7/26/2019 Colesterol HDL guia practica

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UNIVERSIDAD PRIVADA DEL VALLESERVICIOS DE LABORATORIO: ANALISIS CLINICO IIELABOPRADO POR: BIOQUIMICA MARLENE MEDRANO GUZMANGUIA PRCTICA MARZO /2016

HDL COLESTEROL

1. OBJETIVO: Determinar la concentracin de HDL Colesterol en sangreprecipitando selectivamente las lipoprotenas de baja y muy baja densidad (LDL y

VLDL) determinando HDL colesterol en el sobrenadante con reaccin de punto

final

2. DEINICIONES:

HDL !"#$%&$'"#: !s una de las lipoprotenas m"s ricas en colesterol #ue

contrarresta la accin nociva #ue pueda tener la LDL$ sobre nuestro organismo

al evitar la arterioesclerosis e%cesiva

(. DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO:(.1. )*+,-$*&": !l acido fosfotungstico y el cloruro de magnesio$ #ue precipitando

selectiva y cuantitativamente las VLDL y LDL$ permiten la obtencin de

resultados comparables al m&todo de referencia Despu&s de la centrifugacin$ el

colesterol HDL se determina en el sobrenadante utili'ando el sistema en'im"tico

colorim&trico colesterol medir la reaccin de punto a nm

(.2. M)$%&',:*uero(.2.1. C,*&+,+: + ul(.2.2. R$)%&"%:,o -emoli'ado$ limpio y fresco

(.(. E)"% -,&$',#$% '$,!&3"%:(.(.1. E)"%:

Centrifuga

!spectrofotmetro (*tat .a%)

/a0o mara a 123C

Vorte%

(.(.2. M,&$',#$%:

4icropipetas :5 a 5 ul

6ubos de -emolisis (tubos de *tat fa%)

7eloj marcador

(.(.(. R$,!&3"%:

*tandard

7eactivo precipitante

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7eactivo de Colesterol (reactivo de trabajo)

(.4. P'"!$+-$*&":(.4.1. P'$!&,!5* +$ #,% VLDL LDL:

!numerar los tubos$

80adir + ul de suero 9 + ul de reactivo recipitante

8gitar vigorosamente por 1 segundos fundamental para la obtencin de

resultados consistentes

Centrifugar a 1 rpm por lo menos 5 min para obtener un sobrenadante

lmpido

ipetear el sobrenadante inmediatamente despu&s del centrifugacin teniendo

cuidado de no resuspender el precipitado para evitar resultados falsamente

elevados

(.4.2. R$,!!5* C"#"'-&'!,:

!numerar los tubos de la siguiente forma:

REACTIVOS BLANCO STANDAR DESCONOCIDO

E%&7*+,' ; 5 ul ;S"8'$*,+,*&$ ; ; 5 ulR$,!&3" +$ &',8,9"+$ !"#$%&$'"#

5 ml 5 ml 5 ml

4e'clar en el Vorte% e incubar 5 minutos a /a0o mara a 123C

7ealice la lectura comen'ando por el blanco $ est"ndar y muestra

Luego leer en el *686 .8< : ,3 =====

7egistrar los resultados e informar

.4.(. E%&,8#+,+ +$ #, -$;!#, +$ '$,!!5* minutos por lo #ue la absorbancia

debe ser leda dentro de este lapso

(.. V,#"'$% +$ '$

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N="% A+"#$%!$*&$% : mayor a1 mg?dl

4. ANE>OS:

A*$?" 1:

S)%&,*!,% *&$'

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HDL Colesterol mg?dl D % .

C"-" !,#!)#,' #, !"*!$*&',!5* +$# !"#$%&$'"# VLDL LDL: Btili'ando laecuacin de .riedeald #ue es e%acta para muestras cuya concentracin de

triglic&ridos no ultrapasen E mg?dl y no pertene'can a pacientes portadores de

lipoproteinemia de tipo FFF

E!),!5* +$ '$+$,#+:Colesterol VLDL 6riglic&ridos ? Colesterol LDL Colesterol total G (HDL 9 VLDL)