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8/19/2019 Biotech Deux
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Génie génétique etbiotechnologie
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Acides nucléiques (rappel)
ADN ARNm protéinesTranscription Traduction
NucléotidesAcides aminés
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Acides nucléiques
Nucléotides :
Gr. Phosphate
Campbell 2e edition, fig. 5.29
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Acides nucléiques
Nucléotides :
Gr. Phosphate
Sucre (pentose) : Ribose pour ARNDésoxyribose pour ADN
Campbell 2e edition, fig. 5.29
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Acides nucléiques
Nucléotides :
Gr. Phosphate
Ribose pour ARN Désoxyribose pour ADN
Campbell 2e edition, fig. 5.29
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Acides nucléiques
Nucléotides :
Gr. Phosphate
Ribose pour ARN Désoxyribose pour ADN
Différence au carbone 2Campbell 2e edition, fig. 5.29
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Acides nucléiques
Nucléotides :
Gr. Phosphate
Base azotée
Sucre (pentose) : - Ribose pour ARN- Désoxyribose pour ADN
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Acides nucléiques
Bases azotées :
5 différentes qui sont regroupées en
Purines Pyrimidines
Adénine Guanine Cytosine Thymine Uracile
Campbell 2e edition, fig. 5.29
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Acides nucléiques
Bases azotées :
5 différentes qui sont regroupées en
Purines Pyrimidines
Adénine Guanine Cytosine Thymine Uracile
Seulement
ADN
Seulement
ARNCampbell 2e edition, fig. 5.29
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Acides nucléiques
+
+
+ …
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Acides nucléiques
+
+
+ …
=
Polymère: brin d’ARNou brin d’ADN
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Acides nucléiques
Dans le cas de l’ADN …
+ =
Double hélice
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Structure de l’ADN
1
23
4
5
Nucléotide
Bases
azotées
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Structure de l’ADN
Bases
azotées
Bases azotées au centre
A + TC + G
Squelette phosphate à l’extérieur
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P r e m i è r e b a s e
T r oi s i è m
e b a s e
Deuxième base
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P r e m i è r e b a s e
T r oi s i è m
e b a s e
Deuxième base
Ce code est UNIVERSEL
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Travail: Individuel
Temps: 5 minutes
À faire: Compléter l’exercice sur la transcription et la traduction des notesde cours
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BiotechnologieApplication des techniques qui utilisent des êtres vivants sous leur
forme naturelle ou modifiée à des fins pratiques ou industrielles
http://www.developpementdurablelejournal.com/local/cache-vignettes/L335xH335/arton2325-c0415.png
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Génome humain
http://www.salisbury.edu/biology/faculty/flerickson/images/Human_Genome.jpg
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Génome humain
http://www.salisbury.edu/biology/faculty/flerickson/images/Human_Genome.jpg
But: Obtenir la séquence du génome humain
Nombre de gènes prévu: 100 000
Nombre de gènes réel: 25 000
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Génome humainConséquences :
1- Technologies de séquençage furent améliorées
http://www.kikm.org/images/Human%20Genome%20Project.jpg
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Génome humainConséquences :
1- Technologies de séquençage furent améliorées
2- Meilleure compréhension de certaines séquences
http://www.cbse.ucsc.edu/research/images/human_mouse_align.jpg
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Génome humainConséquences :
1- Technologies de séquençage furent améliorées
2- Meilleure compréhension de certaines séquences
3- Émergence de nouvelles sciences (bioinformatique etpharmacogénomique)
http://www.pasteur-lille.fr/fr/recherche/u744/images/dna2.jpg
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Génome humainComment ? Microréseaux d’ADN
http://www.bio.davidson.edu/COURSES/genomics/2005/Durnbaugh/microarray.jpg
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Génome humainComment ? Microréseaux d’ADN
http://www.bio.davidson.edu/COURSES/genomics/2005/Durnbaugh/microarray.jpg
Support avec séquences d’ADN connues (sondes)
1- Couper le fragment d’ADN inconnu (enzymes de restriction)
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Génome humainComment ? Microréseaux d’ADN
http://www.bio.davidson.edu/COURSES/genomics/2005/Durnbaugh/microarray.jpg
Support avec séquences d’ADN connues (sondes)
1- Couper le fragment d’ADN inconnu (enzymes de restriction)
…ATTAAACGCCATATCGGGCCTTCGAGCTTAAAGGCCTTT
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Génome humain
Comment ? Microréseaux d’ADN
http://www.bio.davidson.edu/COURSES/genomics/2005/Durnbaugh/microarray.jpg
Support avec séquences d’ADN connues (sondes)
1- Couper le fragment d’ADN inconnu (enzymes de restriction)
…ATTAAACGCCATATCGGGCCTTCGAGCTTAAAGGCCTTT
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Génome humain
Comment ? Microréseaux d’ADN
http://www.bio.davidson.edu/COURSES/genomics/2005/Durnbaugh/microarray.jpg
Support avec séquences d’ADN connues (sondes)
1- Couper le fragment d’ADN inconnu (enzymes de restriction)
…ATTAAACGCCATATCGGGCCTTCGAGCTTAAAGGCCTTT
2- Ajouter une étiquette fluorescente aux fragments
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Génome humain
Comment ? Microréseaux d’ADN
http://www.bio.davidson.edu/COURSES/genomics/2005/Durnbaugh/microarray.jpg
Support avec séquences d’ADN connues (sondes)
1- Couper le fragment d’ADN inconnu (enzymes de restriction)
…ATTAAACGCCATATCGGGCCTTCGAGCTTAAAGGCCTTT
2- Ajouter une étiquette fluorescente aux fragments
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Génome humain
Comment ? Microréseaux d’ADN
Support avec séquences d’ADN connues (sondes)
1- Couper le fragment d’ADN inconnu (enzymes de restriction)
…ATTAAACGCCATATCGGGCCTTCGAGCTTAAAGGCCTTT
2- Ajouter une étiquette fluorescente aux fragments
3- Déposer les fragments sur la plaque (se lient aux séquencescomplémentaires)
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Génome humain
Comment ? Microréseaux d’ADN
4- Rincer et analyser les résultats à l’aide d’un ordinateur
http://www.chrisdellavedova.com/wp-content/uploads/2007/11/microarray.gif
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Travail: Équipe de deux
Temps: 10 minutes
À faire: Compléter l’exercice sur le séquençage du génome humain
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Réponse
ATTCGAGG
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Transfert de gène (clonage)
https://reader009.{domain}/reader009/html5/0728/5b5c2c1a3a92e/5b5c2c2eab34b.jpg
Clone: Organisme génétiquement identique à un autre
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Transfert de gène (clonage)Buts:
1- Fabriquer beaucoup de copies d’un gène particulier
2- Produire une protéine en grande quantité
http://www.lefermenteurabioreaction.com/files/image/qiagen-hiperfect.jpg
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Transfert de gène (clonage)À savoir :
Plasmide
ADN circulaire distinct du chromosome bactérien et capable dese répliquer
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Transfert de gène (clonage)Comment:
1- Enzyme de restriction (couper le gène d’intérêt et le plasmide )⇒ Reconnait une séquence d’ADN spécifique
= Site de restriction
http://www.gene-abc.ch/lex/images/pics2/restrict_ani.gif
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Transfert de gène (clonage)
Comment:
Ex: Enzyme reconnait séquence 5’ GAATTC 3’ et coupe
entre G et A
Site de restriction
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Travail: Individuel
Temps: 5 minutes
À faire: Compléter l’exercice sur les enzymes de restriction
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Transfert de gène (clonage)
Comment:
1- Enzyme de restriction (couper le gène d’intérêt et le plasmide )2- Lier le gène dans le plasmide (ADN ligase)
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Transfert de gène (clonage)
Comment:
1- Enzyme de restriction (couper le gène d’intérêt et le plasmide )2- Lier le gène dans le plasmide (ADN ligase)
ADN ligase
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Transfert de gène (clonage)
Comment:
1- Enzyme de restriction (couper le gène d’intérêt et le plasmide )2- Lier le gène dans le plasmide (ADN ligase)
ADN ligase
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Transfert de gène (clonage)
Comment:
1- Enzyme de restriction (couper le gène d’intérêt et le plasmide )2- Lier le gène dans le plasmide (ADN ligase)
3- Réintroduire le plasmide recombiné dans la bactérie
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Transfert de gène (clonage)
Comment:
1- Enzyme de restriction (couper le gène d’intérêt et le plasmide )2- Lier le gène dans le plasmide (ADN ligase)
3- Réintroduire le plasmide recombiné dans la bactérie
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Transfert de gène (clonage)
Comment:
1- Enzyme de restriction (couper le gène d’intérêt et le plasmide )2- Lier le gène dans le plasmide (ADN ligase)
3- Réintroduire le plasmide recombiné dans la bactérie
4- Étaler les bactéries sur des géloses nutritives et incubation
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Transfert de gène (clonage)
Comment:
1- Enzyme de restriction (couper le gène d’intérêt et le plasmide )2- Lier le gène dans le plasmide (ADN ligase)
3- Réintroduire le plasmide recombiné dans la bactérie
4- Étaler les bactéries sur des géloses nutritives et incubation
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OGM…qu’en savez-vous ?
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/6/67/Rabbit_Grasshoper_Mutant-01611-nevit.jpg
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OGM…qu’en savez-vous ?
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/6/67/Rabbit_Grasshoper_Mutant-01611-nevit.jpg
Quel pays était le plus grand producteur d’OGM en 2007 ?
a) Canadab) Chine
c) États-Unisd) Argentine
Réponse: États-Unis avec 51% de la superficie mondiale
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http://www.ogm.gouv.qc.ca/images/ogm_monde.gif
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OGM…qu’en savez-vous ?
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/6/67/Rabbit_Grasshoper_Mutant-01611-nevit.jpg
Vrai ou Faux.
L’insuline utilisée pour traiter le diabète est produite par desbactéries génétiquement modifiées ?
Réponse: Vrai
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OGM…qu’en savez-vous ?
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/6/67/Rabbit_Grasshoper_Mutant-01611-nevit.jpg
Le soja, le canola et le maïs génétiquement modifiés sont
approuvés au Canada. Depuis quand ?
a) Les années 1980b) Les années 1990c) En 2003d) Faux, ils ne sont pas approuvés au Canada
Réponse: les années 1990
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OGM…qu’en savez-vous ?
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/6/67/Rabbit_Grasshoper_Mutant-01611-nevit.jpg
En quelle année les fraises GM (ajout d’un gène de poisson
afin de résister au gel) furent-elles approuvées au Canada?
a) Les années 1980b) Les années 1990c) En 2003d) Faux, elles ne sont pas approuvés au Canada
Réponse: Faux…
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Les OGM dans les aliments
REPORTAGE
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Exemples d’OGM
http://terresacree.org/images/ogm%5B3%5D.jpg
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Exemples d’OGMTomates résistantes au sel
http://laparoleestdargent.files.wordpress.com/2007/10/pachd_tomates.jpg
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Exemples d’OGMTomates résistantes au sel
Riz produisant de la bêta-carotêne
http://www.linternaute.com/science/environnement/dossiers/06/0602-bons-ogm/riz-dore.jpg
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Exemples d’OGMTomates résistantes au sel
Riz produisant de la bêta-carotêne
Résistance aux herbicides de certaines plantes
https://reader009.{domain}/reader009/html5/0728/5b5c2c1a3a92e/5b5c2c3a8f923.jpg
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Les OGM…qu’en pensez-vous ?
http://fedlablout.cigogne.org/images/fedlablout.cigogne.org/t-ogm.jpg
À faire: Lire le texte sur les OGM dans vos notes de cours
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ClonageNaturel
http://www.anemone-clown.fr/photos/haeckel_actinies.jpg
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ClonageNaturel
Artificiel…
http://www.radio-canada.ca/jeunesse/explorateur/img/reportage/clonage_g.jpg
Utiliser une cellule somatique d’un organisme pour fabriquerun autre individu qui lui est génétiquement identique
Brebis donneused ll l
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de cellules
mammaires
Brebis donneused ll l
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Culture des cellules mammaires dans un milieu pauvre ennutriments; arrêt du cycle cellulaire et dédifférenciation du noyau
de cellules
mammaires
Brebis donneused’un ovocyte
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d un ovocyte
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Brebis donneused’un ovocyte
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d un ovocyte
Retrait du noyauFusion des cellules
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Croissance des cellules enmilieu de culture
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Croissance des cellules enmilieu de culture
Jeune embryon
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Croissance des cellules enmilieu de culture
Jeune embryon
Implantation de l’embryondans l’utérus d’une brebis
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Croissance des cellules enmilieu de culture
Jeune embryon
Implantation de l’embryondans l’utérus d’une brebis
Dolly
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Clonage thérapeutiqueCréation d’un embryon en vue d’obtenir des cellules souches
embryonnaires qui seront utilisées à des fins médicales
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Clonage thérapeutique
REPORTAGE
Découverte 18 avril 2004