Presentacin de PowerPoint

Agrobacterium tumefaciens

Universidad Autnoma Metropolitana

Gmez Acosta Miguel Angel

Dra. Mara Anglica Gutirrez Nava

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La biologa molecular y la ingeniera gentica en plantas se inician con el descubrimiento y el estudio de A tumefaciens.

Bacteria (Gram negativa) presente en la rizsfera.

Agente causal de la enfermedad conocida como agalla en corona.

Esta bacteria, produce el crecimiento de tumores en los tejidos de los vegetales atacados.

A. tumefaciens es organismo capaz de transformar genticamente una clula vegetal.

En 1947, Armin C. Braun del instituto Rokefeller de Investigacin Mdica, hablo del principio tumorgeno .

Responsable de la formacin de la crown gall era la transferencia de un fragmento de DNA llamado T-DNA que a su vez se localizaba en un plsmido al que se denomin Ti (inductor de tumores).

Tras la transferencia el T-DNA se integraba en el genoma nuclear de la planta y su expresin induca el fenotipo tumoral.

El ori permite que el plsmido Ti sea mantenido de forma estable en A tumefaciens.

Existen tres elementos genticos necesarios para la transferencia del T-DNA a la planta, (regiones presentes en los plsmidos de Agrobacterium) :

Bordes flanqueantes del T-DNA:

A la izquierda y derecha del T-DNA existen dos direct repeats de unos 24-25pb que flanquean y definen el T-DNA. Estos bordes son secuencias en cis necesarias para la transferencia y normalmente todo el DNA contenido entre los mismos es transferido a la planta

Genes vir.

Genes de virulencia o regin vir codificada por el plsmido Ti en una regin de 35 kb localizada fuera del T-DNA, (existen 25 genes vir reunidos en 7 operones)

Genes codificados por el cromosoma bacteriano.

Estos genes son necesarios para la unin de la bacteria a la clula vegetal daada.

GENop

Responsable de la sntesis de opinas.

GENES onc

Son genes del plsmido T-DNA responsables de la codificacin de enzimas que intervienen en la sntesis de hormonas vegetales y por lo menos un aenzima clave en la biosntesis de la opina.

Ingeniera gentica de plantas usando T-DNA

El uso de T-DNA en la ingeniera gentica de plantas se basa en cuatro puntos:

1.- Localizacin y delecin de los genes que gobiernan la formacin del tumor.

2.- El desarrollo de marcadores tiles para detectar aquellas clulas vegetales que haban sido transformadas por Agrobacterium.

3.- El desarrollo de vectores y procedimientos genticos que permitan introducir genes forneos en el T- DNA .

4.- El desarrollo de varios sistemas de cultivo de tejidos que permitieron la infeccin eficiente y la regeneracin de plantas transgnicas completas a partir de clulas vegetales transformadas con el inserto de inters.

Transferencia del T-DNA

El proceso bsico de transformacin vegetal utilizando A. tumefaciens

Transformacin de plantas. El conocimiento de las bases moleculares por las cuales A. tumefaciens transfiere su ADN-T al genoma de la planta ha sido fundamental para el desarrollo de la ingeniera gentica de plantas.

Los primeros reportes cientficos de plantas transgnicas son del ao 1983 con el desarrollo de plantas de tabaco, de Nicotiana plumbaginifolia, de petunia y girasoles resistentes al antibitico kanamicina.

Estas primeras plantas fueron usadas en investigaciones posteriores logrando producir plantas transgnicas con caractersticas (resistencia) comerciales importantes.

Gracias por tu atencin.