ATUALIDADES EM CITOTECNOLOGIA

PATOLOGIA DIGITAL

Davy Rapozo, PhD

Instituto Nacional de Câncer

Centro de Pesquisas

Patologia Molecular

• Como tudo começou?

Interesse em aperfeiçoar e entender a visão

• Grécia 500 a.c. – Teorias da luz

• Euclides 300 a.c. – Indícios da ótica

• Al-Hazen 65 d.c. – Globos de vidro para aumentar

imagens e concentrar a luz

• Ptolomeu 150 d.c. – Mediu os índices de refração da luz

• Roger Bacon 1267 – Refração em lentes

influenciando a invenção dos óculos.

• Século XIV – Lentes começam a ser usadas para

corrigir defeitos da visão e aumento de objetos.

Leeuwenhoek – Uso do microscópio simples.

• Século XVII – O desenvolvimento do telescópio

propiciou a invenção do microscópio composto (lente

ocular + objetiva).

Primeiro microscópio planejado -

meados de 1590.

• 1609 – Galileu fez seu 1° microscópio.

• 1750 – Recomendação de usar lente simples para

observação das curiosidades das ciências naturais.

Rudolf Virchow (1821-1902)

– Considerado o pai da

patologia moderna.

• 1930 – Invenção do radar e da televisão despertou o

interesse dos microscopistas.

• 1935 – Aplicação do conceito da relação objeto/imagem/tempo

Desenvolvimento do microscópio eletrônico de varredura

• 1938 – Microscópio eletrônico de transmissão.

• 1952 – Resolução de 50 nm.

Nas últimas duas décadas o acoplamento de câmeras

digitais a microscópios

Evolução da patologia digital

Evolução da patologia digital

Evolução da patologia digital

Bônus:

• Arquivo digital

• Análise de imagem

• Softwares de quantificação de colorações

Ônus:

• Imagem estática

• Softwares de análise com base na contagem de

pixels

• Manipulação de imagem

Nova era da patologia digital

Lâminas digitais

Nova era da patologia digital

Digitalizadores

Nova era da patologia digital

Digitalizadores

• Capacidade

• Campo claro e/ou fluorescência

• Suporte de TI

• Usuário capacitado

• Universalização

• Economia massiva de tempo

Nova era da patologia digital

Qualidade da imagem

• Focalização

Nova era da patologia digital

Qualidade da imagem

• Qualidade do tecido

• Montagem da lâmina de vidro

Nova era da patologia digital

Qualidade da imagem

• Técnica de aquisição da imagem

Nova era da patologia digital

Qualidade da imagem

• Pós-processamento das lâminas digitalizadas

• Integralidade da digitalização

• Controle da qualidade

• Associação com arquivo do caso

• Compressão do arquivo digital

• Localização

Nova era da patologia digital

Qualidade da imagem

• Questões de manipulação de imagem

Infra-estrutura de TI

Disponibilização para usuários

Infra-estrutura de TI

Infra-estrutura de armazenamento

Infra-estrutura de TI

Qualidade dos monitores

Infra-estrutura de TI

Velocidade de rede

Aplicações

• Ensino

Aplicações

• Ensino

Aplicações

• Ensino

Aplicações

• Ensino

• Ensino

Hamilton et al., 2012

Hamilton et al., 2012

• Ensino

• Ensino

Aplicações

• Diagnóstico

• Salto de obstáculos

• Imagens estáticas e ao vivo

Aplicações

• Diagnóstico

INCA - HCI

Rio de Janeiro

Aplicações

• Diagnóstico

• Tele-diagnóstico

• Tele-revisão

Aplicações

• Diagnóstico

• Análise de imagem

Quantificação de área

Aplicações

• Diagnóstico

• Análise de imagem

Reconhecimento de

padrões histológicos

Aplicações

• Diagnóstico

• Análise de imagem

Quantificação de “objeto”

Aplicações

• Diagnóstico

• Análise de imagem

Quantificação celular total

Aplicações

• Pesquisa

• Laboratório virtual de análise de TMA

Aplicações

• Pesquisa

• Laboratório virtual de análise de TMA

Aplicações

• Pesquisa

• Análise de fluorescência

Aplicações

• Arquivo digital

Citologia digital

Wilbor et al., 2011

Wilbor et al., 2011

Wilbor et al., 2011

Wilbor et al., 2011

Wilbor et al., 2011

Davy Rapozo, PhD

Instituto Nacional de Câncer

Centro de Pesquisas

Patologia Molecular

ATUALIDADES EM CITOTECNOLOGIA

DIAGNÓSTICO MOLECULAR PARA

CITOTECNOLOGIA

Citologia em meio liquido

• Melhora a sensibilidade

• Permite automação

• Somente um dispositivo de coleta

• 100% das células serão analisadas

Coleta e

processamento

Impossibilita o uso de técnicas de biologia molecular

Possibilidade para uso de técnicas de biologia molecular

Reação em cadeia da Polimerase - PCR

Lee et al., 2015

Reação em cadeia da Polimerase - PCR

Rossi et al., 2015

Sequenciamento direto do DNA

Rossi et al., 2015

Imunohistoquímica

Hesselink et al., 2004

Hibridação in situ

• Aplicações

• Tele-diagnóstico

• Tele-revisão

• Proficiência

• Onde estamos?

• Implantação do Laboratório de Patologia Molecular

• Patologia digital

• Automação do diagnóstico do painel de

biomarcadores para câncer de mama

• Validação de TMA

• Validação de algoritmos de quantificação

O Grupo:

Dr Davy Rapozo – PI

Priscila Valverde – MSc

Vanessa Barbosa - IC

Colaboradores:

Dra Claudia Bessa – INCA

Dra Sheila Coelho – INCA

Dra Tatiana Simão – UERJ

Dr Max Robinson - UK

Obrigado!!!