Aula prática I ----------------- Microbiologia Médica ---------------- dia:19/08/2010

Nome: Juliana Cardoso Gomes dos Santos.

Nesta aula, fizemos cultura de bactérias na placa de petri e coloração de

gram.

Cultura de bactérias na placa de petri.

O primeiro passo foi limpar a bancada com álcool 70% em seguida ligar o bico

de bussen, posteriormente pegamos um swab estéril e fomos para o local de

coleta, no qual o grupo se dividiu para diversos locais da faculdade, sendo tais

locais:

→ Telefone público

→ Banheiro feminino

→ Cédula de dinheiro

→ Bancada da cantina

→ Vidro da Xerox

→ Banheiro Masculino

→ Bebedouro

→ Pele de uma aluna da classe

→ Garganta de uma aluna da classe

Foi passado o swabe estéril sobre esses locais, e em seguida retornamos ao

laboratório. Continuamente, por trás do bico de busen abrimos cuidadosamente

a placa já contendo o meio de cultura ECA ( a base de proteínas e

carboidratos), e então roletamos em forma da zigue-zague, o swabe sobre o

meio de cultura sólido, sucessivamente fechamos a placa, e a colocamos na

estufa no dia 19/08/2010 ás 9:30 pm na estufa, numa temperatura de

aproximadamente 36ºC. Lembrando que a placa foi devidamente identificada e

o swab descartado em seguida.

Coloração de gram.

Primeiro fizemos a fixação da amostra na lâmina, que ocorreu da seguinte

forma:

→ Identificamos a lâmina

→ Um circulo de giz por traz da da lâmina

→ Flambar a alça de platina e esperar esfriar

→ Contamina a alça e em seguida contamina a lâmina

→ Passa a lâmina cerca de 3 vezes na chama de fogo, para que o material

fixar

Depois da lâmina fixada, é feita a coloração de gram, seguindo os seguintes

passos:

→ Mergulhe a lâmina no CRISTAL VIOLETA, durante 60 segundos. Tal

reagente cora as bactérias de azul;

→ Mergulhe a lâmina no LUGOL (solução mordente), durante 60 segundos. Tal

solução forma o complexo de CV + I.

→ Mergulhe no ÁLCOOL 95%, durante 10 segundos. Este reagente descolorir

as bactérias gram negativas.

→ Mergulhe a lâmina na FLUXINA, durante 30 segundos. Este reagente irá

colorir as bactérias gram negativas de vermelho.

→ Por fim coloca a lâmina para secar.

OBS.: ENTRE UM PASSO E OUTRO, A LÂMINA FOI DEVIDAMENTE LAVADA

COM ÁGUA DESTILADA.

Resultados

Para a visualização do microscópio, após a lâmina secar, passa se o óleo de

imersão, e a visualização ocorre numa lente de 1000:

→ Primeira lâmina foi o banheiro feminino: diplobacilo gram negativos.

→ Lâmina que já estava pronta no laboratório: streptococcus gram positivos em

cadeia.

→ Lâmina da garganta: bacilos gram negativos.

→ Lâmina feita da placa de Petri: colônia de fugos.

“ AS OUTRAS LÂMINAS NÃO FORAM VISUALIZADAS, DEVIDO TER

ACABADO O TEMPO DA AULA”

Aula prática II --------------- Microbiologia Médica ---------------- dia: 02/09/2010