1
MCD L AB , S.A. de C.V. PRODUCTO AGAR HIERRO Y LISINA USO EXPLICACIÓN FORMULA PREPARACIÓN RESULTADOS BIBLIOGRAFÍA Blv. Centro Industrial Nº 1017, Fracc. Ind. Puente de Vigas, C.P. 54070, Tlalnepantla, Edo. de México Teléfono y Fax: 53-84-20-95 · 53-84-20-70 · 53-84-20-50 ESPECIFICACIONES El Agar de Hierro y Lisina es un medio utilizado para la diferenciación de microorganismos entéricos en base a su capacidad para desaminar o descarboxilar la lisina y de producir sulfuro de hidrógeno. Este medio también es conocido como LIA Edwards y Fife desarrollaron este medio para diferenciar a Salmonella arizonae. Debido a que S. arizonae fermenta la lactosa rápidamente, la producción de H 2 S es suprimida en el Agar de Hierro y Triple Azúcar. Eliminando la lactosa e incorporando la lisina, Edwards y Fife encontraron que este medio diferencía a los bacilos entéricos en base a su capacidad para descarboxilar o desaminar la lisina y producir H 2 S. Este medio es especialmente recomendado para la identificación de bacilos que fermentan rápidamente la lactosa. En este medio la peptona provee la fuente de carbono y nitrógeno. El extracto de levadura provee vitaminas y cofactores para el crecimiento. La dextrosa es la fuente de energía. El hidrocloruro de L-lisina es el sustrato donde actúan las enzimas descarboxilasa o desaminasa. El citrato férrico de amonio y el tiosulfato de sodio actúan como indicadores de la producción de H 2 S. El púrpura de bromocresol es un indicador de pH. El agar es adicionado como agente solidificante. Peptona de Gelatina 5.0 L-Lisina 10.0 Extracto de Levadura 3.0 Tiosulfato de Sodio 0.04 Dextrosa 1.0 Citrato de Hierro y Amonio 0.5 Púrpura de Bromocresol 0.02 Agar Bacteriológico 1305 pH 6.7 ± 0.2 Método: Suspender 23 g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitación suave hasta su completa disolución y hervir durante un minuto. Dispensar en tubos de vidrio, tapar y esterilizar en autoclave a 121°C (15 libras de presión) durante 15 minutos. Dejar enfriar en posición horizontal. Procedimiento: 1. A partir de una colonia aislada sembrar el medio por picadura en el fondo y por estría en la superficie. 2. Incubar a 35 ± 2°C durante 18 a 48 horas. 3. Examinar los tubos para observar cambios de color y ennegrecimiento Prueba Reacción positiva Reacción negativa Producción de H 2 S Formación de un precipitado negro en la superficie No hay formación de precipitado negro Descarboxilación de la Lisina Fondo y superficie del medio de color púrpura ( alcalino) Fondo amarillo (ácido), superficie púrpura (alcalina) Desaminación de la Lisina Superficie roja Superficie púrpura Proteus y Providenza producen cultivos con superficie roja sobre fondo amarillo Almacenamiento: 2-30° C. Caducidad: 5 años en frasco cerrado. Presentación: Frasco con 450 g Caja con 20 sobres para un litro Medio preparado en caja con 10 Tubos 1. Edwards, P.R., and M.A. Fife. 1961. Lysine iron agar in the detection of Arizona cultures. Appl. Microbiol. 9:478. 2. MacFaddin, J.F. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria, vol. I. Williams & Wilkins, Baltimore, MD. 3. Finegold, S.M., and W.J. Martin. 1982. Bailey and Scott´s diagnostic microbiology, 6 th ed.p.631. The CV Mosby Company, St. Louis. Mo.

Agar Hierro y Lisina

Embed Size (px)

DESCRIPTION

forma de preparar agares hierro lisina para microbiologia

Citation preview

  • MCD LAB, S.A. de C.V.

    PRODUCTOAGAR HIERRO Y LISINA

    USO

    EXPL

    ICAC

    INFO

    RMUL

    APR

    EPAR

    ACIN

    RESU

    LTAD

    OSBIB

    LIOGR

    AFA

    Blv. Centro Industrial N 1017, Fracc. Ind. Puente de Vigas, C.P. 54070, Tlalnepantla, Edo. de MxicoTelfono y Fax: 53-84-20-95 53-84-20-70 53-84-20-50

    ESPECIFICACIONES

    El Agar de Hierro y Lisina es un medio utilizado para la diferenciacin de microorganismos entricos en base a su capacidad para desaminar o descarboxilar la lisina y de producir sulfuro de hidrgeno. Este medio tambin es conocido como LIA Edwards y Fife desarrollaron este medio para diferenciar a Salmonella arizonae. Debido a que S. arizonae fermenta la lactosa rpidamente, la produccin de H2S es suprimida en el Agar de Hierro y Triple Azcar. Eliminando la lactosa e incorporando la lisina, Edwards y Fife encontraron que este medio diferenca a los bacilos entricos en base a su capacidad para descarboxilar o desaminar la lisina y producir H2 S. Este medio es especialmente recomendado para la identificacin de bacilos que fermentan rpidamente la lactosa. En este medio la peptona provee la fuente de carbono y nitrgeno. El extracto de levadura provee vitaminas y cofactores para el crecimiento. La dextrosa es la fuente de energa. El hidrocloruro de L-lisina es el sustrato donde actan las enzimas descarboxilasa o desaminasa. El citrato frrico de amonio y el tiosulfato de sodio actan como indicadores de la produccin de H2S. El prpura de bromocresol es un indicador de pH. El agar es adicionado como agente solidificante. Peptona de Gelatina 5.0 L-Lisina 10.0 Extracto de Levadura 3.0 Tiosulfato de Sodio 0.04 Dextrosa 1.0 Citrato de Hierro y Amonio 0.5 Prpura de Bromocresol 0.02 Agar Bacteriolgico 1305 pH 6.7 0.2 Mtodo: Suspender 23 g del medio en un litro de agua purificada. Calentar con agitacin suave hasta su completa disolucin y hervir durante un minuto. Dispensar en tubos de vidrio, tapar y esterilizar en autoclave a 121C (15 libras de presin) durante 15 minutos. Dejar enfriar en posicin horizontal. Procedimiento:

    1. A partir de una colonia aislada sembrar el medio por picadura en el fondo y por estra en la superficie.

    2. Incubar a 35 2C durante 18 a 48 horas. 3. Examinar los tubos para observar cambios de color y ennegrecimiento

    Prueba Reaccin positiva Reaccin negativa Produccin de H2S Formacin de un precipitado

    negro en la superficie No hay formacin de precipitado negro

    Descarboxilacin de la Lisina

    Fondo y superficie del medio de color prpura ( alcalino)

    Fondo amarillo (cido), superficie prpura (alcalina)

    Desaminacin de la Lisina Superficie roja Superficie prpura Proteus y Providenza producen cultivos con superficie roja sobre fondo amarillo Almacenamiento: 2-30 C. Caducidad: 5 aos en frasco cerrado. Presentacin: Frasco con 450 g Caja con 20 sobres para un litro Medio preparado en caja con 10 Tubos

    1. Edwards, P.R., and M.A. Fife. 1961. Lysine iron agar in the detection of Arizona cultures. Appl. Microbiol. 9:478. 2. MacFaddin, J.F. 1985. Media for isolation-cultivation-identification-maintenance of medical bacteria, vol. I. Williams & Wilkins, Baltimore, MD. 3. Finegold, S.M., and W.J. Martin. 1982. Bailey and Scotts diagnostic microbiology, 6th ed.p.631. The CV Mosby Company, St. Louis. Mo.