26
ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา Colletotrichum sp. The effect of soursop’s leaves crude extract on the control of Colletotrichum sp. ฮากีม นิกาเร็ง รหัส 5760601013 อุสมาน เจ๊ะลาเตะ รหัส 5760601034 รายงานฉบับนี้เป็นส่วนหนึ่งของการศึกษารายวิชา 06-354-261 ปัญหาพิเศษ ตามหลักสูตรวิทยาศาสตรบัณฑิต (เกษตรศาสตร์) คณะเกษตรศาสตร์ มหาวิทยาลัยนราธิวาสราชนครินทร์ ปีการศึกษา 2560

ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

  • Upload
    others

  • View
    2

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

ผลของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศตอการควบคมเชอรา Colletotrichum sp.

The effect of soursop’s leaves crude extract on the control of Colletotrichum sp.

ฮากม นกาเรง รหส 5760601013

อสมาน เจะลาเตะ รหส 5760601034

รายงานฉบบนเปนสวนหนงของการศกษารายวชา 06-354-261 ปญหาพเศษ ตามหลกสตรวทยาศาสตรบณฑต (เกษตรศาสตร)

คณะเกษตรศาสตร มหาวทยาลยนราธวาสราชนครนทร ปการศกษา 2560

Page 2: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

ผลของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศตอการควบคมเชอรา Colletotrichum sp.

The effect of soursop’s leaves crude extract on the control of Colletotrichum sp.

ฮากม นกาเรง รหส 5760601013 อสมาน เจะลาเตะ รหส 5760601034

รายงานฉบบนเปนสวนหนงของการศกษารายวชา 06-354-261 ปญหาพเศษ ตามหลกสตรวทยาศาสตรบณฑต (เกษตรศาสตร)

คณะเกษตรศาสตร มหาวทยาลยนราธวาสราชนครนทร ปการศกษา 2560

Page 3: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

เรอง ผลของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศตอการควบคมเชอรา Colletotrichum sp. ชอนกศกษา นายฮากม นกาเรง รหส 5760601013 นายอสมาน เจะลาเตะ รหส 5760601034 หลกสตร วทยาศาสตรบณฑต (เกษตรศาสตร) ปการศกษา 2560 ทปรกษาหลก อาจารยจกรพงศ จระแพทย ทปรกษารวม ผชวยศาสตราจารย ดร.สายทอง แกวฉาย

บทคดยอ

งานวจยนมวตถประสงคเพอศกษาชนดของตวท าละลายทใชในการสกดสารสกดหยาบในใบทเรยนเทศ และเพอศกษาประสทธภาพในการควบคมเชอรา Colletotrichum sp. ของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศ วางแผนการทดลองแบบ 4x4 Factorial in CRD ประกอบดวยสงทดลองทม 2 ปจจย ไดแก ตวท าละลายทแตกตางกน ประกอบดวย เมทานอล เอทลอะซเตท เฮกเซน และน า ทความเขมขน 0 5,000 10,000 และ 15,000 ppm พบวา สารสกดหยาบในตวท าลายน า มปรมาณสารสกดหยาบมากทสด เทากบ 38.78 กรม โดยลกษณะของสารสกดหยาบจะมสเขยวด า และหนด ส าหรบประสทธภาพของการยบยงการเจรญของเชอรา Colletotrichum sp. พบวา สารสกดหยาบในตวท าละลายเอทลอะซเตท สามารถยบยงการเจรญของเชอรา Colletotrichum sp. ไดดทสด โดยทระดบความเขมขนของสารสกด 10,000 และ 15,000 ppm มคาการยบยงการเจรญของเสนใยเชอรา Colletotrichum sp. สงทสด เทากบ 42.20 และ 43.57 เปอรเซนต ตามล าดบ มความแตกตางกนทางสถตอยางมนยส าคญยง (p<0.01) เมอเปรยบเทยบกบสงทดลองอนๆ

ค าส าคญ : สารสกดหยาบ ใบทเรยนเทศ เชอรา Colletotrichum sp.

Page 4: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

Title The effect of soursop’s leaves crude extract on the control of Colletotrichum sp. Authors Hakeem Nikareng ID. 5760601013 Ausman Chelateh ID. 5760601034 Course Bachelor of Science in Agriculture Academic Year 2017 Advisor Mr. Jakkrapong Jirapaet Co-advisor Asist. Prof. Saithong Kaewchai, Ph.D.

Abstract This research aims to study the type of solvent which used extraction of crude

extracts and the efficiency of controlling fungus Colletotrichum sp. by soupsop’s leaves crude extracts. The experiment design was been analyzed the 4x4 Factorial in CRD, which consisted of two factors included methanol, ethyl acetate, hexane, water and the level of concentration at 0, 5,000, 10,000 and 15,000 ppm. The results showed that coarse extracts using water as solvent had the highest crude extract content of 38.78 gram and the crude extracts were dark green, black and viscous. While, the efficiency of inhibition on fungus was found that the crude extract using ethyl acetate could be inhibited the growth of Colletotrichum sp. was the best. The concentrations of 10,000 and 15,000 ppm in the crude extract using ethyl acetate were found that the highest to inhibit the growth of Colletotrichum sp. at 42.20 and 43.57 percent, respectively, and The statistical difference was significant (p <0.01). Key words: Crude extracts, soupsop’s leaves, Colletotrichum sp.

Page 5: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

กตตกรรมประกาศ

ปญหาพเศษฉบบนส าเรจไดดวยความกรณาของ อาจารยจกรพงศ จระแพทย ทปรกษา และผชวย ศาสตราจารย ดร.สายทอง แกวฉาย ทปรกษารวม ทใหค าปรกษาและแนะน าตงแตเรมด าเนนการ ตลอดจน ตรวจทานแกไขจนกระทงเสรจสมบรณ และขอขอบพระคณอาจารย ดร.จารวรรณ แดงโรจน อาจารยประจ า คณะวทยาศาสตรและเทคโนโลย ทใหค าแนะน าชวยเหลอ และใหความอนเคราะหหองปฏบตการส าหรบสกด สารสกดหยาบ

ขอขอบคณคณะกรรมการสอบปญหาพเศษทกทาน อาจารยผรบผดชอบรายวชา คณาจารย และ เจาหนาทคณะเกษตรศาสตร ทมสวนชวยเหลอ ผลกดน และใหความร

ขอขอบคณ เพอน พ และนองๆ คณะเกษตรศาสตร ทคอยใหความชวยเหลอ และใหก าลงใจใน ระหวางทศกษา และท าการทดลองมาโดยตลอด

สดทายนขอกราบขอบพระคณ คณพอ คณแม และทกๆ คนในครอบครวทใหการสนบสนนคอยดแล ใหค าปรกษา และเปนก าลงใจทดเสมอมา ฮากม นกาเรง

อสมาน เจะลาเตะ

Page 6: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

สารบญ

หนา

บทคดยอภาษาไทย ................................................................................................................................... (1) บทคดยอภาษาองกฤษ .............................................................................................................................. (2) กตตกรรมประกาศ .................................................................................................................................... (3) สารบญ ..................................................................................................................................................... (4) สารบญตาราง ........................................................................................................................................... (5) สารบญภาพ .............................................................................................................................................. (6) บทท 1 บทน า ............................................................................................................................................. 1 บทท 2 เอกสารและงานวจยทเกยวของ ...................................................................................................... 1 บทท 3 วธการวจย ...................................................................................................................................... 2 บทท 4 ผลการวจยและวจารณ ................................................................................................................... 3 บทท 5 สรปและขอเสนอแนะ ..................................................................................................................... 4 เอกสารอางอง ............................................................................................................................................. 5

Page 7: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

สารบญตาราง

ตาราง หนา

ตารางท 2.1 คณคาทางโภชนาการของทเรยนเทศ .................................................................................... (1) ตารางท 4.1 ปรมาณสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศทไดในตวท าละลายตางกน ..................................... (2) ตารางท 4.2 เปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศท

สกดดวยตวท าละลายตางชนดกน ........................................................................................ (3) ตารางท 4.3 เปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศท

ความเขมขนของสารสกดตางกน .......................................................................................... (4) ตารางท 4.4 เปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราระหวางชนดของตวท าละลายทใชสกดสารและ

ความเขมขนของสารสกด ..................................................................................................... (5)

Page 8: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

สารบญภาพ

ภาพท หนา

ภาพท 3.1 ขนตอนการสกดสารสกดจากใบทเรยนเทศ.............................................................................. (1) ภาพท 4.1 สารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศในตวท าละลายแตกตางกน .................................................... (2) ภาพท 4.2 ผลของสารสกดหยาบในตวท าละลายแตกตางกนตอการยบยงการเจรญของเชอรา

Colletotrichum sp. ............................................................................................................. (2)

Page 9: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

บทท 1 บทน า

1.1 ความเปนมา และความส าคญของปญหา

การน าสารประกอบมาใชประโยชนตางๆ นน ไดมาจากการสกดออกมาจากสวนตางๆ ของพช เชน ราก เปลอก ใบ ดอก ผล และเมลด ใหอยในรปของสารสกดหยาบ (crude extracts) เพอใหไดเนอสารทมความเขมขนสง กอนน าไปใชส าหรบการศกษาและพฒนาในระดบสงทมความละเอยดและซบซอน อาทเชน ดานเวชศาสตร ดานเภสชวทยา และดานการปองกนก าจดศตรพช เปนตน ซงพ ชตระกล Annonaceae มสารพฤกษเคมกลมใหญๆ 3 กลม คอ ไซโคลเฮกซะเปปไทด อะซโตจนน และแอนโนนาเซยส อะซโตจนน ทมแทนนน สเตอรอยด และคารดแอค ไกลโคไซด เปนองคประกอบ (Gajalakshmi et al., 2012) ไดมการสกดสารประกอบจากใบและเปลอก จงพบสารประกอบอะซโตจนน ซงเปนสารประเภทโพลคไทด ซงมเฉพาะพชสกลนเทานน การออกฤทธทางชวภาพของพชตระกล Annonaceae มสารพฤกษเคมกลมใหญๆ 3 กลม คอ ไซโคลเฮกซะเปปไทด อะซโตจนน และแอนโนนาเซยส อะซโตจนน ทมแทนนน สเตอรอยด และคารดแอค ไกลโคไซด เปนองคประกอบ (Gajalakshmi et al., 2012) ไดมการสกดสารประกอบจากใบและเปลอก จงพบสารอะซโตจนน ไดแก ฤทธตอตานปรสต ( antiparasitidal activities) ฤทธการฆาแมลง (insecticidal activities) ฤทธกดภมคมกน (immunosuppressive effect) และสามารถระงบเซลลมะเรงบางชนดได เชน มะเรงปอด มะเรงเตานม และมะเรงปากมดลก (ณฐธยาน, 2554)

แมวาในพชเหลานจะมสารประกอบทมประสทธภาพในดานการรกษาโรค ปองกนก าจดเชอทกอใหเกดอนตรายตอมนษย และมศกยภาพในการใชเปนสารปองกนก าจดศตรพชได แตปรมาณและความเขมขนของสารประกอบทสกดไดจากพชในแตละสวนประกอบอาจมความแตกตางกนขน เนองจากกระบวนการสงเคราะหสารในระดบเซลลและการเกบสะสมของสารในแตละสวนประกอบนนแตกตางกน รวมถงการออกฤทธของสารประกอบนน อาจสงผลลพธทมความแตกตางกนอกดวย เชน สควอโมซน ทแยกไดจากสวนสกดอเทอรจะมมากในเมลดนอยหนา สารอะซมโลบน นอรนซเฟอรน และแอนโนนาอน ทแยกไดในปรมาณมากจากสวนของผลทเรยนเทศ เปนตน (กนกอร, 2555) ซงจะเหนไดวา ในแตละสวนประกอบของพชจะใหปรมาณความเขมขนและชนดของสารประกอบทแตกตางกนไป นอกจากนพบวา ฤดกาลทซงเปนปจจยทมผลตอการเจรญเตบโตของพช ท าใหพชเกดการเปลยนแปลงและมพฒนาการในระยะตางๆ เชน การแตกยอดออนและออกดอกในฤดรอน เปนตน ฤดกาลยงสงผลตอปรมาณและความเขมขนของสารออกฤทธในตนพชเชนเดยวกน ซงสอดคลองกบ Hernandez และคณะ (2013) ทศกษาอทธพลของการเปลยนแปลงฤดกาลตอฟโนโลย และปรมาณของสารไลรโอดนนในนอยหนาลทเซนต พบวา ปรมาณความเขมขนของไลรโอดนนในรากเพมขนในชวงฤดแลง และเรมมปรมาณลดลงเมอเรมเขาสฤดฝน นอกจากน ปรมาณสารอะซโตจนนในทเรยนเทศทมอายตางกน มการสงเคราะหสารทแตกตางกน ซงการสงเคราะหสารอลคารอยดในเมลดมคานอย และจะพรอมเรมเพมสงขนเมอเมลดเรมงอกจนมปรมาณสงสดเมอเรมแตกใบออนคแรก จากนนปรมาณจะเรมลดลง ส าหรบในตนกลาเมลด พบวา ปรมาณลาเฮอราดรนในใบสงทอายนอยและจะลดลงอยางรวดเรว เมอตนทเรยนเทศมอายมากขน ในขณะทสารโรลลนาสเตตน -2 ในใบมปรมาณนอย แตจะเพมมากขนเมอตนมอายเพมขน (Gonzalez-Esquinca et al., 2014) ทงนการเกบ

Page 10: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

สะสมสารประกอบทางเคมมลกษณะเชนเดยวกนกบการสะสมอาหารในพช ซงจะมปรมาณความเขมขนทแตกตางกนในรอบปขนอยกบสภาพภมอากาศทสงผลตอการเจรญเตบโตของพช นนเอง 5. วตถประสงค 1. เพอศกษาชนดของตวท าละลายทใชในการสกดสารสกดหยาบในใบทเรยนเทศ 2. เพอศกษาประสทธภาพในการควบคมเชอราโรคแอนแทรกโนสในพรกของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศ 6. ประโยชนทคาดวาจะไดรบ 1. ทราบปรมาณสารสกดหยาบในใบทเรยนเทศทใชตวท าละลายตางกน 2. ทราบประสทธภาพในการควบคมเชอราโรคแอนแทรกโนสในพรกของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศทไดจากตวท าละลายแตกตางกน

Page 11: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

บทท 2 เอกสารและงานวจยทเกยวของ

2.1 เอกสารทเกยวของ

ทเรยนเทศ (Soursop) จดเปนพชทอยในวงศกระดงงา (Annonaceae) วงศเดยวกบ นอยหนา จ าป นมแมว กระดงงา เปนตน และพบวา มสมาชกประมาณ 130 สกล และ 2 ,300 ชนด โดยมสกล Annona และ Rollinia เปนกลมทมขนาดใหญ และมความส าคญทางเศรษฐกจ โดยชนดทมศกยภาพดานการตลาดภายในประเทศ มจ านวน 7 ชนด และพนธลกผสม 1 ชนด (Badrie and Schauss, 2009) ทเรยนเทศ มถนก าเนดอยในอเมรกากลาง พบครงแรกในป 1526 โดยนกประวตศาสตรชาวสเปน ชวงราวครสตศตวรรษท 16 จงเรมแพรกระจายไปสพนทเขตรอนทวโลกรวมทงประเทศแถบเอเชยตะวนตกเฉยงใตโดยนกเดนเรอชาวสเปน และเปนอกชนดพชทมการน าออกจากอเมรกาสดนแดนโลกเกาเขตรอนชน นบเปนจดเรมตนของการแพรกระจายพนธอยางกวางขวางตงแตตะวนเฉยงใตของประเทศจนจนถงประเทศออสเตรเลย และทราบลมเขตอบอนภาคตะวนตกของแอฟรกา (Morton, 1987; Love and Paul, 2011) ส าหรบการแพรกระจายพนธของทเรยนเทศในแถบเอเชยใตและเอเชยตะวนออกเฉยงใตพบวา ทเรยนเทศมการเจรญเตบโตในหลายพนทตงแตประเทศอนเดย ศรลงกา บงคลาเทศ รวมถงบรเวณตอนใตของประเทศจน ฟลปปนส อนโดนเซย มาเลเซย เวยดนาม และไทย

นอกจากนยงมบางพนทของออสเตรเลย และนวซแลนด มการกระจายตวในบรเวณกวาง โดยสวนใหญเปนการปลกแบบบานสวนแตรสชาตและเอกลกษณของกลนเฉพาะตวของทเรยนเทศ ตอมาจงเปนทยอมรบและเรมมการปลกในเชงพาณชยมากขนอาทเชน รฐควนสแลนดในออสเตรเลย ตอนกลางและตะวนตกของวซายาส ตอนกลางของเกาะลซอนในฟลปปนส (Bureau of Plant Industry, 2011) ราก ประกอบดวย ระบบรากหลก ยาวประมาณ 1.5-1.8 เมตร และรากแขนงดานขางทมความแขงแรง ซงปกตระบบรากแกวไมมความแขงแรงและไมสามารถเจรญเตบโตใหลกได จงเปนประเดนทมความส าคญมาก ส าหรบการวางแผนและการตดสนใจเพอการผลต (Pinto, 2007) ล าตน ไมยนตนขนาดเลก แตกกงกานคอนขางมาก สงประมาณ 4-8 เมตร และอาจมความสงถง 10 เมตรในสภาพธรรมชาต เสนผานศนยกลางล าตนประมาณ 20 เซนตเมตร (Alexander et al., 1984) ลกษณะล าตนกลม มผวขรขระและมสน าตาลเขม (Pinto et al., 2005) ใบ เปนใบเดยว คอนขางหนา ใบเรยงสลบกนไปในระนาบเดยวกบก ง ใบมรปรางรถงรปไขปลายใบมน กวาง 3-4 เซนตเมตร ยาว 8-13 เซนตเมตร เสนใบเหนเดนชด ผวใบออนเปนมน ดานบน ลกษณะเปนมนนมเหมอนหนงสตว ดานลางสเหมอนสนมไมมขน เมอฉกใบจะไดกลนเหมนเขยวฉนจด (กรกนก, 2551) ดอก มขนาดใหญหนาอวบน า เสนผาศนยกลาง 3 เซนตเมตร มกลบดอก 2 ชนๆ ละ 3 กลบ (Morton, 1987) กลบดอกดานนอกขอบชดกน รปไขปลายแหลมปาน มสเหลองครม เกสรตวเมยจ านวนมากบนสวนปลายฐานดอก และลอมรอบดวยเกสรตวผหนาลกษณะเปนขนสนๆ ขดเปนวงตรงฐานสวนลาง จะผสมตวเองใน 1 ถง 3 วนหลงดอกบาน (Alexander et al., 1984) และสวนใหญจะออกดอกสวนกลางทรงพมของตน (Padmini et al., 2013) ผล มขนาดใหญ รปทรงผลมทงทรงกลมและรปหวใจ เมอโตเตมทผลจะมขนาดความกวาง 10-20 เซนตเมตร ยาว 15-35 เซนตเมตร มน าหนกตงแต 0.5-3 กโลกรม (Pinto et al., 2005; Morton, 1987) อวบน าคลายผลขนนขนาดเลก ผวผลมสเขยว เวลาแกหรอสกจะเปลยนเปนสเขยวปนน าตาลออน มหนามอวบน าทผวจ านวนมาก ปลายหนามชลงดานลาง ม

Page 12: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

ปรมาณกรดมากและมความหวานนอยกวาเชอรมวยา มรสชาตคลายกนกบสบปะรดผสมมะมวง เนอสขาวมน ามาก รสชาตหวานอมเปรยว (Subhadrabandhu, 2001)

คณคาทางโภชนาการของทเรยนเทศ กเชนเดยวกบไมผลเมองรอนอนๆ ซงอดมไปดวยสารอาหาร และวตามนตางๆ ทเปนประโยชนตอรางกาย อาทเชน คารโบไฮเดรต เสนใย ธาตเหลก และฟอสฟอรส เปนตน (ตารางท 1) ปจจบนประเทศผผลตหลายประเทศ ไดแก ฟลปปนส อนโดนเซย และมาเลเซย น าผลทเรยนเทศสกไปแปรรปเปนผลตภณฑในรปแบบตางๆ เชน น าผลไม ทเรยนอดกระปองเครองดมส าเรจรป น าเนอผลผสมในไอศกรม และท าไวน เปนตน ผลตภณฑเหลานไดรบความนยมและเปนท ตองการของผบรโภคมาก (Morton, 1987; Love and Paul, 2011) รวมถงการน ามาใชเปนยารกษาโรคตางๆ โดยผลทเรยนเทศสก น ามารบประทานเพอรกษาโรคเลอดออกตามไรฟน ผลดบรกษาโรคบด เมลดใชสมานแผล ใชเบอปลา และก าจดแมลง ใบรกษาโรคผวหนง แกไอ และปวดตามขอ รากและเปลอก ใชชงดม ลดอาการเครยด ท าใหนอนไมหลบ และบรรเทาอาการปวดเกรงตามรางกาย (สดสายชล , 2556) สอดคลองกบ ณฐธยาน (2554) ซงกลาววา มการน าทเรยนเทศมาใชบ าบดรกษาอาการเจบปวดของคนในชมชนแบบภมปญญาชาวบานทางภาคใต โดยเชอวาทเรยนเทศมสรรพคณหลากหลายดาน เชน น าใบมาตมกบน าเกลอเพอรกษาอาการปวดฟน หากโดนครบปลาแทงเขาผวหนงใหน ารากมาต าใหละเอยดผสมน าซาวขาวประคบ จะชวยบรรเทาอาการเจบปวดได อกทงผลสกจะมอายการเกบรกษาสน จงนยมน าผลออนมาประกอบอาหาร เชน แกงสม หรอเชอมเปนของหวาน เปนตน นอกจากนประเทศในเขตรอนแถบอเมรกากลางและอเมรกาใต เชน ประเทศบราซล นยมน าผลมาคนน าดมตานพยาธ และตานพษไขจากเชอมาลาเรย รวมถงการน าใบและเปลอกมาตมดม เพอชวยใหคลอดบตรไดงาย และเพมน ามนนมแกสตรหลงคลอดไดเปนอยางด

Page 13: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

ตารางท 2.1 คณคาทางโภชนาการของทเรยนเทศ ในสวนทรบประทานได 100 กรม รายละเอยด

ววฒน (2543)

Morton (1987)

Love and Pull (2011)

Onyechi et al. (2012)

น า (กรม) 83.2 82.8 80.1-82.8 82.8 พลงงาน (กโลแคลลอร) 59.0 53.1-61.3 61.3-71.0 - โปรตน (กรม) 1.0 1.0 0.69-1.0 - ไขมน (กรม) 0.2 0.97 0.39-0.97 - คารโบไฮเดรต (กรม) 15.1 14.63 14.6-18.2 - เสนใย (กรม) 0.6 0.79 0.79-0.95 0.62 เถา (กรม) - 60.0 58.0-60.0 46.0 แคลเซยม (มลลกรม) 14.0 10.3 9.0-10-.3 - เหลก (มลลกรม) 0.5 0.64 0.64-0.82 - แมกนเซยม (มลลกรม) - - 22.0 - ฟอสฟอรส (มลลกรม) - 27.7 27.7-29.0 30.0 โพแทสเซยม (มลลกรม) - - 20.0 - โซเดยม (มลลกรม) - - 22.0 - เรตนอล (IU)* - - - 192..5 กรดแอสคอรบค (มลลกรม) 24 29.6 16.4-29.6 22.59 ไทอะมน (มลลกรม) 0.08 0.11 0.07-29.0 2.1 ไรโบฟลาวน (มลลกรม) - 0.5 0.05-0.12 0.20 ไนอาซน (มลลกรม) - 1.28 1.28-1.52 0.21 ทรปโตเฟรน (มลลกรม) - 11.0 - - เมทไทโอนน (มลลกรม) - 7.0 - - ไลซน (มลลกรม) - 60.0 - - หมายเหต *International Unit

สารออกฤทธทางเภสชวทยา จากขอมลกรมวทยาศาสตรการแพทย จดใหทเรยนเทศเปนพชมพษเมอบรโภคหรอหายใจเขาไป เชนเดยวกบนอยหนา พชตระกล Annonaceae จะมสารพฤกษเคมกลมใหญๆ 3 กลม คอ ไซโคลเฮกซะเปปไทด อะซโตจนน และแอนโนนาเซยส อะซโตจนน ทมแทนนน สเตอรอยด และคารดแอค ไกลโคไซด เปนองคประกอบ (Gajalakshmi et al., 2012) โดยมการศกษาสารออกฤทธในทเรยนเทศ เรมขนตงแตป 1976 โดยสถาบนมะเรงแหงชาตของสหรฐอเมรกา ไดมการสกดสารประกอบจากใบและเปลอก จงพบสารประกอบอะซโตจนน ซงเปนสารประเภทโพลคไทด มหวงโซคารบอน 35-37 อะตอม วงเตตระไฮโดรฟวแรน 1-2 วง มหมฟงกชนแลคโทน ทปลายสายโครงสราง รวมทงมหมไฮดรอกซลภายในโครงสราง เปนคณสมบตเฉพาะพชสกลนเทานน การออกฤทธทางชวภาพของสารอะซโตจนน ไดแกฤทธตอตานปรสต (antiparasitidal activities) ฤทธการฆาแมลง (insecticidal activities) ฤทธกดภมคมกน (immune-suppressive effect) และสามารถระงบเซลลมะเรงบางชนดได เชน มะเรงปอดมะเรงเตานม และมะเรงปากมดลก (ณฐธยาน , 2554) สอดคลองกบ Liaw และคณะ

Page 14: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

(2010) รายงานวามการน าสารสกดทไดจากทเรยนเทศไปทดลองการตานเซลลมะเรงเตานมในหนทดลองโดยใหสาร 10 มลลกรมตอกโลกรม และชงน าหนกเนองอก พบวา สารสกดเปนพษตอเซลลมะเรง และท าใหชนเนองอกมน าหนกลดลงใน 13-25 วน นอกจากน สามารถแยกสารประกอบทมฤทธทางชวภาพซงอยในกลมไอโซควโนลนอลคาลอนด จากผลทเรยนเทศอก 3 ชนด คอ แอสมโลบน นอรนซเฟอรน และแอนโนนน ซงถกน ามาใชเปนสมนไพรพนเมองในแถบอเมรกาใต ผล และใบใชเปนยากลอมประสาท ชวยใหรสกผอนคลาย และเมลดใชเปนยานอนหลบ (กนกอร, 2555)

พรก เปนพชผกทมความส าคญทางเศรษฐกจ สามารถน าไปใชประโยชนไดทงในรปแบบการบรโภคสดและการน าไปแปรรป นอกเหนอไปจากคณสมบตในเรองของความเผด พรกยงเปนมคณคาทางอาหารสง โดยในผลพรกมวตามนซ (Vitamin C) หรอ กรดแอสคอรบก (Ascorbic acid) ซงชวยใหการดดซมอาหารในกระเพาะอาหารและล าไส อกทงชวยใหมการล าเลยงธาต อาหารไปยงเนอเยอในสวนตางๆ ไดดยงขน พรกเปนแหลงของเบตาแคโรทน (ß-carotein) ซงเปนสารตงตนของวตามนเอ (Vitamin A) มคณสมบตในการตอตานอนมลอสระ (Antioxidant) อกทงมสาระส าคญ อก 2 ชนด คอ แคปไซซน (Capsaicin) ซง เปนสารทใหความเผดรอน และสามารถใชเปนผลตภณฑยารกษาโรคตางๆ เชน ยาฆาเชอแบคทเรยในกระเพาะอาหาร ยาชวย การดดซมอาหาร ครมคลายกลามเนอ และครมลดอาการเจบปวด (กรมวชาการเกษตร , 2552) สาระส าคญ อกชนดหนง คอ โอล โอเรซน (Oleoresin) เปนน ามนหอมระเหยท าใหพรกมกลนหอมสามารถน ามาผลตเปนสารกนหนอาหาร จากขอมลของส านกงานเศรษฐกจการเกษตร (2552) พบวาระหวางป พ.ศ. 2549 และ พ.ศ. 2551 มปรมาณการน าเขาพรกแหงจากตางประเทศเพมมากขนจากเดม 10,386 เมตรกตน เทากบมลคา 227.62 ลานบาท และมปรมาณการสงออกพรกแหงจากประเทศไทยเพมมากขนจากเดม 3,274 เมตรกตน เทากบมลคา 422.48 ลานบาท (ส านกงานเศรษฐกจการเกษตร, 2552) แสดงใหเหนถงความตองการในการบรโภคพรกทงภายในและภายนอกประเทศนนมแนวโนมทเพมสงขน พรกจงนบเปนพชทมมลคาทางเศรษฐกจสมควรใหมการพฒนาระบบการผลตเพอใหไดพรกทมคณภาพดและมปรมาณเพยงพอแกความตองการใน การบรโภค ส าหรบปญหาส าคญทพบในระบบการผลตพรก คอ ปญหาการระบาดศตรพช ซงสรางความเสยหายในการผลตพรกเปนอยางมาก โดยเฉพาะอย างยงโรคแอนแทรกโนส (anthracnose) หรอโรคกงแหง ซงเปนโรคทเกดจากเชอรา 2 ชนด คอ เชอรา Colletotrichum gloeosporioides และเชอรา Colletotrichum capsici เชอราทงสองชนดน สามารถเขาท าลายพรกได ทกสวนของล าตนเหนอดน และมความสามารถในเขาท าลายพชแบบแฝง (latent infection) กลาวคอเชอราสาเหตโรคสามารถ เขาท าลายพชตงแตระยะทยงออนโดยไมปรากฏอาการใหเหนจนกระทงพชเขาสระยะสกแกจงพบการระบาดของโรค มผลทาให ไมสามารถปองกนก าจดไดทนทวงท อกทงโรคแอนแทรกโนสสามารถถายทอดผานทางเมลดพนธท าใหเกดการระบาดของเชอราสาเหตโรคตางสายพนธกระจายเขาไปในพนทปลกอนๆ ส าหรบแนวทางการควบคมโรคเกษตรกรสวนใหญใชสารเคมก าจด เชอราประเภทดดซม (systemic fungicide) เชน mancozeb captan benomyl propineb chlorothalonil prochloraz และ copper oxychloride (ธนวฒน, 2549; กรมวชาการเกษตร, 2552) ซงการใชสารเคมปรมาณมากและตดตอกนเปนเวลานาน สงผลใหเชอราเกดการกลายพนธมความตานทานตอสารเคมจากปญหาดงกลาวสงผลใหเกษตรกรมตนทนคาใชจายในการซอ สารเคมเพอก าจดเชอราสาเหตโรคเพมสงขน รวมทงกอใหเกดการสะสมของสารพษในสภาพแวดลอมมากยงขน ส าหรบแนวทางการแกปญหาของระบบการเกษตรในปจจบนไดมการสนบสนนใหเกษตรกรกลบมาท าการเกษตรแบบพงพา ธรรมชาตหรอเกษตรอนทรย สารสกดจากพชเปนวธการหนงทถกน า มาใชเพอทดแทนสารเคมก าจดโรคพช ซงกลมพชทนยม น ามาใชกน

Page 15: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

มาก คอ พชสมนไพร เนองดวยเหตผลของการมคณสมบตทางยาและการออกฤทธตอเชอจลนทรยสาเหตโรคของ มนษยและสตว จงเปนแนวทางทดในการน ามาปรบใชกบเชอจลนทรยสาเหตโรคพช การทดลองนจงไดท าการศกษา ประสทธภาพของสารสกดหยาบจากมะรมและฟาทะลายโจรตอการยบยงการงอกของสปอรเชอรา C. gloeosporioides และ เชอรา C. capsici สาเหตโรคแอนแทรกโนสพรก เนองจากการระบาดของโรคแอนแทรกโนสปจจยหลกเกดจากการพดพาของ สปอรเชอราไปตกบนสวนตางๆ ของตนพรกในแปลงปลก การปองกนโรคแอนแทรกโนสใหมประสทธภาพจงตองท าการลด แหลงสะสมและการกระจายตวของสปอรเชอราในสภาพแปลง ผลจากการศกษานจะสามารถชวยพฒนาแนวทางการควบคม โรคแอนแทรกโนสไดอยางมประสทธภาพอกทางหนง

โรคแอนแรกโนสของพรก หรอ กงแหงของพรกมเชอสาเหตเกดจากเชอรา Colletotrichum ซงมหลายสปซสทสามารถเขาท าลายพรกได แตละชนด ในแตละวยของพรกและสวนตางๆของล าตนไดตางกน Kim et al.(2004) ไดรายงานวา C. acutatum และ C. gloeosporioides เขาท าลายทผลพรกไดทกวย แตไมท าลายทใบและล าตน แตเชอ C. coccodes และ C. dematium กลบเขาท าลายทงสองสวนนได สวนผลพรก ดวยวยทแตกตางกน ยงมผลตอสปซสทจะเขาท าลายไดเชนกน คอ C. capsici มกเขาท าลายในพรกทสกแดงแลว แต C. acutatum และ C. gloeosporioides มกเขาท าลายในผลออน และผลทแกจดแตยงคงเปนสเขยว (Hong and Hwang, 1998) ลกษณะอาการของโรคขนกบชนด ของพรก ในพรกใหญ เกดจดฉ าน า ขยายเปนวง หรอร เชอจะสรางสปอรในตมเลกๆสครม หรอสน าตาล แลวเปลยนเปนสด าเรยงเปนวงซอนกน ถาอากาศเยน ชน จะเหนสปอรเปนเมอกเยมสครม หรอสสมออนอยบรเวณแผล สวนพรกเลก แผลจะเนาในลกษณะฉ าน า แผลสน าตาล สภาพแวดลอมทเหมาะสมในการเกดโรค คอฝนตกพร า มหมอก หรอน าคางจด อณหภมเฉลย 27 องศาเซลเซยส ความชนสมพทธ 95 เปอรเซนต เชอแพรกระจายไปไดกบ ลม ฝน น า หรออปกรณการเกษตร (กรรณการและสร, 2553) โรคนสรางความเสยหายใหแกพรกไดทงกอนและหลง การเกบเกยว การปองกนก าจด โดยวธผสมผสาน คอ ใชเมลดพนธปลอดโรค หมนตรวจแปลง พบผลเปนโรคเกบรวบรวมน าไปท าลายนอกแปลง งดการใหน าแบบพนฝอย ใชจลนทรยชวภาพ เชน Trichoderma spp., Bacillus subtilis, หลงการเกบเกยวพรกควรเกบผลพรกไวในทอณหภม เยนอยางสม าเสมอ ถามการระบาดของโรคควรใช โปรคลอราช ไทแรม ซเนบมาเนบ แมนโคเซบ เบโนมล คอปเปอรออกซคลอไรด หรอคาเบนดา ซมและใหเลอกใชสลบกนสองชนด (กรรณการและสร, 2553)

Page 16: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

2.2 งานวจยทเกยวของ พชราภรณ และคณะ (2558) ทดสอบฤทธฆาแมลงของสารสกดปโตรเลยมอเทอร สารสกดเอทล

อะซเตท สารสกดอะซโตน และสารสกด เอทานอลจากเมลดและใบทเรยนเทศตอหนอนใยผกวย 2 ในสภาพหองปฏบตการดวยวธจมใบ พบวาสารสกดเอทานอล จากใบทเรยนเทศมฤทธฆาแมลงสงสดท าใหแมลงตาย 100% ทเวลา 72 ชวโมงหลงการทดสอบ เมอน าสารสกดเอทานอล จากใบทเรยนเทศความเขมขน 1, 3 และ 5% (w/v) มาทดสอบประสทธภาพการควบคมหนอนใยผกในแปลงคะนา ทงในฤดแลงและฤดฝน เปรยบเทยบกบสารฆาแมลงสปนโนแซดและชดควบคม ผลการทดสอบในฤดแลงพบวาสารฆา แมลงสปนโนแซดและสารสกดเอทานอลจากสวนใบ มฤทธควบคมหนอนใยผกสงกวาชดควบคมอยางมนยส าคญยงทาง สถต นอกจากนสารสกดเอทานอลทกความเขมขนมฤทธควบคมหนอนใยผก ในระดบนาพอใจใกลเคยงกบสารฆาแมลง สปนโนแซดซงเปนสารทมประสทธภาพดทสด อยางไรกตามไมพบความแตกตางทางสถตของการควบคมหนอนใยผก ระหวางสงทดลองในชวงฤดฝน จงอาจสรปไดวาสารสกดเอทานอลจากใบทเรยนเทศมศกยภาพสงในการน ามาใชควบคม หนอนใยผก

พชราภรณ และคณะ (2558) ทดสอบฤทธชวภาพฤทธฆาแมลง ฤทธยบยงการฟกเปนตวเตมวยของลกรนใหม และฤทธไลแมลงของผง ใบนอยหนา ใบนอยโหนง และใบทเรยนเทศ ตอการควบคมตวของผงใบนอยหนา ใบนอยโหนง และใบทเรยนเทศ ทเตม วยของดวงงวงขาว ทความเขมขน 0.5, 1, 2, 3, 4 และ 5% ตอการฆา การยบยงการฟกเปนตวเตมวยของลกรนใหม (F1) และการไลตวเตมวยของดวงงวงขาว โดยการทดสอบฤทธฆาแมลง และฤทธยบยงการฟกเปนตวเตมวยของลกรนใหม ใชวธ grain treatment test สวนฤทธไลแมลงใชวธ cup bioassay ผลการทดสอบพบวา ผงใบพชทงสามชนดมความเปน พษตอแมลงสงมาก ซงผงใบนอยหนามฤทธฆาแมลงสงสด โดยความเขมขน 4 และ 5 % ท าใหแมลงตาย 100% ภายใน ระยะเวลาเพยง 3 วน รองลงมาไดแก ผงใบทเรยนเทศและผงใบนอยโหนงตามล าดบ นอกจากนผงใบนอยหนาทความ เขมขนตงแต 2% ขนไป ยงมฤทธยบยงการฟกเปนตวเตมวยของลกรนใหม 100% อยางไรกตาม ผงใบนอยหนามฤทธไล ดวงงวงขาวในระดบปานกลาง (class II – class IV) ในขณะทผงใบนอยโหนง (class II – class III) และผงใบทเรยนเทศ (class I – class IV) มฤทธไลแมลงคอนขางต า ดงนนนอยหนา นอยโหนงและทเรยนเทศ จงเปนพชทมศกยภาพสงใน การน ามาใชฆา ยบยงการฟกเปนตวเตมวยของลกรนใหม และไลดวงงวงขาวควบคมดวงงวงขาว

Page 17: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

บทท 3 วธการด าเนนงานการวจย

3.1 การเตรยมสารสกดจากใบทเรยนเทศ

เกบตวอยางใบทเรยนเทศทเจรญเตบโตเตมท จากนน น าใบทเรยนเทศสดมา ลางท าความสะอาด และผงใหแหงในทรม แลวน าชงน าหนกสด จงน าไปอบทอณหภม 50 องศาเซลเซยส ระยะเวลา 36-48 ชวโมง หรอจนกวาตวอยางจะแหงสนท บดใหละเอยดดวยเครองปน ชงตวอยางประมาณ 500 กรม แชตวอยางในตวท าละลายทแตกตางกน ไดแก เฮกเซน (Hexane) เอทลอะซเตด (Ethyl acetate) และเมทานอล (Methanol) ในปรมาณพอทวม เกบไวในอณหภมหอง 3 วน จากนนน ามากรองตะกอนออกดวยกระดาษกรองเบอร 1 แลวน าสวนของเหลวไประเหยตวท าละลายออกดวยเครอง Rotary vacuum evaporator ท าใหแหง และเกบไวเพอทดสอบตอไป สวนน า (Water) น าไปตมทอณหภม 150-200 องศา ตมจนเดอด น ามากรองตะกอนออกดวยกระดาษกรองเบอร 1 จากนนน าไปแชใหแขงในตแช แลวน าไประเหยตวท าละลายออกดวยเครองระเหยสญญากาศแบบเยอกแขง (Freeze Dry) ท าใหแหง และเกบไวเพอทดสอบตอไป (ภาพท 1)

3.2 การทดสอบเชอสาเหตโรค

ด าเนนการวจยโดยใชแผนการทดลองแบบ 4×4 Factorial in CRD ประกอบดวยสงทดลองทม 2 ปจจย ไดแก ตวท าละลายทแตกตางกน ประกอบดวย เมทานอล เอทลอะซเตท เฮกเซน และน า ความเขมขนของสารละลายทตางกน ประกอบดวย 0 5,000 10,000 และ 15,000 ppm ทดสอบโดยเตรยมอาหาร PDA ปรมาตร 120 มลลลตร เตมสารสกดหยาบจากใบพลทความเขมขนดงกลาว ลงในขวดรปชมพ นงฆาเชอทอณหภม 121 องศาเซลเซยส ความดน 15 ปอนด/ตารางนว จากนนเทอาหารทผสมสารสกดลงในจานเลยงเชอ จานละ 24 มลลลตร ในสวนของชดควบคมจะไมผสมสารสกด หลงจากผวหนาของอาหารทผสมสารสกดและชดควบคมแหงสนทน าเชอรา Colletotrichum sp.ไดรบความอนเคราะหจากหองปฏบตการอารกขาพช คณะเกษตรศาสตร มหาวทยาลยนราธวาสราชนครนทร แลวน าไปเลยงบนอาหาร PDA อาย 7 วน มาตดบรเวณขอบของโคโลนดวย Cork borer ขนาดเสนผาศนยกลาง 0.5 เซนตเมตร วางลงบนผวหนาอาหารทผสมสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศ จากนนน าเชอไปบมทอณหภมหอง ทงหมด 5 ซ า จนกระทงสงเกตเสนใยในชดควบคมเจรญเตมจานเลยงเชอบนทกขอมลน ามาค านวณหาเปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโต

3.3 การเกบขอมลและวเคราะหผล

บนทกผลโดยการวดขนาดเสนผาศนยกลางโคโลนของเชอหลงจากเลยงในอาหารทกวนจนกระทงเชอในจานควบคมเจรญเตมจานเลยงเชอ แลวน ามาค านวณหาเปอรเซนตการยบยงการเจรญเตบโตการเจรญของเชอ จากนนน าขอมลมาวเคราะหความแปรปรวน (ANOVA) และเปรยบเทยบความแตกตางของคาเฉลยดวยวธ DMRT (Duncan Multiple Rang Test) โดยใชโปรแกรม R

Page 18: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

วธการค านวณหาเปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอรา (Percent Growth inhibition = PGI) จากสตร

PGI = [(A-B)/A] × 100 โดย A = เสนผาศนยกลางโคโลนของเชอโรคในชดควบคม B = เสนผาศนยกลางโคโลนของเชอโรคในจานทดสอบ 3.4 ระยะเวลาและสถานทในการด าเนนการวจย

เรมตงแตเดอน ธนวาคม พ.ศ. 2560 ถงเดอน กรกฎาคม พ.ศ. 2561 สถานทท าการวจย - หองปฏบตการโรคพช คณะเกษตรศาสตร มหาวทยาลยนราธวาสราชนครนทร ต าบลโคกเคยน

อ าเภอเมอง จงหวดนราธวาส - หองปฏบตการเคม คณะวทยาศาสตร มหาวทยาลยนราธวาสราชนครนทร ต าบลโคกเคยน

อ าเภอเมอง จงหวดนราธวาส

Page 19: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

แบงใบ 500 กรม ออกเปน 2 สวน

สวนท 1 ส าหรบการสกดดวยตวท าละลายตางๆ

N

สวนท 2 ส าหรบการสกดดวยน า

อบแหง

อบแหง

บด

บด

สกดดวย Hexane 3-5 วน 2 รอบ

ตมดวยน ากลน 1-2 ชวโมง ทอณหภม 200-230 องศาเซลเซยส

กรอง

สารสกดจากน า

สารสกดจากน า

กาก

ระเหยน าออก

สารสกดหยาบ น า

สารสกดจากน า

สารสกดจากจาก Hexane

สารสกดจากน า

กาก

ระเหยตวท าละลายออก

สารสกดหยาบ Hexane

สารสกดจากน า

สกดดวย Ethyl acetate 3-5 วน 2 รอบ

กรอง

สกดดวย Ethyl acetate

กาก

ระเหยตวท าละลายออก

สารสกดหยาบ Ethyl acetace

สกดดวย Methanol 3-5 วน 2 รอบ

กรอง

สารสกดดวยจาก Methanol

ระเหยตวท าละลายออก

กาก

สารสกดหยาบ Methanol

ภาพท 3.1 ขนตอนการสกดสารสกดจากใบทเรยนเทศ

Page 20: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

บทท 4 ผลและวจารณผล

4.1 ลกษณะสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศ

ผลของการสกดสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศในตวท าละลายทแตกตางกน พบวา สารสกดหยาบในตวท าละลายน า มน าหนกสารมากทสด เทากบ 38.78 กรม รองลงมาคอ เอทลอะซเตท เทากบ 19.61 กรม ถดมา คอ เมทานอล เทากบ 15.13 กรม และเฮกเซน มคานอยทสด เทากบ 12.28 กรม (ตารางท 4.1) โดยลกษณะของสารสกดหยาบจะมสเขยวด า และหนด ยกเวนสารสกดจากน าทมลกษณะเปนผงสน าตาลเขม (ภาพท 4.1)

ตารางท 4.1 ปรมาณสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศทไดในตวท าละลายตางกน

ตวท าละลาย น าหนกใบแหง (g) น าหนกสารสกดหยาบ (g) Hexane 500 12.28 Ethyl acetate 500 19.61 Methanol 500 15.13 น า 500 38.78

ก ข

ค ง ภาพท 4.1 สารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศในตวท าละลายแตกตางกน

ก. Hexane ข. Ethyl acetate ค. Methanol ง. น า

Page 21: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

4.2 ชนดตวท าละลายตอการยบยงการเจรญของเสนใยเชอรา ผลการศกษาชนดตวท าละลายตอการยบยงการเจรญของเสนใยเชอรา พบวา สารสกดหยาบในตวท าละลายเอทลอะซเตท มการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยสงทสด เทากบ 30.19 เปอรเซนต รองลงมาคอ สารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศทสกดดวยเมทานอล เฮกเซน และน า มเปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลย เทากบ 20.21 20.00 และ 7.09 เปอรเซนต ตามล าดบ โดยตวท าละลายทใชสกดสารทงหมดมความแตกตางกนอยางมนยส าคญทางสถตทระดบความเชอมน 99 เปอรเซนต (ตารางท 4.2) ตารางท 4.2 เปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศทสกดดวยตวท าละลายตางชนดกน

ชนดตวท าละลาย การยบยงการเจรญของเสนใยเฉลย (%) เมทานอล 20.21 b เอทลอะซเตท 30.19 a เฮกเซน 20.00 b น า 7.09 c

F-test ** CV% 13.13

หมายเหต ** มความแตกตางกนทางสถตอยางมนยส าคญยง ทระดบความเชอมน 99 % ตวอกษรก ากบในแนวตงแสดงการเปรยบเทยบความแตกตางของคาเฉลยสงทดลองดวยวธ DMRT

4.3 ระดบความเขมขนตอการยบยงการเจรญของเสนใยเชอรา ผลการศกษาระดบความเขมขนตอการยบยงการเจรญของเสนใยเชอรา พบวา ทความเขมขน 15,000 ppm มเปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยสงสด เทากบ 29.58 เปอรเซนต รองลงมาทความเขมขน 10,000 5,000 และ 0 ppm มเปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยเทากบ 27.16 20.76 และ 0 เปอรเซนต ตามล าดบ โดยความเขมขนของสารสกดทงหมดมความแตกตางกนอยางมนยส าคญทางสถตทระดบความเชอมน 99 เปอรเซนต (ตารางท 4.3) ตารางท 4.3 เปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศทความเขมขนของสารสกดตางกน

ความเขมขนของสารสกด (ppm) การยบยงการเจรญของเสนใยเฉลย (%) 0 00.00 c 5,000 20.76 b 10,000 27.16 a 15,000 29.58 a

F-test ** CV% 13.13

หมายเหต ** มความแตกตางกนทางสถตอยางมนยส าคญยง ทระดบความเชอมน 99 % ตวอกษรก ากบในแนวตงแสดงการเปรยบเทยบความแตกตางของคาเฉลยสงทดลองดวยวธ DMRT

Page 22: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

4.4 ชนดตวท าละลายและความเขมขนตอการยบยงการเจรญของเสนใยเชอรา ผลการศกษาชนดตวท าละลายและความเขมขนตอการยบยงการเจรญของเสนใยเชอรา พบวา ตวท าละลายเอทลอะซเตท ทความเขมขน 15,000 และ 10,000 ppm สามารถยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยไดสงถง 43.57 และ 42.20 เปอรเซนต ตามล าดบ โดยแตกตางกนอยางมนยส าคญยงทางสถตทระดบความเชอมน 99 เปอรเซนต (ตารางท 4.4 และภาพท 4.2) ตารางท 4.4 เปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราระหวางชนดของตวท าละลายทใชสกดสารและความเขมขนของสารสกด

ตวท าละลายทใชสกดสาร ความเขมขนของสารสกด (ppm)

การยบยงการเจรญของเสนใยเฉลย(%)

เมทานอล

0 0.00g 5,000 21.10d 10,000 29.17c 15,000 30.55bc

เอทลอะซเตท

0 0.00g 5,000 35.00b 10,000 42.20a 15,000 43.57a

เฮกเซน

0 0.00g 5,000 21.92d 10,000 27.80c 15,000 30.28bc

น า

0 0.00g 5,000 5.00f 10,000 9.45ef 15,000 13.90e

F-test ** CV% 13.13

หมายเหต ** มความแตกตางกนทางสถตอยางมนยส าคญยง ทระดบความเชอมน 99 % ตวอกษรก ากบในแนวตงแสดงการเปรยบเทยบความแตกตางของคาเฉลยสงทดลองดวยวธ DMRT

Page 23: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

15,000 ppm

10,000 ppm

5,000 ppm

ควบคม เมทานอล เอทลอะซเตท เฮกเซน น า

ภาพท 4.2 ผลของสารสกดหยาบในตวท าละลายแตกตางกนตอการยบยงการเจรญของเชอรา Colletotrichum sp.

4.4 วจารณผล จากการศกษาผลของสารสกดหยาบจากใบทเรยนเทศตอการยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา Colletotrichum sp. ทเปนสาเหตของโรคแอนแทรกโนส โดยตวท าละลายทใชสกดสารม 4 ชนด คอ เมทานอล เอทลอะซเตท เฮกเซน และน า โดยความเขมขนของสารสกดทใช คอ 0 5,000 10,000 และ15,000 พบวา สารสกดหยาบในตวท าละลายเอทลอะซเตท มการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยสงทสด เทากบ 43.57 เปอรเซนต สวนเปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราของความเขมขนสงทสด คอ 15,000 และ 10,000 ppm เทากบ 27.16 และ 29.58 เปอรเซนต และผลการวเคราะหเปอรเซนตการยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยระหวางชนดของตวท าละลายทใชสกดสาร และความเขมขนของสารสกด พบวา ตวท าละลายเอทลอะซเตททความเขมขน 15,000 ppm สามารถยบยงการเจรญของเสนใยเชอราเฉลยไดสงถง 30.19 เปอรเซนต ซงสอดคลองกบ ปทมพร (2549) ซงน าสารสกดหยาบของรากกลวยเตาพชในตระกล Annonaceae ในชนคลอโรฟอรมและเอทลอะซเตท ไปแยกดวยวธโครมาโตกราฟ พบสารประกอบพวก acetogenin และอาทตย (2553) ซงพบวาสารสกดหยาบของกลวยเตา สามารถยบยงการเจรญเตบโตของเชอรา C. albicans และ C. neoformans ได นอกจากนสารสกดทไดจากพชตระกล Annonaceae ชนดอนๆ เชน ใบขาวหลามดง ยงสามารถยบยงการเกดเชอไขมาเลเรย และเชอเซลลมะเรงได (เยาวรนทรม, มปป.) อกดวย

Page 24: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

บทท 5 สรปและเสนอแนะ

5.1 สรป

จากการศกษาผลของสารสกด หยาบจากใบทเรยนเทศตอการควบคมเชอรา Colletotrichum sp. ดวยตวท าละลายทง 4 ชนด คอ เมทานอล เอทลอะซเตท เฮกเซน และน าทความเขมขน 0 5,000 10,000 และ15,000 ppm สามารถสรปไดดงน

1. เมอใชน าเปนตวท าละลาย ท าใหไดปรมาณสารสกดหยาบมากทสด 2. สารสกดหยาบในตวท าละลายเอทลอะซ เตท สามารถยบย งการเจรญของเชอรา

Colletotrichum sp. ไดดทสด โดยทระดบความเขมขนของสารสกด 10,000 และ 15,000 ppm มคาการยบยงการเจรญของเสนใยเชอรา Colletotrichum sp. สงทสด เทากบ 42.20 และ 43.57 เปอรเซนต ตามล าดบ

5.2 ขอเสนอแนะ 5.2.1 ควรมชดควบคมทใชสารเคมในการยบยงการเจรญของเชอราเปนชดเปรยบเทยบดวย 5.2.2 มการทดสอบซ าเพอยนยนผลทได

Page 25: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

เอกสารอางอง

กนกอร ระยานล. 2555. สารทออกฤทธทางชวภาพจากพชในวงศกระดงงา. ว. มหาวทยาลยศรนครนทรวโรฒ สาขาวทยาศาสตรและเทคโนโลย 4 : 96-110.

กรกนก ปานอ าพน. 2551. การศกษาลกษณะทางสณฐานวทยาและทางชวโมเลกลของพนธนอยหนา (Annona squamosal L.) ทพบในประเทศไทย. ปรญญาวทยาศาสตรมหาบณฑต (พฤกษเศรษฐกจ) สาขาวชาพฤกษเศรษฐกจ มหาวทยาลยเกษตรศาสตร.

กรมวชาการเกษตร. 2552. พรก [สบคน], http://210.246.186.28/pl_data/CHILLI/1STAT/st01.html [23/01/2010].

กรรณการ ลาชโรจนและสร สวรรณเขตนคม. 2553. การจดการโรค-ศตรพช และอาการผดปกตของพรก. เชยงใหม: บรษท ทรโอแอดเวอรไทซงแอนดมเดย จ ากด.

ณฐธยาน ชสงห ฟาน เบม. 2554. ผลทางชวภาพของสารสกดหยาบทเรยนเทศตอเซลลมะเรงแบคทเรยกอโรคและลกน ายงลาย. สาชาวชาชววทยา คณะวทยาศาสตร มหาวทยาลยทกษณ.

ธนวฒน อมรามร. 2549. พรกผกกนผลรอนแรงแหงป, เคหการเกษตร, 30(4):70-90. ปทมพร มานาม. 2549. การศกษาองคประกอบทางเคมของสารสกดคลอโรฟอรมและเอทลแอซเตตจาก

รากกลวยเตา (Polyalthia debilis (Pierre) FINET & GAGNEP.). ปรญญานพนธ วท.ม. (เคม). กรงเทพฯ : บณฑตวทยาลย มหาวทยาลยศรนครนทรวโรฒ.

เยาวรนทร นครภกด. มปป. การศกษาองคประกอบทางเคมจากสวนสกดหยาบเฮกเซนของใบขาวหลามดง. โรงเรยนแกนนครวทยาลย.

สดสายชล หอมทอง. 2556. ทเรยนเทศผลไมทไมอาจมองขาม. ส านกบรการวชาการ มหาวทยาลยบรพา. เขาถงไดจาก : http:/www.uniserv.buu.ac.th/topic.asp?TOPIC_ID=5602 (เขาถงเมอ 01 กมภาพนธ 2558).

ส านกงานเศรษฐกจการเกษตร. 2552. ปรมาณและมลคาสนคาขาเขาเกษตรกรรม สถตน าเขา-สงออก [สบคน], http://www.oae.go.th/statistic/import/QVImp.xls [23/01/2010].

อาทตร พมม. 2553. การศกษาชววทยาและผลของสารสกดหยาบจากกลวยเตา (Polyalthia debilis Pinet & Gagnep.) และน านอย (Polyalthia suberosa (Roxb.) Thwaites) ตอการเจรญของรา ปรญญาวทยาศาสตรมหาบณฑต สาขาวชาวทยาศาสตรประยกต มหาวทยาลยราชภฏเลย

Alexander D. McE., P. B. Scholefield and A. Frodsham. 1984. Some tree fruits for tropical Ausralia. CSIRO, Australia. 56 p.

Badrie, N. and A. G. Schauss. 2009. Soursop (Annona muricata L.): Composition, nutritional value, medicinal uses, and toxicology. In Bioactive Foods in Promoting Health. (ed. R. R. Watson and V. R. Preedy). pp. 621-643. Oxford : Academic Press.

Bureau of Plant Industry. 2011. Production guide of guayabano. Available from : http:/www.bdi.da.gov.ph /bpioldsite1/guide_guayabano.php (access 07 December 2014).

Page 26: ผลของสารสกัดหยาบจากใบ ...agri.pnu.ac.th/files/25-06-2561.pdf · 2018-06-25 · ผลของสารสกัดหยาบจากใบทุเรียนเทศต่อการควบคุมเชื้อรา

Gajalakshmi, s., s. Vijayalakshmi and V. D. Rajeswari. 2012. Phytochemical and pharmacological properties of Annona muricata: A Review. Internationnal Journal of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences 4 : 5

Gonzlez-Esquinca, A. R., I. De-La-Cruz-Chacon, M. Castro-Moreno, J. A. Orozco-Castillo and C. A. Riley-Saldana. 2014. Alkaloids and acetogenins in Annonaceae development : biological consideretions. Edicao Especial 36 : 001-016.

Hernandez, C. M., C. L. Tinoco-Ojanguren, M. R. Cruz-Ortega and A.R. Goonzalez-Esquinca. 2013. Influence of seasonal variation on the phenology and liriodenine content of Annona lutecens (Annonaceae). J. Plant Res. : 8 pp.4

Hong, J.K. and Hwang, B.K. 1998. Influence of inoculum density, wetness duration, plant age, inoculation method and cultivar resistance on infection of pepper plants by Colletotrichum coccodes. Pant Disease 82(10): 1079-1083.

Kim, K.K., Yoon, J.B., Park, H.G., Park, E.W. and Kim, Y.H. 2004. Structural modifications and programmed cell death of chilli pepper fruits related resistance responses to Colletotrichum gloeosporioides infection. Genetics and Resistance 94: 1295-1304.

Liaw, C. C., T. Y. Wu, F. R. Chang and Y. C. Wu. 2010. Historic perspectives on Annonaceous acetogenins from the chemical bench to preclinical trials. Planta med. 76 : 1390-1404.

Love, K. and R. E. Paull. 2011. Soursop. University of Hawaii at Manoa, College of Tropical Agriculture and Human Resources. Fruit and Nuts Publication F_N-22. Available From : http:/www.ctahr..hawaii.edu/oc/freepubs/pdf/F_N-22.pdf (access 07 December 2014).

Morton, J. 1987. Fruits of warm climates. Miami, FL. : 75–80. Ojeda, M., B. Schaffer, and F. S. Davies. 2004. Soli temperature physiology and growth of

containerized Annona species. Scientia Horticulturae 102 : 243-255. Padmini, S. M. P. C. K. N. G. Pushpakumara and R. Samarasekera. 2013. Morphological

characterization of soursop (Annona muricata L.) germplasm in Sri Lanka. Tropical Agricultural Research 24 : 362-374.

Pinto, A. C. de Q. 2007. Soursop (Annona muricata L.). Fertilizing for high yield and quality tropical of Brazil. IPI Bulletin 18 : 202-217.

Pinto, A. C. de Q., M. C. R. Cordeiro, S. R. M. de Andrade, F. R. Ferreira, H. A. de C. Filgueiras, R. E. Alves and D. I. Kinpara. 2005. Annona species, International Centre for Underutilized Crops. University of Southampton, Southampton, UK.

Subhadrabandhu, S. 2001. Under-utilized tropical fruits of Thailand. Food and Agriculture Organization of the United Nations, Regional Office For Asia and the pacific, maliwan Mansion.