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  • SISTEMA AUTOMATIZADO PARA MICROBIOLOGA: BD PHOENIX

    TM M. Soledad Prat M.

    Seccin Bacteriologa

  • TEMARIO

    Tecnologa y propsito del Sistema Ventajas y desventajas de Sistemas

    automatizados.

    Descripcin del Equipo

    Identificacin y AST en Bacilos Gram-negativos Identificacin y AST en Cocceas Gram-positivas Experiencia local (ISP)

    Encuesta a usuarios Conclusiones

  • VENTAJAS SISTEMAS AUTOMATIZADOS

    Uso metodologa estandarizada y validada. Disminucin carga de trabajo para el personal del laboratorio. Disminucin del tiempo de resultados en ID y AST. Resultados ms rpidos para ser aplicados en clnica. Mayor capacidad de Identificacin. Taxa muy amplia Informe de resultados basados en CIM. En AST: Interpretacin de resultados y Control de Calidad

    con estndares CLSI - Actualizados.

    Fcil manipulacin Manejo de datos a travs de Software*. Concentracin de

    informacin y anlisis.

    Mayor Bioseguridad y Calidad de la informacin

  • DESVENTAJAS SISTEMAS AUTOMATIZADOS

    Costo alto de paneles/ muestra

    Excesiva confianza en el sistema pudiendo no detectar errores.

    Errores pueden llevar a fallas en tratamiento, (Ej. cultivos mixtos, identificacin equivocada).

    Requiere igualmente analizar pruebas bsicas.

    Requiere anlisis a cargo de profesional competente.

    Puede requerir uso agregado de pruebas complementarias (> costo).

  • SISTEMA AUTOMATIZADO PARA MICROBIOLOGA BD PHOENIX

  • SISTEMA AUTOMATIZADO PARA MICROBIOLOGA BD PHOENIX

  • USO PREVISTO

    El Sistema Automatizado para Microbiologa BD Phoenix est diseado para la identificacin (ID)

    rpida y la prueba de sensibilidad a antibiticos

    (AST) en bacterias de importancia clnica

    El sistema Phoenix proporciona resultados rpidos para la mayora de las bacterias aerbicas gram-positivas as como para la mayora de las bacterias aerbicas y anaerbicas facultativas gram-negativas de origen humano.

  • FUNDAMENTOS TECNICOSID

    En ID , muchas de las pruebas empleadas en los paneles del Sistema Phoenix son modificaciones

    de los mtodos clsicos, bioqumicos

    convencionales.

    Incluyen pruebas para la fermentacin, oxidacin, degradacin e hidrlisis de diversos

    sustratos.

    Adems, el Sistema Phoenix utiliza sustratos cromognicos y fluorognicos, as como

    sustratos con fuentes de carbono nicas para la

    identificacin de los organismos.

  • IDENTIFICACION BACTERIANA (ID)

    La produccin de cido se indica por un cambio en el indicador rojo fenol, si la bacteria

    utiliza carbohidratos como sustrato.

    Los sustratos cromognicos producen un color amarillo por la hidrlisis enzimtica.

    Los organismos que utilizan una fuente especfica de carbono reducen el indicador

    basado en resazurina.

    Existen otros tests que detectan la capacidad del organismo para hidrolizar, degradar,

    reducir o utilizar de otro modo un sustrato.

  • FUNDAMENTOS TECNICOSAST

    El mtodo AST del Sistema Phoenix es una versin miniaturizada modificada de la tcnica de dilucin

    doble de microdilucin en caldo.

    Los test de sensibilidad en el Sistema Phoenix se realizan mediante la determinacin del

    crecimiento bacteriano en presencia de diversas

    concentraciones de antibitico, analizado con la

    ayuda del indicador AST .

    El mtodo AST del sistema Phoenix es un test de microdilucin que utiliza caldo de cultivo.

  • SUSCEPTIBILIDAD AST

    Utiliza un indicador redox para detectar el crecimiento del organismo en presencia de un

    antibitico.

    Se realizan mediciones continuas de los cambios del indicador, as como la turbidez

    bacteriana.

    Cada configuracin del panel para AST contiene diversos antibiticos con un amplio

    rango de concentraciones de doble dilucin 1:2.

    Se utiliza la identificacin del organismo para interpretar los valores CIM de cada antibitico.

  • Velocidad proporcionando Exactitud y Precisin:

    ID en promedio de 2-3 hrs, lectura hasta 12 hrs.

    Se pueden configurar: Alertas para resultados de pacientes crticos. Alertas para deteccin de mecanismos de resistencia.

    Establece reglas de Interpretacin actualizadas de acuerdo al CLSI

    Vigentes.

    BD Experto: con ms de 500 reglas

    - validacin resultados AST

    - validacin cruzada de ID & AST

    - informes para el clnico.

    - equivalencia antimicrobiana

    - deteccin mecanismos de resistencia

    BD Phoenix PANELESCuenta con paneles para identificacin y paneles combinados para ID y Susceptibilidad.

  • EQUIPO / PANELES Realiza un mximo de 100 tests de ID y AST , al mismo tiempo, en

    paneles combinados .

    El panel es una bandeja de poliestireno moldeada sellada y autoinoculante, con 136 micropocillos con reactivos liofilizados.

    El panel combinado incluye un lado para ID (51 pocillos) con sustratos liofilizados para la ID de bacterias y un lado para AST (85

    pocillos) con concentraciones variables de antibiticos.

    Contiene controles interno de crecimiento y controles presencia indicador redox (AST).

    Utiliza un indicador redox colorimtrico optimizado para AST. Utiliza indicadores colorimtricos y fluorimtricos para ID. Utiliza caldo AST con ajuste de cationes (ej.: Ca++ y Mg++) para

    optimizar el rendimiento de los anlisis de sensibilidad.

  • INSUMOS SISTEMA PHOENIX

    CALDO ID, CALDO AST INDICADOR

    PANELES ID, AST, ID/AST

    PHOENIXSPECNEFELOMETRO

  • INOCULACION PANELES

    Los paneles Phoenix se inoculan con una densidad equivalente al patrn 0,5 de McFarland (0,5 y 0,6 es

    aceptable).

    Las suspensiones deben prepararse slo con el nefelmetro BBL CrystalSpec o BD PhoenixSpec.

    Inoculados, los paneles se colocan en el instrumento y se incuban a una temperatura constante de 35 C.

    El instrumento analiza los paneles cada 20 minutos hasta un mximo de 16 horas en caso necesario.

    No es posible realizar una lectura manual.

  • TIEMPOS MAXIMOS PERMITIDOS

  • PANELES GRAM NEGATIVOS

  • PANELES GRAM -POSITIVOS

  • BD PHOENIX TAXA

    Gram NegativosEnterobacterias

    No-Fermentadores Otros Bacilos Gram-

    Gram Positivos Staphylococcus Enterococcus Bacilos Gram + Streptococcus (48)

    152

    300

    48

    GP GN Strepto

  • PRUEBAS SUPLEMENTARIASID

  • BD Phoenix AST

    F. Quinolonas: 10 clases Aminoglicsidos: 10 clases Rifamicina: 1 B Lact/Inh B lact: 7 clases B Lactamicos Pen: 7 clases Carbapenemes: 3 clases Cephem: 24 clases Peptido ciclico: 1 Folatos: 3 clases Glicopeptidos 2 clases Ketolidos: 1 Lincosamida: 1

    Macrolido: 3 clases Monobactam: 1 Phenicol: 1 Lincosamida: 1 Fusidane: 1 Nitrofurano: 1 Oxazolidinona: 1 Ac. Pseudomnico: 2 clases Quinolonas: 1 Streptogramina: 2 clases Tetraciclina: 2 Otros: 4

  • AST : MIC VERDADERO

    Deteccin del verdadero CIM estbasado en al menos 3 dobles consecutivas concentraciones del antimicrobiano.

    No hay extrapolacin de la curva de crecimiento. Es el valor que da para la interpretacin.

    Dos tecnologas de lectura: Turbidimetra como resultado de la

    divisin celular. Cambio colorimetrico del indicador

    Redox como resultado del metabolismo.

    MIC

    0,25

    0,5

    1,0

    2,0

    4,0

    8,0

    16,0

    32,0

  • DETECCION MECANISMOS RESISTENCIA

    Deteccin de la produccin de BLEE entre especies de Enterobacteriaceae.

    Deteccin de la resistencia a la vancomicina en las especies Enterococcus (VRE) y Staphylococcus (VISA y VRSA).

    Deteccin de la resistencia a los aminoglicsidos de alto nivel en las especies de Enterococcus y Streptococcus (HLAR);

    Deteccin de resistencia a la meticilina en Staphylococos (MRS); Deteccin de la produccin de -lactamasa en las especies de

    Staphylococcus (BLACT);

    Deteccin de la resistencia a los macrlidos en las especies de Streptococcus (MLSb y MEFF);

    La deteccin de la resistencia de alto y bajo nivel a la penicilina en S. pneumoniae (HLPRSP) (LLPRSP).

    Confiabilidad y velocidad para pacientes crticos Deteccin de mecanismos de resistencia basados en test especficos o

    antimicrobianos probados en el panel.

  • Phoenix MARCADORES RESISTENCIA

    -Lactamasa en Staphylococcus (Nitrocephin test) Meticilina Resistencia Staphylococcus

    MRS basada en Interpretacin a Oxacilina. mecA predice basado en Cefoxitin

    Vancomicina Resistencia Enterococcus y Staphylococcus (basado en CIM a Vancomicina).

    Resistencia Enterococcus a alto nivel de Aminoglicosidos(Gentamicina 500 mcg/ml and Streptomicina 1000 mcg/ml

    MLSb resistencia en Staphylococcus and Streptococcus Automtica si Clindamicina y Eritromicina = R Clasificada manualmente (ind. MLSB or efflux) basada en

    D test

    -Lactamasa de Espectro Extendido en Enterobacterias.

  • FLUJO DETERMINACION BLEE

  • Informe selectivo:

    - alertas en resultados de pacientes crticos

    - alertas ante deteccin de mecanismos de resistencia.

    - rpido informe de resultados de ID & AST

    - rapido informe depende del crecimiento

    -Valor verdadero del CIM

    ALARMAS EN RESULTADOS DE PACIENTES CRITICOS

  • BACILOS GRAM NEGATIVOS: ID y ASTNcepas

    Desempeo AST Observ. Referencia

    Bacilos

    Gram Neg.

    Vibrios

    BNF

    507

    138

    57

    89,9% T: 2-12

    hrs

    89,1% T: 4 hrs

    84,2% T: 5 hrs

    No se

    alcanzan

    valores

    > 90%

    OHara et al.

    JCM 2006

    Enterobacte

    rias

    ID y AST

    231

    (31

    esp.)

    ID: 94,4% EA: 98,7%

    CA: 97,7%

    VME: 0,38%, ME

    0,3%

    mE 1,8%

    100%

    Deteccin

    BLEE

    Carrol et al.

    JCM 2006

    Enterobacte

    rias

    BNF

    ID y AST

    494

    110

    98,4%

    99,1%

    EA: 94,2%

    CA: 97,3%

    VME: 1,6%, ME 0,6%

    mE 1,9%

    98,5%

    Deteccin

    BLEE

    Menozzi et al.

    JCM 2006

    Enterobacte

    rias

    BNF

    ID y AST

    163

    53

    98%

    T: 2-12 hrs

    P.aer. 100%

    Otros 37,5%

    CA: 99,5% 95,5%

    VME: 0,3% 0,7%

    ME : 0,2% 1,3%

    mE: 3,2% 4,5%

    Referencia

    Estndar

    CLSI.

    Resultados

    comparables

    Snyder et al.

    ASM 2006

    (compara con

    MSCan)

  • DETECCION DE BLEEN cepas Resultado Resultado Observ. Referencia

    E. coli BLEE+

    K.pn. BLEE +174

    19

    Phoenix

    E.coli 96%

    K.p 89,4%

    T: 95,3%

    Vitek 2

    E.coli 99,4%

    K.p 100%

    T: 99,5%

    Compara Vitek 2 y

    Phoenix. Referencia: E-

    Test y Difusin CLSI

    Trevio et al.

    Enfermed.

    Infecciosas y

    MC. 2009.

    E.coli

    K.pn y K.

    oxytoca

    102 Phoenix

    S: 96%

    (99%)*

    E: 81%

    (58%)*

    Vitek 2

    S: 91%

    (89%)*

    E: 85%

    Compara Vitek 2 y

    Phoenix. Referencia:

    Caracterizacin

    enzimtica molecular

    *regla adicion. experto

    S.Thomson et

    al. JCM.2007

    Distintas

    especies

    Enterobact.

    BLEE + y -

    510 cepas:

    BLEE +

    :288

    Secuenc.

    Met.

    Fenotpico

    319 +

    Phoenix

    319 + ms 2

    K.oxytoca

    Hiperpro.K1

    S: 100% E:

    98,9%

    Referencia: Mtodos

    fenotpicos y

    secuenciacin

    Sanguinetti et

    al. JCM.2003

    E.coli

    Klebsiella

    spp

    74 cepas

    clnicas

    17 cepas

    referen.

    Vitek1:

    83%

    Vitek 2

    78%

    Phoenix: 89%

    E-Test: 94%*

    Compara Vitek1 y 2 y

    Phoenix. Referencia: E-

    Test cepas clin. y

    Genotipificac. cepas Ref.

    Leverstein et

    al. JCM 2002

  • CONCLUSIONES BACILOS GRAM NEGATIVOS

    En general se obtienen aceptables resultados en identificacin de Enterobacterias.Mayor dificultad en identificar Enterobacterias menos comunes. AST: en general aceptables resultados ms frecuente mE y ME que EVM .Buena deteccin de BLEE principales en especies deE. coli y Klebsiella spp.

  • BACILOS NO FERMENTADORES: ID y ASTN cepas Desempeo AST Observ. Referencia

    ID y AST*

    B

    lactmicos

    amplio

    espectro

    136 95,6% EA: 94,2%

    CA: 93,1%

    VME: 0%

    ME: 5,2%*

    mE: 5,1%*

    Dificultad de medir

    CIM en B.lact

    (cefepime) por

    complej. mecanismos

    resistencia

    Endimiani et

    al.

    Microbiolgi

    ca. 2002

    ID 65

    clnicas

    122

    referencia

    Phoenix

    75% 67%

    Vitek 2

    61% 42%

    MicroScan

    75% 57%

    No se obtienen

    resultados aceptables

    Turnbull et

    al.

    ASM.2002(Compara

    varios

    Mtodos)

    ID

    B. cepacia

    153 Phoenix

    50%

    Vitek 2

    53%

    P: 0,624

    No se obtienen

    resultados aceptables

    Brisse et al.

    JCM.2002

    (Compara

    varios

    Mtodos)

  • BNF1

  • Se obtienen buenos resultados en ID en las especies ms frecuentes: Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter

    sacaroliticos, S. maltophilia.

    Otras especies presentan resultados muy diversos y no siempre aceptables.

    En Complejo B. cepacia se aprecia la insatisfactoria capacidad de los sistemas automatizados para identificar

    esta especie y por la importancia clnica, se requiere

    mtodos de confirmacin fenotpicos y preferentemente

    moleculares.

    Estudios de AST deben complementarse con mtodos estndares en especies MR con variados mecanismos.

    CONCLUSIONES BACILOS GRAM NEGATIVOS NO FERMENTADORES

  • CAPACIDAD DE DETECCION OTRAS RESISTENCIAS

    Deteccin Resistencia a Imipenem en Acinetobacter baumannii. Se compara Phoenix, Vitek y Microscan . Solamente Microscan no obtuvo resultados aceptables, los otros sistemas aceptables y comparables. (BMC Infecctions Diseases 2009).

    Susceptibilidad de P.aeruginosa ante Beta lactmicos se compara Phoenix, Microscan y Vitek 1 y 2. Se obtuvo en todos los sistemas inaceptables niveles de error con falsa susceptibilidad con TZP e IMI y falsa resistencia con ATM, FEP, CAZ. Comparados como referencia CLSI por difusin y CIM. Se recomienda mtodos alternativos en estos casos.(JCM. 2007).

    Inconsistentes resultados con TZP?. Se estudia la capacidad de detectarResistencia a TZP en cepas de E. coli por Phoenix, Microscan, Vitek . Se compara con mtodo referencia Microdilucin en caldo. Estudio de reproducibilidad en 20 das.Cepas resistentes presentaron variabilidad de resultados en el mtodo de referencia y , en mtodos automatizados siendo el Phoenix el que obtuvo resultados ms cercanos al de referencia, CA 74%. (ICAAC, 2005).

  • CARBAPENEMASAS EN ENTEROBACTERIAS

    Trabajo sin publicar ( F.Pasteran et al. INEI , C.Malbrn. Argentina). Capacidad del Phoenix para Deteccin Cabapenemasas Clase A, comparado

    con Dilucin en agar y la genotipificacin.

    Resultados preliminares:CA entre Phoenix y Dil. Agar: IMI: 84%, MEM: 71, ERT.73%

    Conclusin: Buena capacidad de deteccin principalmente con ERT. Baja la especificidad ante presencia de CTX-M.

    757991788291Esp.

    7976791007890Sens.

    ERTMEMIMIERTMEMIMI

    Dilucin AgarPhoenix75 cepas

  • Staphylococcus y EnterococcusObjetivo N

    cepasResultado Resultado Autor

    Capacidad

    PhoenixStaphylococcus

    Enterococcus

    ID y AST

    Total

    424

    cepas

    Enterococcus

    90 cepas

    S.aureus

    232

    Staphyloc.sp

    102

    ID 100%

    ID 100%

    ID 98%

    EA100% CA 99,3%

    Vanco R: 100%

    EA98,2% CA 98,8%

    VME: 1,7%

    EA 96,8% CA 95,7%

    VME0,7%, ME 1,7%

    y mE: 2,9%

    Caroll et al.

    JCM. 2006

    Comparar

    Mtodos IDStpahylococcus

    40 especi

    es

    Compara Vitek 2Phoenix API

    Sistemas

    automatiz.

    Aceptables y

    comparables.

    API Mejores

    resultados

    Phoenix: menor

    correlacin

    S. hominis 75%

    S.epidermidis 76%.

    Layer et al.

    JCM.

    2006

    Comparar

    Mtodos ID y

    ASTStpahyloc. yEnterococcus

    202

    cepas

    102 S. aureus

    100Enterococ.Compara

    Phoenix y Microsacan

    ID (ambos):Staphyloc.

    100%

    Enterococ.

    99%

    AST (ambos):Staphyloc.

    96,9%

    Enterococ.

    95,2%

    Noel et al.

    ASM. 2005

  • DETECCION RESISTENCIA EN StaphylococcusAutorResultadoResultadoN cepasObjetivo

    Comparar

    deteccin

    Resist. por

    Gen mecA

    S.aureus

    620 SAMR 448

    cepas

    SAMS 172

    cepas

    *uso

    cefoxitin

    ID Phoenix:

    99,8%

    ID VItek 2:

    99,7%

    AST Phoenix

    EVM: 0,2%

    EM: 0%

    AST Vitek 2:

    EVM: 0,2%

    EM: 0,6%

    Junkins et

    al. JCM.

    2009

    Comparar

    deteccin

    VISA en 6

    sistemas:

    Referencia

    Mtodo Microdilucin

    T: 129< 1: 60

    2 ug/ml:24

    4 ug/ml:

    36

    8 ug/ml:

    9

    Phoenix, E-

    test

    Vitek 1 y 2

    Microscan

    Diluc. Agar,

    Difusin,

    Screening.

    EA: 98%

    Menos Vitek1.

    Phoenix, E-Test: una

    dilucin >

    Vitek 2: una dilucin 8ug/ml

    para predecir Resist.

    mediada por Gen

    mecA

    Phoenix:

    S: 100%

    E: 99,2 %

    Votta et

    al.

    ICAAC

    2004

  • DETECCION RESISTENCIA ERITRO/CLINDA Streptococcus

    Objetivo: Evaluar 4 mtodos su capacidad de deteccin de R mediada por ermB y mefA/E.

    ermB (MLSB): Eritromicina R y Clindamicina RInducible: iMLSB o constitutiva cMLSB

    mefA/E (M): Eritromicina R y Clindamicina S.

    Se estudiaron 59 aislamientos: 31 ermB, 20 mefA/E y 8 negativas. Se evala: doble disco, Microscan, Phoenix y microdilucin caldo. Resultados:

    Mtodo difusin: mejor correlacin ermB: 100% (Phoenix: 97%)Microdilucin caldo: mejor correlacin mefA/E: 95%. (Phoenix: 90%).En Phoenix % correlacin para deteccin iMLSB: 100% y para cMLSB 93%.

    Sinha et al. Evaluation of Four AST Methods for Detection of Erytromicin andClindamycin Resistance in Streptococci. ICAAC. 2003.

  • AST: Streptococcus pneumoniae

    Scott et al. Comparison of BD Phoenix to Vitek 2, MicroScan MICroStrep and E-Test forAntimicrobial Susceptibility Testing of Streptococcus pneumoniae . JCM. 2009, p. 3557- 3561.

    311 cepas clnicas.Tiempo :

    Phoenix : 12,1 horas Vitek: 9,8 horas

    EVM menores en Phoenix (0,3%, con penicilina) comparado con Vitek (2,4%).mE en Phoenix 9,3% y en Vitek 9,6%.Ambos sitemas dan resultados confiables y en menor tiempo que sistemas manuales.

  • COMPARACION FLUJO TRABAJO V/S CAPACIDAD: VITEK 2 Y PHOENIX

    Eigner et al. Analysis of the Comparative Workflow and Performance Characteristics of the Vitek 2 and Phoenix Systems. JCM,2005, p.3829-3834.

    Estudio realizado con 307 cepas.

    Variable Phoenix VitekTiempo:Manipulacin 7 cepas 20,9 +- 1,8 10,6+- 1,0Resultado total cepas 727 +- 162 506 +- 120

    ID BNF 100% 100%ID Staphyloccus 97% 97%ID Enterococcus 100 % 100%ID Enterobacteriaceae 96% 98%

    AST CA 97% 97%mE 3% 2,8%ME 0,3% 0,2%VME 0,6% 1,7%

  • BNF IDENT LAB. REF.

    Total

    A. baumannii 211 A. baumannii 196 Sin identif 5 Alcalig. faecalis 3 Bord.bronchisep. 1 Ac. asacarolitico 3 Acinetobacter spp. 3Pseudomonas

    aeruginosa 191 P. aeruginosa 189 Sin identif 1 Pseudomonas spp. 1Acinetobacter

    asacarolitico 16Acinetobacter

    asacarolitico 11 Sin identif 1 Acinetobacter spp. 1 Moraxella spp. 2 Alcalig. faecalis 1Stenotrophomon

    as maltophilia 40 S. maltophiliaBurkholeria

    cepacia 20 Burkh. cepacia 17 S. maltophilia 1 P.fluorescens 2Alcaligenes

    faecalis 7 Alcal. faecalis 4 P. putida 1 B. bronchisep. 2

    She. putrefaciens 6 She. putrefaciens 3 P.aeruginosa 1 P. pseudoalcalig. 1P. fluorescens 6 P. fluorescens 3 P.aeruginosa 2 P. putida 1P. putida 10 P. putida 8 P.aeruginosa 1 P. oryzihabitans 1

    P. oryzihabitans 4 P. oryzihabitans 2CDC grupo EF 4b 1 Kingella 1

    P.pseudoalcalig. 4 P. pseudoalcalig. 1 P. stutzeri 1 Sin Identif 1 P.aeruginosa 1P. stutzeri 4 P. stutzeri 1 Sin Identif 1 P. putida 1 Pseudomonas spp.1P. monteilii 2 Ps. putidaChrys.

    Indologenes 6 Chrys. indolog. 3Bergeyella

    zoohelcum 3Eliz.

    kinkiamening 4 Eliz. kingiamen. 3Sphin.

    paucimobilis 1

    Myroides spp. 2 Myroides spp. 1Eliz. kingiamening

    1Sphin.

    paucimobilis 2Sphin. paucimobilis

    2

    Achromobacter

    (distintas

    especies) 8

    Achromobacter

    (distintas especies) 4

    Burkholderia

    gladioli 1Pseudomonas spp. 1 P. aeruginosa 1 Sin Ident 1

    Delftia, Weksella,

    Comamonas,

    Moraxella 4

    Delftia, Weksella,

    Comamonas,

    Moraxella 4Otras Especies

    incorrecta o sin identificar 10Total cepas BNF 557 Correlacin 88,9%

    EXPERIENCIA LABORATORIO REFERENCIA ISP (2008-2009)

  • ENTEROBACTERIAS IDENT LAB. REF.

    K. pneumoniae

    128 K. pneumoniae 127

    K. oxytoca 1

    E.coli 69

    E.coli 68Delftia acidovorans

    1

    E. cloacae 40 E. cloacae 36 Citrobacter koseri2

    K. pneumoniae 1 Citrobacterfreundii 1

    S. marcescnes 28S. marcescnes

    E. agglomerans 24 E. agglomerans 9 E. cloacae 2 K. pneumoniae 1 Tatumelaphyseos 3

    Leclercia adec. 8

    Shigella 1

    E.aerogenes 3 E.aerogenes 2 K. pneumoniae 1

    Salmonella spp. 241 Salmonella spp.

    Shigella spp. 5 Shigella spp.

    S. odorifera 1 S. odorifera

    S. liquefaciens 1 S. liquefaciens

    P. mirabilis 6 P. mirabilis

    M. morganii 1 P. stuartii

    K. oxytoca 2 K. oxytoca

    K.ozaenae 3 K.ozaenae

    E. gergoviae 1 Enterobacter spp.

    C. freundii 2 C. freundii

    Hafnia alvei 6 Hafnia alvei

    Vibrio parahaemolyticus 1 Vibrio parahaemolyticus

    Total cepas 562

    96,00%

    EXPERIENCIA LABORATORIO REFERENCIA ISP (2008-2009)

  • Especie TOTAL CORRELACIN Error muy grave Error grave Error menor Comentarios

    K. pneumoniae

    BLEE +128 128 Beta lactamicos

    K. pneumoniae

    BLEE - 16 16

    Beta lactamicos

    E. coli BLEE + 46 46 Beta lactamicos

    E. coli BLEE - 10 10 Beta lactamicos

    P. mirabilis BLEE + 5 4* 1 Recomendacin Experto para BLEE 4

    E. cloacae 20 20

    S. marcescens 30 28

    2 cepas BLEE + , no estandarizado

    E. aglomerans 20 20

    Salmonella spp. 229 169 60

    Susc. Dism. Ciproerror: 26,2%

    NA

    A. baumannii 177 171 2 4carbapenemeserror: 3,4% IMI: 2, MEM:4

    P. aeruginosa 154 143 3 8carbapenemeserror: 7,1% MEM

    S. maltophilia 38 26 3* 4* 5** error: 31,7* SXT, ** LEV, CAZ

    EXPERIENCIA LABORATORIO REFERENCIA ISP (2008-2009)AST

  • ENCUESTA

    No-4 12 horas10 horasTiempo

    demora BGN

    NoNoMuy poco por

    inculo y en

    Pseudom.

    ASTcon TZB

    NoDificultad ID y

    AST en BGN

    --10 a 12 horas12 horas

    promedio

    Tiempo

    demora C+

    MF 0,5 en

    escaso

    desarrollo

    Dificultad CIM

    Linezolid en

    Enterococcus.

    Moderada

    Strepto y algunos

    Staphy.

    Errores con

    ID Staph.

    saproph.

    Dificultad ID y

    AST en

    Cocceas

    En bajos %

    confianza y AST:

    mecan. Resist.

    Hosp.2

    No

    Hosp. 1

    Si , para

    resistencias

    especficas

    Hosp.3

    En Cocc.+

    da baja

    confiabilidad

    Uso Tec.

    Alternativa

    Hosp.4Pregunta

  • CONCLUSIONES EXPERIENCIAPHOENIX

    Muy buena correlacin en bacterias ms frecuentes en clnica.

    Buena correlacin de resultados CIM en la mayora de AB.

    Sistema expertos buen aporte. Es necesario siempre analizar la ID, AST, aspectos

    microbiolgicos y de la muestra.

    Fcil manipulacin Menor tiempo para obtener resultados. Software permite anlisis de datos

  • Desventajas: Costo paneles

    Tamao Equipo Requiere control adecuado de temperatura

    ambiente.

    Paneles con corta fecha de vencimiento.

    CONCLUSIONES EXPERIENCIAPHOENIX

  • CONCLUSIONES VITEK / PHOENIX

    Ambos sistemas presentan buen nivel de identificacin en bacterias de importancia clnica.

    AST : todos presentan errores mayores y muy mayores similares, con variaciones dependiendo

    del agente bacteriano.

    Es necesario estar alerta para deteccin de mecanismos de resistencia.

    Son una buena alternativa para la prctica clnica (tiempo, estandarizacin, alertas, sistemas de

    experto, etc.)

  • CONCLUSIONES VITEK / PHOENIX

    No se puede desechar mtodos tradicionales.

    Resultados siempre deben ser analizados por profesionales competentes relacionando ID y AST.

    Al seleccionar el equipo: tener claro sus limitaciones y el objetivo para el laboratorio y

    relacionarse con los clnicos para una mayor

    utilidad de los resultados.

    Los grupos de usuarios de los distintos sistemas deberan solicitar la incorporacin de paneles AST

    con antimicrobianos de acuerdo a la realidad local.

  • MUCHAS GRACIAS

    Gracias por la colaboracin

    Dr. Leonardo Chanqueo

    TM. Carlos Rodo

    TM Dina Concha

    TM:, Natacha Garrido, Arturo Briones y Pablo Saavedra

  • BGN:Publicaciones revisadas1. OHara Caroline. Evaluation of tehe Phoenix 100 ID/AST Systema and NID Panel for

    Identificaction of Enterobacteriaceae, Vibrionaceae, and Commonly IsolatedNonenteric Gram Negative Bacilli. JCM. 2006, p. 928-933.

    2. Carrol et al. Evaluation of the Phoenix Automated Microbiology Microbiology Systemfor Identification and Antimicrobial Susceptibility Testing of Enterobacteriaceae. JCM. 2006, 44(10): 3506-3509.

    3. Menozzi et al.Two Center Collaborative Evaluation of Performance of the BD Phoenix Automated Microbiology System for identificaction and Antimicrobial SusceptibilityTesting of Gram Negative Bacteria. JCM. 2006, p: 2085 4094.

    4. Snyder et al. Comparative Study of Identificaction and Antimicrobial SusceptibilityTesting of Enterobacteriaceae and Non Fermentative Gram negative Organisms withthe Phoenix Automated microbiology and Microscan. Meeting ASM. 2006.

    5. Brasso et al. Variabiity in Vitro Susceptibility Test Results for E.coli Isolates andPiperacilin/Tazobactam Using Comercial and Reference AST Methods. ICAAC. 2005

    6. .Turner et al. Detection of Gram Negative Bacterial Resistance to FluoroquinoloneAgents in the Phoenix Automated Microbiolgy System. ASM. 1999.

    7. Salomon et al. Assessment of the Phoenix Automated Microbiology System in theIdentificaction of a Variety of Gram Negative Bacilli. Clinical microbiology andInfections Diseases. 2000.

  • BNF: Publicaciones revisadas

    1. Endimiani et al. Identificcation and Antimicrobial Susceptibility Testing of clinical Isolatesof Nonfermenting Gram Negative Bacteria by the Phoenix Automates microbiologySystem. Microbiologica. 2002, (25): 323- 329.

    2. Turnbull et al. Side by Side Evaluation of Dade Microscan Walkaway 96, BD Phoenix and BioMerieux Vitek 2 for Identificaction Testing of a Challenge and Routine Set ofNonfermentative and Miscellaneous Gran Negative Clinical Isolates. Meeting ASM. 2002.

    3. Brisse et al. Comparative Evaluation of the Phoenix and Vitek Automated Instruments forIdentificaction of Isolates of the Burkholderia cepacia Complex. JCM. 2002, p.1743-1748.

    4. Kulah et al. Detecting imipenem resistance in Acinetobacter baumannii by automatedsystem (Phoenix, Microscan, Vitek 2), high error rates with Microscan. BMC InfectionsDiseases 2009.

    5. Juretschko et al. Accuracies of B-Lactam Susceptibility Test Results for P. aeruginosawith Four Automated System( Phoenix, Microscan, Vitek, 1 y 2)JCM.2007,p: 1339-1342.

    6. Turng et al. Comparative Studies of Antibiotic Susceptibility of S. maltophilia withTrimethoprim/sulfonamethoxazole Using Different Testing Methodologies. Clinicalmicrobiology and Infections Diseases. 1999.

    7. Hejna et al. Comparison of Phoenix and Vitek Automated Susceptibility Testing forPerformance with A. baumannii complex and P. aeruginosa isolates. Clinicalmicrobiology and Infections Diseases. 1999

  • DETECCION BLEEPublicaciones revisadas

    1. Trevio et al. Comparacin entre las pruebas para la deteccin de beta-lactamasasespectro extendido de los sitemas Vitek 2 y Phoenix. Enfermedades Infecciosas y Microbiologa Clnica, 2009: 27(10): 566-570.2. Thomson et al. Comparation of Phoenix and Vitek 2 Extended Spectrum B-LactamaseDetection Test for Analysis of Escherichia coli and Klebsiella Isolates wuith wellCharacterized B- Lactamases.JCM. 2007.p: 2380-2384.3.Sanguinetti et al. Characterization of Clinical Isolates of Enterobacteriaceae from Italyby the BD Phoenix Extended Spectrum B-Lactamases Detection Method. JCM, 2003, p. 1463-1468.4.Leverstein et al. Evaluation of E-Test ESBL and the BD phoenix, Vitek 1 y 2, Automated Instruments for detection of Extended Spectrum B-Lactamases in Multiresistant E.coli y Klebsiella spp. JCM, 2002, p.3703-3711.5. Gross et al. The importance of ESBL Screening Test in Rapid Automated AntimicrobialSusceptibility Testing (AST). ICAAC.20016. Turng et al. An evaluation of the Phoenix Automated Microbiolgy Sysem for Extended Spectrum Lactamase Detection. Society Microbiology .Los Angeles. 2000.7.Brisse et al. Evaluation of the Phoenix Automated Microbiology Systemfor DetectionExtended Spectrum Beta Lactamase Producing E. coli and Klebsiella and CiprofloxacinResistant Acinetobacter and Pseudomoans aeruginosa European Clinical Isolates. ICAAC, 2000.

  • STAPHYLOCOCCUS Y ENTEROCOCCUS

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    D. Junkins et al, BD Phoenix and Vitek 2 Detection of mec A mediated Resistance in Staphylococcus aureus with Cefoxitin. JCM, 2009 p. 2879-2882. Spanu et al. Identification of methicilin-resistant isolates Staphylococcus aureus andcoagulase-negative Staphylococci responsible for blood stream infections with Phoenix system. Diagnostic Microbiolgy and infections Diseases.2004, (48)p.221-227M. Swenson et al. Accuracy of Comercial and Reference Susceptibility Testing Methodsfor Detecting Vancomycin-Intermediated Staphylococuus aureus . JCM, 2009 p. 2013-2017M. Votta et al. Evaluation of Cefoxitin MIC Results as a Predictor ofmecA-mediated Resistance with Staphylococcus aureus inthe Phoenix Automated Microbiology System. ICAAC 2004.C. Carroll et al. Evaluation of the BD Phoenix Automated Microbiology System foridentificaction and Antimicrobial Susceptibility Testing of Staphylococcus andEnterococcus. JCM, 2006, p. 2072-2077.F. Layer et al. Comparative Study Using various Methods for Identificaction ofStaphylococcus Species in Clinical Specimens. JCM, 2006, p.2824-2830Noel et al. Clinical Evaluation Comparing the BD Phoenix Automated Microbiology Systemwith the Microscan for Identificaction and Antimicrobial Susceptibility Testing ofStaphylococcus aureus and Enterococcus species. ASM.2005.Webster et al. Methicilin resistant S. aureus with reduced susceptibility to vancomycin in Canad. Diagnostic Microbiology and Infections Diseases. 2006.

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  • PUBLICACIONES REVISADAS Sinha et al. Evaluation of Four AST Methods for Detection of Erytromicin and ClindamycinResistance in Streptococci. ICAAC. 2003.Scott et al. Comparison of BD Phoenix to Vitek 2, MicroScan MICroStrep and E-Test forAntimicrobial Susceptibility Testing of Streptococcus pneumoniae . JCM. 2009, p. 3557-3561.Eigner et al. Analysis of the Comparative Workflow and Performance Characteristics of the Vitek 2 and Phoenix Systems. JCM,2005, p.3829-3834.Gross et al. Comparison of Phoenix to Vitek 2 Antimicrobial Susceptibility Test Performance with a Diverse Group of bacteria which are Found in Clinical Microbiology Labs. ClinicalMicrobiology and Ifections Diseases. 2002.Junkins et al. Comparison of BD Phoenix AP Workflow with Vitek 2. JCM.2010.Fahr et al. Antimicrobial Susceptibility Testing for Ten Fluoroquinolones Using the BD Phoenix Automated Microbiology System. Clinical Microbiology and Infections Diseases. 2002.Reuben et al. Preliminary Evaluation and Overview of Phoenix a New Automated ID/AST System. Clinical Microbiology and Infections Diseases 1999.Reuben et al. A Performance Evaluation of Phoenix Automated Microbiology System in detecting resistance to Linezolid , Azitromycin, Claritromycin, and Quinupristin.dalfopristinamong Staphylococcal and Enterocococcal isolates. ICAAC. 2000. Hong et al. Detection of Vancomycin Resistance in Enterococci with the Phoenix System. Clinical Microbiology and Infections Diseases. 2002.Hejna et al. Detectionof High Level Aminoglycoside Resistance HLAR, in Enterococci withthe Phoenix Automated Microbiolgy System. Clinical Microbiology and Infections Diseases. 2000