1

PRAKTIKUM BIOKIMIA URIN KUALITATIF

1. Sifat urin normal antara lainJawab :

a. Volume : 750 2000 ml/hari, denganrata-rata 1500 ml/hari

b. Berat jenis : 1,003 1,030c. pH : 4,5 8 , dengan rata-rata 6d. Warna : kuning pucat dan sedikit jernih

2. Sebutkan senyawa yang normalterdapat dalam urin!Jawab:

3. Sebutkan senyawa yang abnormalterdapat dalam urin!Jawab: protein, glukosa, gula lain(fruktosa, galaktosa, laktosa, pentosa),badan keton, bilirubin, darah,porfirin,hemoglobin, pus, vitamin larutlemak,dll.

4. Untuk memeriksa adanya asam uratdalam urin dapat dilakukan percobaan :Jawab: Tes Muroxide, Tes SchiffMuroxide, positif jika terdapat warnamerah-ungu Test Schiff positif jikaterdapat endapan putih Ag2O

5. Mineral dalam urin antara lain:

Jawab: Na+, K+, Mg+, Cl-, Ca2+,Phosphat (tabel no.2)

6. Katabolisme protein dikeluarkanmelalui urin sebagai senyawa...Jawab: urea, ammonia

7. Kreatinin dalam urin terutama berasaldari katabolisme senyawa....Jawab: kreatin.Kreatinin merupakan hasil metabolismekreatin fosfat dan kreatin. Kreatin fosfatdan kratinin merupakan senyawaberenergi tinggi yang terdapat diotot.Proses katabolisme dan anabolismekreatin fosfat dibantu oleh enzim yangsama yaitu kreatin kinase. Pada saatotot kekurangan ATP untukberkontraksimaka otot akan merombak Kreatinfosfatuntuk mendapatkan energitambahan.

8. Hasil katabolisme purin diekskresimelalui urin sebagai senyawa....Jawab: asam uratAsam nukleat (DNA,RNA) akandidegradasi oleh enzim nukleasemenjadi nekluesida (basanitrogen,gula) dan phospat. Basanitogen ini ada dua jenis yaitupurin(adenin,guanin) dan pirimidin(sitosin, timin, urasil). Hanya purin yangakan didegradasi menjadi asam urat.Guanin akan mengalami deaminasimenjadi Xanthine sedangkan Adeninakan mengalami deaminasi menjadiInosin, hypoxantihne baru selanjutnyadiubah menjadi xanthine. Xanthineyang berasal baik dari guanin maupunadenin selanjutnyakan diubah menjadiasam urat oleh enzim XanthineOxidase. Enzim ini juga berfungsi untukmembantu perubahan hipoxanthinemenjadi xanthine.

Pada hewan tertentu, adanya enzimuricase akan bisa mengubah asam uratyang bersifat Hidrofobik menjadi allantoinyang hidrofilik. Karena manusia tidakmempunyai enzim ini, maka jika kadarasam urat dalam darah meningkat akanbisa menimbulkan gangguan sepertiArthritis Gout.

2

9. Urin + asam nitrat pekat laludituangkan pada kertas saring yangtelah dibasahi AgNO3, kemudianberwarna hitam. Percobaan inimenunjukkan senyawa:Jawab: asam urat

10. Apakah perbedaan hematuria danhemoglobinuria?Jawab :Hematuria :urin yang tercampur darah(RBC). Hal ini dikarenakan gangguanpada filtrasi glomerulus sehinggaeritrosit dapat masuk ke glomerulus.Hematuria biasa terjadi pada traumasaluran kemih, infeksi, batu kemih dll.Hemoglobinura :urin yang mengandungHb karena eritrosit telah lisis sebelummasuk ke glomerulus.

11. Hasil metabolisme nitrogen proteindiekskresikan dalam bentuk:Jawab: urea, amonia. Inget lagi yaNitrogenous wastes ada empat zatitu.Urea dan ammonia berasal darikatabolisme protein. Kreatinin berasaldari kreatin phosphat sedangkan Asamurat dari katabolisme Purin.

12. Ekskresi kalsium urin meningkatpada kondisi apa saja? Menurun padakondisi apa saja? :Jawab:Meningkat pada:intake Ca2+ berlebih,gangguan kemampuan reabsorbsi Ca2+pada tubulus ginjal, peningkatanresorpsi tulang, hiperparatiroidismeprimer, tumor paratiroid, osteomalacia,metastasis osteolitikMenurun pada :kekurangan intakeCa2+, hipoparatiroidisme, gagal ginjalkronik, pre eklampsia

13. Reaksi Jaffe digunakan untukmendeteksi adanya ....(a) dalam urin,apabila positif akan terjadi warna ....(b)karena terbentuk senyawa ....(c)Jawab: a. Kreatinin, b. Merah jingga, c.Kreatinin pikrat

14. Bahan makanan yang dalamkatabolisme menghasilkan basa purinadalah:

Jawab: kafein, theobromine (ada diicokelat), jeroan, emping melinjo,Bayam

15. Kadar kreatinin meningkat dalamkeadaan:Jawab: puasa, hamil, malnutrisi,destruksi jaringan otot, minum banyakair putih

16. Karbohidrat yang normal terdapatdalam urin adalah:Jawab: pentosa, selain glukosa.

17. Kondisi yang menyebabkan asamlaktat banyak diekskresi ke urin adalah:Jawab: olahraga, pneumonia, epilepsi,eclampsia, penyakit liver

18. Pigmen yang terdapat dalam urinantara lain:Jawab:urobilin, urochrome

19. Reaksi positif pada Tes Benzidinemenunjukkan di dalam urin terdapatsenyawa:Jawab: Hemoglobin

20. Jika urin + asam pikrat + NaOHmemberikan warna merah, senyawayang menyebabkan warna merah iniadalah:Jawab: kreatinin pikrat

21. Apa indikator yang digunakanpada percobaan dekomposisi urea?Jelaskan dan tulis reaksi kimia yangterjadi!Jawab: kertas lakmus merah. Jikaterdapat urea makakertas lakmusmenjadi biru akibat menangkap gasNH3 yang bersifat basa. Reaksi :CO(NH2)2 -(urease)-> (NH4)2CO3(NH4)2CO3 + H2O -> 2(NH4)2CO3 +H2CO3H2CO3 -> H2O + CO2(NH4)2CO3 -> NH3+ H2O

22. Penentuan asam urat juga dapatdilakukan dengan reaksi Schiff. Tulisreaksi kimianya!Jawab: Asam urat + Na2CO3+ AgNO3-> Ag Urat -> Endapan Ag2O (hitam)

3

23. Bagaimana cara menunjukkanadanya:a. Garam ammonium dalam urin?b. Fosfat dalam urin?

Jawab:

a. Garam garam ammonium dalamurin akan terurai menjadi gasammonia dalam suasana basa.Gas yang bebas kemudianditangkap dengan indikator pH(kertas lakmus atau PP)

b. dengan tes Newmann. Prinsipnya :Fosfat anorganik akan berikatandengan ammonium molibdatmenjadi ammoniumfosfomolibdatyang berwarna kuning jeruk.

24. Sebutkan fungsi sel-sel tubuli padapembentukan urin!Jawab: Reabsorbsi dan Sekresi.

25. Urea disintesis di organ apa dan daribahan apa saja?Jawab:Urea disintesis di hepar melalui prosestransaminasi, deaminasi, transportamonia, siklus urea.Bahan yangdigunakan?? Ini kalimat soalnya agakmembingungkan juga sih yangdimaksud sebenarnya yang mana.Secara umum urea dihasilkan dari 2molekul NH4+ dan senyawa keton yangdidapatkan dari HCO3- atau CO2.HCO3- dan CO2 nya buat donor atomC-nya, makanya rumus kimia urea bisamenjadi CO(NH2)2. NH4 nya itu berasaldari pelepasan gugus amin suatuprotein atau asam amino.Kalau yangdimaksud bahan disini adalah daribahan apa saja urea berasal ya berartijawabnya asam amino, protein, peptondan senyawa polipeptida lain.Pembentukan urea tidak lepas darisiklus urea yang terjadi dihepatosit dandimulai dari mitokondria kemudiandilanjutkan disitoplasma.

26. Apa yang dimaksud dengankoefisien kreatinin?Jawab:Koefisien kreatinin adalah jumlah mgkreatinin yang diekskresikan dalam 24jam/kg BB. Koefisien kreatinin

menunjukkan clearance kreatininpadaginjal.Koefisien ini juga bisa digunakanuntuk memeriksa fungsi ginjal karena90% kreatinin diekskresikan dalamurin.

27. Percobaan apa yang dilakukanuntuk mengetahui adanya asam uratdalam urin? Apa yang terjadi jikahasilnya positif?Jawab: Asam urat dalam urin dapatdideteksi dengan percobaan berikut ini:Tes Muroxide : menghasilkan warnaungu yang berasaldari senyawaammonium muroxide Reaksi Schiff :menghasilkan warna hitam di kertassaring, berasal dari senyawa Ag2O

28. Bagaimana cara menunjukkanadanya sulfat dalam urin?Jawab: dengan menambahkan BaCl2dan asam asetat maka Ion Sulfat diurin akan mengendap membentukBarium Sulfat.

29. Zat warna yang terdapat dalamurin adalah:Jawab: Urobilin dan urochrome

30. Makromineral yang terdapatdalam urin normal adalah:Jawab: makromineral itu adalahmineral yang dibutuhkan oleh tubuhsebesar 100 mg/hari. Contohnya ya :kalium, Cl, natrium, phosphat, calcium.Kalau ditanya yang diurin yang lihattabel no.2 biar tahu pasti mana yangkandungan nya paling tinggi diurin.

31. Asam urat merupakan hasiloksidasi dari:Jawab: xanthin

4

32. Hasil hidrolisis asam urat olehurikase adalah:Jawab: allantoin

33. Reagen Rothera digunakan untukmenunjukkan adanya:Jawab: asam urat

34. Adanya fosfat dalam urinditunjukkan dengan Reaksi Newman.Reaksi positif jika terbentuklarutan/endapan berwarna....(a), darisenyawa....(b)Jawab: a. Kuning, b. Ammoniumfosfomolibdat

35. Ureum dalam urin dengan ureasediubah menjadi:Jawab: (NH4)2CO3

36. Adanya Hb dalam urin ditunjukkandengan percobaan:Jawab: Benzidine

37. Yang menyebabkan urin bersifatbasa jika dibiarkan adalah:Jawab: adanya nitrogen dalam urinberupa urea dan ammonia yangbersifat basa karena gugus NH3.

38. Tes Muroxide digunakan untukmenunjukkan senyawa:Reaksi positif jika terbentuk larutanberwarna:Jawab: Asam urat, Ungu

39. Sulfat dalam urin berasal dari:Jawab: garam sulfat, ion sulfat Sulfatdalam urin paling banyak berada dalambentuk Inorganik artinya dia tidakberikatan dengan senyawa organikseperti protein gitu.

40. Adanya bilirubin dalam urinditunjukkan dengan reaksi:Jawab: Gmelin

(Jawab sendiri ya ;)

41. Adanya fosfat dalam urinditunjukan dengan reaksi... .Reaksi positif jika terbentuk larutan/endapan yg berwarna ... .

42. Adanya kreatinin dapat ditunjukkandengan reaksi ... .Reaksi positif, jika terbentuk larutan ygberwarna ...

43. Test Muroxide digunakan untukmenunjukkan adaya ... dalam urin.Adanya pigmen darah dalam urin dapatdideteksi dengan test ... .

44. Sulfat yg terdapat dalam urinberasal dari katabolisme asam amino... .Adanya pigmen darah dalam urindinamakan ... .

45. Produk oksidasi asam urat denganurikase adalah ...Benda keton terdiri dari ... dan .....

Dalam urin subjek normal, hasil tes biuretadalah (46) ...... sebab (47) ..............

Adanya urea dalam urin dapat diketahuidengan reaksi (48).......... indikator yangdigunakan adalah (49).........

Pada reaksi muroxide, percobaaandilakukan dengan penambahan garam(50) .......... ke dalam sampel urin, sebab(51)..............

Adanya kreatinin dalam urin dapatdilakukan dengan penambahan asampikrat jenuh ke dalam urine yangditunjukkan dengan warna (52)................

Adanya garam ammonium dalam urinditunjukkan oleh terjadinya gas (53)........adanya fosfat ditunjukkan denganendapan yang berwarna kuning jeruksetelah penambahan setetes HNO3 pekatdan beberapa tetes (54)................ sedangadanya sulfat ditunjukkan denganterjadinya (60)............. setelahditambahkan BaCl2

5

TAMBAHAN TEORI NITROGENOUS WASTES

Percobaan Urin Kualitatif pada dasarnya adalah untuk menunjukkan ada atau tidakadanya substansi tertentu didalam urin dan tidak bisa digunaan untuk mengetahui berapakadar substansi tersebut. Pada praktikum urin kualitatif ini, urin akan diperiksa untukmengetahui ada atau tidak adanya zat organik dan anorganik yang terlarut didalam urinyaitu urea, asam urat, kreatinin,ammonium sulfat,fosfat dan sulfat.

1. Urin dan Komposisinya

Urin merupakan alat sekresi utama didalam tubuh yang didalamnya terkandung banyak zatbaik organik maupun anorganik. Karena urin adalah alat sekresi utama maka ada atau tidakadanya suatu zat tertentu didalam urin bisa mengindikasikan penyakit tertentu. Oleh karenaitu uji laboratorium urin bisa membantu dalam menegakkan diagnosis. Urin tediri dari 95 %air dan sisanya berupa zat terlarut baik organik maupun anorganik (Saladin). Zat terlaruttersebut yang paling banyak adalah urea, NaCl, KCl, Kreatinin, Asam Urat dan trace elemenlain. (tabel pertanyaan no 2) adalah menunjukkan komposisi urin yang bisa ditemukan padaurin normal. Kadar zat terlarut merupakan hasil riset rerata dari pria dengan berat rerata 70kg dengan asumsi eksresi urin 24 jam sebesar 1,2 L/hari. Merupakan abnormalitas jikadiurin ditemukan hemoglobin bebas, darah, albumin, glukosa, protein dengan berat molekultinggi, pus, vitamin larut lemak dll.

2. Nitrogenous Wastes

Nitrogenous wastes adalah senyawa kecil yang mengandung gugus nitrogen yang sangattoksik bagi tubuh. Nitrogenous wastes pada manusia adalah urea,asam urat, kreatinin danamonia. Urea dan ammonia merupakan hasil katabolisme protein, asam urat dari asamnukleat dan kreatinin dari kreatinin phosphat.

2.1 UREA

Urea adalah nitrogenous wastes utama manusia karena NH3 dan NH4+ bersifat toksikdan harus diubah kedalam urea. Urea pada manusia diekskresikann sebagai zat terlarutdalam urin, namun pada aves dan reptil mereka mengeksresikan urea dalam bentuk asamurat padat. Sedangkan pisces, mereka bisa mengeksresikan NH3 secara langsung tanpaterlarut urin. Pembentukan urea tidak lepas dari siklus urea yang terjadi dihepatosit dandimulai dari mitokondria kemudian dilanjutkan disitoplasma. Secara ringkas urea dibentukdari gugus amino hasil degradasi protein dengan reaksi sebagai berikut :

2NH3+ CO2 -> NH2 C=O NH2+ 2 H2O

2.2 ASAM URAT

Asam nukleat (DNA,RNA) akan didegradasi oleh enzim nuklease menjadi nekluesida(basa nitrogen,gula) dan phospat. Basa nitogen ini ada dua jenis yaitu purin (adenin,guanin)dan pirimidin (sitosin, timin, urasil). Hanya purin yang akan didegradasi menjadi asam urat.Guanin akan mengalami deaminasi menjadi Xanthine sedangkan Adenin akan mengalamideaminasi menjadi Inosin, hypoxantihne baru selanjutnya diubah menjadi xanthine.Xanthine yang berasal baik dari guanin maupun adenin selanjutnyakan diubah menjadiasam urat oleh enzim Xanthine Oxidase. Enzim ini juga berfungsi untuk membantuperubahan hipoxanthine menjadi xanthine. Pada hewan tertentu, adanya enzim uricaseakan bisa mengubah asam urat yang bersifat Hidrofobik menjadi allantoin yang hidrofilik.Karena manusia tidak mempunyai enzim ini, maka jika kadar asamurat dalamdarahmeningkat akan bisa menimbulkan gangguan seperti Arthritis Gout.

6

2.3 KREATININ

Kreatinin merupakan hasil metabolisme kreatinfosfat dan kreatin. Kreatin fosfat dankratinin merupakan senyawa berenergi tinggi yang terdapat diotot. Proses katabolisme dananabolisme kreatin fosfat dibantu oleh enzim yang sama yaitu kreatin kinase. Pada saat ototkekurangan ATP untuk berkontraksi maka otot akan merombak Kreatin fosfat untukmendapatkan energi tambahan. Kreatin fosfat akan dirombak menjadi kreatin dan Pi,selanjutnya terjadi proses perubahan kreatin menjadi kreatinin yang berlangsung secaraspontan tanpa bantuan enzim. Karena kreatinin tidak bisa difosforilasi lagi maka kreatininakan diekskresikan oleh tubuh.