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23 y 24 de Agosto 2011; Monterrey, N.L., México
Revista Salud Pública y Nutrición Edición Especial 3-2012
RESPYN
Pruebas Pre-transfusionales?
Es un conjunto de procedimiento
in vitro que nos permiten conocer
si hay afinidad inmunológica entre
el hemocomponente a transfundir
de un donador hacia un receptor
( paciente).
OBJETIVO
SELECCIONAR COMPONENTES SANGUÍNEOS QUE
UNA VEZ TRANSFUNDIDOS TENDRÁN
UNASOBREVIVENCIA ACEPTABLE, CON EL MENOR
RIESGO ASOCIADO PARA EL RECEPTOR POTENCIAL
OBJETIVO
DETECTAR LA MAYORIA DE ANTICUERPOS
INESPERADOS CLINICAMENTE SIGNIFICATIVOS
(ACTIVOS A 37 °C)
SOLICITUD
OP
ER
AD
OR
PRUEBAS
PRETRASFUSIONALES
RASTREO
PCM / PCm
AUTO
CONTROL
MU
ES
TR
A
METODO
ABO / Rh
PRUEBAS
PRETRANSFUSIONALES
R Prueba Menor
AC Autocontrol
D Prueba Mayor
GR receptor +
Suero donador
GR donador +
Suero receptor
GR receptor +
Suero receptor
SOLICITUD
Datos del Hospital, Instituto o unidad medica que solicita
Datos generales del paciente ( nombre, edad, sexo, cama, número de ingreso etc.)
Diagnóstico ( legible y sin iníciales)
Tipo de transfusión (urgente, ordinario, programada)
Datos previos de transfusión.
SOLICITUD
Medicamentos que este recibiendo ( antibióticos )
Datos clínicos ( Hb. Hto. TP, TPT, Plaquetas)
Unidad o componente sanguíneo solicitado ( Qué? y Cuántos?, características
requeridas)
Fecha y Hora en que se realizara la transfusión
Nombre completo y firma del médico que solicita la transfusión
SOLICITUD DE PRODUCTOS SANGUÍNEOS
TIPO Y CANTIDAD DEL PRODUCTO
SOLICITADO (CE, PL, 250 ml,100ml)
DIAGNOSTICO O TIPO DE CIRUGIA
(LES, BYPASS)
GRADO DE URGENCIA
SOLICITUD DE PRODUCTOS SANGUÍNEOS
ANTECEDENTES TRANSFUSIONALES
ANTECEDENTES DE REACCIONES TRANSFUSIONALES Y TIPO DE REACCION
SOLICITUD DE PRODUCTOS SANGUÍNEOS
EN MUJERES No DE EMBARAZOS Y ABORTOS
MEDICO SOLICITANTE, SERVICIO
HORA Y FECHA DE LA SOLICITUD
PRUEBAS PRETRANSFUSIONALES
ROTULADO ADECUADO DE LA MUESTRA
NOMBRE Y APELLIDOS
No. DE REGISTRO
FECHA DE EXTRACCION (ISO9000)
CONFIRMACION DE LA IDENTIDAD DE LA
MUESTRA
CONFIRMACION DE LA
IDENTIDAD DE LA
MUESTRA
CHECAR ROTULADO DEL
TUBO CON LA SOLICITUD
MEDIDAS DE SEGURIDAD Y CONTROL DE CALIDAD
REACTIVOS EMPLEADOS
DE LA MUESTRA PROBLEMA
DEL PILOTO DEL DONADOR
DE LA PRUEBA CRUZADA
HEMOCOMPONENTE
LAS UNIDADES A TRANSFUNDIR DEBERÁN DE CUMPLIR CON
LOS REQUISITOS DE SEGURIDAD NECESARIOS:
1.- GRUPO SANGUÍNEO Y Rh
2.-SEROLOGÍA NO REACTIVA.
3.-IDENTIFICACIÓN DEL DONANTE.
4.-FECHA DE EXTRACIÓN Y CADUCIDAD.
5.-DATOS DE HEMOGLOBINA Y HEMATOCRITO.
6.-TIPO DE HEMOCOMPONENTE.
7.-VOLUMEN Y CONDICIONES DE ALMACENAMIENTO Y/O
TRATAMIENTO ESPECIAL.
El inciso 10 de la NOM-003-SSA2-1993 par la disposición de la sangre humana y sus componentes con fines terapéuticos que
corresponde a la sección de Hemocompatibilidad y Receptores, establece las características pertinentes de la prueba cruzada. 10.15 Las pruebas cruzadas de compatibilidad sanguínea, Deberán incluir aquéllas que permitan demostrar la ausencia de anticuerpos específicos regulares o irregulares de importancia clínica en el suero del receptor, contra los eritrocitos del disponente (prueba mayor)
PRUEBA DE
COMPATIBILIDAD
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
Asimismo, es recomendable demostrar la ausencia de
anticuerpos iregulares de importancia clínica en el suero del
disponente, contra los eritrocitos del receptor (prueba menor)
Las pruebas cruzadas incluirán pruebas de aglutinación en
medio salino, así como, en algún medio facilitador de la
reacción, rutinariamente se empleará la prueba de
antiglobulina humana (prueba de Coombs)
Las pruebas cruzadas deberán incluir un control que
permita detectar la presencia de autoanticuerpos.
A manera de control del procedimiento y del reactivo, en
cada prueba de Coombs interpretada como negativa, es
recomendable agregar células sensibilizadas con
inmunoglobulina G
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
La prueba cruzada presentará de una tres fases, dependiendo del medio en el que desarrolle. La más común emplea medio salino, por ende se divide en tres fases:
Salina rápida: descarta incompatibilidad ABO. Puede presentar aglutinación cuando hay presencia de Roleaux, presencia de autoanticuerpos o aloanticuerpos, tubo de muestra contaminado.
Salina a 37ºC: Incubación a 37ºC al menos 1 hora. Detecta anticuerpos de tipo IgG. Puede haber aglutinación en presencia de autoanticuerpos o aloanticuerpos. Permite diferenciar la presencia de anticuerpos fríos de los calientes.
Salina Coombs Fase final en la que se agrega el suero de Coombs (poliespecífico o monoespecífico).Detecta anticuerpo clínicamente significativos.
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
Existen diferentes tipos de reactivos de
Coombs.
– Gel-Coombs poliespecífico (anti-IgG +
anti-C3d)
– Gel- Coombs monoespecífico
– ( anti-IgG)
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
Potenciadores
LISS (Low Ionic Strength Saline): Incrementa la captura de anticuerpos , disminuye el tiempo de incubación.
ENZIMAS PROTEOLITICAS: (papaína, ficina, tripsina, bromelina) amplifica detección de anticuerpos anti-Rh, Kidd, Lewis, autoanticuerpos calientes y frios (excepción de Pr)
SOLUCIONES DE POLICATIONES (Polibrenos, sulfato de protamina) Induce agragación reversible, genera complejos Ag-Ab intactos, altamente sensible.
RASTREO
● Dentro de el protocolo de pruebas PRETANSFUSIONALES y de
REACCIÓN TRANSFUSIONAL se sugiere la búsqueda de
anticuerpos diferentes al sistema ABO para aquellos pacientes que
reporten dentro de la historia clínica un factor de riesgo.
SE REALIZA A PACIENTES:
POLITRANSFUNDIDOS
MUJERES EMBARAZADAS Rh NEGATIVO
REACCION HEMOLITICA TRANSFUSIONALES
● 10.16 No se ha comprobado que el rastreo rutinario de
anticuerpos irregulares, en el suero del receptor y del
disponente, pueda sustituir a la prueba cruzada de
compatibilidad.
RASTREO
10.9 Los plasmas, incluyendo el contenido en las unidades de
concentrados de plaquetas o leucocitos…….. Es
recomendable practicar una prueba menor o haber
comprobado, mediante pruebas de rastreo, la ausencia de
anticuerpos irregulares de importancia clínica,
particularmente cundo el plasma provenga de disponente con
antecedentes propiciadores de aloinmunización.
NEONATO Y LACTANTE PEQUEÑO
INMUNOLOGICAMENTE
INMADUROS
RARA ALOINMUNIZACIÓN
CONTRA AGS
ERITROCITARIOS DURANTE
PERIODO NEONATAL
NEONATO Y LACTANTE PEQUEÑO
ESTANDARES DE LA
AABB LIMITADAS PRUEBAS
SEROLÓGICAS
EN NEONATOS MENORES DE
4 MESES
TIPIFICACIÓN ABO, Rh ,
RASTREO DE ANTICUERPOS
(SUERO,PLASMA DE
NEONATO O MAMA.)
NEONATO Y LACTANTE PEQUEÑO
RASTREO DE ANTICUERPOS
NEGATIVO
OMITIR PRUEBAS DE
COMPATIBILIDAD Y
TIPIFICACIÓN ABO,
Rh
NEONATO Y LACTANTE PEQUEÑO
TRANSFUNDIR C.E. GRUPO O y PL DEL
GRUPO ABO DEL NEONATO.
PRESENCIA DE Ac: DAR C.E. CARENTE DEL AG CORRESPONDIENTE
PRUEBA DE
COMPATIBILIDAD
RASTREO DE
ANTICUERPOS
COMPATIBLE NEGATIVO
S/R INCOMPATIBLE NEGATIVO
S/C INCOMPATIBLE
NEGATIVO
COMPATIBLE POSITIVO
INCOMPATIBLE
POSITIVO
INTERPRETACION
RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES
1.- Presencia de aloanticuerpo con autotestigo negativo
La especificidad del Ac o los Acs debe ser identificada.
Confirmar las unidades compatibles carezcan del Ag correspondiente. (anti-c)
RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES.
Si hay presentes mezclas de Acs.
Un Ac que reacciona con un Ag de alta incidencia.
( los hermanos son la opción para sangre compatible)
El Ac está presente en concentraciones muy bajas
ENVIAR LA MUESTRA A UN LABORATORIO
DE REFERENCIA
RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS
CRUZADAS INCOMPATIBLES.
2.- Aloanticuerpo presente y control
autologo positivo.
Pacientes que han recibido sangre en los 2 o
3 meses precedentes.
Pacientes con reacción transfusional.
(Historia transfusional y Dx)
RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES
3.- Los autoanticuerpos frios Anti-I.
(Crioautoanticuerpos potentes)
Incubar a 37°C 30-60 minutos.
RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES
4.- Los autoanticuerpos calientes
Rara vez ocasionan discrepancia en las pruebas ABO.
AAC presente en suero
Coombs Directo
Autoadsorcion en caliente
RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES
5.- La formación de Rouleaux
La adición de 1-3 gotas de SSI.
La aglutinación por Acs permanece
sin cambios.
RASTREO DE ANTICUERPOS POSITIVO, PRUEBAS CRUZADAS
INCOMPATIBLES
6.- Problemas relacionados
con los reactivos
Los anticuerpos contra drogas
y aditivos.
CASO CLINICO 1
Paciente Guadalupe Alarcón Pérez
- Dx. Anemia Hemolítica en estudio
- Embarazos (el último) fue hace 3 años
- AT= 0
- 2 Hermanas fallecen por LES
- Grupo Sanguíneo O Positivo
CASO CLINICO 1
Paciente Guadalupe Alarcón Pérez
- Coombs Directo PositivoTítulo 32
- Autotestigo S/C Positivo
- Eluído Positivo (todas las células)
- Se cruzaron 37 Unidades de C. E. (varias unidades dieron compatibles)
Problema
Anti-A Anti-B Anti-
AB
Aut
o
Cel
A1
Cel
A2
Cel
B
Cel
O Anti-D
Control
Rh
4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+ 4+
●Que grupo sanguíneo es?
●Paciente Con 5 g/dL de Hb
●Dx Anenia Hemolítica en estudio
Prueba de compatibilidad
Unidad Gel D Gel R Gel
A
Tubo
D
C. mono
Tubo
R
C. mono
Tubo
A
C. mono
103732 2+ 4+ 4+ + 2+ 2+
103777 2+ 4+ + 2+ 2+
103841 2+ 4+ - 2+ 2+
Panel de Ac Irregulares
Técnica Cel
1
Cel
2
Cel
3
Cel
4
Cel
5
Cel
6
Cel
7
Cel8 Cel
9
Cel
10
Auto
S/r - - - - - - - - - - -
S/22° + - - - - - - + + - -
S/37° - - - - - - - - - - -
S/C
mono
+ + - 2+ - + 2+ 2+ 2+ - 3+
CAGH 2+ 2+ 2+
Gel poli 2+ 2+ 1+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 2+ 1+ 3+
Panel de Ac Irregulares en
Eluido
Técnica Cel
1
Cel
2
Cel
3
Cel
4
Cel 5 Cel 6 Cel 7 Cel8 Cel 9 Cel
10
S/r - - - - - - - - - -
S/22° - - - - - - - - - -
S/37° - - - - - - - - - -
S/C
mono
2+ 2+ + 2+ 2+ 3+ 2+ 3+ 2+ 2+
CAGH
A/C 2+ 3+ 2+ 2+ 2+ 3+ 4+ 3+ 2+ 1+
Panel de Ac Irregulares en
Eluido
Técnica Cel
R1R1
Cel
R2R2
Cel
rr
Auto
S/r - - - -
S/22° - - - -
S/37° - - - -
S/C
mono
2+ 2+ + 2+
CAGH
GEL/C 2+ 3+ 2+ 2+
Cel C D E c e P S K k Jka Jkb Dia
1 + + -
-
+ + - - + - + +
2 - + + + -
-
+ -
+ - + -
3 -
-
-
+ + + - - + + - -
4 + + -
+ + -
+ + + + - -
5 + + -
-
+ + - - + - + -
6 + + + + + + + -
+ - + -
7 + -
+ + + + - - + - + -
8 -
+ + + + -
+ + + + + -
9 -
+ + + -
+ + -
+ + + +
10 + + + + + + - - + + - -
CASO CLINICO
PANEL DE ANTICUERPOS POSITIVO
PROBABLE ANTI-c + ANTI S
ELUIDO DE ANTICUERPOS POSITIVO
PROBABLE ANTI-SISTEMA Rh