BAB IIIALAT, BAHAN DAN METODE 3.1 ALATPeralatan yang dipakai
adalah labu, kompor listrik, kondensor, pipet, cawan petri, cawan
krus, tanur, eksikator, oven, penangas, chamber, pipa kapiler,
kertas saring.3.2BAHAN PENELITIAN3.2.1. Bahan Tumbuhan Pisang
nangka (Musa paradisiaca. L) yang diperoleh di perkebunan cililin,
kabupaten bandung barat.3.2.2. Bahan KimiaEtanol 95%, aseton, eter,
n-heksan, amoniak, etil asetat, pereaksi dragendroff, asam klorida
2 N.3.3METODE PENELITIAN3.3.1 Pengolahan BahanPisang nangka
dibersihkan dari kotoran, kemudian dikeringkan dengan cara
diangin-anginkan lalu digiling menggunakan blander hingga berbetuk
serbuk halus.3.3.2 Ekstraksi Ekstraksi dilakukan dengan menggunakan
metode refluks, yaitu ekstrak dengan cara panas menggunakan pelarut
etanol. Penggunaan pelarut etanol sebagai pelarut karena metabolit
yang akan di tarik adalah flavonoid yang merupakan suatu senyawa
polar.Pisang nangka dibersihkan dari kotoran, kemudian dikeringkan
dengan cara diangin-anginkan lalu digiling menggunakan blander
hingga berbentuk serbuk halus. Pisang yang sudah halus kemudian
dimasukkan ke dalam alat refluks, ditambahkan pelarut etanol.
Rendam simplesia. Setiap 3 jam pelarut dig anti dengan menggunakan
pelarut yang baru, ekstrak cair yang didapat diuapkan diatas cawan
hingga ekstrak mengental.3.3.3Karakteristik Simplisia dan
Ekstrak3.3.3.1 Penetapan kadar abuPenetapan kadar abu total
dilakukan dengan cara menimbang lebih kurang 2 gram sampai 3 gram
zat yang telah digerus, kemudian zat tersebut dimasukkan kedalam
krus silikat yang telah dipijarkan dan ditara. Perlahan-lahan krus
dipijarkan hingga arang habis, dinginkan, dan ditimbang. Jika
dengan cara ini arang tidak dapat dihilangkan, maka kedalamnya
ditambahkan air panas, disaring melalui kertas saring bebas abu.
Dipijarkan sisa dan kertas saring dalam krus yang sama. Dimasukkan
bobot tetap, ditimbang. Dihitung kadar abu terhadap bahan yang
telah dikeringkan. (MMI, 1989).3.3.3.2Penetapan Kadar Abu Larut
AirAbu yang diperboleh dari penetapan kadar abu total, dididihkan
dalam 25 ml air selama 5 menit. Bagian yang tidak larut disaring
melalui kertas saring bebas abu, dicuci dengan air panas, residu
dan kertas saring bebas abu dipijarkan sampai bobot tetap. Kadar
sesuai dengan jumlah abu yang larut dalam air dihitung dalam persen
b/b terhadap bahan kering (MMI, 1989).
3.3.3.3Penetapan Kadar Abu Tidak Larut Asam Abu yang diperoleh
dari penetapan kadar abu, dididihkan dengan 25 ml asam sulfat encer
P selama 5 menit, dikumpulkan bagian yang tidak larut dalam asam,
disarig melalui krus kaca masir atau kertas saring bebas abu,
dicuci dengan air panas, dipijarkan hingga bobot tetap, ditimbang.
Dihitung kadar abu yang tidak larut dalam asam terhadap bahan yang
telah dikeringkan diudara (MMI, 1989).3.3.3.4Penetapan Kadar Sari
Larut AirPenetapan kadar sari larut air bertujuan untuk mengetahui
kadar sari dari bahan yang terlarut didalam pelarut air.Serbuk
simplisia kering terlebih dahulu dikeringkan di udara, kemudian 5
gram serbuk simplisia dimaserasi selama 24 jam dengan menggunakan
100 ml air kloroform P (1000:2,5), dalam labu bersumbat sambil
berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama dan kemudian dibiarkan
selama 18 jam. Kemudian disaring, dan 20 ml filtrat diuapkan hingga
kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara,
kemudian dihitung terhadap bobot bahan yang telah dikeringkan
(KemenKes RI, 1989).
3.3.3.5. Penetapan Kadar Sari Larut EtanolPenetapan kadar sari
larut etanol dilakukan untuk mengetahui kadar sari dari bahan yang
terlarut didalam pelarut etanol. Serbuk simplisia terlebih dahulu
dikeringkan diudara, kemudian 5 gram serbuk simplisia dimaserasi
selama 24 jam dengan 100 ml etanol 95% menggunakan labu bersumbat
sambil berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama dan kemudian
dibiarkan selama 18 jam. Kemudian disaring cepat dengan menghindari
penguapan etanol. Kemudian 20 ml filtrat diuapkan hingga kering
dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara, kemudian sisa
dipanaskan pada suhu 105C hingga bobot tetap. Kadar sari larut
dalam etanol 95% dihitung terhadap bobot yang sudah dikeringkan
(KemenKes RI, 1989).
3.3.4 Penapisan Fitokimia EkstrakPenapisan fitokimia dilakukan
terhadap ekstrak dan dan simplisia yang sudah dibubukkan untuk
memeriksa adanya senyawa metabolit sekunder. Secara umum
pemeriksaan ini meliputi alkaloid, flavonoid, tannin, polifenol,
triterpenoid & steroid, kuinon, saponin, monoterpen &
sesquiterpen, fenolat. Adapun tahapannya sebagai berikut:3.3.4.1
AlkaloidSampel dibasakan dengan ammonia, kemudian ditambahkan
kloroform, digerus kuat-kuat. Lapisan kloroform diambil kemudian
ditambahkan asam klorida 2N. Setelah dikocok kuat-kuat dan
terbentuk dua lapisan, lapisan asam diambil, dibagi menjadi tiga
bagian.Bagian 1 ditambahkan pereaksi Mayer. Jika terjadi kekeruhan
atau endapan berwarna putih, berarti sampel kemungkinan mengandung
alkaloid.Bagian 2 ditambahkan pereaksi Dragendorf. Jika terjadi
kekeruhan atau endapan berwarna jingga-kuning berarti sampel
mengandung alkaloid.Bagian 3 digunakan sebagai blanko (KemenKes RI,
1989).
3.3.4.2 FlavonoidSampel dalam tabung reaksi dicampur dengan Mg
dan HCl 2N. Campuran dipanaskan dan disaring. Kedalam filtrat
ditambahkan amil alkohol, dikocok kuat-kuat, Adanya flavonoid
ditandai dengan terbentuknya warna kuning hingga merah yang dapat
ditarik oleh amil alkohol (KemenKes RI, 1989).
3.3.4.3 TanninSampel ditambahkan air dalam tabung reaksi
dipanaskan dan disaring. Pada filtrat ditambahkan larutan gelatin
1%, adanya tannin ditandai dengan terjadinya endapan putih
(KemenKes RI, 1989). 3.3.4.4 FenolatSampel ditambahkan air dalam
tabung reaksi, kemudian dipanasakna dan disaring. Pada filtrat
ditambahkan pereaksi FeCl3. Adanya fenolat ditandai dengan
terbetuknya warna hijau-biru hitam hingga hitam (KemenKes RI,
1989).
3.3.4.5 Monoterpen dan SesquiterpenSampel digerus dengan eter,
filtratnya diambil dan ditempatkan dalam cawan penguap, dan
dibiarkan kering, kemudian ditambahkan larutan vanillin 10% dalam
H2SO4 kental. Terjadinya warna-warna menunjukkan adanya senyawa
monoterpen dan sesquiterpen (KemenKes RI, 1989). 3.3.4.6 Steroid
dan TriterpenoidSampel digerus dengan eter, filtratnya diambil dan
ditempatkan dalam cawan penguap, dan dibiarkan kering, kemudian
ditambahkan pereaksi Lieberman-Burchard. Terjadinya warna ungu
menunjukkan adanya senyawa triterpenoid. Terjadinya warna hijau
biru menunjukkan adanya steroid (KemenKes RI, 1989).
3.3.4.7 KuinonSampel ditambahkan air dalam tabung reaksi, lalu
dipanaskan dan disaring. Pada filtrat ditambahkan KOH 5%. Adanya
senyawa kuinon ditandai dengan terjadinya warna kuning (KemenKes
RI, 1989).
3.3.4.8 SaponinSampel ditambahkan air dalam tabung reaksi, lalu
dipanaskan dan disaring. Filtrat dimasukkan ke dalam tabung reaksi,
dikocok kuat-kuat. Terbentuknya busa yang mantap dan tidak hilang
selama 10 menit dengan tinggi busa minimal 1 cm menunjukkan adanya
saponin (KemenKes RI, 1989).
