Conferències de Recerca Neuropsicofarmacologia de les ...diposit.ub.edu/dspace/bitstream/2445/69133/1/Seminari9_DavidPubill.pdf · 1 Neuropsicofarmacologia de les noves drogues psicoestimulants

1

Neuropsicofarmacologia de les noves drogues psicoestimulants i la seva associació amb alcohol

Dr. David Pubill([email protected])

Grup de Recerca: Neuropsicofarmacologia dels derivats amfetamínics

Unitat de Farmacologia i FarmacognòsiaDep. de Farmacologia i Química Terapèutica

Conferències de Recerca

13 d’octubre de 2015

Conferència de Recerca, 13/10/2015 D. Pubill

Generalitats sobre el consum de drogues a Espanya

• Important consum per part d’adolescents i joves d’alcohol, tabac i cannabis.

• Preferència per les drogues “de disseny” i el cannabis. Increment de consum. Policonsum de cap de setmana.

• A partir dels 25 anys, increment en consum de cocaïna (l’edat d’inici baixa). Consum d’heroïna a la baixa.

• Irrupció de noves drogues sintètiques des de 2009:• 2010: 15 noves substàncies. Legal highs. • Catinones sintètiques (Mefedrona, metilona, MDPV)• Cannabinoides sintètics• Derivats de cocaïna (fluorotropacocaïna) i amfetamina, Metilendioxiaminoindano (MDAI)

Per quPer quèè estudiar les noves drogues ?estudiar les noves drogues ?

2


• Dependència (multifactorial)• Exclusió social, marginació• Conflictes familiars i laborals• Infraccions i delinqüència• Risc sanitari divers• Interaccions amb fàrmacs• Trastorns psiquiàtrics

ConseqConseqüèüències socioncies socio--sanitsanitààries del consum de drogues dries del consum de drogues d’’ababúúss


ClassificaciClassificacióó de les principals substde les principals substààncies dncies d’’ababúúss

• Psicoestimulants• Derivats amfetamínics: MDMA (èxtasi), METH (cristal, ice), d-amfetamina (speed)• Catinones: mefedrona, metilona, MDPV• Cocaïna

• Dissociatives• Ketamina (Special K)• Dextrometorfan/dextrorfan• Fenciclidina (PCP, pols d’àngel)

• Depressores/sedants• GHB (“èxtasi” líquid)• Alcohol• Cannabis• Heroïna

• Al·lucinògenes• LSD (tripis, àcids), Bromo-Dragonfly• Catinones: MDPV, etc• Mescalina, fongs

3


El El ““BoomBoom”” de les catinonesde les catinones


El El ““BoomBoom”” de les catinonesde les catinones

4


MDMA

Les catinones i altres amfetamines: Les catinones i altres amfetamines: ““cosines germanescosines germanes””


ProducciProduccióó i comercialitzacii comercialitzacióó de les catinonesde les catinones

5



PresPresèència de NSPs en incidents diversosncia de NSPs en incidents diversos

6



Estudis previs amb catinonesEstudis previs amb catinones

7


PresPresèència de lncia de l’’alcohol en el policonsumalcohol en el policonsum


Per quPer quèè ll’’alcohol ?alcohol ?

• Droga legal, publicitada• Assequible i dispensada en llocs d’oci• “Cultura del vi”• Falsa percepció de innocuïtat• Associat a ambient festiu• Inici precoç en el seu consum (“botellón”)

8


Els circuits de recompensa: punt comú


9

DAT

VMAT

Mefedrona (Meph), amfetamina

Meph

X

Terminaldopaminèrgic

Mecanisme dMecanisme d’’acciaccióó de la mefedrona de la mefedrona


COCAÏNA

X

La cocaïna inhibeix la recaptació de dopamina

MDPV

InhibiciInhibicióó de la recaptacide la recaptacióó de DA i efecte de DA i efecte psicoestimulantpsicoestimulant

10


Ef. psicoestimulant

Recompensa/condicionament (capacitat addictiva)

Canvis neuroquímics i d’expressió gènica

Efectes nocius?[toxicitat orgànica (neurotoxicitat), alteracions memòria…]

Catinona

Quins efectes de les drogues podem estudiar en Quins efectes de les drogues podem estudiar en rata/ratolrata/ratolíí? ?

Ratolins adolescents (4-5 setmanes)


Activitat locomotora, efecte psicoestimulantActivitat locomotora, efecte psicoestimulant

Actímetre

11



30 60 90 12

015

00

500

1000

1500

2000

2500

3000 SalineEtOH 0.5

Meph 10

Meph 10 + EtOH 1Meph 10 + EtOH 0.5

EtOH 1

$$$

@

$$$

$$$$

$

Time (min)

Bre

aks

Saline

EtOH 0.

5

EtOH 1

Meph 10

Meph 10

+EtO

H 0.5

Meph 10

+EtOH 1

Meph 25

Meph 25

+EtO

H 0.5

Meph 25

+EtO

H 10

2500

5000

7500

10000

12500

15000

17500

*

** ******

** **$

Cum

ulat

ive

brea

ks(1

20 m

in)

Potenciació de l’efecte de mefedrona per alcohol



Saline

EtOH

Meph

Meph +

EtOH

Meph +

Hal

Meph+E

tOH+Hal

Meph+Ket

Meph+EtO

H+Ket

0

2500

5000

7500

10000

12500

15000

**

***#

***ns

##

Cum

ulat

ive

brea

ks(1

20 m

in)

12

Conferència de Recerca, 13/10/2015 D. PubillFont: Tzschentke, 2014. Encyclopedia of Psychopharmacology

PreferPreferèència de lloc condicionada i capacitat de ncia de lloc condicionada i capacitat de recompensarecompensa


PreferPreferèència de lloc condicionada i capacitat de ncia de lloc condicionada i capacitat de recompensarecompensa

13



Resultats del CPP amb mefedrona i alcoholResultats del CPP amb mefedrona i alcohol

-100-50

050

100150200250300350

****

**

***ns

#

Saline

EtOH

Meph 10

Meph 10

+ EtO

H

Meph 25

Meph 25

+ EtO

H

Pref

eren

ce s

core

(s)

14


Principal Component Analysis

Els Els ““xipsxips”” (microarrays) de DNA: expressi(microarrays) de DNA: expressióó diferencial de gensdiferencial de gens


Saline

EtOH

Meph

Meph +

EtOH

0

50

100

150

200

Drd3

****

mR

NA

leve

ls (r

elat

ive

to c

ontr

ol)

Els receptors domaminEls receptors domaminèèrgics Drgics D33 i el seu paper en li el seu paper en l’’addicciaddiccióó

Nivells mesurats després del CPPAmb qPCR

L’increment d’expressió de receptors D3 no és suficient per si sol per provocar condicionament

15


Antagonisme dels efectes mediats pels receptors DAntagonisme dels efectes mediats pels receptors D33

0

50

100

150

200

* * **

* **###

##

MephEtOHSB

---

+--

-+-

++-

--+

-++

+-+

+++

mR

NA

leve

ls(r

elat

ive

to c

ontr

ol)

-100-50

050

100150200250300

**

***

#####

MephEtOHSB

---

+--

-+-

++-

--+

-++

+-+

+++

$

Pref

eren

ce s

core

(s)

SB: SB-277011A, antagonista competitiu del rec. D3


ImplicaciImplicacióó del BDNF i modulacidel BDNF i modulacióó farmacològicafarmacològica

Vehicle ANA-12 Meph Meph+ANA-12-100

-50

0

50

100

150

200

250 **

#

Pref

eren

ce s

core

(s)

0 2 40

50

100

150

200

250

*

***

Time after Meph injection (h)

BD

NF

mR

NA

(%)

ANA-12: antagonista del receptor del BDNF

16


Ratolins CD-1 adolescents

Sèrum Mefedrona (Meph)(25 mg/kg, s.c.)

Etanol (EtOH)(2, 1.5, 1.5, 1 g/kg)

Meph + EtOH

4 injeccions cada 2h en un dia

Estudi dEstudi d’’alteracions neuroqualteracions neuroquíímiques i conductalsmiques i conductals

24 h 7 dies 28 dies

Estrès oxidatiu • Integritat dels terminalsDopaminèrgics i serotoninèrgics• Memòria

Efectes sobre la neurogènesi


Neurotoxicitat i degeneraciNeurotoxicitat i degeneracióó de terminals monoaminde terminals monoaminèèrgicsrgics

17


Marcadors dMarcadors d’’integritat dels terminals sinintegritat dels terminals sinààptics i ptics i neurotoxicitatneurotoxicitat

Saline

EtOH

Meph

Meph +

EtOH

0

25

50

75

100

125DAT, Frontal cortex

***

##

*

[3 H]W

IN 3

5428

bind

ing

(%)

Saline

EtOH

Meph

Meph+E

tOH

0

25

50

75

100

125 SERT, Hippocampus

***

##

***

[3 H]P

arox

etin

ebi

ndin

g (%

)

Saline

EtOH

Meph

Meph +

EtOH

0

25

50

75

100

125 TH, Frontal cortex

**

***

#

Prot

ein

leve

ls (%

)

Saline

EtOH

Meph

Meph +

EtOH

0

25

50

75

100

125TPH-2, Hippocampus

** *

***

#

Prot

ein

leve

ls (%

)

7 dies post-tractamet


Saline

EtOH

Meph

Meph +

EtOH

0

25

50

75

100

125

150Frontal cortex

**#

MD

Ale

vels

( μm

ol/m

g tis

sue)

Saline

EtOH

Meph

Meph +

EtOH

0

25

50

75

100

125

150Hippocampus

**

##

*

MD

Ale

vels

( μm

ol/m

g tis

sue)

Mesura de lMesura de l’’estrestrèès oxidatius oxidatiu

L’alcohol potencia l’estrès oxidatiu (ROS) induït per la mefedrona

18


SOD

SFEtO

HMep

h

Meph + EtO

H0

50

100

150

200

250 *

Prot

ein

leve

ls (%

)

GPx1

SFEtO

HMep

h

Meph + EtO

H0

50

100

150

200

250

300

350

* *

Prot

ein

leve

ls (%

)

Catalasa

SFEtO

HMep

h

Meph + EtO

H0

50

100

150

200

250*** ***

Prot

ein

leve

ls (%

)

ExpressiExpressióó dd’’enzims antioxidantsenzims antioxidants

L’administració mefedrona sola o associada a alcohol indueixen una resposta antioxidant per combatre les ROS.

Tècnica: Western blotting


Saline

EtOH

Meph

Meph+E

tOH

0

20

40

60

80

100

120

***

*

#

BrdU

pos

itive

cel

ls/a

rea

(% o

f con

trol)

Efectes sobre la neurogEfectes sobre la neurogèènesinesi

Marcatge de cèl·lules que es divideixen amb BrdU

19


El laberint aquEl laberint aquààtic de Morristic de Morris


1 2 3 4 5 6

10

20

30

40

50

SalineEtOHMeph

* *

**

Meph+EtOH

Day

Late

ncy

to p

latfo

rm (s

)

Saline

EtOH

Meph

Meph +

EtOH

0

10

20

30

40

50

60**

#

Late

ncy

to p

latf

orm

are

a (s

)

Efectes sobre la memòriaEfectes sobre la memòria

20


MicrodiMicrodiààlisi lisi ““in vivoin vivo””: canvis neuroqu: canvis neuroquíímicsmics


Increment de dopamina per MDPV: relaciIncrement de dopamina per MDPV: relacióóamb activitat locomotoraamb activitat locomotora

Nivells de DA mesurats per microdiàlisiSuperposició amb activitat locomotora

21


SensibilitzaciSensibilitzacióó a MDPVa MDPV


ConclusionsConclusions

• La recerca sobre les noves substàncies psicoestimulants ens proporciona coneixements sobre els seus efectes i riscos. Aquests resultats permeten informar, de manera contrastada, a la població.

• La combinació de diferents tècniques i pautes de tractament ens permet obtenir diferents tipus d’informació sobre una determinada droga.

• El policonsum de mefedrona amb alcohol en ratolins adolescents incrementa diversos efectes de la primera. Si això també ocorre en humans, representaria un risc incrementat de desenvolupar-ne addicció.

• La mefedrona, administrada amb freqüència i a dosis elevades, pot produir alteracions neuronals localitzades i relacionades amb neurotoxicitat, les quals s’agreugen si es combina amb alcohol. La pèrdua de memòria espaial seria un dels efectes.

• Els estudis duts a terme amb MDPV indiquen que aquesta es comporta de forma similar i més potent que la cocaïna.

22


El nostre grup de recercaEl nostre grup de recerca

Neuropsicofarmacologia dels derivats amfetamínicsUnitat de Farmacologia i FarmacognòsiaFacultat de Farmàcia, UBDept. de Farmacologia i Química Terapèutica

Dra. Elena EscubedoDr. Jordi CamarasaDr. David Pubill

Dr. Raúl López

Doctorands:Andrés CiudadSònia AbadLetícia Duart

Post-docs:Patricia MuñozMario Buenrostro

Pràcticums de màster i alumnes Treball Dirigit

Col·laboracions recents

Dr. Carles J. Ciudad (Dept. Bioquímica, Fac. Farmàcia)Dra. Teresa Rodrigo (UEA Farmàcia)Dra. Olga Valverde (IMIM)Dr. Marcel·lí Carbó (IMIM/UPF)Dr. Jan Kehr (Inst. Karolinska)Drs. Daniele Lecca i Galeano Di Chiara (Univ. Degli studi di Cagliari)

Financiació

Plan Nacional sobre Drogas (2012I102)Generalitat de Catalunya (2009SGR977) Plan Nacional de Investigación Científica (SAF2013-46135-P)

Documents

Conferències de Recerca Neuropsicofarmacologia de les ...diposit.ub.edu/dspace/bitstream/2445/69133/1/Seminari9_DavidPubill.pdf · 1 Neuropsicofarmacologia de les noves drogues psicoestimulants