CHLAMIDIA

Familia de bacterias intracelulares obligadas.

Afinidad por células epiteliales de las mucosas.

Inmóviles. Poseen proyecciones cilíndricas que se unen a receptores de su célula blanco.

Chlamidias

Durante mucho tiempo se pensó que eran virus, esto no es así debido a:

-Poseen envoltura celular similar a Gram negativas

-Contienen ADN y ARN.

-Poseen ribosomas procarióticos.

-Son susceptibles a una amplia gama de antibióticos.

Clasificación

La familia se divide en dos géneros:

Chlamydia

Chlamydophila

Chlamydia agrupa 3 especies:

Trachomatis Suis Muridarum

Chlamydophila incluye 6 especies:- Psitacci (aves-hombre)- Abortus (bovinos-hombre)- Felis (felinos)- Pneumoniae (hombre-cobayos-koalas)- Pecorum (cerdos-rumiantes)- Caviae (cobayos)

Ciclo de desarrollo

Existen 2 morfologías diferentes:

cuerpo elemental

cuerpo reticulado

Cuerpo elemental

Cuerpo esférico, pequeño y denso de 0.2 a 0.4 micras de diámetro.

Es la forma infecciosa responsable de la fijación a la célula blanco.

Está rodeado por una doble envoltura trilaminar, una interna o membrana citoplasmática y otra externa que corresponde a la pared celular bacteriana.

Esta pared tiene una composición química similar a la de las bacterias gram negativas.

Cuerpo elemental

Tiene muy poco o nada de ácido murámico, contiene una gran cantidad de proteínas ricas en aminoácidos azufrados que forman puentes disulfuros que son los responsables de su rigidez y escasa permeabilidad lo que le permite la supervivencia en su corta vida extracelular

ADN compacto, molécula circular cerrada.

Cuerpo reticulado

Es la forma intracelular, metabólicamente activo, que se divide por fisión binaria.

Es más grande que el cuerpo elemental, 0.6 a 1 micra de diámetro, pero de pared más fina, tiene un aspecto granular por el desenrollamiento del ADN y mayor nº de ribosomas (mayor activ.biosintética)

Fases del ciclo de desarrollo

Fijación y penetración del CE Transición del CE metabólicamente

inerte en el CR metabólicamente activo Desarrollo y división del CR que produce

una progenie abundante Maduración de los CR no infecciosos a

CE infecciosos Liberación de los CE de la célula

huésped

Fijación y penetración

Adhesión a la célula blanco, participan LPS y MOMP (mayor proteína de membrana externa).

Ingestión por parte de la célula. Fusión del fago-lisosoma con los

macrófagos

Transición de CR a CE

Formación del fagosoma Inicio de síntesis proteica. Las momp pasan de su forma polimérica

a monomérica, se forman poros por donde pasan los nucleótidos transportadores de energía.

Desarrollo y división de los CR

A las 12 horas de la infección todas las chlamidias están en forma de cuerpo reticulado.

Se dividen por fisión binaria.

Maduración de CR a CE

Cuando los nutrientes de la célula hospedadora se agotan, las MOMP vuelven a su estado polimérico formando puentes disulfuro.

Liberación de los CE

Se produce entre las 48 y 72 horas. Puede darse por lisis celular (C.psitacci)

o por exocitosis (C. trachomatis).

Pueden liberarse intactos o rodeados por una membrana agrupados como una pequeña colonia.

Estructura antigénica

Todos los miembros de la familia presentan una serie de antígenos comunes, el más importante es el LPS, que posee además del lípido A, 3 moléculas de ácido 3 Keto-2 desoxioctulosónico (KDO).

Carecen del polisacárido O

Estructura antigénica

Los antígenos proteicos están constituidos por las MOMP : proteínas ricas en aa azufrados

actividad de porina

función adhesiva

Estructura antigénica La proteína Omp2 es la segunda más

importante de la pared celular, solo se encuentra en el CE, por poseer restos azufrados le confiere resistencia y rigidez.

La Omp3 es una lipoproteína, que sirve de enlace entre la Omp2 y los fosfolípidos de la membrana externa.

La POMP es exclusiva de la C.abortus, la cual es altamente inmunógena.

Obtención de las muestras

Eliminar secreciones y exudados. Realizar hisopados vigorosos. Colocar en medio de transporte. Enviar refrigerado a 4ºC y procesar

dentro de las 48 horas, caso contrario congelar a -70ºC.

Toma de muestras

Para C. tracomatis: material ocular, urogenital, rectal, nasofaríngeo.

Para C. psitacci: sangra, esputo o biopsia de tejidos.

Para C. pneumonie: hisopados de orofaringe posterior.

Diagnóstico de laboratorio

Solo pueden cultivarse y aislarse en células eucariotas (Intracelular obligado)

Proliferan en la membrana del saco vitelino del embrión de pollo (de 6 a 8 días).

Ratón y cobayo: animales más idóneos para inocular (IP-IN-IC)

Diagnóstico

Forma más práctica y de uso más frecuente:

uso de líneas celulares

(Mc Coy, Hela o Vero)

fibroblastos de embrión de

pollo

Observación

Se realizan tinciones como las de Jiménez o Giemsa.

Se observan también por Inmunofluorescencia o indirectamente por métodos serológicos como fijación de complemento o PCR.

Afecciones que causan

C. trachomatis:

Afecciones en los ojos:

-“tracoma”(queratatoconjuntivitis).

Afecciones venéreas:

-linfogranuloma venéreo

-vaginitis-esterilidad

Afecciones que causan

C. psitacci:

Psitacosis (ornitosis), zoonosis.

Aves portadoras: loros, palomas, patos, pollos, pavos, cotorras.

Puerta de entrada: aparato respiratorio por inhalación de los m.o a partir de aves infectadas o sus excrementos

Patologías que producen Porcinos (diarrea-neumonía), felinos

(neumonía-conjuntivitis), equinos (abortos-diarrea), ovinos (abortos, diarrea, neumonía), hombre (fiebre, mialgias, cefalea frontal, neumonía, conjuntivitis, rinitis, abortos, puede llevar a la muerte), bovinos (abortos, disminución en la producción de leche, vesiculitis, encefalomielitis).

RICKETSIACEAE:

Son bacterias parásitas obligadas de células eucariotas, siendo sus hospedadores vertebrados o invertebrados (garrapatas, ácaros, pulgas y piojos).

Son pleomórficos, con formas bacilares o cocoides, cuyo tamaño varía de 0.3 a 0.6 micras de ancho, por 0.8 a 2 micras de longitud.

Ricketsias

Son inmóviles y aerobias. Producen débiles endotoxinas. Son

Gram negativas aunque no se tiñen bien con este colorante.

Son inestables en estado extracelular, excepto C. burnetti que es resistente al calor y desecación gracias a estructuras similares a endoesporas

Infección: por picadura de artrópodo o ingestión de tremátodos infectados

Adherencia a zonas ricas en colesterol de las membranas de las células diana

“endocitosis inducida”

Quedan incluidas en los fagosomas

Liberación en el citosol

División por fisión binaria hasta que estalla la célula

Aislamiento y observación

Se cultivan en embrión de pollo por inoculación en saco vitelino o en cultivos celulares.

Se utilizan las tinciones de Giemsa o Stamp, o Maquiavello.

También se pueden realizar Inmunofluorescencia.

Inmunohistoquímica

Gimenez

Inmunohistoquímica

Estructura antigénica

Las rickettsias expresan un antígeno de grupo similar al lipopolisacárido y otros de naturaleza proteica, de los cuales los más importantes son las proteínas rOmp A y rOmpB.

Clasificación

Orden Ricketsiaceae compuesto por 2 familias:

Rickettsiaceae: con 3 géneros:

Ricketsia (sp ricketsi) Orientia Wolbachia

Ehrlichiaceae: con 4 géneros:

Ehrlichia (canis) Anaplasma (marginale-centrale) Cowdria (ruminantium) Neoricketsia (helminthoeca)

Orden Rhizobiales:

Compuesto por la familia Bartonellaceae con 1 género: Bartonella

Orden Legionellales:

Compuesto por la familia Coxiellaceae con 2 géneros:

*Coxiella *Ricketsiella

Ricketsia ricketssi: afecta a los caninos Vector: garrapatas. Produce la fiebre manchada de las montañas rocosas. Muchas especies afectan al hombre produciéndole Tifus el vector en este caso el piojo (R.Prowazeki).

Ehrlichia canis: transmitida por garrapatas (rhipicephalus sanguineos). Produce una enfermedad febril caracterizada por anorexia, edema hemorragias y muerte.

CICLO ERLICHIA

Anaplasma los vectores son los mosquitos, las garrapatas (bophilus microplus) y el más importante en la Argentina es el tábano, también se transmite por agujas contaminadas con sangre de animales enfermos, instrumental quirúrgico, etc.

Parasitan los GR, se observan como estructuras cocoides de 0.3 a 1 micra de diámetro. Son Gram (+)

Anaplasma centrale -centro del GR

marginale –periferia del GR

*Producen enfermedades anemizantes

Cowdria: su especie ruminantium afecta a bovinos y ovinos produciendo la enfermedad denominada corazón acuoso. También se transmite por garrapatas pero del género amblyoma.

Neoricketsia: con su especie helminthoeca, se encuentra en lombrices que parasitan al salmón y truchas. Afecta a los caninos que se alimentan de pescado crudo produciéndoles enteritis hemorrágica.

Coxiella: especie: burnetti. Afecta a bovinos, ovinos y hombre (zoonosis). Se transmite a los animales por vectores hematófagos como las garrapatas. En el hombre produce la enfermedad conocida como Fiebre Q, ocasionando fiebre, neumonía o hepatitis. Ingresa por vía aerógena, por piel, por ingestión de leche no pasteurizada o por manipulación de lanas o cueros.

CICLO COXIELLA

Micoplasmas

Son los procariotas más pequeños. Pertenecen a la fam. Mollicutes: molis—

blando, kutis--piel Carecen de pared celular Membrana con estructura trilaminar (2/3

de proteínas,1/3 de lípidos). Esta membrana contiene colesterol (a

dif. De las bacterias), carece de ácido diaminopimélico.

Por carecer de membrana celular necesitan vivir en un entorno de elevada presión osmótica para que exista un equilibrio osmótico con respecto al medio interior del microorganismo.

El ADN tiene un contenido de bases guanina-citosina muy pequeño, por lo que la información genética es muy reducida.

Afinidad por las mucosas (respiratoria, genital, ocular ,etc)

Características generales

Son células muy pequeñas y pleomórficas rodeadas por una membrana trilaminar.

Su tamaño oscila entre 0.2 a 0.8 micras de diámetro. Su pleomorfismo se debe a la carencia de pared celular rígida.

Replicación por fisión binaria, también por gemación, la replicación del genoma no está sincronizado con la división celular = formas en brotes o cadenas en rosario.

Clasificación

Familia: Micoplasmataceae: tiene 2 géneros:

Micoplasma y Ureaplasma Acholeplasmataceae: con 1 género:

Acholeplasma Spiroplasmataceae: con 1 género:

Spiroplasma Anaeroplasmataceae: con 1 género:

Anaeroplasma

Diagnóstico

Para el examen microscópico se usa contraste de fases o campo oscuro.

Se tiñen con Giemsa. Medios de cultivo especiales, son muy

exigentes : base nutritiva (extracto de corazón), peptonas, extracto de levaduras, suero (fuente de ácidos grasos y colesterol), glucosa, vitaminas.

Agar Edward.

Necesidades especiales

M.synoviae, requieren el agregado de factores de crecimiento especiales como la L-cisteína y el NADH.

El cultivo de las especies de ureaplasma requiere el agregado de urea al medio.

Por su lento crecimiento es indispensable el agregado de antibióticos.

Morfología de las colonias

Las colonias se forman a los 2 a 7 días de incubación a 37ºC en condiciones de aerobiosis y mejor aún con un 5 a 10% de CO2.

Son pequeñas de 50 a 500 micras. Se desarrollan entre las fibrillas del agar, extendiéndose después sobre la superficie en una zona periférica plana. Así queda constituida la típica forma de huevo frito.

Tienen una gran adherencia al medio.

Se deben observar con lupa por su pequeño tamaño.

Las colonias de ureaplasma tienen más bien forma de botón y son mas pequeñas, 10 micras.

Factores de virulencia

No son muy virulentos (excepto M. Mycoides).

Poseen estructuras de adhesión y algunas toxinas que ejercen una acción local.

Uno de los mecanismos de adhesión son órganos de fijación de naturaleza proteica que se unen a receptores de la célula huésped .

Toxinas algunas producen efectos similares a las endotoxinas (galactanos para M. mycoides, y una glucoproteína para M. bovis).

También liberan hemolisinas y exotoxinas.

Patologías que producen

M. galliseptium : afecta a las aves, produce enfermedades respiratorias: traqueitis, neumonía, aerosaculitis.

M. synoviae : afecta a las aves produciendo artritis.

M. bovis: bovinos, neumonías, mastitis, queratoconjuntivitis.

M. mycoides: bovinos, salpingintis, metritis y abortos

En el cerdo el M. hyopneumonie produce la denominada neumonía enzootica.

Los micoplasmas no son gérmenes muy virulentos, por eso las infecciones que originan necesitan el concurso de ciertos factores predisponentes como por ejemplo el hacinamiento.