Bioprocess EngineeringBioprocess Engineering

基因重組﹝ PCR, host selection ﹞ 或微生物篩選﹝ plasmid selection﹞

Lab. 生產

工廠生產

前處理﹝殺菌等﹞ 生化反應器 破碎細胞

分離及純化

Recombinant protein

metabolites

細胞固定化﹝酵素固定化﹞

蛋白質的沈澱作用 能使蛋白質發生沈澱作用的因素有： 酸 酸性試劑 單寧酸 重金屬離子（汞離子、鉛離子等） 咖啡因 嗎啡 中性鹽 有機溶媒 熱

﹝﹝ 五﹞蛋白質純化五﹞蛋白質純化

Ammonium sulfate

Salting out﹝鹽析﹞

﹝﹝ 五﹞蛋白質純化五﹞蛋白質純化等電點沉澱

蛋白質的溶解度1. pH 值：當 pH 值在其等電點（ pI ）時，溶解度

最小。 2. 鹽濃度：當在低濃度時，蛋白質的溶解度隨著鹽

濃度的增加而增加，稱為 Salting-in 。當鹽濃度高至某一濃度時，蛋白質的溶解度隨著鹽濃度的增加而減少，稱為 Salting-out 。

3. 溶媒的介電常數（ Dielectric contant ）：酒精、丙酮的常數較水小，使蛋白質分子在此溶媒中的斥力較小，溶解度較低。

4. 溫度：在一限定的溫度（約 0~40℃）下，大部份的蛋白質溶解度隨溫度的上升而增加。

Ion exchange Ion exchange chromatographychromatography

RR++AA-- + B + B-- R R++BB-- + A + A--

Gel filtration Gel filtration chromatographychromatography

Gel filtration Gel filtration chromatographychromatography

V0 ： void volume Ve ： elution volume

Affinity chromatographyAffinity chromatography

重組基因法 6 His-Ni

DialysisDialysis

Cellophanenitrocellulosecollodion