8/15/2019 Análisis Genético de GHR Debe Contener

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Análisis genético de GHR debe contener la

secuenciación de todos los exones de

codifcación específca de Intrón Secuencias y

detección de exón supresionesResumen

Antecedentes: El trabajo de los pacientes con características clínicas y / obioquímicas de la insensibilidad de hormona de crecimiento (GHI) por logeneral contiene análisis gentico del receptor de la hormona del crecimientogen (GH!)" y si es negati#a" de $%&% ' " y IG&*$ y IG+, En un in-ormeanterior describimos . hermanos que presentan talla baja" bajos ni#eles deIG+" la secreci0n ele#ada GH y ning1n aumento de IG+ despus de +semana de la administraci0n de GH, &nálisis repetido de GH! no mostr0

alteraciones2 $in embargo" nue#as pruebas re#elaron una hetero3ygous $%&%'de-ecto en ambos hermanos ,Subjects y étodos: 4os muchachos de 5rigen$urinamHindustan mostr0 la -alta de crecimiento hasta la edad de 67 a8os"seguida de la recuperaci0n del crecimiento parcial asociado con el aumento deíndice de masa corporal, !eanálisis del GH! incluyendo publicaci0n secuenciasde intrones se reali30 en el &49 de los pacientes recogidos 7 a8os antes, Resultados: *a #ariante hetero3ygous $%&%' result0 ser -uncionalmentebenigna, *& mutaci0n intr0nica homocigotos del GH!" c,6+ ; 7$6; 7

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ig, +, edigree, $ímbolos para #ariantes genticas se indican, &ltura $4$ semenciona seg1n la re-erencia de la 5J$ CD,

Hace muy poco se nos in-orm0 por uno de los laboratorios que se había lle#adoa cabo el análisis gentico inicial que al reanálisis" una mutaci0n homocigota seencontr0 en el intr0n 6 de GH!" una regi0n que no se incluy0 en el proyectoinicial, En esta bre#e nota se describe la clínica y los detalles de laboratorio deestos pacientes" incluida su cur#as de crecimiento y los resultados de estudios-unctional $%&%',

Sujeto y métodos

IF naci0 despus de semanas de gestaci0n con un parto normal peso (K".$4$) C.D (longitud desconocida de nacimiento), *os padres eran deascendencia $urinamIndostán, *a altura del padre era +6 cm (+" $4$ seg1nla 5rgani3aci0n Jundial de la $alud" 5J$" de re-erencia) CD y la altura de lamadre era de +6K cm (K"' $4$2 target altura K" $4$) CD, El árbolgeneal0gico se muestra en la Bgura +, En el primer 7 a8os de #ida la altura delpaciente $4$ disminuyeron y en el primer e?amen por el endocrin0logopediátrico en 6"

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actualmente es de .". $4$, ubertad comen3ado a +"6 a8os, Luriosamente"su ni#el de IG+ aument0 de ,. $4$ a 7" a8os a K $4$ a la edad de +"'a8os, *a prolactina -ue K"+6 A / l (normal)" y no hubo signos deinmunodeBciencia, $u más jo#en !F hermano naci0 con un peso al nacer deK". $4$ y una longitud nacimiento de ." $4$ C.D, $u altura $4$ disminuy0 en

los primeros 6 a8os de #ida" y en el primer e?amen en " a8os de la edad desu altura era de cm ("< $4$ de acuerdo con el cuadro de la 5J$ CD" "para la re-erencia holandesa C'D)" el IJL -ue del K" $4$ C6D y circun-erencia dela cabe3a era .,' $4$ C7D, $u cur#a de crecimiento y el IJL la e#oluci0n -uesimilar a la de su hermano (Bg, . c" d), $u IG+ ni#el estaba por debajo dellímite de detecci0n del ensayo y permaneci0 indetectable despus de laadministraci0n de altas dosis de rhGH durante + semana, Ml tenía una #o3aguda y su desarrollo psicomotor -ue retrasado, Ml ha mostrado signos deinmunodeBciencia, & +.,7 a8os su altura es de +,. $4$ de acuerdo con elcuadro de la 5J$ CD (+" para la re-erencia holandesa C'D)" y el índice demasa corporal es de "K $4$ C6D, *a pubertad tiene no empe3ado, El másreciente ni#el de IG+ -ue de +, $4$ CD y la prolactina -ue de K"+. A / l(normal), 4e la nota" $4$ altura actuales de ambos los ni8os no es di-erente dela altura del objeti#o $4$,

 Análisis genético de GHR

 En .KK7" ninguna aberraci0n pat0gena se pudo detectar con el c0digo dee?ones (incluyendo las secuencias Nanqueantes del intr0n hasta 7'nucle0tidos) del gen GH!, En .K+K" las pruebas genticas del GH! (codiBcaci0nde e?ones incluyendo secuencias de acompa8amiento intr0n hasta Knucle0tidos en intr0n y J*& para detectar #ariantes de n1mero de copias) y#arios otros genes C+D se repiti0" y de nue#o no se encontraron aberraciones enel GH!, En .K+" se #ol#ieron a anali3ar las muestras de &49 de +Kpacientes GHI de

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ig, ., &ltura (a) C'D y el índice de masa corporal (b) C6D de IF paciente,

lle#a la #ariante $%&%' y" además" un heterocigotos en la #ariante IG&*$(p,&rg'%rp) y una deleci0n en el cromosoma O (Oq.' arr ($9Q&.,+ariante IG&*$ y la supresi0n en el cromosomaO tambin -ueron que se encuentra en la madre,

$%&%' p,Glu+'&la (p,E+'&) Estudios -uncionales

la >ariante $%&%' p,Glu+'&la se gener0 y estudios -uncionales (e?presi0n#ariante" la -os-orilaci0n de la GH inducida #ariante" la acti#idad transcripcionalmedida por ensayos de reportero de luci-erasa) se reali3aron en los HES.

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ig, ., &ltura (c) C'D y el índice de masa corporal (d) C6D de !F pacienteLomo se describi0 anteriormente C+D, El 9terminal *&G$%&%'E+'& (E+'&) se gener0 por mutagnesis especíBca del sitio (TuicULhange II dirigidaal sitio Sit de Jutagnesis" $tratagene" *a Volla" Lali-ornia" utili3ando pc49&,+que lle#an de tipo sal#aje 9*&G$%&%' como plantilla," EE,AA,)

Resultados

la >ariante $%&%' p,Glu+'& es uncionalmente benigna $e determin0primero si el missense heterocig0tica >ariante $%&%' (e?0n ) identiBcado enambos hermanos podía

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ig, , Estudios de la reconstituci0n de la hetero3ygous$%&%' #ariantep,Glu+'&la, >ector (pc49&,+)" 9terminalmente *&G$%&%' de tipo sal#aje#ariante ($%&%') o $%&%'Glu+'&la (E+'&) se trans-ectaron en

HES.

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resultado de un de-ecto de tráBco C++D, Esto condujo a GHI con cierta#ariabilidad de las mani-estaciones -enotípicas C+KD

-iscusión

Este bre#e in-orme es presentado por tres ra3ones, En primer lugar" ilustra queel clínico siempre debe interpretar una resultado negati#o de una pruebagentica a la lu3 de las limitaciones de las tcnicas utili3adas en el laboratorio,En el momento del primer análisis GH! en .KK7" la mutaci0n especíBca enintr0n 6 había sido descrita en + altamente consanguínea amilia paquistaní C

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!F tenía dos #ariantes adicionales" con posible e-ecto en estatura, $e especul0que la Oq.' delecion" que contiene un gen (W4!KL)" no tu#o ning1n e-ectoen la altura" pero que la >ariante IG&*$ podría contribuir a la baja estatura de!F, Esto -ue apoyado por un +'KU4a pico complejo ternario in-erior y un ni#el&*$ srica menor que en IF C+D, $in embargo" la madre tambin lle#ado a

ambas #ariantes y tiene una altura dentro de la gama normal, $e trata sin dudade que con el rápido surgimiento de nue#as metodologías analíticas genticas"numerosas #ariantes moleculares se encontraron en un solo paciente, ese & lamayoría de estas #ariantes es probable que sean benignos" o digenicos inclusoe-ectos causales oligogenicos no hacen más probable" especialmente cuandose asocia con consanguinidad, Este es ilustra en un in-orme sobre un casoreciente de un paciente con GHI causada por un c,6+ homocigotos ; 7$6 ; 7

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la proteína normal" mientras que los pacientes gra#emente a-ectados teneruna proporci0n en -a#or de la proteína mutante C+KD, En nuestro pacientes la#elocidad de crecimiento cada #e3 mayor podrían ser el resultado de un tiposal#aje relaci0n de cambio / mutante con el tiempo, En adici0n" la pubertad y laobesidad tambin podrían contribuir al patr0n de crecimiento obser#ado, $0lo

. pacientes se han reportado haber recibido rIG+ tratamiento C+D, *a#elocidad de crecimiento en el paciente con la mutaci0n combinedGH!and&&&$ aument0 de "K a