Chapter 8 細胞トレーシング - Thermo Fisher Scientific...i 製品： 2012年8月現在、ライフテクノロジーズから供給している細胞培養用製品を記載しています。このカタログに記載されている製品は、すべ

細胞トレーシング Chapter 8

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製品：2012年8月現在、ライフテクノロジーズから供給している細胞培養用製品を記載しています。このカタログに記載されている製品は、すべて研究用です。これら研究用製品は、ヒト、動物の診断あるいは治療用としては承認されていません。研究用以外の目的には使用しないでください。予告なしに仕様の変更、販売を終了することがありますので、予めご了承ください。販売条件は364ページをご覧ください。

価格：記載価格は2012年8月現在の希望小売価格（単位：円）で、消費税は含まれていません。価格・包装等は予告なしに変更する場合がありますので、予めご了承ください。なお、本価格には荷造費・運送費・保険料等の諸経費は含まれておりません。実費を申し受ける場合もありますので併せてご了承ください。

バルク包装：本カタログ記載以外の包装・バルクにつきましては、当社営業部へご相談ください（TEL：03-6832-9300）。

注文：製品番号ならびに製品名が似ている製品が多々ございます。ご注文の際には正確に製品番号、製品名、サイズ、数量等をご記入ください。

配送：原則として製品は当社取扱販売店へ配送いたします。当社取扱販売店からの午後2時までのご注文を翌日お届けいたします。金曜日のご注文は月曜日にお届けします。なお、温度の影響を受けやすい－70℃保存品につきましては、ご要望に応じてお客様への直送も承っております。

直送できます：対象となる製品は、このマークが目印です。ご注文時に直送希望の旨を当社取扱販売店へご連絡ください。

返品：納品された製品がご注文内容と異なっている、あるいは梱包の不備、製品の破損、または品質上問題がある場合は速やかに対応させていただきますので、ご購入先の取扱販売店へご連絡ください。上記以外の返品はご容赦願います。また、製品番号ならびに製品名が似ている製品が多々ございます。ご返品の際は正確に製品番号、製品名、サイズ、数量等をご連絡ください。

保存：製品の品質上、保存、配送の温度管理は厳重に注意しております。納品、検収後の保存は表示温度を厳守してください。詳細は、マニュアルまたは、製品添付書をご覧ください。

機器の保証：機器については販売から1年以内は、通常の使用状況での破損または故障について保証を行ないます。保証にはご希望と状況に応じて修理、交換、支払金の返却などがございます。

ラベルをお読みください：それぞれの製品のラベルに記載の有効期限に注意し、保存に関する指示を守ってください。当社は、有効期限を過ぎた製品、あるいは不適当な保存、取扱いによって生じた問題に関しては一切責任を負いません。

毒物・劇物：毒物及び劇物取締法に基づく該当品は、本文中に以下の略号を記してありますのでご注意ください。毒物、劇物の判定は法令の改正及び新しい知見に基づき改定されることがあります。

毒劇

GHS（Global Harmonized System）ルールに基づいた製品ラベルへのピクトグラム表示を順次進めております。

カルタヘナ法：カルタヘナ法の該当の有無については弊社WEBサイト（www.lifetechnologies.com/cartagena/）をご参照、またはテクニカルサポート（TEL：0120-477-392）までお願いいたします。

MSDS（Material Safety Data Sheet）：製品のMSDSは、当社ホームページ（www.lifetechnologies.com）をご参照ください。内容についてのお問い合わせはテクニカルサポート（TEL：0120-477-392）までお願いいたします。

カスタムオーダー：当社では、下記の項目についてカスタムオーダーを受けております。お問い合わせください。・カスタムオリゴDNA　　・特注培地　　・カスタムcDNAライブラリー　　・ペプチド合成／ペプチド抗体　　など

お客様情報の登録について：1.ライフテクノロジーズ取扱い製品の中に、ライセンスに関する規定（お客様の情報をライセンス元に連絡することが義務づけられている）のあるものがあります。該当製品ご購入の際に、お客様登録用紙への記載をお願いしております。お客様登録用紙は当社取扱販売店からお渡しいたします。当社ホームページからダウンロードできます。また、各製品の使用説明書にもライセンスに関する記載がございます。ご使用前に必ずお読みください。

お客様登録：対象となる製品は、このマークが目印です。

2.毒素、他該当製品ご購入の際に、弊社指定用紙への記載をお願いしております。

その他：論文記載時の表記についてライフテクノロジーズの製品をご使用になり、論文に社名を記載される場合は“Life Technologies, Carlsbad, CA USA”とお書きください。その他関連製品については当社マーケティング部（TEL：03-6832-9350）までお問い合せください。

細胞トレーシング 209

ニューロントレーシング用カルボシアニン膜色素 211

固定可能な極性分子を用いるニューロントレーシング 213

蛍光標識デキストラン 214

タンパク質コンジュゲート 217

ニッスルとミエリン染色 218

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細胞トレーシング

Important Licensing Information: The products in this catalog may covered by one or more Limited Use Label Licenses (see the Life Technologies website www.lifetechnologies.com). By use of these products, you accept the terms and conditions of all applicable Limited Use Label Licenses. All products are for research use only, and are not intended for human or animal diagnostics, therapeutic, commercial, or other clinical uses unless otherwise specifically indicated in the applicable product Limited Use Label License(s).

記載価格は 2012年 8月現在の価格です。消費税は含まれていません。価格は予告なしに変更する場合がありますのであらかじめ了承ください。

209www.lifetechnologies.com

Cell Biology Catalog


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細胞トレーシング細胞形態の効果的なトレーサーとなるためには、蛍光プローブや他の検出可能な分子が、細胞やオルガネラの構造内に長期間維持されるだけでなく、細胞内やオルガネラ内に局在的に導入されるキャパシティがなければなりません。また、生細胞や組織と共に使用する場合には、トレーサーは生物学的に不活性で非毒性でなければならなりません。当社の蛍光トレーサーは、細胞分裂、細胞溶解あるいはリポソーム融合を追跡するのに使用することができるだけでなく、生存率を示し、毛細管の中での流れを調査し、神経細胞の結合性を特徴づけ、ギャップ結合(細隙結合)を通じた色素のトランスロケーションを研究するのに使用することができます。さらに、これらは培養細胞、組織あるいは無傷の生物中の標識細胞の動きを追跡するのに使用することができます。

短期細胞トレーシング試薬

固定不能のCellTrace™カルセインプローブは、生存率アッセイのための実績ある短期トレーサーであり、マーカーです。SYTOX® Green nucleic acid stainもしくはプロピジウムアイオダイドなどの膜非透過性核酸染色剤とペアで使用すると、このようなプローブは蛍光顕微鏡法、蛍光光度法、フローサイトメトリーを用いて生細胞と死細胞を区別する強力なツールになります。CellTrace™カルセインプローブには下記のような特長があります。

　•細胞膜が無傷の細胞にのみ保持されます。　• 細胞膜を受動拡散するアセトキシメチル(AM)エステ

ル成分を含んでいます。

　• AMエステルが分解すると、数時間効果的に保持される極性分子が生成します。

　• 製品番号C3100MPは、便利な20x50 μg包装になっています。

Jurkat細胞を1.0 μM CellTrace™ カルセイングリーンAM、CellTrace™カルセインレッド・オレンジAMまたはフルオレセインジアセテートで標識した。各試料から採取した等量の細胞をフローサイトメトリーによって30分ごとに計180分間分析した。

CellTrace™ calcein probes製　品　名 Ex/Em サイズ製品番号価格

CellTrace™ calcein blue AM 360/440 20 × 50 μg C34853 ¥56,000 15.2

CellTrace™ calcein green AM 494/517 20 × 50 μg C34852 ¥55,400 15.2

CellTrace™ calcein red-orange AM 577/595 20 × 50 μg C34851 ¥56,000 15.2

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長期細胞トレーシング試薬

チオール反応性トレーサー

当社は、数世代にわたって多くの生細胞に保持され、細胞群中で隣接する細胞にほとんど移動しない蛍光産物を生成する幾つかのチオール反応性CellTracker™プローブを開発しました。一度細胞内に入り込むと、この色素は、GSTを介した反応と考えられている反応で、膜非透過性グルタチオン蛍光色素付加体を生成します。このようなプローブは、蛍光色素の細胞保持を著しく向上させます。これらは、移植した細胞や組織に対する理想的な長期トレーサーです。CellTracker™プローブには下記のような特長があります。

　•生細胞の膜を通って自由に拡散します。　• 標識した細胞は、ローディング後少なくとも

24時間、しばしば数回の細胞分裂を経ても、蛍光を発し、生存しています。

　• ペプチド蛍光色素付加体は、ホルムアルデヒドもしくはグルタルアルデヒド固定後でも保持されます。

アミン反応性トレーサー

デザインと用途においてチオール反応性CellTracker™プローブと同じようにCellTrace™アミン反応性トレーサーは、細胞に良好に保持され、タンパク質または他のアミン含有生体分子と反応すると、アルデヒドベースの固定液で間接的に固定することができます。このようなアミン反応性トレーサーには下記のような特長があります。

　•生細胞膜を通って自由に拡散します。　• 細胞内エステラーゼがCellTracker™プローブの酢酸エステル基を切断し、非常に蛍光の強いアミン反応性フルオロフォアが生成します。

　• 胚発生時の細胞が移動し分裂する間でも、細胞内に良好に保持される色素・タンパク質付加体が生成します1, 2。

参考文献1. J Cell Biol 101, 610 (1985); 2. J Cell Biol 103, 2649 (1986).

CellTracker™グリーンCMFDAで標識した無傷の海底堆積物コア試料中の生物顕微鏡写真より、深海底生有孔虫である微生物Leptohalysis scottiが認められる。Joan M.

Bernhard氏(Wadsworth Center, New York State Department of Health)よりデータ提供。

製　品　名 Ex/Em サイズ製品番号価格

Thiol-reactive long-term cell tracers

CellTracker™ Blue CMAC 353/466 5 mg C2110 ¥39,900 10.1, 14.2

CellTracker™ Blue CMF2HC 371/464 5 mg C12881 ¥39,900 10.1, 14.2

CellTracker™ Green CMFDA 492/517 1 mg C2925 ¥50,200 14.2, 15.2, 15.6, 20.2

CellTracker™ Green CMFDA 492/517 20 × 50 μg C7025 ¥59,600 14.2, 15.2, 15.6, 20.2

CellTracker™ Orange CMTMR 541/565 1 mg C2927 ¥50,200 14.2

CellTracker™ Orange CMRA 548/576 20 × 50 μg C34551 ¥59,600 14.2

CellTracker™ Red CMTPX 577/602 20 × 50 μg C34552 ¥59,600 14.2

CellTracker™ Violet BMQC 415/516 5 × 100 μg C10094 ¥27,200 14.2

Amine-reactive long-term cell tracers

CFSE (CFDA-SE) 492/517 25 mg C1157 ¥46,000 14.2, 15.4, 20.2

Vybrant® CFDA SE Cell Tracer Kit 492/517 1 kit V12883 ¥42,000 14.2, 15.4

CellTrace™ CFSE Cell Proliferation Kit* 492/517 1 kit C34554 ¥30,000 14.2, 15.4

CellTrace™ Oregon Green® 488 carboxylic acid

diacetate, succinimidyl ester492/518 20 × 50 μg C34555 ¥62,000 14.2, 15.4

SNARF®-1 carboxylic acid, acetate, succinimidyl

ester576/635 10 × 50 μg S22801 ¥67,900 14.2, 15.4, 20.4

CellTrace™ Far Red DDAO-SE 646/659 20 × 50 μg C34553 ¥60,000 14.2

* Optimized for tracing via flow cytometry.



細胞トレーシング／ニューロントレーシング用カルボシアニン膜色素

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ニューロントレーシング用カルボシアニン膜色素カルボシアニンは最も強力な蛍光色素で、いくつかの研究領域で有用なツールであることが証明されています。最も広く用いられているカルボシアニン膜プローブはオクタデシル(C18)インドカルボシアニンのDiIおよびDiD、オキサカルボシアニンのDiOです。DiOは緑色、DiIは橙赤色、DiDは近赤外の蛍光を発します。当社のVybrant®マルチカラー細胞標識キットにはDiI、DiOおよびDiD色素各々の可溶化試料と細胞や組織を染色するためのプロトコールが含まれています。カルボシアニン色素は単品製品としてご購入いただくこともできます。CM-DiIはチオール反応性クロロメチル成分を有するDiIの誘導体です。固定と浸透化段階の間、幾つかの細胞には十分に保持され、DiIよりもやや水溶性が高いので、細胞懸濁液と固定細胞用の染色溶液の調製が容易です。CM-DiIは当社のVybrant® CM-DiI細胞標識溶液とNeuroTrace® CM-DiI組織標識ペーストに含まれています。カルボシアニン色素には下記のような特長があります。

　•周囲に拡散し、細胞全体を染色します。　•水中では弱い蛍光を発します。　•吸光係数が高く、非常に明るいシグナルを発します。　•細胞膜に良好に保持されます。　•他の細胞にはほとんど移動しません。

FAST DiI™およびFAST DiO™色素

適用した場所からニューロン末端へ脂質親和性カルボシアニントレーサーが拡散するには数日から数週間かかります1。この拡散プロセスは、プローブのアルキルテールに不飽和を導入すると促進されるようです。当社のFAST DiI™色素2

～4

とFAST DiO™色素5は、DiIとDiOの飽和したオクタデシルテール(C18:0)の代わりに二不飽和リノレイル(C18:2)テールを持っています。不飽和類似化合物の移動は、DiIとDiOの移動に比べると少なくとも50%速いと報告されています。

参考文献1. Trends Neurosci 12, 333 (1989); 2. Neuroreport 8, 3965 (1997); 3. Biophys J 70, 988 (1996); 4. J Cell Biol 134, 1427 (1996); 5. Neuron 17, 91 (1996).

NeuroTrace®標識ペースト

NeuroTrace® DiO、DiI、CM-DiI、DiD組織標識ペーストは、それぞれDiO、DiI、CM-DiI、DiDを不活性な耐水ゲルに混合したものです。便利なNeuroTrace®マルチカラー組織標識キットでは、DiOペースト、DiIペーストおよびDiDペーストがセットとなっています。これらペーストは、供給されたままの状態ですぐに使用でき、針の先端を用いて生検体や固定した組織検体を直接標識することができます。この使用方法では、色素の神経束への透過と、軸索の表面上と表面下両方の標識が改善されます。同様の状況に、色素結晶を直接適用したり、あるいは濃縮溶液を微量注入した場合には、表面上のニューロンしか標識されません。またこの標識方法は、色素輸送率を50～ 80%上昇させることが明らかにされています。

逆行性輸送によって標識された新生マウスの視床底腹側核のニューロン。DiI(DiIC18(3)、緑色-疑似カラー )とDiD(DiIC18(5)、赤色-疑似カラー )のペア色素沈着物を注入し、固定し、インキュベートして、色素を逆行性輸送させた。Ariel Agmon氏(West Virginia University)よりデータ提供。

DilC(3)Dilで標識されたイカ胚の後部ヒレ。ヒレ周辺の細胞体に沿って並ぶ、繊毛感覚ニューロンの密度により、選択的に染色されている。溶液の中に胚を浸すことによって染色された（インジェクションを使用していない）。Mount Holyoke 大学Rachel Fink氏よりデータ提供。

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製　品　名 Ex/Em Product Notes サイズ製品番号価格

DiI and analogs

DiIC18(3) “DiI” 549/565Red-orange–fluorescent lipophilic probe; widely used as

a neuronal tracer 100 mg D282 ¥54,400 12.4, 13.4, 14.4

DiIC18(3) “DiI” 549/565Large-crystal form of DiI to facilitate direct application of

crystals to membranes 25 mg D3911 ¥42,900 13.4, 14.4

DiIC16(3) 549/565Shorter-chain DiI analog that may incorporate into membranes

more easily than DiI 100 mg D384 ¥54,400 12.4, 13.4, 14.4

DiIC12(3) 549/565Shorter-chain DiI analog that may incorporate into membranes

more easily than DiI 100 mg D383 ¥54,400 13.4, 14.4

FAST DiI™ oil 549/564Unsaturated DiI analog that reportedly migrates ~50% faster than DiI within membranes

5 mg D3899 ¥54,400 13.4, 14.4

FAST DiI™ Solid 549/564Solid form to facilitate direct application of crystals to

membranes 5 mg D7756 ¥54,400 13.4, 14.4

Δ9-DiI oil 549/564Unsaturated DiI analog that may migrate faster than DiI

within membranes 25 mg D3886 ¥54,400 13.4, 14.4

CellTracker™ CM-DiI 553/570Chloromethylated DiI analog; potentially retained after fixation

and permeabilization 20 × 50 μg C7000 ¥50,200 13.4, 14.4

CellTracker™ CM-DiI 553/570Chloromethylated DiI analog; potentially retained after fixation

and permeabilization 1 mg C7001 ¥43,900 13.4, 14.4

SP-DiIC18(3) 556/573Anionic DiI analog with enhanced solubility in culture

medium 5 mg D7777 ¥54,400 13.4, 14.4

DiIC18(3)-DS 555/570Anionic DiI analog with enhanced solubility in culture

medium5 mg D7776 ¥54,400 13.4, 14.4

DiD and analogs

DiIC18(5) oil “DiD” 644/665Useful in autofluorescent samples and as a second tracer in

combination with DiI 25 mg D307 ¥36,700 13.4, 14.4

DiIC18(5) “DiD” 644/663Solid form to facilitate direct application of crystals to

membranes 10 mg D7757 ¥29,400 13.4, 14.4

DiIC18(5)-DS 650/670Anionic DiD analog with enhanced solubility in culture

medium 5 mg D12730 ¥54,400 13.4, 14.4

DiR

DiIC18(7) “DiR” 748/780Absorption and emission in the near-infrared region, where many tissues are optically transparent

10 mg D12731 ¥39,900 13.4, 14.4

DiO and analogs

DiOC18(3) “DiO” 484/501 Widely used as a second tracer in combination with DiI 100 mg D275 ¥54,400 13.4, 14.4

DiOC16(3) 484/501Shorter-chain DiO analog that may incorporate into membranes more easily than DiO

25 mg D1125 ¥54,400 13.4, 14.4

FAST DiO™ Solid 484/499Unsaturated DiO analog that reportedly migrates ~50% faster than DiO within membranes

5 mg D3898 ¥54,400 13.4, 14.4

SP-DiOC18(3) 497/513 Anionic DiO analog with enhanced water solubility 5 mg D7778 ¥54,400 13.4, 14.4

DiA and analogs

4-Di-16-ASP “DiA” 480/540* Useful as a second tracer with DiI 25 mg D3883 ¥46,100 13.4, 14.4

FAST DiA™ Solid 480/540*Solid form to facilitate direct application of crystals to

membranes 5 mg D7758 ¥54,400 13.4, 14.4

4-Di-10-ASP 480/540*Shorter-chain DiA analog that may incorporate into membranes

more easily than DiA 25 mg D291 ¥46,100 13.4, 14.4

NeuroTrace® tissue labeling pastes

NeuroTrace® DiI tissue-labeling paste

549/565Can be applied directly to live or fixed tissue specimens using

the tip of a needle500 mg N22880 ¥32,600 14.4

NeuroTrace® CM-DiI tissue-labeling paste



NeuroTrace® DiO tissue-labeling paste



NeuroTrace® Multicolor Tissue-Labeling Kit

multipleContains 500 mg of DiO, DiI, and DiD labeling pastes for

multicolor tracing1 kit N22884 ¥77,200 14.4

* Optimized for tracing via flow cytometry.



8ニューロントレーシング用カルボシアニン膜色素／

固定可能な極性分子を用いるニューロントレーシング

固定可能な極性分子を用いるニューロントレーシング当社は、細胞トレーサーとして使用することができる広範囲で高い水溶性色素と他の検出可能なプローブを用意しています。ほとんどの場合、これら水溶性プローブの極性は高すぎて、細胞膜を通って受動的に拡散することができません。そのため、色素を細胞にロードするには特別な方法を用いなければなりません。これには、微量注入、ピノサイトーシス、あるいは、細胞膜を一時的に透過性にする方法1などがあります。

ヒドラジド誘導体

蛍光を発するヒドラジドおよびビオシチン誘導体は、細胞トレーシングに使用されている最も一般的な極性分子です。アミン含有誘導体は、一般的なアルデヒドをベースとする固定液によって細胞と組織に固定することができます。それによって、色素は、その後の試料処理後も保持されます。当社では、Alexa Fluor®色素にコンジュゲートさせたヒドラジドを提供しています。これは光安定性が高く、画像取得時に露光時間が長くても優れた明るさを示し、細かな構造を検出することができます。これら色素は高い水溶性を有しています(通常8%以上)。より使いやすい製品として、200 mM KClで溶解したAlexa Fluor®色素-ヒドラジドコンジュゲートを3種ご用意しております。これは、微量注入実験にすぐに使用できます。ヒドラジン誘導体であるルシファーイエローはニューロンの形態研究に人気の高いツールです。これはジアミノベンジジン(DAB)を電子顕微鏡検査用の不溶性の電子密度反応産物へと光変換(photoconvert)させるのに使用することができます2

、3。当社ではルシファーイエローを、カリウム塩と、より溶けやすいリチウム塩に加えて、微量注入用に100 mM

水溶液タイプの計3種類を提供しています。

ビオシチン誘導体

ビオシチン(ε-ビオチノイル-L-リジン)と蛍光ビオシチン誘導体も一般的な微量注入可能な順行性ニューロントレーサーです。この水溶性トレーサーは、しばしば電気生理学的測定中に、ニューロンの機能と構造および連絡性を相互に関連付けるために、ニューロンを標識するのに使用されます4

、5。ビオシチン誘導体は全て一級アミンを含むので、ホ

ルムアルデヒドもしくはグルタルアルデヒドで細胞に固定することができ、その後、アビジンまたはストレプトアビジンプローブを用いて検出することができます。当社の、明るい光安定性のビオシチンのAlexa Fluor®コンジュゲートも、固定試料あるいは非固定試料で直接観察することができます。

参考文献1. Methods Cell Biol 29, 153 (1989); 2. J Neurosci Methods 41, 45 (1992); 3. J Neurosci Methods 33, 207 (1990); 4. Nature 377, 734 (1995); 5. J Neurosci 14, 4338 (1994).

（上）ルシファーイエロー CHまたはスルホローダミン101のいずれかを微量注入したAplysia californicaの左上四分円ニューロン培養物。オーバーラップしている突起が広範囲に配列しているのを示す(J. Neurophysiol 66, 316 (1991))。David Kleinfeld氏 (AT & T Bell Laboratories)とBrian Salzberg氏 (University of

Pennsylvania School of Medicine)よりデータ提供。

（左）Alexa Fluor® 568ヒドラジド(上の細胞、赤色)、Alexa Fluor® 488ヒドラジド(中央の細胞、緑色)、あるいはAlexa Fluor® 488ヒドラジドとAlexa Fluor® 568ヒドラジド両方(下の細胞、共局在部位では黄色)を注入した3つのウサギ網膜神経節細胞。Michiel van Wyk氏(University of Queensland, Australia)よりデータ提供。

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ラベル Ex/Em サイズ製品番号価格

Hydrazide derivatives (fixable)

Alexa Fluor® 350 345/445 5 mg A10439 ¥36,600 3.3, 14.3

Alexa Fluor® 488 493/517 1 mg A10436 ¥36,600 3.3, 14.3

Alexa Fluor® 555 554/567 1 mg A20501MP ¥36,600 3.3, 14.3

Alexa Fluor® 568 576/599 1 mg A10437 ¥36,600 3.3, 14.3

Alexa Fluor® 568 576/599 125 μl* A10441 ¥34,400 14.3

Alexa Fluor® 594 588/613 1 mg A10438 ¥36,600 3.3, 14.3

Alexa Fluor® 594 588/613 125 μl* A10442 ¥34,400 14.3

Alexa Fluor® 633 624/643 1 mg A30634 ¥37,000 3.3, 14.3

Alexa Fluor® 647 649/666 1 mg A20502 ¥36,600 3.3, 14.3

Lucifer yellow CH (lithium salt) 428/536 25 mg L453 ¥19,100 3.3, 14.3, 16.1

Lucifer yellow CH (lithium salt) 428/536 100 μl* L12926 ¥37,700 14.3

Lucifer yellow CH (potassium salt) 428/536 25 mg L1177 ¥19,100 14.3

Biocytin derivatives (fixable)

Alexa Fluor® 488 494/520 250 μg A12924 ¥36,600 4.3, 14.3

Alexa Fluor® 546 556/572 250 μg A12923 ¥42,300 4.3, 14.3

Alexa Fluor® 594 591/618 250 μg A12922 ¥42,300 4.3, 14.3

Biocytin NA 100 mg B1592 ¥22,400 4.2, 14.3

Other polar tracers (nonfixable)

Aminostilbamadine 361/536 10 mg A22850 ¥33,600 14.3

hydroxystilbamidine 345/450 10 mg H22845 ¥33,600 8.1, 14.3

Sulforhodamine 101 586/605 25 mg S359 ¥20,100 14.3, 16.1

True blue chloride 375/403 5 mg T1323 ¥39,900 14.3

* For microinjection.

蛍光標識デキストランデキストランは、中から高分子量で、水溶性に優れ、毒性の低い親水性多糖類です。デキストランは、生物には非常に稀なポリ-(α-D-1,6-グルコース)結合を持っているので、ほとんどの細胞グリコシダーゼによる分解に抵抗性を示すため、生物学的にはデキストランは不活性です。これはまた、免疫原性が低いという特徴があります。蛍光デキストラン、特にフルオレセインとローダミンのコンジュゲートは、細胞系譜をトレースするために広く使用されています1

～3。こ

の手法では、デキストランを発達中の胚のひとつの細胞に微量注入すると、その細胞と娘細胞がどうなるかin vivoで追跡することができます。この伝統的な系譜トレーシングを行なうために必要な試薬は、当社の便利なVybrant®細胞系譜トレーシングキットに含まれています。アルデヒド固定可能なカスケードブルー標識デキストランをまず、必要な親細胞に注入します。分化後、低レベルのシグナルを、抗カスケードブルー抗体と当社のAlexa Fluor® 546色素にコンジュゲートした二次抗体によって増幅します。幾つかの用途では、分析を行なうために、デキストラントレーサーを続いてホルムアルデヒドまたはグルタルアルデヒドで処理する必要があります4, 5。その為、当社のデキストランコンジュゲートのほとんどに対して、「リジン固定可能な」製品を提供しています。このデキストランは、リジン残基と共有結合し、それによって、デキストラントレーサーは、アルデヒドを介した固定によって周囲の生体分子とコンジュゲートし、その後、免疫組織化学法や超微細構造法によって検出することができます。デキストランの正味荷電（Net charge）は蛍光色素とコンジュゲートの調製法に依存しています。当社は、天然のデキストランをFITCのようなイソチオシアネート誘導体と反応させるのではなく、水溶性アミノデキストランを適切な色素のサクシニミジルエステルと反応させることによって、ほとんどのデキストランを調製しています。この方法を用いると、より優れたアミン選択性が得られ、アミド結合が得られます。これはイソチオシアネートから形成される対応するチオ尿素よりもやや安定性が高くなっています。ローダミングリーンとAlexa Fluor® 488のコンジュゲートを除き、色素をひとたび添加すると、デキストラン未反応のアミンがキャップされ、中性デキストランもしくは陰イオンデキストランが生成されます。ローダミングリーンとAlexa Fluor® 488デキストランの場合には、デキストラン上の未反応のアミンは色素コンジュゲート後にもキャップされません。Alexa Fluor®、カスケードブルー、ルシファーイエロー、フルオレセイン、オレゴングリーンデキストランは、もともと陰イオン性ですが、両性イオン性ローダミンB、テトラメチルローダミン、テキサスレッド色素で標識したデキストランのほとんどは本質的に中性です。

参考文献1. Nature 344, 431 (1990); 2. Science 252, 569 (1991); 3. Development 108, 581 (1990); 4. Brain Res 526, 127 (1990); 5. Brain Res Bull 25, 139 (1990).



固定可能な極性分子を用いるニューロントレーシング／蛍光標識デキストラン

8ラベル Fixable Common Name サイズ製品番号価格

3,000 MW dextran conjugates

Alexa Fluor® 488 No 2 mg D34682 ¥24,300 14.5

Alexa Fluor® 680 No 2 mg D34681 ¥24,300 14.5

Amino Yes 100 mg D3330 ¥22,200 14.5

Biotin Yes BDA-3000 10 mg D7135 ¥50,200 4.3, 14.5

Cascade Blue® Yes 10 mg D7132 ¥50,200 14.5

Fluorescein No 10 mg D3305 ¥43,900 14.5, 20.4

Fluorescein Yes 10 mg D3306 ¥50,200 14.5

Fluorescein and biotin Yes micro-emerald 5 mg D7156 ¥59,600 4.3, 14.5

Rhodamine Green™ No 5 mg D7163 ¥51,300 14.5

Tetramethylrhodamine No 10 mg D3307 ¥43,900 14.5

Tetramethylrhodamine Yes 10 mg D3308 ¥50,200 14.5

Tetramethylrhodamine and

biotinYes micro-ruby 5 mg D7162 ¥59,600 4.3, 14.5

Texas Red® No 10 mg D3329 ¥43,900 14.5

Texas Red® Yes 10 mg D3328 ¥50,200 14.5


Alexa Fluor® 488 Yes 5 mg D22910 ¥59,200 14.5







Amino Yes 1 g D1860 ¥30,500 14.5

蛍光デキストランコンジュゲートを注入した32細胞期アフリカツメガエル（Xenopus laevis）胚の3つの背側卵割球の系譜追跡。第1層背側（A1）卵割球には10,000 MWリジン-固定可能蛍光デキストランを注入し、第2層背側（B1）卵割球および第3層背側（C3）卵割球にはそれぞれ、リジン-固定可能Texas

RED® 10,000 MWデキストランおよびリジン-固定可能Cascade Blue® 10,000

MWデキストランを注入した。胚1つに色素を注入し、直ちに固定して画像化した（左）。右の画像は、同じように色素を注入したのち10細胞期に固定して画像化した胚。カリフォルニア大学バークリー校のMarie Vodicka氏よりデータ提供。

リジン-固定可能3000 MW Texas Red®デキストランで標識している雄性セイヨウカダヤシ（Gambusia affinis）の脊髄全載標本にみる二次運動ニューロン。Bipinnate inclinator musclesにデキストラン結晶を加えたところ、その色素は軸索から細胞体と樹状突起へ輸送された。蛍光顕微鏡、Texas Red用バンドパス蛍光フィルターで運動ニューロンの画像を取得。University of Nebraska

Medical CenterのE. Rosa-Molinar氏とCreighton大学のBernd Fritzschよりデータ提供。

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ラベル Fixable Common Name サイズ製品番号価格

Biotin Yes BDA-10,000 25 mg D1956 ¥43,900 4.3, 14.5

Biotin YesNeuroTrace® BDA-10,000

Neuronal Tracer Kitkit N7167 ¥59,600 14.5

BODIPY® FL Yes 5 mg D7168 ¥43,900 14.5

Cascade Blue® Yes 25 mg D1976 ¥43,900 14.5


Fluorescein Yes fluoro-emerald 25 mg D1820 ¥43,900 14.5

Fluorescein and biotin Yes mini-emerald 10 mg D7178 ¥59,600 4.3, 14.5

Lucifer yellow Yes 25 mg D1825 ¥32,600 14.5

Oregon Green® 488 No 5 mg D7170 ¥43,900 14.5, 20.4

Oregon Green® 488 Yes 5 mg D7171 ¥50,200 14.5

Rhodamine B No 25 mg D1824 ¥32,600 14.5

Rhodamine Green™ Yes 10 mg D7153 ¥59,600 14.5



Tetramethylrhodamine Yes fluoro-ruby 25 mg D1817 ¥43,900 14.5

Tetramethylrhodamine and

biotinYes mini-ruby 10 mg D3312 ¥59,600 4.3, 14.5

Texas Red® No 25 mg D1828 ¥32,600 14.5

Texas Red® Yes 25 mg D1863 ¥43,900 14.5


Amino Yes 1 g D1861 ¥30,500 14.5




Texas Red® No 25 mg D1829 ¥32,600 14.5


Amino Yes 1 g D1862 ¥30,500 14.5





Oregon Green® 488 Yes 5 mg D7173 ¥50,200 14.5


Rhodamine B No 25 mg D1841 ¥32,600 14.5



Texas Red® No 25 mg D1830 ¥32,600 14.5

Texas Red® Yes 25 mg D1864 ¥43,900 14.5


Amino Yes 100 mg D7144 ¥22,200 14.5



2,000,000 MW dextran conjugates





蛍光標識デキストラン／タンパク質コンジュゲート

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タンパク質コンジュゲート多分散デキストランとは異なり、蛍光タンパク質トレーサーは、かなり明確な分子量を有します。こうしたトレーサーの用途のいくつかはデキストラントレーサーとほぼ同じですが、タンパク質コンジュゲートのほうがプロテオリシスの影響を受けやすいと思われます。蛍光タンパク質トレーサーのうち非常に広く用いられているもののひとつに蛍光標識したコレラ毒素サブユニットB（CTB）があり、ニューロンの逆行性標識に使われています。当社のCTBコンジュゲートは組換えコレラ毒素サブユニットBから作られており、毒素サブユニットAを全く含みません。Alexa Fluor®タンパク質コンジュゲートはいずれも優れた蛍光強度を有し、汎用性のあるトレーサーになっています。

ラベルサイズ製品番号価格

Bovine serum albumin (BSA) conjugates

Alexa Fluor® 488 5 mg A13100 ¥39,400 14.7

Alexa Fluor® 555 5 mg A34786 ¥39,400 14.7

Alexa Fluor® 594 5 mg A13101 ¥39,400 14.7

Alexa Fluor® 647 5 mg A34785 ¥39,400 14.7

Alexa Fluor® 680 5 mg A34787 ¥39,400 14.7

BODIPY® FL 5 mg A2750 ¥21,200 14.7

DNP 5 mg A23018 ¥21,200 14.7

Fluorescein 5 mg A23015 ¥21,200 14.7

Tetramethylrhodamine 5 mg A23016 ¥21,200 14.7

Texas Red® 5 mg A23017 ¥21,200 14.7

Ovalbumin conjugates

Alexa Fluor® 488 2 mg O34781 ¥20,700 14.7

Alexa Fluor® 555 2 mg O34782 ¥20,700 14.7

Alexa Fluor® 594 2 mg O34783 ¥20,700 14.7

Alexa Fluor® 647 2 mg O34784 ¥20,700 14.7

Fluorescein 5 mg O23020 ¥21,200 14.7

Texas Red® 5 mg O23021 ¥21,200 14.7

Cholera toxin subunit B conjugates

Alexa Fluor® 488100 μg C34775 ¥36,300 7.7, 14.7, 16.1

500 μg C22841 ¥115,600 7.7, 14.7, 16.1

Alexa Fluor® 555100 μg C34776 ¥36,300 7.7, 14.7, 16.1

500 μg C22843 ¥115,600 7.7, 14.7, 16.1

Alexa Fluor® 594100 μg C34777 ¥36,300 7.7, 14.7, 16.1

500 μg C22842 ¥115,600 7.7, 14.7, 16.1

Alexa Fluor® 647 100 μg C34778 ¥36,300 7.7, 14.7, 16.1

Biotin-XX 100 μg C34779 ¥36,700 4.3, 7.7, 14.7, 16.1

Horseradish peroxidase 100 μg C34780 ¥36,700 7.7, 14.7, 16.1

Other protein conjugatesProtein ラベルサイズ製品番号価格

Histone H1 (calf thymus) Alexa Fluor® 488 1 mg H13188 ¥31,200 12.5, 16.1

Parvalbumin (codfish) Alexa Fluor® 488 1 mg P23012 ¥32,200 14.7

Trypsin inhibitor (soybean) Alexa Fluor® 488 1 mg T23011 ¥26,900 14.7, 16.1

SAIVI™ injectable contrast reagents

Bovine serum albumin Alexa Fluor® 680 1 ml S34788 ¥76,800 14.7

Human serum transferrinAlexa Fluor® 680 1 ml S34790 ¥101,700 14.7

Alexa Fluor® 750 1 ml S34791 ¥101,700 14.7

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ニッスルとミエリン染色NeuroTrace®蛍光ニッスル染色剤

Franz Nisslが100年以上も前に記述しているニッスル物質は、ニューロン固有のものです。驚くほどの量の粗面小胞体で構成されているニッスル物質は、ニューロンの異常に高いタンパク質合成能力を反映しています。様々な蛍光性あるいは発色性「ニッスル染色剤」がこの対比染色に使用されています。これには、アクリジンオレンジ、エチジウムブロマイド、クレシルバイオレット、メチレンブルー、サフラニン-O、トルイジンブルーOがあります。当社は、ニューロン染色用に広範囲なスペクトルの蛍光色を提供するばかりでなく、従来の色素よりもはるかに感受性の高い5種類の蛍光ニッスル染色剤を開発しました。

FluoroMyelin™ミエリン染色

フルオロミエリン（レッドとグリーン）はミエリンを特異的に染色します。フルオロミエリングリーンと神経細胞本体染色用のニューロトレースレッドニッスル染色剤と核染色用のDAPIがセットになったBrainStainキットもあり、脳切片の染色に有用です。

　• 従来のクロモジェニック法（抗MBP抗体やLoyez法やSchmued's金塩素法）よりも時間とコストパフォーマンスに優れています。

　• ラベリングのステップは約20分と短時間です。

抗ヒト神経細胞タンパク質HuC/HuDマウスモノクローナル抗体は、ヒト、マウス、鳥類、ゼブラフィッシュ、両生類の神経細胞に特異的な同定用にお使いいただけます。embryonic lethal abnormal visual(ELAV)ファミリーのRNA結合性タンパク質である神経タンパク質HuDやHuCやHel-N1

を認識します（HuRなどは認識しません）。これらの抗原は、神経細胞発生の極初期から発現され始めます。当社はこの抗体のビオチンコンジュゲートも扱っております。

NeuroTrace® fluorescent Nissl stainsColor Ex/Em サイズ製品番号価格

Blue 435/455 1 ml N21479 ¥32,600 8.1, 12.5, 14.3

Green 500/525 1 ml N21480 ¥32,600 8.1, 12.5, 14.3

Yellow 515/535 1 ml N21481 ¥32,600 8.1, 12.5, 14.3

Red 530/615 1 ml N21482 ¥32,600 8.1, 12.5, 14.3

Deep red 640/660 1 ml N21483 ¥32,600 8.1, 12.5, 14.3

FluoroMyelin™ myelin stains

Green 479/598 1 ml F34651 ¥43,900 14.4

Red 558/654 1 ml F34652 ¥43,900 14.4

BrainStain™ Imaging KitContents 製品番号価格

Contains FluoroMyelin™ Green, NeuroTrace® 530/615 red Nissl stain, and DAPI B34650 ¥80,300 14.4

NeuroTrace® 530/615赤色蛍光ニッスル染色剤で標識した神経体細胞を示すマウス小脳切片合成画像。核はDAPIで対比染色した。

マウス間脳と小脳の横断面をFluoroMyelin Green と

FluoroMyelin Redで各々を標識。NeuroTrace®ニッスル染色とDAPIで対比染色。

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Chapter 8 細胞トレーシング - Thermo Fisher Scientific...i 製品： 2012年8月現在、ライフテクノロジーズから供給している細胞培養用製品を記載しています。このカタログに記載されている製品は、すべ