A efectuat: Calugareanu Valentin gr.2202

Profesor: Elena Zariciuc

Apa este un factor indispensabil existentei si continuitatii vietii pe planeta noastra.In conditii naturale, apa nu exista niciodata in stare pura, in apa gasindu-se intotdeauna o anumita cantitate de substante dizolvate sau aflate in suspensie.

Compozitia naturala a apei, avand in vedere diversitatea si continutul acestor substante in apa, evidentiaza prezenta urmatoarelor grupe de elemente componente : gaze dizolvate ( O2, CO2, H2, H2S), substante minerale si organice dizolvate, coloidale sau aflate in suspensie cat si saprofita propriei apei.Apa pura se obtine din apa naturala prin distilare repetata in conditii in care sa nu poata dizolva gaze din aer sau substante solide din recipientele in care este conservata

Conditii de potabilitate a apeiPentru a fi potabila apa trebuie sa indeplineasca anumite conditii:

Organoleptice (gust, miros) Fizice (temperatura, turbiditate, culoare, pH,

radioactivitate, conductibilitate electrica) Chimice (substante organice, anorganice,

subst.ce dau duritatea apei – saruri de Ca si Mg) Bacteriologice

Conditii bacteriologice

Flora proprie = germeni psihrofili (criofili) – germeni care se dezv.la 22°C (saprofiti)

Flora mezofila – germeni care se dezv. la 37°C (germeni de provenienta umana si animala)

Indicatori bacteriologici de contaminare a apei1) Nr. total de germ. la 37°C / 1 ml apa

2) Nr. probabil de germeni colli

3) Nr. probabil de Streptococi intestinali (enterococi de grup D) – saprofiti ai omului

4) Det. bacteriofagilor enterici (anti-Esherichia colli, anti-Salmonella thyphi)

5) Det. germ. sulfitoreducatori (Clostridii)

6) Det. germ. care se dezv. La 22°C Analizele curente si obligatorii: 1), 2) si 3)

Metode de recoltare

Apa se recolteaza in recipiente de sticla sterilizate la 180°C

Daca se recolteaza apa de robinet se sterilizeaza flaconul cu tiosulfat care neutraliz. Cl din apa

Transp.flacoanelor: in conditii izoterme la +4°C Analiza microbiologica se face la max.6-8 ore

din momentul recoltarii probelor.

Determinarea NTG la 37°C din proba de apa se fac dilutii zecimale; din fiecare dilutie se insamanteaza cate 1 ml

pe o placa Petri peste care turnam geloza simpla; se fac miscari de rotatie in plan orizontal pt.ca geloza sa inglobeze apa insamantata.

se incubeaza la 37°C, 48 ore

NTG 37°C / ml = Σ n x d , n= nr.colonii

N d= inversul dilutiei

N= nr.placi

Determinarea bacteriilor Determinarea bacteriilor coliformecoliforme Sursa cea mai importantă de poluare

bacteriană a apei o constituie reziduurile, excrementele umane şi animale, care pot conţine germeni patogeni.

Metoda pentru determinarea bacteriilor coliforme include teste prezumtive, de confirmare, bazate in primul rând pe capacitatea bacteriilor de a fermenta lactoza cu producere de acid lactic, CO2, H2, în timp de 48 ore la 35C.

Nr. probabil de germeni colli

2 teste : a) de prezumtie b) de confirmare

a) intr-o eprubeta cu un mediu lichid cu lauryl sulfat + lactoza in care se aseaza un tub de fermentatie Durham cu gura in jos (rol: capteaza gazul care se form.prin fermentarea lactozei)Se incub. la 37°C, 48 ore (test de imbogatire)

Reactie (+) virarea culorii in galben

Nr. probabil de germeni colli

b) Confirmarea prezentei germ.colli: insamantare cu ansa din tubul Durham (+) la testul anterior pe un mediu solid Levine – specific pt.colli

Se incub. la 37°C, 24 ore

Confirmare colonii de germ.colli in picaturi de fuxina (rosii-violet in centru, cu irizatii spre periferie)

! Caracteristic pt.germ.colli: aparitia unui reflex verde-metalic la supraf.mediului

Nr. probabil de enterococi (Streptococi fecali) Germ.saprofiti ai intestinului Se gasesc in nr. mult mai mic decat colli

(10%, restul colliformi) Rezista mai mult in apa decat colli riscul

transmiterii enterovirusurilor Evidentiati prin 2 teste:a) de prezumtie: se insamanteaza apa pe

bulion cu azida de sodiu; se incub. la 37°C, 48 ore

Reactie (+) aparitia unui sediment alb care la agitare nu se descompune

Nr. probabil de enterococi (Streptococi fecali)

b) Testul de confirmare: strapungem cu ansa sedimentul format, insamantare pe acelasi mediu de cultura + indicator de culoare = brom-crezol (violet); se incub. la 44,5°C, 24 ore

Confirmare virarea culorii de la violet la galben si aparitia de sediment

Analize complementare- in epidemii hidrice sau cand se alege o noua sursa de apa Det. bacteriofagilor enterici (anti-Esherichia

colli, anti-Salmonella thyphi)

Det. germ. sulfitoreducatori (Clostridii)

Det. germ. care se dezv. la 22°C

Determinarea bacteriofagilor enterici Rezista in apa mai mult decat bacteriile Se pot evidentia chiar daca germ.respectiv a

disparut Proba de apa se insamanteaza cu ansa dintr-

o cultura de Esherichia colli, apoi pe geloza simpla, se incub. la 37°C, 24 ore

Daca in proba de apa exista bacteriofagi zone de liza a coloniilor (liza clara completa,

liza incompleta, liza in plaja) apa nepotabila !

Determinarea germ.sulfitoreducatori (Clostridii) Anaerobi sporulati cu dubla provenienta: naturala de

pe sol si intestinala. Prezenta lor in apa contaminare f.veche Se foloseste un mediu solid cu sulfit de Na si FeCl2

care se toarna in eprubete; se insamanteaza cate 1 ml apa, se incub.la 37°C

Reactie (+) aparitia de colonii negre (se formeaza FeS)

Confirmare: insamantare cu ansa din coloniile negre pe un mediu cu lapte; se incub.la 37°C in conditii de anaerobioza formarea unui cheag = prezenta Cl.perfringens in apa

Determinarea germ.la 22°C

Se gasesc in mod natural in apa, determinarea florei saprofite arata gradul de poluare: cand apa are germ.supraadaugati flora saprofita e inhibata.

Normal flora supraadaugata: endogena = 3:1 Se insamant.pe geloza simpla, incub.la 22°C

NTG 22°C / ml = Σ n x d N

Determinarea numărului total de germeni

Numărul total de germeni reprezintă numărul de colonii care se dezvolta in urma insamantarii de 1cm3 de apa in mediu de cultura, după 48 ore de termostatare la 37C.

În cazul in care se consideră că apa reprezintă un grad ridicat de contaminare mai mare se fac însămânţări din diluţii (schema I) coloniilor se face din plăcile cu 30-300 colonii.