Phase Contrast MicroscopyPhase Contrast Microscopy&

DIC MiDIC Microscopy

인간의 눈은 밝기와 색깔, 즉 빛의 파장과 진폭에 민감하기 때문에Contrast증가를 위해 표본은 일반적으로 염색되어 슬라이드 글라스에 올려진 상태로 관찰되게 된다. 그러나 이러한 과정은 살아있는 세포를 죽이기때문에 명시야에서 살아있는 시료를 관찰하는 것은 불가능하다.

그럼에도 불구하고, 살아있는 세포나 세포의 유사분열 관찰에 대한 필요성 때문에 네덜란드의 Frederick Zernike는 위상차 관찰법(Phase Contrast Microscopy)을 발명하였다.

위상차 관찰법은 특수한 콘덴서 안에 있는 둥근 조리개를 이용한다. 그리고 또한 빛의 진행을 지연시켜 주는 둥근 위상판이 대물렌즈 안에 장착되어 있다어 있다.

위상차 관찰법은 위상차용 콘덴서와 위상차용 대물렌즈를 부착하면 표준현미경으로 관찰이 가능하기 때문에 매우 보편화되어 있다. 녹색 필터는 종종 Contrast를 증가시키기 위해 이용된다종 Contrast를 증가시키기 위해 이용된다.

위상차 관찰법은 Positive, Negative Contrast 모두에서 관찰이 가능 하다. Positive Contrast는 종종 세포와 분자의 내부 조직을 관찰시 사용되고, Negative Contrast는 낮은 Contrast를 가진 물체의 형태나 물리적 운동의Negative Contrast는 낮은 Contrast를 가진 물체의 형태나 물리적 운동의관찰에 사용된다.

위상차 관찰법과 더불어 살아있는 세포와 같은 낮은 Contrast를 가진 표본들의 관찰을 위한 다른 관찰법이 있다. 이 관찰법은 DIC(Differential Interference Contrast) 관찰법이라 불리고 다음 사진은 이 관찰법을 위한Interference Contrast) 관찰법이라 불리고 다음 사진은 이 관찰법을 위한부속장치들을 보여주고 있다.

미분간섭 관찰법은 둥근 조리개와 둥근 위상판 대신 편광 필터와DIC 프리즘을 사용한다.

미분간섭 관찰법은 후광이 없다는 점에서 위상차 관찰법의 약점을 해결하였고 또한 물체의 경계를 명확하게 구분지어 주며, 이미지에 뛰어난 명암을줄 수 있도록 해주었다줄 수 있도록 해주었다.