27
CELULAS CALICIFORMES Célula con forma de cáliz que presenta un núcleo basal y un citoplasma cargado de mucinas (componente principal del moco). Está presente en los epitelios de los aparatos respiratorio y digestivo, y su función principal es secretar moco, que protege y lubrica la superficie interna de dichos aparatos. RIBETE EN CEPILLO El Ribete en Cepillo es el conjunto de microvellosidades largas presentes en la superficie luminal de las células intestinales del Yeyuno-íleon, se especializan para la absorción de los Nutrientes orgánicos. También se las encuentra en el epitelio de los túbulos renales, principlamente en el túbulo contorneado Proximal. La Chapa Estriada son microvellosidades cortas, paralelas, regulares dispuestas de manera muy juntas, se encuentran en las células absortivas intestinales. Tricromico de Masson Es una técnica para la coloración de fibras colágenas y elásticas. Se observan tres colores distintos; tejido conjuntivo de verde, tejido muscular de verde pardo, eritrocitos de rojizo, núcleos azul negro y citoplasma y fibras musculares rosa. 1º-Desparafinado. Estufa durante 30 min. a 60º. Sumergimos en xilol durante 10 o 15 min. 7º- Ácido fosfomolíbdico 5 min. 2º- Hidratación. Alcohol absoluto-5min. Alcohol 96º-5min. Alcohol 70º-5min. 8º- Ácido fosfomolíbdico 5 min. 3º- Lavar en H2O destilada. 9º- Verde luz 5-7 min. 4º- Hematoxilina de Weigert 5 min. 10º-Deshidratar. Alcohol de 70º Alcohol de 96º.

COLORACIONES HISTOQUIMICA TEXTO

Embed Size (px)

Citation preview

Page 1: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

CELULAS CALICIFORMES

Célula con forma de cáliz que presenta un núcleo basal y un citoplasma cargado de mucinas (componente principal del moco). Está presente en los epitelios de los aparatos respiratorio y digestivo, y su función principal es secretar moco, que protege y lubrica la superficie interna de dichos aparatos.

RIBETE EN CEPILLO

El Ribete en Cepillo es el conjunto de microvellosidades largas presentes en la superficie luminal de las células intestinales del Yeyuno-íleon, se especializan para la absorción de los Nutrientes orgánicos. También se las encuentra en el epitelio de los túbulos renales, principlamente en el túbulo contorneado Proximal. La Chapa Estriada son microvellosidades cortas, paralelas, regulares dispuestas de manera muy juntas, se encuentran en las células absortivas intestinales.

Tricromico de Masson

Es una técnica para la coloración de fibras colágenas y elásticas. Se observan tres colores distintos; tejido conjuntivo de verde, tejido muscular de verde pardo, eritrocitos de rojizo, núcleos azul negro y citoplasma y fibras musculares rosa.

1º-Desparafinado.

Estufa durante 30 min. a 60º.

Sumergimos en xilol durante 10 o 15 min.

7º- Ácido fosfomolíbdico 5 min.

2º- Hidratación.

Alcohol absoluto-5min.

Alcohol 96º-5min.

Alcohol 70º-5min.

8º- Ácido fosfomolíbdico 5 min.

3º- Lavar en H2O destilada. 9º- Verde luz 5-7 min.

4º- Hematoxilina de Weigert 5 min.

10º-Deshidratar.

Alcohol de 70º

Alcohol de 96º.

Xilol.

5º- Lavar con agua corriente 10 min. 11º- Montaje.

6º- Fucsina de Ponceau 5 min.

Ver foto Descargar técnica

Tinción tricrómica de Masson

La tinción tricrómica de Masson, al igual que otras tinciones tricrómicas, es una técnica de coloración especial que permite visualizar claramente las fibras de colágeno tipo I que forman fibras gruesas o haces, diseñados para dar resistencia; también evidencia, aunque en menor

Page 2: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

intensidad, las fibras reticulares. Se emplean tres colorantes para diferenciar el núcleo celular, el citoplasma y las fibras de colágeno.

Índice

[ocultar]

1 Fundamento

2 Tejido control y diana

3 Reactivos

4 Procedimiento

o 4.1 Análisis de resultados

o 4.2 Variantes

5 Véase también

6 Bibliografía

7 Enlaces externos

Fundamento[editar · editar código]

Primeramente, se tiñen las secciones con un tinte ácido tal como escarlata de Biebrich. Todos los elementos acidófilos del tejido tales como el citoplasma, el músculo y el colágeno se unirán a los tintes ácidos. Las secciones entonces se tratan con ácido fosfotúngsticoy/o fosfomolíbdico. Ya que el citoplasma es mucho menos permeable que el colágeno, los ácidos fosfotúngsticos y fosfomolíbdicos permiten que la escarlata de Biebrich difunda del colágeno pero no del citoplasma. Los ácidos fosfotúngsticos y fosfomolíbdicos tienen numerosos grupos ácidos que probablemente actúen como medio de unión entre el colágeno y el azul de la anilina, que es el tinte del colágeno. Probablemente, el pH de la solución fosfotúngstico/fosfomolíbdico también aumente la coloración y ayude al colágeno en la difusión o el retiro de los colorantes.

Tejido control y diana[editar · editar código]

Cualquier tejido con componente conjuntivo, en especial con contenido en fibras colágenas, puede servir como control o ser un tejido diana. Cualquier fijador es válido, si bien es de elección la solución de Bouin. El grosor de corte óptimo de las muestras es de entre 4 y 6 micras.

Reactivos[editar · editar código]

1. Solución de hematoxilina férrica de Weigert.

2. Solución de escarlata de Biebrich – fucsina ácida:

1. 90 cc de escarlata de Biebrich al 1% en agua destilada.

2. 9 cc de fucsina ácida al 1% en solución acuosa.

3. 1 cc de ácido acético glacial.

Page 3: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

3. Solución acuosa de ácido fosfomolíbdico (utilizar ácido fosfotúngstico en la misma proporción, si se va a teñir con verde luz):

1. 5 g de ácido fosfomolíbdico.

2. 200 cc de agua destilada.

4. Solución de azul de anilina:

1. 2,5 g de azul de anilina.

2. 2 cc de ácido acético glacial.

3. 98 cc de agua destilada.

5. Solución de verde luz al 2% (alternativa al azul):

1. 2 g de verde luz SF amarillento.

2. 99 cc de agua destilada.

3. 1 cc de ácido acético glacial.

6. Solución diferenciadora: solución acuosa de ácido acético glacial al 1%.

Procedimiento[editar · editar código]

1. Desparafinar e hidratar hasta el agua destilada de manera habitual.

2. En material fijado en soluciones de formaldehído o alcohólicas se recomienda hacer un mordentaje previo con líquido de Bouin durante 1 hora a 56-60 ºC o toda la noche a temperatura ambiente.

3. Enfriar y lavar en agua destilada hasta que desaparezca el color amarillo.

4. Teñir con hematoxilina férrica durante 10 minutos. Lavar en agua corriente durante 10 minutos.

5. Lavar en agua destilada.

6. Teñir con la solución de escarlata-fucsina ácida durante 2-5 minutos.

7. Lavar en agua destilada.

8. Tratar con la solución de ácido fosfomolíbdico-fosfotúngstico durante 10-15 minutos si se va a colorear con la solución de azul deanilina, o en la solución acuosa de ácido fosfotúngstico al 5% durante 15 minutos si se desea teñir con verde luz.

9. Teñir con solución de azul de anilina 15 minutos o con solución de verde luz 5 minutos.

10. Lavar en agua destilada.

11. Diferenciar en la solución de ácido acético al 1% durante 3-5 minutos.

12. Deshidratar, aclarar y montar.

Page 4: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

Amiloides que son insolubles en los agregados de proteínas fibrosas que comparten rasgos estructurales específicos. Surgen de al menos 18 inapropiadamente versiones plegadas de las proteínas y polipéptidos presentes de forma natural en el cuerpo. Estas estructuras malformadas alterar su configuración adecuada de forma que erróneamente interactúan unos con otro u otros componentes de las células que forman fibrillas insolubles. Ellos se han asociado con la patología de más de 20 enfermedades humanas graves en que, la acumulación anormal de fibrillas de amiloide en los órganos puede conducir a la amiloidosis, y puede desempeñar un papel en diversos trastornos neurodegenerativos.

Definición

El nombre proviene de amiloide la identificación temprana confundido por Rudolph Virchow de la sustancia en forma de almidón, basado en técnicas de tinción de yodo crudo. Durante un período, la comunidad científica discute si o no los depósitos de amiloide eran depósitos de grasa o depósitos de hidratos de carbono hasta que finalmente se encontró que eran, de hecho, los depósitos de material proteico.

El, definición histopatológico clásico del amiloide es una, el depósito proteico extracelular exhiben estructura de lámina beta. Común a la mayoría de las estructuras de tipo cross-beta por lo general se identifican con birrefringencia verde manzana cuando se tiñen con rojo congo y visto con luz polarizada. Estos depósitos a menudo reclutan varios azúcares y otros componentes, tales como suero componente amiloide P, lo que resulta en el complejo, y estructuras a veces no homogéneos. Recientemente, esta definición ha sido cuestionado como algunas especies, amiloide clásicos se han observado en lugares claramente intracelulares.

Definición. La amiloidosis es parte de un grupo de enfermedades poco frecuentes. ... Moretones de fácil aparición; Piel púrpura (coloración púrpura de la piel ... Dificultades para deglutir; Lengua agrandada; Hígado agrandado; Diarrea ...

Amiloide

Es un nombre genérico para designar diversas sustancias que tienen en común estar contituidas por proteína fibrilar b-plegada. Este tipo de estructura no ocurre normalmente en las proteínas de los mamíferos. En nombre de amiloide, dado por Virchow, se debe a la similitud con el almidón en cuanto a la afinidad tintorial con el yodo.

Amiloidosis Localizada

Se producen en la piel, glándula tiroides, islotes de Langerhans, corazón, cerebro. El depósito de amiloide en los islotes de Langerhans aumenta con la edad, siendo muy frecuente por sobre los 70 años. Es más acentuado en diabéticos de tipo II (diabetes mellitus del adulto) de larga data, pero su relación exacta con esta enfermedad se desconoce. El amiloide también se puede formar en tumores productores de algunas hormonas polipeptídicas como los insulinomas o nesidioblastomas funcionantes, el carcinoma medular del tiroides, en tumores secretores de hormona de crecimiento, etcétera.

Page 5: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

.

TINCION

Un espécimen histológico teñido, colocado entreportaobjetos y cubreobjetos, montado sobre la platina de unmicroscopio óptico.

Una tinción o coloración es una técnica auxiliar utilizada en microscopía para mejorar el contraste en la imagen vista al microscopio. Los colorantes y tinturas son sustancias que usualmente se utilizan en biología y medicina para resaltar estructuras en tejidos biológicos que van a ser observados con la ayuda de diferentes tipos de microscopios. Los diferentes colorantes pueden ser utilizados para aumentar la definición y examinar grandes cortes de tejido (resaltando por ejemplo fibras musculares o tejido conectivo), poblacionescelulares (por ejemplo clasificando diferentes células sanguíneas) o incluso para resaltar organelas dentro de células individuales.

En bioquímica, esto implica agregar un colorante específico (esto significa que se una de manera selectiva ya sea a ADN, proteínas, lípidos, carbohidratos, etc.) a un sustrato para cualificar o cuantificar la presencia de un determinado compuesto. Tanto la tinción como el marcado fluorescente pueden servir para los mismos propósitos.

Diferentes tipos de tinciones biológicas son utilizadas también para marcar células en citometría de flujo y para marcar proteínas ó ácidos nucleicos enelectroforesis en gel.

Las tinciones no están limitadas a su uso en materiales biológicos, también pueden ser utilizadas para estudiar la morfología de otros materiales (por ejemplo, las estructuras lamelares de polímeros semicristalinos de las estructuras de dominio de bloques decopolímeros.

TINCIÓN IN VIVO E IN VITRO

Una tinción in vivo (tinción supravital) es el proceso de teñir tejidos vivos. Al provocar que determinadas células o estructuras adquieran los colores de contraste, se puede estudiar su ubicación y morfología mientras están desempeñando su función. El

Page 6: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

propósito más común es revelar detalles de la citoestructura que de otra manera no resultarían evidentes, sin embargo, la tinción supravital puede revelar además donde aparece un determinado producto químico o donde se lleva a cabo una determinada reacción química dentro de las células o tejidos.

A menudo estas tinciones son llamadas tinciones vitales o supravitales. Se introducen en el organismo mientras las células aún se encuentran vivas. Para conseguir el efecto deseado, el colorante usualmente se utiliza en soluciones muy diluidas que van entre 1:5.000 a 1:50.000. A pesar de esto las tinciones son eventualmente tóxicas para los organismos, algunas más que otras.

Una tinción in vitro involucra el coloreo de células o estructuras que han sido removidas de su contexto biológico. Se utiliza a menudo una combinación de varios colorantes para revelar más detalles y características de las que se obtendrían con la utilización de uno solo. Combinados con protocolos específicos de fijación y de preparación de muestras, los científicos y profesionales de la salud pueden utilizar estas técnicas estandarizadas como una herramienta diagnóstica repetible y consistente. Una contratinción es una tinción que consigue que las células o estructuras sean más visibles, cuando no se consigue que sean totalmente visibles con la tinción principal.

Por ejemplo, el cristal violeta tiñe únicamente a las bacterias Gram positivas en la tinción de Gram. Se utiliza una contratinción desafranina (que colorea todas las células), para permitir también la identificación de bacterias Gram negativas.

Es de notar que muchas tinciones pueden ser utilizadas tanto en células vivas como en células fijadas.

MÉTODOS DE TINCIÓN IN VITRO

PREPARACIÓN

Las etapas preparatorias involucradas en una tinción van a depender del tipo de análisis planeado; bajo estas premisas se puede considerar que algunos o todos de los siguientes pasos podrían requerirse.

FIJACIÓN : de por si, esta etapa puede consistir en varios pasos. La fijación es una modificación de las propiedades fisicoquímicas de las proteínas que forman una célula o tejido y que tiene por finalidad preservar las formas de las células o tejidos tanto como sea posible. A veces se puede utilizar una fijación por calor para matar, adherir y alterar un espécimen de modo que acepte la tinción. La mayor parte de las veces se utiliza un fijador químico. Los fijadores químicos en general causan la formación de enlaces cruzados entre proteínas, o entre proteínas y otras sustancias presentes en la muestra, incrementando su resistencia mecánica. Entre los fijadores químicos más comunes se encuentran el formaldehído, etanol, metanol, y/o el ácido pícrico. Pequeños bloques de tejido pueden ser embebidos en parafina o algún polímero, proceso conocido como inclusión, para incrementar su resistencia y estabilidad, y para hacer más fácil cortarlos en rodajas extremadamente delgadas, ya que cuanto más delgado es un corte histológico, más definición se obtiene en las imágenes microscópicas.

PERMEABILIZACIÓN este paso implica el tratamiento de las células con un surfactante suave. Este tipo de tratamiento tiene como finalidad disolver la

Page 7: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

membrana celular para permitir que las grandes moléculas de colorante puedan acceder a las estructuras del interior de las células.

MONTAJE frecuentemente implica adherir los cortes histológicos a un portaobjetos de vidrio para su observación al microscopio o análisis. En algunos casos, se puede cultivar a las células directamente sobre le portaobjetos. En muestras de células sueltas, como las que se presentan en un extendido de sangre o de fluidos biológicos, la muestra puede ser aplicada directamente sobre el portaobjetos. Para piezas de tejido de mayor tamaño, se utiliza un micrótomo que corta la muestra en rodajas sumamente delgadas. Estas rodajas son luego adheridas al portaobjetos por medio de una substancia que funciona como pegamento, ya sea una resina transparente, gelatina o clara de huevo. El montaje tiene por finalidad aumentar la resistencia mecánica de una muestra que de otra manera sería extremadamente frágil, para que soporte el proceso de teñido conservando lo más posible su estructura original.

TINCIÓN ADECUADA

En su forma más simple, el verdadero proceso de tinción puede implicar la inmersión de la muestra (antes o después de la fijación y el montaje) en la solución colorante, seguido del aclarado que es un lavado para eliminar el exceso de colorante y la observación. Muchos tintes, sin embargo, requieren del uso de un mordiente, esto es, un compuesto químico que reacciona con el colorante para formar unprecipitado coloreado insoluble. Cuando la solución de colorante en exceso se elimina durante el aclarado, la tinción mordentada permanece.

La mayoría de los colorantes utilizados en microscopía se encuentran disponibles como colorantes certificados. Esto significa que los colorantes ofrecidos por el fabricante han sido evaluados por un organismo independiente, la Biological Stain Commission, y que este organismo ha determinado que el producto ofrecido cumple o excede ciertos estándares de pureza, concentración de sustancia colorante y desempeño en las técnicas de tinción empleadas. Estos estándares son publicados detalladamente en la revista Biotechnic & Histochemistry.1 Muchos colorantes presentan una composición diferente entre diferentes fabricantes. La utilización de colorantes certificados elimina una fuente de resultados inesperados.2

TINCIÓN DIRECTA

Hablamos de tinción directa cuando el colorante interacciona directamente con el sustrato, sin otro tratamiento previo.

TINCIÓN INDIRECTA

Se denomina de este modo a las tinciones que hacen uso de un mordiente. Un mordiente habitual es el ácido tánico.

Afinidad de diferentes tejidos por diferentes colorantes[editar · editar código]

Cuando un tejido u estructura subcelular presenta una afinidad por un determinado colorante se suele designar por los sufijos -filo o -fílico. Por ejemplo, los tejidos que se tiñen con azure suelen ser nombrados como azurófilos o azurofílicos. También puede ser utilizado para designar propiedades tintoriales más generalizadas, por ejemplo los tejidos que se tiñen con colorantes de naturaleza ácida (por ejemplo la eosina) suelen ser denominados como acidofílicos, basofílicos cuando se tiñen con colorantes de naturaleza básica (tales como por ejemplo el azul de metileno o la hematoxilina),

Page 8: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

y anfifílicos cuando aceptan ambos colorantes.4 Por el contrario, los tejidoscromófobos no toman colorante con facilidad.

TINCIÓN NEGATIVA

Un método sencillo de tinción para bacterias, que además es un claro caso de cromofobia y que por lo tanto funciona aún cuando los métodos de tinción positiva fallan, es la tinción negativa. Esto puede ser conseguido simplemente extendiendo la muestra en un portaobjetos y aplicando directamente sobre ella una gota de nigrosina o tinta china y cubriendo luego la muestra humedecida con un cubreobjetos. Luego de esto, los microorganismos pueden ser observados fácilmente por medio de microscopía en campo claro como inclusiones claras muy bien contrastadas contra el medio oscuro que las rodea.5 Adicionalmente, la tinción negativa es una técnica suave que no destruye a los microorganismos, permitiendo por lo tanto un recultivo posterior para el estudio de patógenos.

COLORANTES

La mayoría de los colorantes son compuestos orgánicos que tienen alguna afinidad específica por los materiales celulares. Muchos colorantes utilizados con frecuencia son moléculas cargadas positivamente (cationes) y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados negativamente, tales como los ácidos nucleicos y los polisacáridos ácidos. Ejemplos de colorantes catiónicos son el azul de metileno, el cristal violeta y la safranina. Otros colorantes son moléculas cargadas negativamente (aniones) y se combinan con los constituyentes celulares cargados positivamente, tales como muchas proteínas. Esos colorantes incluyen laeosina, la fucsina ácida y el rojo Congo. Otro grupo de colorantes son sustancias liposolubles; los colorantes de este grupo se combinan con los materiales lipídicos de la célula, usándose a menudo para revelar la localización de las gotículas o depósitos de grasa. Un ejemplo de colorante liposoluble es el negro Sudán. Si se desea simplemente incrementar el contraste de las células para la microscopía, son suficientes los procedimientos simples de tinción. El azul de metileno es un buen colorante simple que actúa sobre todas las células bacterianas rápidamente y que no produce un color tan intenso que oscurezca los detalles celulares. Es especialmente útil para detectar la presencia de bacterias en muestras naturales, puesto que la mayor parte del material no celular no se tiñe.

COLORANTES HISTOLÓGICOS MÁS COMUNES

Los diferentes colorantes reaccionan o se concentran en diferentes partes de las células o tejidos, y estas propiedades son utilizadas como una ventaja para revelar partes o áreas específicas. Algunos de los colorantes biológicos más comunes se listan más abajo. A menos que se indique lo contrario la mayoría de estos colorantes se utilizan con células y tejidos fijados. Las tinciones vitales (que pueden ser utilizadas con organismos vivos) se encuentran destacadas.

AZUL BRILLANTE DE COOMASSIE

Coomassie blue (también conocido como azul brillante) es un colorante que tiñe en forma no específica a todas las proteínas con un fuerte color azul. Se utiliza frecuentemente para teñir las corridas de proteínas en las electroforesis en gel.

Page 9: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

AZUL DE METILENO

Azul de metileno se utiliza para teñir células animales, para hacer más visibles sus núcleos. Es también utilizado para teñir los extendidos de sangre para ser utilizados en citología y como colorante vital en el recuento de reticulocitos.

AZUL NILO

El Nile blue (o Nile blue A), es decir azul Nilo, tiñe a los núcleos de color azul. También puede ser utilizado para teñir células vivas.

BISMARCK BROWN

Bismarck brown, Marrón Bismarck, (también conocido como Bismarck brown Y o Manchester brown) le imparte un color amarillo a lasmucinas ácidas. Se puede utilizar con células vivas.

BROMURO DE ETIDIO

El bromuro de etidio (BE) se intercala en el ADN y le otorga un color rojo naranja fluorescente. A pesar de que no es capaz de teñir células vivas ya que no atraviesa las membranas intactas, puede ser utilizado para identificar células que se encuentran en las etapas finales de la apoptosis, ya que tales células poseen unas membranas mucho más permeables. Por el mismo motivo, el bromuro de etidio es utilizado como un marcador de apoptosis en poblaciones celulares y para localizar las bandas de ADN en una corrida enelectroforesis en gel. Este colorante puede ser utilizado en combinación con naranja de acridina (NA) en el conteo de células viables. Esta tinción combinada BE/NA le otorga a las células vivas un color verde fluorescente mientras que las células apoptóticas aparecen con la distintiva fluorescencia rojo-naranja.

CARMÍN

El carmín es un colorante de un intenso color rojo que puede ser utilizado como sal de litio para teñir glicógeno, mientras que las sales de alumbre-carmín son colorantes que se adhieren al núcleo. Las tinciones con carmín requieren del uso de un mordiente, que usualmente es aluminio o alumbre.

CRISTAL VIOLETA

El cristal violeta, al ser combinado con un mordiente adecuado, tiñe las paredes celulares de color púrpura. El cristal violeta es un componente importante en la coloración de Gram.

DAPI

El DAPI es un colorante nuclear (tiñe el núcleo) fosforescente, se excita con luz ultravioleta para producir una fuerte fluorescencia azul cuando se encuentra unido al ADN. El DAPI se une a las regiones de alta repetición A=T en los cromosomas. Además no es visible cuando se utiliza con un microscopio de transmisión corriente. Puede ser utilizado en células vivas o fijadas. La técnica de tinción con DAPI es especialmente adecuada para el recuento celular.6

EOSINA

La eosina se utiliza más frecuentemente como contracoloración de la hematoxilina, impartiendo un color que va del rosado al rojo al material citoplasmático, membrana

Page 10: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

celular, y algunas estructuras extracelulares. Además imparte un fuerte color rojo a los eritrocitos. La eosina puede ser utilizada también en algunas variantes de la coloración de Gram, y en muchos otros protocolos de tinción. De hecho existen dos compuestos muy estrechamente relacionados (aunque no iguales) conocidos como eosina. El más frecuentemente utilizado es la eosina Y (también conocida como eosina amarillenta) ya que posee una tonalidad amarillenta muy suave. El otro compuesto conocido como eosina es la eosina B, también conocida como eosina azulada o rojo imperial, la cual posee una suave tonalidad azul. Los dos colorantes son intercambiables, y el la utilización de uno u otro es más una cuestión de preferencia y tradición.

LISTA DE ALGUNAS DE LAS TINCIONES MÁS COMUNES

Tinción Tipo Características Uso Ejemplo

HematoxilinaBásica / Acidofílica

Tiñe núcleos, ácidos nucleicos y estructuras basofílicas (mitocondrias y ribosomas) en azul.

Tinción histológica general

EosinaÁcida / Basofílica

Tiñe proteínas y estructuras con afinidad por los ácidos en diferentes tonos de rojo

Tinción histológica general

Tinción hematoxilina-eosina

BicomponenteAnfifílica

Los núcleos aparecen en azul (hematoxilina)

Los ácidos nucleicos asociados a proteína (ej. ribosomas) en violeta

Fibra muscular en rojo

Tejido conectivo en rosado

Tinción histológica general

Page 11: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

Tinción hemalumbre-eosina

Similar a la tinción H&E con colores más marcados y definidos

Tinción histológica general

Tinción HOPS

Policromática Los núcleos aparecen en azul (hematoxilina)

La elastina aparece en negro (orceína)

Fibra muscular en rojo (filoxina)

Tejido conectivo (colágeno) en amarillo (safranina)

Tinción HPS

Los núcleos aparecen en azul (hematoxilina)

Fibra muscular en rojo (filoxina)

Tejido conectivo (colágeno) en amarillo (safranina)

Tinción de Papanicolau

Permite ver la cromatina con mucha claridad

Núcleos aparecen entre azul y negro

Células con

Se utiliza para diferenciar células en muestras de secreciones biológicas (esputo, LCR, orina, etc.) y en raspados y biopsias. Permite distinguir con

Page 12: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

alto contenido de queratina en amarillo

Glucógeno en amarillo

Células superficiales de naranja a rosado.

Células intermedias y parabasales entre turquesa y azul.

Células metaplásicas muestran coloraciones mezcladas (P. Ej. verde y rosa)

relativa facilidad células con transformaciones neoplásicas, levaduras y bacterias.

Tinción de Romanowsky

PancromáticadeRomanowsky Extendidos

sanguíneos

Tinción de Wright

Tinción de Giemsa

Page 13: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

Tinción de Jenner

Tinción de Leishman

Tinción de Field

Tinción de May Grünwald

Tinción de May Grünwald-Giemsa

Tinción con azul de metileno

Supravital

metacromática

Tiñe de azul oscuro restos de ácidos nucleicos, y los proteoglicanos ácidos en varios tonos de violeta.

Diagnóstico de anemias regenerativas

Demostración de estructuras metacromáticas

Tinción con azul de prusia

Tiñe los depósitos de hemosiderina y hierro de color azul-celeste

Diagnóstico de hemopoyesis ineficaz, yhemocromatosis

Tinción tricrómica de Masson

Tricrómica Los núcleos aparecen en marrón o negro

Keratina y músculo en rojo

Los citoplasmas en tonos de

Page 14: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

rosa

El colágeno y hueso en azul o verde

Tinción tricrómica de Lillie

Símil tricrómica de Masson

Tinción tricrómica AZAN de Heidenhan

Símil tricrómica de Masson, los citoplasmas aparecen en tonos de rojo más profundos y el conectivo en tonos más intensos de azul

Tinción tricrómica de Mallory

Símil tricrómica de Masson

Tinción de Van Gieson

Núcleos celulares color marrón a negro.

Colágeno (tejido conectivo fibroso): Color rosa o rojo.

Músculo y Citoplasma: Color amarillo.

Tinción de Movat

Negro = núcleos, fibras elásticas

Page 15: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

Amarillo = colágeno, fibras reticulares

Azul = sustancia basal, mucina

Rojo brillante = fibrina

Rojo = músculo

Tinción tricrómica de Gömöri

TricrómicaArgéntica

Tinción de Warthin-Starry

Argéntica

Tinción de Von Kossa

Tiñe de tonos de marrón y negro los depósitos de fosfato inorgánico en hueso.

Tinción de Golgi

Tinción de Bielchowsky

Tinción de Jones

Tinciones para Microbiología

Page 16: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

Tinción de Gram

Tinción de Ziehl-Neelsen

Tinción de Schaeffer-Fulton

Tiñe endosporas de verde y bacterias en rojo

Sirve para diferenciar endosporas y bacterias

Tinción de Conklin

Tiñe endosporas de verde, similar a Schaeffer-Fulton

Tinción de Grocott

Detección de microorganismos, en especial fúngicos.

Tinción de Dieterle

Búsqueda de microorganismos, ej., Treponema pallidum

Tinción negativa

Tiñe el exterior, pero no el interior de células y estructuras

Es muy utilizada en microscopía electrónica. En microscopía óptica para identificar microorganismos encapsulados.

Tinción con mucicarmina

Tiñe las paredes celulares de polisacáridos de un intenso color rojo

Sirve para diferenciar bacterias con pared de polisacáridos de otras que no. (Ej Cryptococcus son mucicarmina +)

Page 17: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

Tinciones para Organelas

Tinción metacromática

Produce colores púrpuras y violetas en presencia de mucopolisacáridos ácidos sulfatados

Tinciones para Fibras

Tinción de Weigert

Tiñe fibras elásticas en tonos de azul y violeta

Tinción con orceína

Tiñe fibras elásticas en tonos de marrón y negro

Tinciones para Carbohidratos

Tinción PAS

Tiñe carbohidratos y proteínas glicosiladas de color rojo magenta

Tinción con Lugol

Tiñe el almidón de azul, el glucógeno de amarillo y el resto en tonos de ocre

Tinción con Carmín

Tiñe el glicógeno de intenso color rojo.

Tinciones para Proteínas

Tinción argéntica

Dependiendo del fijado tiñe proteínas y ácidos nucleicos en tonos de negro y marrón

Page 18: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

Tinción con Rojo Congo

Tiñe el amiloide de un intenso color rojo

Se utiliza con hematoxilina eosina en patología cuando se busca amiloide

Tinción con Alcian Blue

Tiñe mucopolisacáridos ácidos de color azul

Tinción con Coomassie Brilliant Blue

Tiñe inespecíficamente proteínas de color azul

Tinciones para Ácidos Nucleicos

Tinción de Feulgen

Tiñe el ADN y cromosomas de color rojo-violeta

Naranja de acridina

Tiñe ADN y cromosomas de color verde fluorescente, ARN y ribosomas en color rojo fluorescente

DAPITiñe ADN de color azul-celeste fluorescente

Bromuro de etidio

Tinciones para Lípidos

Page 19: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

Tinción con Luxol Fast Blue

Tiñe la mielina de azul-celeste

Técnica de la Hematina ácida de Baker

Tiñe fosfolípidos y nucleoproteínas de color azul negro

Tinción con Oil Red O

Sudánlipofílica

Tiñe lípidos neutros de color rojo intenso

Tinción con Sudan Black B

Tiñe gotas de lípidos neutros de color negro azulado

Tinción con Sudan II

Tinción con Sudan III

Tiñe lípidos neutros de color rojo

Tinción con Sudan IV

Qué son los carbohidratos

Definición de los carbohidratos

Una dieta armónica, equilibrada y completa debe contener hidratos de carbono o glúcidos entre sus componentes nutricionales, ya que éstos cumplen una función específica dentro del organismo. Para entender un poco más de que se trata, es importante conocer qué son los carbohidratos, a través de su definición.

Los   carbohidratos   deben formar parte de una dieta equilibrada, los cuales deben representar entre el   50 al 60% del valor calórico total ,   1 gr. de hidratos de carbono aporta 4 kcal.

Su   función   en el organismo es esencialmente energética, a través de ellos se consigue la energía suficiente para poder realizar las actividades cotidianas.

Definición de los carbohidratos

Page 20: COLORACIONES HISTOQUIMICA  TEXTO

Los carbohidratos o hidratos de carbono son compuestos orgánicos formados por carbono, hidrógeno y oxígeno.

Qué son los carbohidratos

Los carbohidratos, comúnmente llamados azúcares, son biomoléculasque forman parte de la dieta diaria, estos hidratos de carbono pueden clasificarse en:

Simples: son aquellos azúcares que se absorben en forma rápida, de los cuales se pueden obtener energía en forma casi instantánea. Dentro de este grupo puedes encontrar los dulces, azúcar o sacarosa, miel, mermeladas, amasados de pastelería, etc.

Complejos: Son aquellos azúcares de absorción lenta, necesitan de un mayor tiempo de digestión, por lo que actúan como energía de reserva. Dentro de este grupo se puede encontrar las verduras, cereales integrales, legumbres, pastas, frutas.

Una dieta sana debe contener mayor porcentaje de hidratos de carbono complejos, de esta forma se pueden prevenir diferentes enfermedades tales como diabetes, dislipemias, enfermedades cardiovasculares, etc.

Conocer la definición de carbohidratos, es importante para entender como funcionan y que importancia tienen dentro de una alimentación equilibrad