Tecnologia do DNA Recombinante

Cindy Vilas Boas - 11015411

Jordana Carnicelli - 11126011

Tópicos

1. Dogma Central da Biologia Molecular

2. Algumas técnicas que compõem a tecnologia do DNA Recombinante

3. Um pouco sobre bactérias

4. A tecnologia do DNA Recombinante

5. Importância, aplicações e implicações éticas

Dogma Central da Biologia Molecular

Importante: há contradições:• O RNA pode sofrer replicação em alguns vírus e plantas;• O RNA viral, através de uma enzima denominada transcriptase

reversa, pode ser transcrito em DNA.

Algumas técnicas que compõem a tecnologia do DNA

Recombinante

• Enzimas de restrição: tesouras biológicas

• Eletroforese em gel: separação de fragmentos de DNA

Bactérias e seus plasmídeos

A Tecnologia do DNA Recombinante

• O que é? Um conjunto de técnicas que visa o estudo de um gene. A técnica central é a clonagem molecular.

• Por que falar do dogma central da biologia molecular? Porque quando se estuda um gene, se estuda a proteína que ele codifica.

A Tecnologia do DNA Recombinante

• Clonagem molecular:• Inserto + vetor ~> DNA recombinante

• Processo da transformação

• Tipos de vetores:• Plasmídeos

• Bacteriófago Lâmbda

• Cosmídeos

• Vírus

A Tecnologia do DNA Recombinante

Sobre os vetores: • Plasmídeos: pequenos fragmentos de DNA.

• Fagos : parasitas obrigatórios da ƛ E. Coli. Fragmentos maiores de DNA.

• Cosmídeos: híbrido dos 2 anteriores. Possui vantagens de ambos.

• Vírus: variam muito do tipo usado.

A Tecnologia do DNA Recombinante

Supondo que eu queira estudar um gene que codifica uma proteína que eu não conheço, o que fazer?

1º Recorto o gene por enzimas de restrição

2º Clivo o plasmídeo com a mesma enzima usada na 1ª etapa

3º Plasmídeo clivado + fragmentos contendo o gene + enzima ligase ~> DNA recombinante

4º Insiro o DNA recombinante em uma bactéria hospedeira, processo denominado transformação

5º Divisão celular ~> milhares de cópias do DNA Recombinante

vetor

DNA de interesse

Importância, Aplicações e Implicações Éticas

Aplicações da Técnica:

1. Farmacologia2. Bactérias Especializadas3. Setor Agropecuário