Análisis Físicos y Químicos

8/16/2019 Análisis Físicos y Químicos

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ANEXO A

A1. Rendimiento del jugo.

Materiales y equipos

• 3 lotes de naranja de 10 frutos cada uno

• Balanza granataria

• Cuchillo de acero inoxidable

• Exprimidor con rotor giratorio

• Probeta

• Vasos de precipitado

Procedimiento1. a!ar las naranjas de cada lote" escurrirlas # secarlas con una ser!itoalla" pesarlas #

anotar el peso.

$. Cortar las naranjas a la mitad con un cuchillo de acero inoxidable.

3. Extraer el jugo de la naranja con un exprimidor manual.

%. &edir el !olumen del jugo en una probeta" anotar el !olumen.

Cálculos

'onde(

)* rendimiento del jugo.

V* !olumen del jugo de naranja del lote.

P* peso del lote de naranja.

A. Potencial de !idr"geno #p$%.

Reacti&os' materiales y equipo

• Potenci+metro marca ,-/,

• &uestra

• -mortiguadores


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• -gua destilada

Procedimiento

1. Calibrar el potenci+metro con una soluci+n amortiguadora de p 2. a segunda

calibraci+n se hace utilizando las soluciones amortiguadoras de p % para soluciones

acidas4 o p 10 para soluciones b5sicas4" dependiendo del p de la muestra.

$. 6umergir el electrodo" pre!iamente calibrado" en la soluci+n a la cual se le medir5 el p.

3. Enjuagar el electrodo cada 7ue se proceda a tomar una lectura.

A(. )rados *ri+ #,*ri+%.

Reacti&os' materiales y equipos

• )efract+metro

• &uestras

• Pipetas

• Puntas

• -gua destilada

Procedimiento

1. Colocar en el refract+metro -BBE de mesa" $ o 3 gotas agua destilada" cerrar el prisma #

obser!ar a tra!8s del ocular.

$. -justar la escala a 0 9Brix. Colocar $ o 3 gotas de soluci+n a analizar en el centro del

prisma" obser!ar por el ocular" girando la perilla de compensaci+n de color hasta 7ue el

campo oscuro 7uede a la mitad del cruce de la cruz del campo de !isi+n.

3. /omar la lectura de los 9Brix.


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A-. Acide titula/le #A0%.

Reacti&os' materiales y equipos os reacti!os 7ue a continuaci+n se indican" deben ser grado

anal:tico.

• idr+xido de sodio a,4 0.1

• ;ugo de naranja

• -gua

• Bureta graduada de $< m

• Vaso de precipitado

• Potenci+metro" con electrodos de !idrio

• -gitador electromagn8tico

Procedimiento

1.= Pesar $ g de jugo.

$.= Completar hasta un !olumen de >0 m.

3.= /itular con a, 0.1" con agitaci+n contin?a" hasta un p de @.1.

%.= -notar el !olumen del a, 0.1 gastado en la titulaci+n.


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ota( tomar en cuenta el factor de diluci+n( 1(30.

A2. Nitr"geno am3nico.

Reacti&os' materiales y equipos. os reacti!os 7ue a continuaci+n se indican" deben ser grado

anal:tico.

• Vaso de precipitado de 100 m

• Bureta graduada de $< m

• Potenci+metro

• -gitador magn8tico

• Placa de calentamiento

•

a, 0.1 • ormol al %0" p de @.%

• ;ugo de naranja

• -gua destilada

Procedimiento

1. Pesar < g de jugo.

$. -gregar


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1.% * e7ui!alente de nitr+geno respecto a cada mililitro de hidr+xido consumido.

A4. A5cares reductores por el m6todo de 7e!ling

Reacti&os' materiales y equipos• &atraz !olum8trico de 100 # $


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1. Colocar < m de la soluci+n - # < m de la soluci+n B.

$. -forar a 100 m con agua destilada.

3. /itular con jugo de naranja" si el !olumen de jugo gastado es menor a 1< m" diluir

hasta 7ue 7uede en un inter!alo de 1


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Por ejemplo(

'onde(

* mg de sacarosa 7ue se necesitan para titular la soluci+n -HB" siendo este el factor del

reacti!o.

F.< g * soluci+n patr+n de sacarosa.

V* !olumen de sacarosa o jugo gastados en la titulaci+n m4" si el !olumen de la soluci+n de

sacarosa o jugo es menor a 1< m se procede a realizar la diluci+n correspondiente" el inter!alo

de jugo gastada debe comprender de 1< a


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• -cido clorh:drico Cl4 al 3


9/27

• 'isol!er en $


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• Colocar en un !aso de precipitado # adicionarle 100 m de agua pre!iamente her!ida

para 7uitar la ma#or parte de ox:geno del agua4.

• 'isol!er # aforar a $


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$. 10 m de #oduro de potasio

3. 1m de 5cido clorh:drico al 3


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(. Pesar los crisoles # tarar.

-. Colocar la muestra a no m5s de la mitad del crisol en este caso fueron 3 g de jugo + $ g

de harina de naranja4.

2. &antener los crisoles" con la muestra" en la estufa durante 1$ hrs.

4. /rasladar a la mufla" dejar durante @ h a


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)ealizar los c5lculos correspondientes para cada !olumen conocido de las muestras # preparar

cada una de las diluciones 0a/la A14.

6oluci+n de 5cido

g5lico L4

&etanol al

%@ FF$ @

1$ F@@ 1$1> F@% 1>

$0 F@0 $00a/la A1 'atos para construir la cur!a de calibraci+n de polifenoles totales" usando como est5ndar de referencia5cido g5lico.

Procedimiento

1. /omar


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2. omogenizar

@. )eposar durante %0 min

F. eer en el espectrofot+metro a una longitud de onda de 2>< nm" anotar la absorbancia.

10. Graficar los !alores obtenidos de la absorbancia contra la concentraci+n" ajustar los datos

mediante una regresi+n lineal

11. )ealizar el procedimiento anterior pasos del 1 al F4 con las muestras a analizar.

1$. Ntilizando la ecuaci+n # calcular la concentraci+n de polifenoles totales.

A1;. 7la&onoides totales.

Materiales y reacti&os

•

-gua destilada• itrito de sodio a,$4 al <

• Cloruro de aluminio -lCl34 al


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)ealizar los c5lculos correspondientes para cada !olumen conocido de las muestras 0a/la A4"

# preparar cada una de las diluciones. En la :igura A se muestra la cur!a de calibraci+n

generada usando la ta/la .

6oluci+n de

hesperidina

L4

6oluci+n de

metanol al


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• /ubos Corning

• iofilizadora

• )ecipientes para liofilizaci+n

•

Papel filtroProcedimiento

1. Congelar las muestras" estas deben de estar bien distribuida en la pared del recipiente"

congelando no m5s de la mitad de la capacidad del recipiente.

$. 'espu8s de congelar" el producto se somete a !ac:o.

3. as condiciones de trabajo del e7uipo son =


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P( porcentaje de humedad 4.

O( peso de la charola con la c5scara g4.

'( peso de la charola con la c5scara seca g4.

A1(. O/tenci"n de la !arina integral.


• &olino de martillos" marca !e#co.

• )esiduos secos de naranja( c5scara" semillas # bagazo.

• Bolsas negras

• /apones para los o:dos

Procedimiento

1. Colocar los residuos secos en el molino.

$. Encender el molino" !erificar 7ue los residuos no se atoren en las mand:bulas" por lo 7ue

se recomienda 7ue los residuos sean agregados lentamente.

3. )ecolectar la harina integral en bolsas de mantas.

%. Guardar la harina integral en bolsas negras en el ana7uel.

A1-. 0amiado


• Criba mec5nica

• /amices


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• arina de naranja

Procedimiento

1. Colocar los tamices por su n?mero de malla" en forma ascendente.

$. -dicionarle la harina" aproximadamente 3 minutos.


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Ec. 3

Ec. %

6ustitu#endo -R en la ecuaci+n 3.

Ec. <

S * actor de forma por definici+n.

-R* 6uperficie especifica de una mezcla.

Tp* 'ensidad de la part:cula.


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0a/la A( 6erie de tamices /#ler. Valores del di5metro de part:cula de acuerdo a su n?mero de malla.

A12. @ndice de !inc!amiento


• &ateria !egetal• Probeta graduada de


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V1 * !olumen ocupado por la harina integral.V$ * !olumen final ocupado por la harina en la probeta.

A14. E+tracci"n s"lidol3quido

Materiales' reacti&os y equipos

• arina de naranja

• Etanol o acetona ambos al @


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$. acer $ la!ados con metanol" dejar en agitaci+n durante 10 min cada la!ado.

3. Enjuagar con suficiente agua destilada # con Cl.

Empacado de la columna

1. Colocar el algod+n en la parte inferior de la columna.

$. Empaca la columna con a#uda de un embudo.

3. a!ar la resina con agua destilada" hasta 7ue el agua tenga un p neutro procurar 7ue la

resina no se se7ue4.

Procedimiento

1. Cargar la muestra lentamente" para e!itar 7ue se formen burbujas o 7ue la resina se

remue!a. Esperar $0 minutos.

$. Eluir con 100 m de agua destilada" con goteo de salida contante" cerrar la lla!e de la

columna cuando se ha#a colectado una fracci+n de 100 m.3. )ealizar el procedimiento anterior con las siguientes soluciones porcentuales de metanol(

10" $0" 30" %0 #


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1. Colocar en cada pozo de la primera fila del spot plate $0 gotas de las muestras # agregar

< gotas Cl.

$. En la siguiente fila agregar a cada pozo $0 gotas de muestra junto con una tira de

magnesio met5lico # cinco gotas de Cl" estas son agregadas lentamente #a 7ue se

produce efer!escencia # se pueden mezclar las muestras.

/ipo de

fla!onoide

Coloraci+n con la

reacci+n de 6hinodaChalconas o ha# reacci+n-uronas o ha# reacci+nJsofla!ononas o ha# reacci+n

Jsofla!onas -marillo rojizola!anonas -zul magenta" !ioleta"

rojola!anoles )ojo a magentala!onas #

fla!onoles

-marillo a rojo

0a/la A- Prueba de shinoda. Coloraci+n con lareacci+n de shinoda" para cada tipo de fla!onoide.

En la ta/la A- se muestra la coloraci+n de la reacci+n de shinoda de acuerdo al tipo de

fla!onoides correspondiente

A;. Cromatogra:3a en capa :ina #CC7%

Reacti&os' materiales y equipos

• Placa de silica gel G $(1($4

• )e!elador de cloruro de aluminio -lCl3 al


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1. Jdentificar la placa # colocar las muestras 7igura A14.

$. -dicionar la solucion elu#ente en la c5mara e introducir la placa # tapar.

3. )etirar la placa hasta 7ue el elu#ente alcance la marca superior de esta.

%. Colocar la placa en la campana de extracci+n para 7ue se e!apore el sol!ente.

. 6e re!ela con una soluci+n de -lCl3" #a 7ue ese se adhiere con los fla!onoides dando una

tonalidad dorada al ser le:da en el transiluminador.

7igura A1 Cromatograf:a en capa fina. )eci8nadicionada la muestra.

A1. Concentraci"n en rota&apor de los e+tractos


• &uestras a concentrar

• )ota!apor

• )efrigerantes

• Bamba de !ac:o

•

&atraz de fondo redondoProcedimiento

1. lenar el baDo con agua destilada hasta la marca superior.

$. Colocar la muestra 7ue se desea concentrar en un matraz de fondo redondo" ajustando el

e7uipo al matraz mediante una abrazadera.

3. -juste la profundidad de inmersi+n el matraz mediante el ascensor de mano.


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%. -justar la temperatura del baDo a 20IC para el etanol o metanol # mantener a 100 rpm

durante 30 minutos aproximadamente.

. Cerrar la lla!e de purga del e7uipo # encienda la bomba de !ac:o.

2. -l terminar la destilaci+n apagar la bomba de !ac:o" abrir la lla!e de purga del e7uipo.

@. )etirar el matraz 7uitando la abrazadera" traspasar el concentrado en un frasco 5mbar.

F. -pague todo el e7uipo # limpie la superficie del mismo asegur5ndose 7ue no 7ueden

restos de agua en el refrigerante #a 7ue esta puede ocasionar el crecimiento de algas.

A. Beterminaci"n de la concentraci"n de !esperidina por un m6todo espectro:otometr3a

u&D&is.


• Espectrofot+metro

• &uestras

• Celdas de cuarzo

• -gua destilada

• Papel Mleenex

Procedimiento

• En el caso los espectros" se usa un inter!alo de longitud de onda de $$0 a 3%0 nm.

• Calibrar el espectrofot+metro con una soluci+n blanco" siendo este el sol!ente el en cual

esta disuelta la muestra.

• ,btener el espectro" # realizar los c5lculos necesarios.

• as cur!as de calibraci+n se realizaron" tomando la longitud de onda de m5xima

absorbancia" utilizando una soluci+n est5ndar.


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