Efeito do ectoplasma utilizandoAllium cepa como sistema teste

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ROSANA SILISTINORICCHARD HALLAN HERNANDE LEITE

OBJETIVO

Investigar os efeitos do ectoplasma sobrecélulas de Allium cepa como modelo teste.

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Ectoplasmia: objeto do estudo

• O pesquisador Charles R. Richet (1850-1935), em 1906, propôs o nome“ectoplasma”.

• Ectoplasmia: aparecimento temporário desubstâncias protoplasmáticas mais oumenos organizadas, de essência plástica,física e extrafísica, de fácil decomposição,em graus diversos de solidificação, comformas instáveis, ora como tênues vapores,bastões [...] (VIEIRA, 1999, RICHET, 2008,apud ROSSA, 2011).

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O uso do Allium cepa como organismo

teste

• O Allium cepa (cebola) teve seu uso como sistema-teste em1938 (LEVAN, 1945).

• Vegetais são um importante modelo para teste das alteraçõesgenéticas e reconhecidos como indicadores de efeitoscitotóxicos, genotóxicos e mutagênicos de ambientes compresença de substâncias químicas (YI & MENG, 2003).

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Vantagens do uso de testes em plantas1. Detectar a genotoxicidade mais rápida e eficientemente do que ensaios

animais, são mais simples e econômicos, e usados, com sucesso, emmonitoramento ambiental (YI & MENG, 2003);

2. Indicadores de efeitos tóxicos: respondem com alta sensibilidade(GRANT, 1994); pelo crescimento rápido de suas raízes, grande númerode células em divisão, alta tolerância a diferentes condições de cultivo,disponibilidade durante o ano todo, fácil manuseio e por possuircromossomos em número reduzido (2n = 16) e de grande tamanho(QUINZANI-JORDÃO, 1987);

3. Validados em estudos de colaboração internacional: “United NationsEnvironmental Program” (UNEP), “World Health Organization” (WHO) e“US Environmental Protection Agency” (USEPA), (FERNANDES et al.,2007). 5

MATERIAL E MÉTODOS

a) Material: ectoplasma de indivíduos ectoplastas(N= 12), do sexo feminino (G1) e masculino (G2);

b) Faixa etária: 30 a 80 anos;

c) Ectoplasta: entrevista e autorização do uso dosresultados, por meio do termo de consentimentolivre e esclarecido;

d) Local: sala de experimentos – Ectolab – Foz doIguaçu;

e) Tempo do experimento: 15 minutos.

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Sementes de A. cepa (2n = 16 cromossomos), de um mesmo lote (variedade Baia Periforme).

A. Cepa como modelo teste

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GRUPO EXPERIMENTAL

ECTOPLASTA a 3 mA. cepa

Placas 1s/2r

ECTOPLASTA alcance da mãoA. cepa

Placas 3s/4r

ECTOPLASTA a 3 m A. cepa + HERBICIDA

Placas 5s/6r

ECTOPLASTA alcance da mãoA. cepa + HERBICIDA

Placas 7s/8r

raíz

MATERIAL E MÉTODOS

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CONTROLE

A. Cepa(CONTROLE NEGATIVO)

9s/10r

A. Cepa + HERBICIDA(CONTROLE POSITIVO)

11s/12r

Em outra sala, os dois grupos controle serão colocados para germinar nomesmo horário e nas mesmas condições de temperatura e de umidade da salaexperimental.

raíz

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PROCESSAMENTO DAS AMOSTRAS

Germinação: quando as raízes de A. cepa atingirem 2 cm decomprimento serão fixadas por 24 horas e armazenadas para oprocessamento de acordo com as análises.

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AnálisesAvaliar possíveis alterações no potencial mutagênico,

citotóxico e genotóxico nas células expostas ao ectoplasma etratadas com o herbicida por meio das análises de:

• aberrações cromossômicas;

• freqüência de quebras , micronúcleos

• nucléolos: número de nucléolo por célula; o tamanhode um único nucléolo e a porcentagem de células comum par de nucléolos heteromórficos;

• ultraestrutura por meio da MET ;• Metabolômica;

ECTOPLASTAS - sangue

• Estudo estrutural utilizando o ML;• Análise ultraestrutural por meio do MET

A. CEPA

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REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS• ABNEY, K. R.; KOPSELL, D. A.; SAMS, C. E.; ZIVANOCIC S.; KOPSELL, D. E. UV-B radiation

impacts shoot tissue pigment composition in Allium fistulosum L. cultigens. The Scientific World Journal, 2013, http://dx.doi.org/10.1155/2013/S13867.

• CABARAVDIC, M. Induction of chromosome aberrations in the Allium cepa test systemcaused by the exposure of cells to venzo(a) pyrene. Med Arh., v. 64, p. 215-8, 2010.

• FERETTI, D.; CERETTI, E.; ZERBINI, I.; LIMINA, R. M.; DOMINICI, L.; MORETTI, M.; MONARCA, S.; DONATO, F. Assessmente of the genotoxic effects of gaseous emissions and percolates from three municipal landfills using plant bioassays. Ann Ig., v. 21, p. 153-9, 2009.

• FERNANDES, T. C. C.; MAZZEO, D. E. C.; MORALES, M. A. M. Mechanism of micronuclei formation in polyploidizated cells of Allium cepa exposed to trifluralin herbicide. PesticideBiochemistry and Physiology, v. 8, p. 252-259, 2007.

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