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Universidade de Lisboa

Faculdade de Medicina Dentária

Aplicações clínicas da fibrina rica em plaquetas

em Medicina Dentária. Revisão Literatura

Rita Gaspar

Mestrado Integrado em Medicina Dentária

2018

2

Universidade de Lisboa

Faculdade de Medicina Dentária

Aplicações clínicas da fibrina rica em plaquetas

em Medicina Dentária. Revisão Literatura

Rita Gaspar

Dissertação orientada por

Prof. Doutor João Caramês

Prof. Doutora Helena Francisco

Mestrado Integrado em Medicina Dentária

2018

I

“Mesmo as noites totalmente sem estrelas

podem anunciar a aurora de uma grande

realização” Martin Luther king

II

Agradecimentos

Desde pequena que me recordo de sonhar com este dia. O tempo foi passando e

houve um dia que decidi começar a “ andar “. Muitas adversidades aconteceram, muitas

lágrimas caíram pelo meu rosto, mas a minha força interior e a presença da minha filha

Maria, superaram tudo.

Agradeço a todos os que me ajudaram na concretização deste sonho.

Ao professor Doutor João Caramês por ter aceite a orientação desta minha

dissertação. Pelo seu valor no mundo da Medicina Dentaria, pelo seu sorriso com que

aborda qualquer um, e a sua vontade em ajudar. O meu muito obrigado.

À professora Helena Francisco, também uma referência no mundo da Medicina

Dentaria, o meu sincero obrigada pelo tempo dispensado na correção desta dissertação.

A todos os professores, tendo especial atenção à Professora Doutora Virgínia

Santos e ao Professor Pedro Cruz, pessoas que acreditaram e me ajudaram a superar

algumas dificuldades durante este percurso

III

À minha filha MARIA, flor do meu dia, a minha alegria. Ter sido mãe, nesta

etapa da minha vida, não foi fácil, mas aprendi o que é o amor incondicional; percebi

que é uma missão com muitos desafios, mas que me fizeram e fazem crescer em todos

os sentidos. A ti minha querida, amor da minha vida, obrigada pelo teu sorriso, pela tua

presença, pelo teu amor. Houve dias em que o cansaço e a desmotivação eram enormes,

mas a tua presença, alterava todos esses sentimentos. Obrigada, meu amor. Amo-te

muito.

À minha família, em especial à minha mãe, a todas as pessoas amigas que estiveram ao

meu lado, nesta etapa da minha vida, Helena e António, Helena e Quim Zé, Queta e

avó Di, Sofia Fernandes, Bia, Teresa, Ana Paula, e Isilda. Ana Paz e João Pedro

Nunes, a minha dupla maravilhosa. A todos vocês o meu sincero obrigada por toda

ajuda e força.

“A persistência é o maior caminho do êxito”

Charles Chaplin

IV

V

Índice

1 Introdução .......................................................................................................... 2

1.1 Fibrina Rica em Plaquetas (PRF): um concentrado plaquetário de segunda

geração. ......................................................................................................................... 2

1.2 Componentes biológicos da Fibrina Rica em Plaquetas. ............................ 3

1.2.1 Componentes celulares do PRF ........................................................... 3

1.2.2 Vantagens de uma rede de fibrina tridimensional ............................... 4

1.2.3 Os fatores de crescimento no sangue ................................................... 4

1.3 Centrifugação a baixa velocidade ............................................................... 5

3 Resultados .......................................................................................................... 7

4 Aplicações clínicas do PRF em medicina dentária ............................................ 8

4.1 Alvéolo pós extracional .............................................................................. 8

4.2 Procedimento de elevação do seio maxilar............................................... 11

4.3 Recobrimento radicular e regeneração periodontal .................................. 14

4.3.1Tratamento das recessões gengivais ................................................... 15

4.4 Regeneração tecidular à volta do implante ............................................... 17

4.4.1Regeneração óssea guiada .................................................................. 20

4.5 Rejuvenescimento e preenchimento estético facial .................................. 23

4.6 Tratamento da osteonecrose mandibular .................................................. 24

5 Aplicações clínicas do PRF em desenvolvimento ........................................... 24

5.1 Terapia da articulação temporomandibular .............................................. 24

5.2 Regeneração pulpar .................................................................................. 25

6 Conclusões ....................................................................................................... 26

7.Referências ...................................................................................................... 28

Lista de abreviaturas

TGF-β1 : Transforming Growth Factor- β 1

PDGF : Platelet- Derived Growth Factor

VEGF : Vascular Endothelial Growth Factor

IGF-1 : Insulin Growth Factor-1

A-PRF: Advanced Platelet Rich Fibrin

(IL)-1β: Interleucina 1 β

IL-6 : Interleucina 6

IL-4: Interleucina 4

TNF-α: Tumor Necrosis Factor α

TGF-β1 : Tumor Growth Factor β1

PDGF : Platelet Derived Growth Factor

VEGF : Vascular Endothelial Growth Factor

EGF : Epithelial Growth Factor

IGF : Insulin Growth Factor

PRGF: Plasma Rich in Growth Factor

2

1 Introdução

1.1 Fibrina Rica em Plaquetas (PRF): um concentrado plaquetário de

segunda geração.

Há cerca de duas décadas que a fibrina, rica em plaquetas (PRF), começou a ser

aplicada. O objetivo inicial foi desenvolver uma terapia onde os concentrados

plaquetários podiam ser introduzidos nas lesões, utilizando a capacidade natural do

nosso organismo de obter o processo de cicatrização de forma eficiente, isto é, obtido

através da colheita de fatores de crescimento derivados do sangue de forma natural. O

plasma, rico em plaquetas (PRP) e os fatores de crescimento, ricos em plaquetas

(PRGF), já eram comercializados, no entanto ambos contêm subprodutos que são

antinaturais e inibidores do processo de cicatrização. Removendo estes anticoagulantes

e modificando os protocolos de centrifugação, o PRF foi introduzido alguns anos depois

com o potencial de produzir grande impacto em diversas áreas da medicina, incluindo

na medicina dentária (Dohan et al.,Part I, 2006; Dohan et al.,Part II, 2006). Vários

aspetos importantes sobre regeneração tecidular têm vindo a ser revelados, incluindo o

papel importante da fibrina, assim como a libertação de fatores de crescimento durante

longos períodos de tempo a partir do PRF. Além disso, introduzindo um novo grupo de

células no concentrado plaquetário, os leucócitos, foi observado um grande impacto na

regeneração tecidular e na cicatrização da ferida (Marx, 2004; Kobayashi et al.,2016).

Nos últimos cinco anos foram feitas modificações em relação à velocidade e

tempo de centrifugação, que tem vindo a melhorar o PRF, novo conceito conhecido com

o nome de “low speed centrifugation concept (LSCC)”.

Tendo o PRF sido descrito como um concentrado plaquetário de segunda

geração, uma das suas grandes vantagens é o facto de se poder produzir sem a

necessidade do uso de anticoagulantes ou outros produtos não derivados do ser humano

que previnem a cascata da coagulação, sendo por essa razão considerado cem por cento

autólogo e natural. Enquanto o PRF contem três aspetos importantes para a cicatrização

tecidular da ferida (incluindo células do hospedeiro, uma matriz de fibrina

tridimensional e uma acumulação de fatores de crescimento), seus efeitos sinérgicos têm

sido frequentemente reconhecidos de uma forma notável na cicatrização dos tecidos

moles (Davis et al., Part I, 2014; Davis et al., Part II, 2014).

Ao longo dos últimos anos, a técnica do PRF tem vindo a ser aperfeiçoada para

melhorar os resultados em termos clínicos, sobretudo nos procedimentos de regeneração

nos quais se utiliza esta tecnologia (Miron et al., 2017).

3

1.2 Componentes biológicos da Fibrina Rica em Plaquetas.

Ao longo do processo de cicatrização o sangue tem um papel importante na

aceleração da regeneração tecidular, proporcionando varias células, fatores de

crescimento, citoquinas e fatores de coagulação. Em comparação com o PRP, o PRF,

considerado um concentrado de segunda geração, foi desenvolvido sendo cem por cento

natural e por proporcionar três elementos chave para regeneração tecidular, tais como

células, fatores de crescimento e membrana suporte. Tal como o PRP, o PRF contém

diversas plaquetas e as modificações no tempo e velocidade de centrifugação tem vindo

a mostrar um aumento do número de macrófagos e leucócitos, que são células

importantes para o processo de defesa e de cicatrização. Além disso, segregam um

elevado número de fatores de crescimento, incluindo TGF-β1, PDGF, VEGF, e IGF-1,

capazes de promover a migração celular, a sua proliferação e diferenciação. Por último,

uma vez que não são utilizados anticoagulantes na preparação do PRF, conseguimos

obter uma membrana tridimensional de fibrina, o que complementa um dos três critérios

principais da engenharia tecidular num processo biológico e natural (Guo and Dipietro,

2010).

Ao longo dos anos têm sido feitas algumas revelações, nomeadamente, o facto

da fibrina atuar fixando vários tipos de células e paralelamente, permitindo que com o

tempo, e de forma gradual, se libertem fatores de crescimento. Esta última característica

tem demonstrado que aumenta a angiogénese, o comportamento celular e a regeneração

tecidular (Laurens et al., 2006; Gurtner et al., 2008).

1.2.1 Componentes celulares do PRF

A terapia do concentrado plaquetário tem vindo a ser desenvolvida para

acelerar de forma natural o potencial regenerador das plaquetas presentes no sangue. O

PRF é formado pela separação do sangue, após a centrifugação, em vários componentes,

incluindo hemácias, plasma, leucócitos e plaquetas. O concentrado final do PRF é um

concentrado de leucócitos, plaquetas e fibrina. O primeiro PRF, conhecido como L-PRF

continha noventa e sete por cento de plaquetas e mais de cinquenta por cento de

leucócitos num concentrado de fibrina comparado com toda a colheita de sangue

(Dohan et al.,2010). As variantes do PRF são na maioria sólidas ou geles densos que

não podem ser injetados, embora recentemente tenha sido desenvolvido um PRF liquido

4

injetável utilizando forças de centrifugação mais baixas. Por outro lado, as forças de

centrifugação mais baixas utilizando o LSCC, têm demonstrado novas preparações de

PRF (agora conhecidas como A-PRF) e podem adicionalmente proporcionar um

aumento de plaquetas e granulócitos neutrofílicos dentro do coágulo de PRF,

prolongando a libertação de certos fatores de crescimento (Ghanaati et al.,2014).

Os leucócitos são outro importante tipo de células encontradas no PRF que

desempenham um papel importante na cicatrização tecidular. Vários estudos revelaram

o potencial e o grande impacto dos leucócitos durante a regeneração tecidular (Kawazoe

and Kim, 2012; Perut et al., 2013, Pirraco et al.,2013). O PRF contém um maior

número de leucócitos quando comparado com o PRP ou PRGF. Os leucócitos

desempenham um papel importante na cicatrização tecidular devido à sua ação anti-

-infecciosa bem como devido à sua ação de regulação imunizadora através da secreção

de citoquinas tais como as interleucinas (IL)-1β, IL-6, IL-4, TNF-α (Tonnesen et al.,

2000; Gosain and DiPietro, 2004; Eming et al., 2007). Os leucócitos também

desempenham um papel importante como reguladores, controlando a capacidade dos

biomateriais se adaptarem ao novo ambiente do hospedeiro.

1.2.2 Vantagens de uma rede de fibrina tridimensional

A fibrina tem um papel determinante na agregação plaquetária durante a

hemóstase. Vários estudos descrevem que a fibrina tem a capacidade de atuar como uma

matriz provisória permitindo a passagem das células e a regeneração tecidular (Chase

and Newby, 2003; Mazzucco et al., 2010; Nguyen et al., 2012). Desta forma o PRF tem

inúmeras vantagens adicionais uma vez que consiste num conjunto de citoquinas e de

glicoproteínas enredadas numa rede de fibrina. Os fatores de crescimento armadilhados

na rede permitem a migração, divisão e alteração do fenótipo das células endoteliais,

que promovem a angiogénese (Kobayashi et al., 2016; Burnouf et al., 2013; Reed,

2004)

1.2.3 Os fatores de crescimento no sangue

Os fatores de crescimento podem estimular ou inibir a migração celular, a

adesão, a proliferação e diferenciação. Embora os fatores de crescimento existam em

todos os tecidos, é importante destacar que o sangue é a principal fonte dos numerosos

fatores de crescimento e citoquinas que promovem a angiogénese e regeneração

5

tecidular para a cicatrização da ferida. Os fatores de crescimento existem normalmente

como percursores inativos ou parcialmente ativos que requerem uma ativação

proteolítica, e que podem necessitar ligar-se a uma matriz molecular para a sua

estabilização ou para iniciar a sua atividade. Os fatores de crescimento têm uma

semivida curta. Um exemplo é o caso do fator PDGF que tem uma semivida de dois

minutos quando injetado por via intravenosa (Clark, 2001).

Os concentrados plaquetários criam uma oportunidade de libertar numerosos

fatores de crescimento simultaneamente. As plaquetas e os macrófagos libertam uma

perfusão de fatores tais como o TGF-β1, PDGF, VEGF, EGF e IGF( Nurden, 2011;

Fujioka-Kobayashi et al., 2017) .

1.3 Centrifugação a baixa velocidade

O conceito centrifugação a baixa velocidade, LSCC indica que, reduzindo a

força de centrifugação, se consegue melhorar as matrizes de PRF com um aumento do

número de células inflamatórias e plaquetas. Este efeito foi demonstrado no A-PRF

(advanced-PRF) e no A-PRF+ (advanced PRF plus).

Segundo o protocolo estabelecido por Choukroun, os tubos de vidro eram

utilizados para a preparação de PRF sólido (Choukroun et al., 2001). A superfície

específica de vidro permite a ativação da cascata de coagulação durante o processo de

centrifugação para formar um coágulo de fibrina. Também é necessária uma alta força

de centrifugação relativa (RCF), que é de 708g. Nesta RCF, a rede de fibrina demonstra

uma estrutura densa com o mínimo espaço interfibroso (Ghanaati et al.,2014). A

membrana de fibrina inclui, para além das células inflamatórias, como os leucócitos e as

suas subfamílias, linfócitos, macrófagos, e células estaminais.

As modificações no protocolo de preparação PRF devido à redução da RCF

aplicada resultaram numa melhoria do protocolo de preparação do PRF sólido (A-PRF)

usando 208g. O coágulo avançado mostrou uma estrutura mais porosa, com um espaço

interfibroso maior, comparado com o do PRF (Ghanaati et al.,2014). Além do mais, as

células, especialmente as plaquetas, foram observadas e distribuídas ao longo de todo o

coágulo. A redução da RCF não só resultou numa maior distribuição celular, mas

também no aumento do número de células inflamatórias e plaquetas. Um estudo

histológico comparativo demonstrou que, devido à sua estrutura porosa, o A-PRF

facilitou significativamente a penetração celular na matriz de fibrina, demonstrando

6

uma melhoria significativa do padrão de vascularização dez dias após a implantação

subcutânea em ratos, comparado com o PRF.

Vários estudos in vitro demonstraram a correlação entre a redução do RCF em

termos do LSCC e o aumento da libertação dos fatores de crescimento (Kobayashi et

al., 2016).

Na literatura existem descritas várias indicações para o uso do PRF sólido em

forma de matriz ou em combinação com biomateriais. No entanto, em termos clínicos,

ainda existe a necessidade de um sistema biológico fluido. Por forma a remover a

necessidade de uso de anticoagulantes e conseguir gerar um sangue fluido e totalmente

autólogo, foram desenhados tubos específicos de plástico para as colheitas.

Contrariamente aos tubos de vidro usados para a formação de matrizes de PRF sólido,

os tubos de plástico não ativam a cascata da coagulação durante a centrifugação. Assim,

de acordo com o LSCC, uma maior redução de RCF para 60g e o uso de tubos de

plástico, permitiu a introdução de uma matriz de PRF injetável (i-PRF) sem o uso de

anticoagulantes. Depois da centrifugação, o sangue é separado numa fase alaranjada,

chamada i-PRF, que será aspirada através de uma seringa e numa fase vermelha (com

glóbulos vermelhos). O i-PRF recolhido mantem-se numa fase fluída de dez a quinze

minutos após a centrifugação (Choukroun and Ghanaati, 2017).

A redução do RCF permite um enriquecimento do i-PRF com plaquetas e

leucócitos. Consequentemente, o teste de citometria de fluxo demonstrou que o i-PRF

incluía o número mais elevado de plaquetas e leucócitos no meio de todas as

membranas de PRF sólidas. Além disso, estudos comprovam que o número total de

células no i-PRF demonstrou um maior concentrado de plaquetas, leucócitos, monócitos

e granulócitos em comparação com o PRP e o PRGF (Choukroun and Ghanaati, 2017).

Em resumo, a fibrina rica em plaquetas é um concentrado sanguíneo autólogo

que não requer nenhum tipo de anticoagulantes. Este sistema é caracterizado por um

simples e apropriado processo de preparação para ser utilizado na prática clínica diária.

O LSCC tem como objetivo modificar o protocolo de preparação do PRF, reduzindo a

força de centrifugação aplicada, tendo como resultado o A-PRF, A-PRF+ e o i-PRF. Em

comparação com o protocolo antigo do PRF, as matrizes são muito mais ricas em

leucócitos e plaquetas, e porosas, o que permite que se tornem num depósito de fatores

de crescimento, facilitando o processo de regeneração.

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2.Objectivos

Esta dissertação tem como principal objetivo fazer uma revisão narrativa da

literatura sobre as diferentes aplicações clínicas do PRF tal como a sua relevância

clínica.

Estratégia de pesquisa:

A pesquisa foi realizada tendo como suporte artigos publicados desde 1 de

Janeiro do ano 2000 até 30 de Janeiro de 2018 nas bases como MEDLINE e Cochrane

Library. Os termos que vão ser citados a continuação, foram utilizados em combinação

com operadores Booleanos para fazer a pesquisa: Platelet Rich Fibrin, Tissue

Regeneration, Soft Tissue Regeneration, Bone augmentation, Sinus lift, Management of

gingival recessions, Intrabony defect regeneration.

Tipos de estudos incluídos

Foram incluídos os seguintes estudos nesta revisão: Meta-análises, revisões

sistemáticas, e estudos clínicos aleatorizados, bem como alguns casos clínicos como

estudos in vitro devido à sua relevância científica e ajuda na compreensão de alguns

temas tratados nesta revisão.

Critérios de inclusão

Os artigos incluídos nesta pesquisa vão desde 1 de Janeiro do ano 2000 até 30 de

Janeiro de 2018, e escritos exclusivamente em inglês. Numa primeira fase, cada artigo

foi selecionado por um só autor através do título e do abstract. Após esta primeira fase,

os artigos selecionados foram lidos na íntegra para avaliar a existência de informação

relevante. As referências bibliográficas destes mesmos artigos selecionados também

foram analisadas, tendo sido incluídos mais artigos de acordo com os critérios de

inclusão. Posteriormente a esta seleção inicial e classificação dos artigos, os mesmos

foram analisados pelo autor de modo a obter a informação relevante e necessária para

elaborar esta revisão.

3 Resultados

De acordo com os critérios mencionados, foram encontrados na pesquisa um

total de quinhentos e noventa e seis artigos (Platelet Rich Fibrin AND Tissue

8

Regeneration : 335; Platelet Rich Fibrin AND Soft Tissue Regeneration : 76; Platelet

Rich Fibrin AND Bone augmentation: 82; Platelet Rich Fibrin AND sinus floor

augmentation: 30; Platelet Rich Fibrin AND extraction socket healing: 29; Platelet Rich

Fibrin AND management of gingival recessions:11; Platelet Rich Fibrin AND intrabony

defect regeneration : 33).

4 Aplicações clínicas do PRF em medicina dentária

O PRF tem vindo a sofrer um crescimento exponencial na última década.

Apesar do primeiro artigo de revisão ter sido publicado em 2001 (Choukroun et. al.,

2001), muitos clínicos, mesmo aqueles que trabalhavam em faculdades, não tinham

descoberto o potencial do PRF até 2012-2014. Foi uma grande inovação para estes

clínicos terem-se deparado com as inúmeras aplicações que este concentrado

plaquetário poderia ter. Atualmente existem mais de quinhentos artigos publicados que

avaliam o uso do PRF in vivo e in vitro, tendo sido clinicamente comprovado o seu

potencial regenerador para a reparação dos tecidos da cavidade oral. Alguns

biomateriais foram substituídos por este concentrado cem por cento natural. Apesar dos

bons resultados observados a nível da regeneração tecidular, o PRF continua a ter

resultados mais promissores a nível do crescimento dos tecidos moles. Novos

protocolos cirúrgicos foram estabelecidos e modificados à medida que vai sendo

estudado o potencial biológico do PRF.

Posteriormente, iremos explicar as diferentes aplicações do PRF em medicina

dentária.

4.1 Alvéolo pós extracional

Após a extração dentária, existem alterações a nível ósseo no alvéolo pós-

extracional (Schropp et al., 2003; Botticelli et al., 2006). Na maxila, a cicatrização

natural após a extração envolve perda óssea e modificações dimensionais subsequentes.

De forma a contornar as mudanças morfológicas do osso que resultam da perda

do dente (Botticelli et al., 2006), diversos tipos de enxertos ósseos, membranas,

esponjas de colagénio, têm sido utilizados.

9

Embora saibamos que a manipulação do alvéolo pode limitar as mudanças

dimensionais, até à data, nenhuma terapia consegue limitar as mudanças completamente

(Morjaria et al., 2014). Além disso, sem suprimento sanguíneo constante, o osso não

pode existir (Mammoto et al., 2009). Embora a colocação de biomateriais para

regeneração óssea são comummente utilizados para limitar as mudanças dimensionais

pós-extracionais, uma perda óssea de 0.5-1mm horizontal e vertical ocorre sobretudo na

zona vestibular. Isto ocorre sobretudo devido à drástica perda de suprimento sanguíneo

que resulta da remoção do ligamento periodontal, o tecido responsável por noventa por

cento da supressão sanguínea do osso alveolar (Mormann and Ciancio, 1997).

Recentemente, o concentrado plaquetário de segunda geração foi investigado

como um potencial biomaterial capaz de minimizar alterações dimensionais (Choukroun

et. al., 2001). O PRF facilita a regeneração tecidular e cicatrização da ferida devido à

sua capacidade de formar um coágulo após a extração (Choukroun et. al., 2001). A

primeira aplicação clínica do PRF foi em alvéolos pós extracionais.

A preservação óssea pode ser obtida graças ao uso de PRF, onde previamente se

utilizava outros biomateriais. O lógico é aplicar citoquinas pro-angiogénicas e

inflamatórias, e fatores de crescimento a partir do PRF de forma a estimular o alvéolo

pós-extracional. Várias revisões sistemáticas sobre técnicas de preservação da tábua

óssea reportam que, apesar dos materiais e técnicas convencionais, a preservação da

tábua óssea reduz a perda óssea pós-extracional (De Risi et. al, 2015; Iocca et al., 2016).

A questão que se coloca é quando o PRF consegue atingir resultados similares à

preservação da tábua óssea.

Araújo et al. 2005, avaliaram as alterações dimensionais pós-extracionais com o

PRF e o material controlo ou com o enxerto ósseo (Araújo et al. 2005). Apesar da

panóplia de casos e experiências clínicas vindas de clínicos que utilizam PRF para

alvéolos pós-extracionais, pouco estudos avaliaram a sua eficácia em humanos. Hauser

e os seus colaboradores foram os primeiros a demonstrar que o PRF era capaz de

induzir nova formação de osso em alvéolos pós-extracionais comparado com os

controlos. Também foi observado que cirurgias mais invasivas com retalho acabavam

por neutralizar as vantagens do uso de PRF, e por esse motivo que não é recomendado a

abertura de retalhos durante uma extração dentária, quando não é expressamente

necessário (Hauser et al., 2013). Girish Rao et al. realizaram um estudo em pacientes

que necessitavam de extrações dos terceiros molares bilaterais, onde aplicaram num

local PRF após a extração e a outra localização serviu de controlo. Seis meses mais

tarde foi observado radiograficamente uma maior densidade óssea na localização do

10

PRF (Girish Rao et al., 2013). Hoaglin e Lines estudaram o risco de alveolite seca com

a utilização de PRF após a extração de terceiros molares. Este estudo demonstrou a

diminuição drástica do risco de causar infeção (Hoaglin and Lines, 2013). Suttapresyari

e Leepong demonstraram que no grupo de PRF houve cicatrização primária do tecido

gengival na zona do alvéolo pós-extracional nas primeiras quatro semanas

(Suttapresyari e Leepong, 2016).

Das e os seus colaboradores obtiveram resultados semelhantes na preservação

da tábua óssea comparando o PRF com a utilização de colagénio rico em beta-tricalcio

fosfato (β-TCP-Cl) (Das et al., 2016).

Temmerman et al. investigaram a influência do PRF como um material de

preenchimento do alvéolo na preservação da tabua óssea. Foram observadas diferenças

significativas na preservação e aumento do preenchimento do alvéolo com o uso do

PRF, em comparação com o controlo (Temmerman et al., 2016).

O PRF tem também vindo a demonstrar que é capaz de reduzir a dor pos-

-operatória quando colocado num alvéolo pós-extracional dos terceiros molares

(Bilginaylar and Uyanik, 2016).

A dor pós-operatória advém sobretudo da incisão no tecido gengival, do trauma

no processo da extração e no ato de esticar o tecido gengival para encerrar a ferida por

primeira intenção. No estudo de Bilginaylar e Uyanik, uma serie se variáveis foram

analisadas pré-operatoriamente, incluindo a dor, o número de analgésicos tomados, o

trismus e o inchaço. Estes foram avaliados ao longo de um período de sete dias. Os

autores reportaram uma redução do nível de dor no dia um, dois e três e no número de

analgésicos tomados no segundo e terceiro dias nos grupos onde foi utilizado PRF. A

razão pela qual o PRF reduz a dor pós-operatória deve-se ao facto do mesmo melhorar o

processo de inflamação reduzindo o processo infecioso, uma vez que liberta células

mediadoras da inflamação (Bilginaylar and Uyanik, 2016).

Um estudo retrospetivo comparou duzentas localizações de terceiros molares

mandibulares, tratadas com e sem PRF. Os resultados demostraram apenas dois casos de

osteíte nos tratamentos com PRF, em comparação aos dezanove casos registados no

grupo de controlo. Apesar das etiologias da osteíte serem múltiplas e não estarem bem

definidas, os autores referiram que o grupo controlo onde não foi aplicado PRF requereu

seis horas e meia clínicas adicionais de forma a gerir a infeção, mais custos adicionais.

Os autores referiram que o tratamento preventivo da osteíte localizada pode ser

conseguido graças ao PRF, reduzindo custos e tempo da reação inflamatória (Hoaglin

and Lines, 2013).

11

Num estudo split-mouth aleatorizado, setenta e oito alvéolos de terceiros

molares mandibulares foram tratados com PRF e comparados com o mesmo número de

localizações controlo. A osteíte ocorreu em ambos os casos, no entanto, só ocorreu

osteíte em metade dos casos onde foi aplicado PRF nos alvéolos (Eshghpour et al.

2014).

Num estudo histológico feito em doze beagles em 2014, foi observado nas

quatro primeiras semanas uma variação de formação de novo osso no grupo onde foi

aplicado o PRF em comparação com o controlo. Num período de oito semanas foi

observado maior tecido mineralizado no grupo onde foi aplicado PRF em comparação

com o controlo. Tendo em conta estes resultados, concluímos que seja necessário

esperar um período de oito semanas para obtermos uma melhor formação de tecido

mineralizado em comparação com o controlo (Hatakeyama et al., 2014).

Os estudos histológicos em humanos sobre a aplicação de PRF em alvéolos pós-

-extracionais são ainda escassos. Em 2013, Hauser et al. concluíram através do seu

estudo histológico que no grupo com PRF houve melhor cicatrização óssea, melhorias

na microarquitectura e qualidade óssea, bem como preservação da largura alveolar no

grupo tratado com PRF. Em 2016 foram avaliadas oito biópsias ósseas de quatro

pacientes onde foi utilizado PRF no alvéolo pós-extracional. Os resultados foram os

seguintes: 9,9% ± 5,9% houve formação de tecido osteoide na localização onde foi

aplicado PRF, em comparação 4% ± 2,2% na amostra da localização controlo. No

entanto, devido ao tamanho da amostra ser limitado, não houve diferenças significativas

(P =0,89) (Du Toit et al. 2016).

Em resumo, apesar dos benefícios da utilização do PRF na preservação da tábua

óssea e na redução do período de inflamação da dor pós-operatória, são necessários

mais estudos para comprovar o seu benefício clinicamente.

4.2 Procedimento de elevação do seio maxilar

A reabilitação na zona posterior do maxilar superior representa um desafio

devido à reabsorção centrípeta após a extração dentária como consequência de trauma

ou da doença periodontal (Pietrokovski and Massler, 1967). Achados recentes

mostraram que na maxila, o processo alveolar reabsorve de fora para dentro devido à

direção e inclinação das raízes, e existe uma reabsorção para fora na mandibular onde a

crista se torna mais larga e plana (Swenson and Hudson, 1967). Além disso, ainda foi

demonstrado que a crista edêntula muda em direção ao palato, tendo um grande impacto

12

na zona molar e pré-molar, onde é observada uma reabsorção mais rápida e superior na

maxila quando comparada com mandibular (Pietrokovski and Massler, 1967). Após a

extração dentária, cinquenta por cento da dimensão pode ser perdida como

consequência do processo de remodelação (Schropp et al., 2003). Além disso, a

pneumatização do seio maxilar é inevitável devido ao envelhecimento e a perda dentária

(van der Bergh et al., 2000). Por essa razão, a elevação do seio maxilar tem vindo a ser

um procedimento frequente na reabilitação das zonas edêntulas do maxilar superior.

Uma variedade de materiais de enxerto ósseo tem vindo a ser utilizados até à

data para evitar o aumento da perda ou ausência de osso como resultado da

pneumatização do seio (Nkenke and Stelze, 2009; Wallace, 2003). Uma das questões

dos investigadores sobre a utilização do PRF era se este poderia ser utilizado como

material de enxerto único durante o processo de elevação do seio maxilar. Para que esta

intervenção seja um sucesso é necessário que os implantes sejam colocados em

simultâneo. Isto deve-se a que o uso de um implante por ele mesmo irá atuar como um

criador de espaço para disponibilizar espaço para o crescimento ósseo. Até agora,

estudos têm verificado que os implantes podem ser colocados sozinhos sem a

necessidade do uso de biomateriais. Sempre e quando se forme um coágulo à volta do

implante, novo osso será formado (Chen et al., 2003; Lambert et al., 2011; Thor et

al.,2007).

Embora a adição de PRF ao enxerto ósseo é o procedimento mais comum e

geralmente melhor aceite para regenerar o osso em falta e com maiores taxas de

sucesso, os autores demonstraram que o seu uso poderia ser utilizado para promover a

cicatrização óssea com aumento vertical de até 7,52 mm (Tajima et al., 2013), 10,1mm

(Mazor et al., 2009), 10,4mm (Simonpieri et al.2011) entre o seio maxilar e o topo da

crista alveolar utilizando só PRF para o aumento. Embora não houvesse grupos controlo

nestes estudos, os resultados demonstraram que o PRF sozinho pode ser utilizado como

uma modalidade de tratamento não tendo sido perdido nenhum implante num período

de seis meses (Tajima et al., 2013), um ano (Mazor et al., 2009) e seis anos (Simonpieri

et al.2011). No total, oito estudos seguiram uma intervenção semelhante utilizando o

PRF como único material de enxerto. Enquanto os autores sugeriram que o uso de PRF

sozinho é uma opção de tratamento válida para a maioria dos procedimentos com

elevação do seio maxilar, os estudos que existem não são suficientes. É importante

referir que os resultados dos tratamentos nestes estudos foram um aumento de osso

comprovado radiograficamente, e que teria sido mais acertado ter feito uma análise

histológica. Devido às propriedades osteocondutoras do material substituto ósseo, é

13

aconselhável recomendar a combinação de PRF com materiais de enxerto ósseo para a

elevação do seio maxilar (Inchingolo et al., 2010; Tartullo et al., 2012; Zhang et al.,

2012; Choukroun et al., 2006). Enquanto alguns estudos compararam o PRF em

combinação com o enxerto ósseo e sem PRF, todos reportaram que houve melhorias na

formação de novo osso com o uso de PRF, e a maioria destes estudos descreveu que

possibilita a diminuição do período de cicatrização quando o PRF é utilizado

(Inchingolo et al., 2010; Tartullo et al., 2012; Zhang et al., 2012; Choukroun et al.,

2006).

Em 2015 foi publicada uma revisão sistemática onde investigaram o uso de PRF

nos procedimentos de elevação do seio maxilar: os resultados revelaram que de

duzentos e noventa publicações clínicas encontradas sobre PRF, só oito seguiam os

critérios de inclusão e metade destes estudos não utilizavam um grupo controlo para

comparar os resultados (Ali et al.,2015). Além disso, outras limitações foram

observadas nos estudos como a falta de heterogeneidade tendo em conta a técnica

utilizada (osteotomia vs janela lateral), tempo de colocação do implante (imediato ou

tardio), medição dos resultados, análise das biópsias e período de follow-

-up (Ali et al.,2015). Embora sejam necessários mais estudos, os resultados da aplicação

de PRF apresentaram melhorias na regeneração óssea quando utilizado sozinho.

Em 2010 Avila et al. publicaram um estudo sobre a influência da distância

vestíbulo palatina no aumento do seio maxilar. Neste estudo foi comprovado que a

largura vestíbulo palatina tem maior impacto na formação de novo osso nos

procedimentos de aumento lateral do seio realizados com aloenxerto. Seios estreitos

regeneram com uma maior percentagem de novo osso quando comparado com seios

mais largos. Por estas razões, foi recomendado por vários clínicos que seios mais largos

(> 15mm) não devem ser regenerados somente com PRF (devido à sua limitada

capacidade de induzir a formação de osso) e desse modo deve ser combinado com um

material de enxerto ósseo quando a regeneração do seio é mais extensa (Avila et al.,

2010). Para seios mais estreitos ( < 10mm) o PRF poderá ser utilizado sozinho.

Outra das utilizações do PRF é na reparação da membrana de Schneider. Em

vinte por cento dos procedimentos a elevação do seio maxilar (mais frequentemente

naqueles procedimentos com abertura da janela lateral) reportam ter havido perfuração

da membrana de Schneider (Hernandez-Alfaro et al., 2008; Schwartz-Arad et al., 2004).

Normalmente, as perfurações são cobertas com uma membrana de colagénio absorvível

com colocação de implantes em simultâneo ou com colocação de implantes quatro a

seis meses após o período de cicatrização (Hernandez-Alfaro et al., 2008; Schwartz-

14

Arad et al., 2004; Becker et al., 2008). O PRF tem mostrado resultados promissores

quando aplicado sobre a membrana de Schneider perfurada (Choukroun et al., 2006;

Toffler et al., 2010; Bosshardt et al.,2014). O PRF tem também vindo a ser utilizado no

encerramento da janela de acesso maxilar lateral. Ambos estudos não verificaram

diferenças significativas entre a utilização de membranas de PRF ou membranas de

colagénio (Bosshardt et al.,2014; Gassling et al., 2013).

4.3 Recobrimento radicular e regeneração periodontal

O periodonto é uma unidade funcional complexa que deriva de diversos tecidos,

responsáveis pela ligação do dente com o osso circundante. Isto é conseguido pelas

fibras de colagénio de Sharpey que vão desde o cemento da raiz até ao ligamento

periodontal e ligam-se ao osso (Bosshardt and Sculean, 2009; Bosshardt et al.,2015). O

periodonto oferece uma defesa ao nosso sistema com varias células hospedeiro

responsáveis pela manutenção e integridade estrutural do dente. O fracasso da

prevenção da infeção pode levar à gengivite, inclusive até à periodontite e

eventualmente perda da estrutura óssea. A doença periodontal é uma das doenças mais

prevalentes do ser humano. A regeneração periodontal engloba não só a regeneração do

ligamento periodontal, bem como o osso alveolar, o cemento e os tecidos moles

circundantes (Eke et al., 2009; Grzesuk et al., 2002; Wang et al., 2005). Hoje em dia

existem estudos clínicos randomizados que defendem o uso de PRF na reparação/

regeneração de defeitos infra ósseos e defeitos na zona da furca.

Tendo em conta os resultados positivos obtidos em regeneração com PRP,

vários autores ponderaram a utilização de PRF, uma vez que é um concentrado que não

necessita do uso de anticoagulantes e é fácil de preparar, pois só necessita de um tempo

de centrifugação (Chouckroun et al., 2001). Existem três vantagens adicionais que

suportam este facto. A primeira, é que o PRF contém uma rede de fibrina que facilita a

formação do coágulo e a reparação tecidular (Toffler et al., 2009). A segunda é que a

cinética de libertação dos fatores de crescimento é mais lenta em comparação com o

PRP, e dessa forma a regeneração ocorre num período mais extenso de tempo

(Kobayashi et al.,2016). Para além do mais o PRF contém leucócitos e macrófagos,

conhecidas como células do sistema imunitário (Clark, 2001; Choukroun et al., 2006).

Como os defeitos periodontais são o resultado da invasão patogénica, a inclusão de

15

glóbulos brancos presentes no PRF atuam como uma matriz bacteriana resistente capaz

de lutar contra as baterias patogénicas.

Os defeitos infra ósseos podem ser regenerados com PRF. Dezassete estudos

clínicos randomizados (RCTs) investigaram o uso do PRF na reparação/regeneração do

periodonto em defeitos infra ósseos (Agarwal et al.,2016; Ajwani et al.,2015; Elgendy

and Abo, 2015; Joseph et al.,2014; Panda et al.,2016; Pradeep et al.,2015; Pradeep et

al.,2012; Shah et al.,2015; Thorat et al., 2011; Pradeep et al.,2012; Sharma and

Pradeep, 2011; Aydemir et al.,2016; Chadwick et al.,2016; Chandradas et al.,2016;

Chatterjee et al.,2016; Martande et al.,2016; Pradeep et al.,2016). Em resumo, os RCTs

mostraram que o uso do PRF tem como resultado um ganho do nível de inserção clínico

e uma redução da profundidade de sondagem estatisticamente superior quando

comparado com o uso da abertura de retalho para desbridamento sozinho, e que deve ser

combinado com o uso de enxerto ósseo o com uma membrana de colagénio para obter

melhores resultados.

Embora tenham sido feitos dezassete RCTs, até à data não foi realizado

nenhum estudo histológico para verificar que os resultados obtidos são verdadeiramente

periodontalmente regenerativos ou reparadores.

Paralelamente, também tem vindo a ser utilizado o PRF para furcas grau II. Nos

quatro estudos presentes na literatura foi comprovado um melhor resultado com o PRF

em comparação com o grupo controlo (abertura de retalho para desbridamento sozinho)

e melhores resultados no ganho do nível de inserção clínico (Sharma et al., 2011; Bajaj

et al., 2013; Pradeep et al., 2016, Kanoriya et al., 2016). No entanto são necessários

mais estudos e do tipo histológico que confirmem o grau de regeneração periodontal.

4.3.1Tratamento das recessões gengivais

Os resultados de vários estudos clínicos comprovam a capacidade que o PRF

tem em promover a cicatrização dos tecidos gengivais, uma vez que é capaz de facilitar

o encerramento da ferida e acelerar a regeneração das recessões muco-gengivais. No

entanto ainda são poucos os artigos publicados sobre a aplicação de PRF no tratamento

de recessões gengivais. Num primeiro estudo, Aroca et al., compararam vinte pacientes

tratados com um retalho coronal, com e sem membranas de PRF. Foi observado que

após seis meses, o grupo onde foi aplicado PRF beneficiou-se de um aumento de tecido

queratinizado mas uma percentagem menor de recobrimento completo da raíz (Aroca et

al., 2009).

16

Aleksic et al. e Jankovic et al. compararam o uso de enxerto de tecido

conjuntivo comparado com o PRF como um único material de enxerto para o tratamento

de recessões gengivais de classe Miller tipo I e tipo II em dezanove pacientes. Após seis

meses de cicatrização, não foram observadas diferenças estatisticamente significativas

entre os grupos quando foi comparado a quantidade de raiz coberta e a zona de tecido

queratinizado. Desse modo o uso de PRF é considerado uma boa alternativa nestes

procedimentos quando comparado com o enxerto gold standard de tecido conjuntivo.

Uma vantagem adicional do PRF obtida nestes estudos foi que os pacientes reportaram

um menor desconforto e dor pós-operatória uma vez que não foi utilizado nenhum tipo

de local doador intraoperatório (Aleksic et al., 2009; Jankovic et al., 2012).

Tunali et al., compararam o uso do PRF com o enxerto de tecido conjuntivo em

vinte pacientes ao longo de doze meses de follow-up. Ambas modalidades de tratamento

reduziram significativamente a quantidade de recessão gengival (76% a 77%

respetivamente), e aumentaram o nível de inserção clínico (2,9 mm e 3,04 mm

respetivamente) para níveis praticamente idênticos (Tunali et al., 2015). No total, treze

estudos avaliaram o uso do PRF comparado com outras modalidades regenerativas. No

geral, o uso do PRF foi demonstrado ter sido eficaz na regeneração de recessões

gengivais classes I e classe II de Miller (Agarwal et al., 2016; Aleksic et al.,2010;

Aroca et al., 2009; Dogan et al., 2015; Eren and Atilla, 2014; Gupta et al., 2015;

Jankovic et al., 2010; Keceli et al., 2015; Padma et al., 2013; Rajaram et al.,2015;

Thamaraiselvan et al., 2015; Tunaliota et al., 2015).

Um aspeto que requer maior investigação é determinar quando os benefícios da

cicatrização da ferida, associados ao PRF, são otimizados na cirurgia plástica estética

periodontal, especificamente relacionados com procedimentos de recobrimento da raiz.

Após uma revisão sobre as técnicas cirúrgicas e aplicações clínicas do PRF, os

autores atribuíram resultados não conclusivos a múltiplos pontos-chave, que requerem

modificações adicionais para otimizar os resultados clínicos.

Um dos maiores enganos encontrados quando analisamos a literatura presente,

são os estudos comparativos que comparam o uso do PRF com o enxerto de tecido

conjuntivo. Embora tenham varias características físicas comuns por serem ambos

autólogos, a operação cirúrgica e o produto final são diferentes.

Naturalmente, o enxerto de tecido conjuntivo retirado do palato irá transferir a

expressão genética de queratinização do local dador ao local onde será enxertado.

Karring et al. descreveram este conceito num modelo animal convincentemente

(Karring et al., 1975). O local de receção do enxerto tem pouca implicação na qualidade

17

e quantidade do tecido final obtido. Este mecanismo de ação é descrito como

Fibrogénese.

Curiosamente, anos de experimentação com o PRF revelaram que funciona

como uma via de aumento da fibrina associada à angiogénese. Naturalmente a fibrina é

considerada uma matriz biológica com uma fonte aumentada de VEGF e fatores de

crescimento. O PRF irá desta maneira promover e induzir a formação da

neovascularização e dos novos tecidos no local recetor. Isto torna aparente que a

qualidade do local recetor do tecido mole é crucial para que o procedimento seja bem-

sucedido.

É evidente que se existir uma banda de tecido queratinizado disponível, irá

promover ainda mais a fabricação de um tecido mais queratinizado. Pelo contrário, se só

estiver presente um tecido mucoso não aderido, será esperado uma formação de pouca

qualidade de tecido conjuntivo. Chamamos a isto um mecanismo de fibro-promoção.

Para ocorrer a fibro-promoção, duas condições são necessárias: biointensegrity,

descrita por Ingber ( Ingber, 2008) e “volume” (Ghanaati, 2014). Após uma extensa

experiencia clínica com o PRF, foi observado que estas condições são necessárias para

procedimentos de aumento que envolvam qualquer uso de biomodificadores. A falha

destes dois parâmetros irá traduzir-se no fracasso do enxerto, minimizando o potencial

regenerador do PRF, e consequentemente os resultados clínicos.

A técnica FASTP (Fibrin assisted soft tissue promotion), é uma técnica para

recobrimento da raiz que utiliza o PRF e cujo protocolo cirúrgico tem como intuito

favorecer o aumento e regeneração de tecido mole e defeitos muco-gengivais. Embora

esta técnica cirúrgica inovadora esteja nos seus inícios, tem um grande potencial em

futuros estudos clínicos e histológicos, para validar a sua aplicação a longo prazo

(Stimmelmayr et al., 2013).

4.4 Regeneração tecidular à volta do implante

A aplicação de PRF pode contribuir para o sucesso da colocação de implantes. O

PRF pode ser aplicado durante a colocação de implantes, e incluir o tratamento de

defeitos peri-implantares, contribuir para a osteointegração e cicatrização dos tecidos

moles na zona implantar.

Os dois tipos de defeitos peri-implantares que têm maior importância são a perda

óssea coronal que se vê na peri-implantite e a falha na zona vestibular, imediatamente

após a colocação do implante. Está descrito na literatura que os implantes devem ser

18

colocados mais para palatino ou para lingual e em maior profundidade para alcançar

uma estabilidade primária. Este defeito vestibular é observado quando o implante é

colocado longe da parede vestibular (Levine et al., 2014). Aparentemente o PRF tem a

capacidade contribuir através dos seus leucócitos e fatores de crescimento no processo

de cicatrização do defeito ósseo. Lee e os seus colaboradores criaram um defeito ósseo

durante a colocação de implantes num modelo animal (Lee et al., 2012). Foram

observados resultados positivos no aumento do volume ósseo na área onde se

encontrava o defeito e nos espaços entre as espiras quando utilizado PRF.

Adicionalmente os estudos mostraram que o PRF quando aplicado sozinho ou com

partículas de biomaterial ósseo num defeito não infetado peri-implantar mostrou um

elevado contacto osso implante de sessenta e um por cento e setenta e três por cento,

respetivamente (Hao et al., 2014; Simsek et al., 2016). A literatura parece apoiar o uso

de PRF como um benefício para o preenchimento do defeito ósseo durante a colocação

imediata ou em combinação com um biomaterial ósseo.

Contrariamente à correção do defeito ósseo vestibular, tratar os defeitos

causados pela peri-implantite é bem mais complexa (Esposito et al., 2012). Este tema

continua a ser algo bastante discutido na literatura (Tomas et al., 2016). Vários estudos

investigaram o uso de PRF em humanos (Guler et al., 2016). Neste estudo, foram

abertos retalhos para a colocação de implantes, e estes foram descontaminados. No

grupo experimental foi colocado adicionalmente PRF antes do retalho ser fechado.

Quando a cicatrização ocorreu com PRF, verificou-se uma redução na profundidade de

sondagem (Guler et al., 2016). Além disso, os níveis de inserção clínica melhoraram e

foi registado um aumento de mucosa queratinizada. Estes resultados sugeriram que o

PRF pode ser benéfico na cura dos defeitos da peri-implantite, no entanto são

necessários mais estudos para validar estes resultados.

A mucosa espessa favorece a estabilidade coronal peri-implantar (Levine et al.,

2014; Puisys and Linkevicius, 2015; Linkevicius et al., 2015). A relação entre osso e

tecido mole é necessária para manter a estabilidade e integridade do implante. O osso e

o seu aumento, através de inúmeras técnicas, têm sido tema de grande interesse em

implantologia (Esposito et al., 2009). A falta de desenvolvimento de tecido mole e duro

adequados pode ser uma das razões pelas quais existem altos níveis de peri-implantite

na presente literatura (Monje et al., 2016). Desta forma podemo-nos perguntar se o PRF

contribui na cicatrização do tecido mole e no seu aumento quando é feito um retalho

durante a colocação de implantes? O conceito é certamente biologicamente plausível,

uma vez que colocamos um material autógeno rico em fatores de crescimento que

19

estimula a neoangiogénese e a formação de colagénio. Além do mais, o PRF quando

utilizado em formato do tipo membrana, aumenta a proteção do local quando utilizado

em conjunto com outras membranas do tipo barreira, e contribuem para a cicatrização

do retalho (Panda et al., 2016; Miron et al., 2016).

Até à data, das cento e sessenta e quatro publicações existentes sobre o PRF e o

seu efeito na regeneração do tecido mole e cicatrização, apenas uma fala sobre a

aplicação de PRF e a cicatrização de tecido mole na colocação de implantes (Miron et

al., 2016). Hen e os seus colaboradores experimentaram colocar PRF juntamente com o

retalho de espessura parcial na colocação de implantes, e reportaram que reduzia a

espessura do tecido mole (Hehn et al., 2016). Estas descobertas sugerem que dividindo

o retalho, pode desnecessariamente provocar tensão no tecido mole durante a

cicatrização e adicionalmente à abertura de um retalho mucoperiósteo para a inserção do

implante. O procedimento ideal seria colocar o PRF debaixo do retalho sem dividir o

tecido.

A alta previsibilidade da osteointegração tem incentivado os clínicos e

investigadores para ir mais além e acelerar o processo de cicatrização e eliminar

qualquer risco após o tratamento. A evolução da superfície dos implantes com espiras

mais agressivas facilitou o sucesso da osteointegração bem como aumentou o ISQ

(implant stability quotient) (Smeets et al., 2016). Desta forma mais rapidamente o

implante é reabilitado. No entanto, os implantes com espiras mais agressivas são mais

suscetíveis a uma colonização bacteriana e peri-implantite (Esposito et al.,2015).

Inúmeros estudos, ao longo dos anos, investigaram que as superfícies implantares

aumentavam com os fatores de crescimento, apresentando diversos resultados (Scheller

et al., 2011). Alguns estudos que utilizaram proteínas ósseas morfogénicas (BMPs), que

aumentam a diferenciação osteoblástica e a integração funcional, têm demostrado

melhorias nos valores do contacto osso implante (BIC) (Liu et al.,2007). O PRF liberta

plaquetas e leucócitos no local da ferida, e liberta fatores de crescimento localmente

(PDGF, IGF e VEGF) que aceleram o processo de cicatrização, atraindo células

endoteliais não diferenciadas e células da mesênquima no local da lesão (Therheyden et

al., 2012; Therheyden et al., 2014; Miron et al., 2016). Teoricamente pode melhorar o

processo de cicatrização à volta do implante. Um estudo recente reportou um aumento

dos valores de ISQ durante o período inicial de cicatrização quando o PRF foi aplicado

no local onde foi realizada a osteotomia durante a inserção e o implante foi mergulhado

em plasma extraído do PRF (Oncu et al., 2016). Embora estes estudos tenham

demostrado uma melhoria estatisticamente significativa no osso tipo dois, a informação

20

existente para os outros tipos ósseos é limitada, e é sobretudo no osso tipo três e quatro,

que tem menor densidade, que apresentam um maior desafio.

4.4.1Regeneração óssea guiada

Até à data, existem dois métodos que combinam PRF com regeneração óssea

guiada (GBR). Uma das primeiras utilizações é a aplicação do PRF que pode ser

colocado contra membranas autólogas com um tempo de reabsorção entre dez e catorze

dias e serve para proporcionar propriedades de cicatrização adicional nos tecidos

circundantes.

A segunda utilização é juntar às partículas ósseas do xenoenxerto PRF, cortando

as membranas em pequenos fragmentos e misturando-os com os fragmentos ósseos que

serão enxertados. Estas aplicações do PRF têm mostrado melhorar as propriedades dos

enxertos ósseos tornando-os mais viscosos e adicionalmente proporciona as proteínas e

fatores de crescimento responsáveis para aumentar a angiogénese.

O objetivo principal da GBR é proteger o crescimento lento do osso do

crescimento rápido do tecido mole. De forma a alcançar este objetivo, tem aparecido no

mercado uma variedade de membranas barreira nos últimos anos. Enquanto o PRF tem

sido utilizado inicialmente numa variedade de processos biológicos em medicina

dentária, ficou claro que o PRF, uma vez que atua sobretudo nos tecidos moles, pode

servir como uma membrana barreira nos procedimentos GBR. O PRF tem a capacidade

de conseguir a regeneração do tecido mole e proteger o osso de potenciais agentes

patogénicos e facilitar a angiogénese do tecido ósseo. Uma das questões que se põe

sobre a utilização de PRF é se deve ser utilizado sozinho ou em combinação com uma

membrana de colagénio, e se combinado, se o PRF deve ser usado em cima ou em baixo

da membrana de colagénio. Após vários anos de investigação, chegou-se à conclusão

que as membranas de PRF devem ser utilizadas sozinhas em procedimentos de GBR

quando a reentrada não é esperada. As vantagens são que o periósteo, que

adicionalmente contem um número de células progenitoras, está em contacto com

células da matriz to PRF ao contrario de estarem inteiramente bloqueadas por uma

membrana de colagénio. No entanto, se a reentrada for esperada, e devido à ligação

esperada que ocorre entre o PRF e o periósteo, ao levantar um retalho seguido do uso de

PRF, é aconselhável o uso de PRF em combinação com uma membrana de colagénio.

No entanto, se uma segunda intervenção cirúrgica for esperada, o PRF deve ser

utilizado em combinação com uma membrana barreira de colagénio, e a membrana deve

21

ser colocada diretamente contra o material de enxerto ósseo para facilitar a reentrada e a

membrana de PRF deve ser colocada por cima e em contacto com o tecido mole onde

tem um efeito mais pronunciado. Desta forma, as membranas de colagénio estão

protegidas da exposição da membrana devido ao potencial risco de infeção (Miron et

al., 2016).

Uma outra questão que tem vindo a ser reportada na literatura: se a combinação

de PRF com o enxerto ósseo tem o potencial de atuar como um agente indutor ósseo.

Como o PRF sozinho não é considerado um elemento osteoindutor, a sua combinação

com células progenitoras melhora o potencial osteoindutor das células estaminais

(Wang et al.,2015). Desta forma é dado o melhor meio para ocorrer a regeneração

óssea, e a sua combinação poderá melhorar a regeneração óssea.

O PRF tem sido realizado em vários estudos para investigar mudanças

dimensionais após a extração (Hoaglin et al.,2013; Giris et al.,2013; Suttapreyasri and

Leepong, 2013; Hauser et al.,2013; Anwandter et al.,2016; Temmerman et al.,2016),

contudo foram realizados menos estudos sobre a influência do PRF na regeneração

óssea guiada.

Todos os estudos que investigaram histologicamente e radiograficamente o

efeito do PRF na GBR foram feitos em animais e houve um estudo clínico que

investigou a estabilidade do implante após a regeneração com PRF.

No primeiro estudo feito por Liao et al. (Liao et al. 2011), o PRF foi testado em

combinação com MSCs e uma membrana de regeneração óssea guiada para verificar o

potencial osteogénico dos substitutos ósseos. Foi verificado que os PRF em combinação

com as MSCs tinham um bom potencial de regeneração óssea, embora nenhum dos

controlos apoiou o uso do PRF. Em 2013, Ozdemir et al. investigaram vinte e quatro

crânios de coelhos machos adultos, e foi verificado que houve maior formação óssea na

área onde foi aplicado PRF em comparação com a área controlo. No entanto, não houve

diferenças significativas entre as áreas onde foi aplicado PRF, fosfato de cálcio bifásico

ou no grupo onde foi aplicado osso bovino após um mês. O PRF e o osso bovino

tiveram uma formação óssea superior em comparação com o grupo controlo e com o

grupo onde foi aplicado fosfato de cálcio bifásico após três meses (Ozdemir et al.,

2013). Yoon et al. em 2014 investigaram a influência do PRF na angiogénese e

osteogénese, nos procedimentos de regeneração óssea guiada, usando xenoenxerto

ósseo no crânio de coelhos num período de um, dois e quatro meses. Cada um dos locais

investigados receberam enxerto ósseo bovino com PRF, e o grupo controlo só recebeu

enxerto ósseo bovino. Desta forma foi feita uma comparação direta. Durante os períodos

22

de investigação a intensidade da imunocoloração das VEGF foi constantemente superior

aquando da utilização do PRF em comparação com o grupo controlo. No entanto a

diferença entre ambos os grupos não foi estatisticamente significativa, nos exames

histomorfométricos e imunohistoquímicos na formação do novo osso (Yoon et

al.,2014). Assim sendo o PRF não melhorou a formação do osso adicional neste estudo.

Angelo et al. em 2014 investigaram a estabilidade bioquímica de locais onde foi

realizado um aumento ósseo no maxilar superior com uso de enxerto combinado ou não

com PRF. Foram avaliados oitenta e dois pacientes com atrofia horizontal na zona

anterior do maxilar superior. Estas zonas foram tratadas com enxerto ósseo bifásico e

monofásico com e sem PRF. Foram colocados um total de cento e nove implantes nos

locais onde foi feito o enxerto ósseo. Foi feito um follow-up e o valor do torque de

inserção foi medido com uma indicação clínica da estabilidade biomecânica do osso

aumentado. Os resultados deste estudo concluíram que o uso de PRF não influencia a

estabilidade tardia dos implantes em locais onde foi realizado um aumento com enxerto

ósseo combinado ou não com PRF (Angelo et al.,2014).

Knapen et al. em 2015 investigaram o efeito do PRF num total de setenta e dois

hemi-esferas criadas a partir do crânio de dezoito coelhos e foram preenchidas com

diferentes preenchimentos ósseos: PRF, hidroxiapatite bovina (BHA), e PRF+BHA. As

hemi-esferas vazias foram usadas como controlo. Seis coelhos foram sacrificados em

tempos diferentes: uma semana, cinco semanas e doze semanas. Foi então feito um

estudo histológico e histomorfométrico. Foi descoberto que embora na fase inicial de

regeneração (uma semana), uma alta proporção de tecido conjuntivo colonizou a zona

de regeneração nos dois grupos que continham partículas de BHA, não foram

encontradas diferenças significativas nos quatro grupos em termos de quantidade e

qualidade no mesmo período de tempo. De acordo com o presente estudo, o PRF não

parece ter proporcionado nenhum efeito adicional na cinética ou quantidade de osso no

presente modelo de regeneração óssea guiada.

Ezirganli et al. em 2015 avaliaram os efeitos do PRF, e dos enxertos ósseos

BioOss e BCP no nível de reabsorção total do volume seguindo o aumento ósseo em

nove coelhos da Nova Zelandia. Foi realizado uma tomografia compoturizada aos

noventa, cento e vinte, cento e cinquenta e cento e oitenta dias. Não foram encontradas

diferenças estatisticamente significativas. Embora neste estudo não tenha sido

investigado se a regeneração óssea poderia melhorar quando combinada com o PRF,

este demonstrou que só a GBR com PRF não é suficiente (Ezirganli et al., 2015).

Também em 2015, Kawase et al., observaram que as propriedades de reabsorção

23

das membranas de PRF poderiam ser alteradas com o calor, embora esta técnica não

tenha sido aplicada na prática clínica (Kawase et al., 2015).

Como conclusão, o PRF não pode ser usado sozinho para aumentar osso

horizontalmente e verticalmente, e deve ser combinado com materiais de enxerto ósseo.

O PRF tem um leve potencial para aumentar a formação de novo osso em

procedimentos de regeneração óssea guiada e para aumentar a vascularização dos

tecidos ósseos, importante na formação de novo osso em casos complexos de

regeneração. Tendo em conta a literatura presente, são necessários mais estudos em

humanos para avaliar o uso do PRF em GBR.

4.5 Rejuvenescimento e preenchimento estético facial

A estética facial é uma área que se encontra em constante evolução. A aplicação

de PRP tem mostrado resultados promissores na literatura (Redaelli, 2010). Com a

utilização de concentrados plaquetários sem o uso de anticoagulantes, como é o caso do

PRF, permite-nos aumentar o processo de regeneração tecidular, acelerar a cicatrização

e aumentar a síntese de colagénio. Para além disso, permite também aumentar o

processo de angiogénese, aumentando assim a irrigação dos nossos tecidos (Kim et al.,

2011). O PRF pode ser utilizado com diferentes técnicas de aplicação, como a

mesoterapia com canetas microagulhas ou injetável, bem como em combinação com

outras técnicas (Sclafani, 2010).

O desenvolvimento do LCSC para o PRF permitiu-nos o uso de PRF em formato

líquido, substituindo assim as terapias convencionais com PRP, e que tem a vantagem

de não conter qualquer tipo de anticoagulante, os quais são conhecidos por serem os

responsáveis pela inibição da regeneração tecidular (Na et al., 2011, Sclafani, 2010).

O uso do PRF em estética facial ainda se encontra em evolução, pelo que ainda

são necessários mais estudos para comprovar a sua eficácia.

24

4.6 Tratamento da osteonecrose mandibular

A osteonecrose mandibular é dos maiores desafios clínicos. Os tecidos ósseos

com vascularização limitada resultam em exposição óssea, mais frequentemente

associada a radioterapia ou uso de bifosfonatos.

O uso de PRF tem mostrado o aumento de formação de novos vasos e a

angiogénese em tecidos com defeitos.

Recentemente, alguns casos ou series de casos tem investigado o uso de PRF

para evitar a osteonecrose mandibular (Gonen et al., 2016; Kim et al., 2014; Asaka et

al., 2016; Dinca et al., 2014; Kim et al., 2016; Maluf et al., 2016; Northolt and Hartlev

et al., 2016; Soydan and Uckan, 2014; Tsai et al., 2016). Devido à diminuição da

vascularização nos tecidos com defeitos causados pela osteonecrose, o PRF tem vindo a

ser investigado como uma potencial modalidade de intervenção. Enquanto o objetivo

destes estudos é investigar se efetivamente o PRF pode ser utilizado como tratamento da

osteonecrose relacionada com bifosfonatos ou radiação, a sua eficácia não pode ser

comprovada devido ao desenho dos estudos. São necessários mais estudos clínicos para

determinar o potencial benefício do PRF.

5 Aplicações clínicas do PRF em desenvolvimento

5.1 Terapia da articulação temporomandibular

Os concentrados plaquetários incluindo o plasma rico em plaquetas (PRP) tem

sido previamente investigado como uma modalidade para o tratamento das desordens

temporomandibulares (Hegab et al., 2015; Comert and Gungormus, 2016; Comert et al.,

2015; Hanci et al., 2015; Kim, 2016; Kutuk et al., 2014; Marty et al., 2016; Mehrotra et

al., 2012; Pihut et al., 2014).

Em estudos comparativos com outras opções de tratamento standar disponíveis

como o ácido hialurónico, o PRP mostrou melhores resultados do que o ácido

hialurónico no tratamento da osteoartrite temporomandibular (Hegab et al., 2015).

Durante um follow-up a longo termo, foram notadas melhorias na redução da dor e

aumento do espaço interincisal.

Tendo em conta estes resultados poderemos considerar que o PRF de forma

injetável pode ser usado no tratamento da osteoartrite temporomandibular.

25

As vantagens desta técnica são que o i-PRF não contem anticoagulantes

adicionais, como ocorrem no caso do PRP, e desse modo (pelo menos teoricamente) a

cicatrização destes tecidos deverá ser superior.

Para além disso, uma vez que o i-PRF forma um coágulo de fibrina

imediatamente após a injeção, este fornecerá um potencial beneficio ao formar um

bloco de fibrina dentro do espaço da cartilagem interdiscal, onde a osteoartrite e o

contato ósseo possam ser origem da desordem.

É necessário intensificar a investigação sobre este tema de forma a se tornar uma

prática clínica frequente.

5.2 Regeneração pulpar

Teoricamente, a regeneração pulpar requer um agente capaz de re-vascularizar o

tecido danificado/necrótico, a luta contra a infeção bacteriana e a secreção de um grande

espectro de fatores de crescimento capazes de induzir a proliferação celular e

diferenciação. Neste contexto, o PRF tem um alto potencial em todas estas categorias.

Um estudo in vitro recente utilizou o PRF como um potencial agente para regeneração

pulpar, e concluiu que o PRF estimula a proliferação e diferenciação celular encontradas

na polpa (Huang et al., 2010).

De facto, aumenta significativamente os níveis de osteoprotegrina e fosfatase

alcalina, essencial para a biomineralização, sugerindo que o PRF pode promover

dentina terciária em polpas afetadas (Huang et al., 2010). Dois estudos clínicos

reportaram que depois da remoção da polpa necrótica em dois incisivos permanentes

traumatizados, o PRF poderia ser adicionado ao nível da junção cemento-esmalte e

restaurado de uma forma convencional (Keswani et al., 2013; Shivashankar et al.,

2013). Em ambos casos, os dentes responderam positivamente ao teste elétrico, ao teste

ao frio e foi observado um completo encerramento apical radiograficamente após quinze

meses (Keswani et al., 2013; Shivashankar et al., 2013). Enquanto estes resultados são

extremamente preliminares, estes estudos demonstraram teoricamente o potencial do

PRF. Ambos estudos são difíceis de serem feitos devido a implicações éticas e requerem

um elevado número de pacientes para determinar a sua eficácia.

Recentemente, uma revisão sistemática de Lolata et al. invstigou os efeitos dos

concentrados plaquetários em regeneração/revitalização da polpa necrótica (Lolata et

al., 2016).

Apenas três estudos randomizados e um estudo split-mouth do tipo série de

26

casos foram incluídos (sessenta e um dentes imaturos necróticos tratados em cinquenta e

seis pacientes com um follow-up entre doze e dezoito meses). Todos os estudos

utilizaram PRP e um PRF. Foi observada uma melhoria na cicatrização e encerramento

apical nos grupos tratados com PRP, embora nenhuma diferença significativa tenha sido

observada (P= 0.08 e 0.06, respetivamente). Os autores concluem que embora o

potencial de eficácia do PRP ou do PRF em promover o desenvolvimento de dentes

imaturos necrosados, ainda é escassa a evidência que existe tendo em conta este tema.

Face ao exposto, são necessários mais estudos sobre esta aplicação.

6 Conclusões

Tendo em conta os artigos encontrados na literatura sobre o PRF em alvéolos

pós-extracionais, são necessários mais estudos histológicos feitos em humanos que

comprovem a sua eficácia tanto em tecidos moles como no tecido duro. Dependendo da

predisposição genética de cada paciente, existem diferenças na reabsorção óssea, do

alvéolo, e o PRF poderá contribuir de maneira diferente na preservação dependendo da

localização e do paciente. Um dos principais benefícios comprovados do PRF é a

melhoria da cicatrização em tecidos moles. Também foi comprovado que a aplicação de

PRF no alvéolo pos-extracional diminui a dor e inflamação pos-operatória, sobretudo na

extração de terceiros molares mandibulares. Outro dos benefícios do PRF é o seu efeito

anti-bacteriano uma vez devido à presença de leucócitos na sua composição, o que ajuda

na redução da infeção e consequente dor pós-operatória. São necessários mais estudos

nos quais utilizem o novo conceito de centrifugação LSCC de forma a avaliar se o

aumento do número de leucócitos e fatores de crescimento por parte do PRF irão

resultar num benefício clínico.

A literatura disponível até à data demonstra que o PRF pode ser utilizado com

segurança durante os procedimentos de elevação do seio maxilar. Tem vindo a ser

discutido em vários estudos sobre a utilização única de PRF ou em combinação com

outro biomaterial tanto na regeneração óssea como na reparação da membrana de

Schneider perfurada. Baseado nos factos apresentados anteriormente, existe a

possibilidade de que o PRF aumente o fluxo sanguíneo no seio devido à sua capacidade

de libertação de fatores de crescimento, no entanto são necessários mais estudos que

comprovem a sua eficácia no processo de regeneração óssea. Em relação à reparação de

perfurações na zona do seio, embora existam poucos estudos, o PRF é um meio cem por

27

cento e de baixo custo comparado com a utilização de membranas de colagénio.

Em relação ao uso do PRF para recobrimento radicular, a literatura demonstra

que o uso do PRF melhora significativamente a profundidade de sondagem, reduzindo-

a, e consegue melhorar o ganho de inserção clínico na maioria dos RCTs. No entanto

são necessários mais estudos histológicos que verifiquem a regeneração periodontal

com o uso do PRF.

O potencial do PRF aplicado no tratamento com implantes é ilimitado. Embora

existam alguns estudos que investigaram a capacidade do PRF em acelerar a

osteointegração e existir alguma evidência sobre o tema, são necessários mais estudos

para validar esta informação. São necessários também mais estudos que avaliem o

potencial do PRF em combinação com material de enxerto ósseo em regeneração óssea

guiada. Paralelamente, é necessária uma maior evidência sobre a capacidade do PRF

aumentar a espessura do tecido mole à volta do implante e contribuir para a estabilidade

óssea coronária.

Embora a popularidade do PRF tenha vindo a aumentar nos últimos anos em

medicina dentária regeneradora, é interessante destacar que são ainda escassos os

estudos (especialmente clínicos) que apoiam o uso do PRF em procedimentos GBR.

Como conclusão, a literatura tende a apontar que em procedimentos regeneradores o

PRF é mais eficaz em tecido mole quando comparado com o tecido duro. No geral, o

PRF demonstrou favorecer uma rápida angiogénese nos tecidos, uma área altamente

relevante na regeneração óssea. Adicionalmente, as propriedades dos enxertos ósseos

são melhoradas quando combinadas com o PRF, particularmente porque favorecem a

estabilidade a estabilidade do enxerto. É necessária mais investigação sobre o uso de

PRF como uma membrana barreira e com um substituto da membrana de colagénio

standard para o futuro uso de PRF durante a GBR.

Outras aplicações do PRF em tratamentos como a osteonecrose mandibular, as

desordens temporomandibulares, na regeneração pulpar e estética facial, têm sido

descritas na literatura. No entanto, embora os resultados sejam animadores, a evidência

ainda é escassa, e são necessários mais estudos para comprovar a sua eficácia.

28

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