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CONTAJE DE RETICULOCITOS

Los reticulocitos son eritrocitos juveniles que contienen

remanente de ácido ribonucleico ribosomal, el cual está presente

en grandes cantidades en el citoplasma de los eritrocitos. El

número de reticulocitos en sangre periférica es un reflejo del

grado de actividad eritropoyética.

Los ribosomas tienen la propiedad de reaccionar con ciertos

tintes tales como azul brillante de cresilo, azure B o nuevo azul

de metileno, formando un precipitado azul de gránulos o

filamentos. Esta reacción se produce solo en preparaciones

vitales no fijadas. El reticulocito, mientras más inmaduro, va a

presentar mayor cantidad de material precipitado. De acuerdo a

la cantidad del material, se clasifican los eritrocitos en 4 grupos

de maduración. El recuento se puede realizar por tinción y

examen microscópico o contadores hematológicos. La muestra

que se utiliza es sangre total con EDTA. Este examen debe ser

realizado dentro de las 6 horas de trabajo en el laboratorio.

Contaje Manual:

Se mezclan volúmenes iguales de sangre con EDTA y tres

gotas del colorante (azul brillante de cresilo). La exacta

cantidad de sangre que se utiliza, depende del estado de

salud del paciente (en anemia, requiere mayor cantidad de

sangre, paciente poliglobúlicos requiere menor cantidad de

sangre.

Colocar a 37 ºc, por 5 min (establece laboratorio el tiempo)

Resuspendo las células con una ligera agitación

Se realiza un frotis, en el portaobjetos

Dejar secar el frotis.

Observar con lente 40 x y 100x (inmersión).

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Para el contaje se ubica un área donde las células no están

distorsionadas. Es incorrecto realizar frotis delgados donde las

células estén muy separadas.

En un frotis adecuado buscamos campos donde las células no

estén demasiado sobremontadas. Se cuentan 10 campos de 100

glóbulos rojos bien distribuidos y dentro de esos 10 campos

cuántos reticulocitos fueron contados??

Se saca por regla de tres:

1000 GR 70

100 X = 7%

El valor referencia de reticulocitos en recién nacido de 2-6 % y

en adulto 0.5 a 2.0 %.

Cuando disminuye el número de eritrocitos tal como sucede en

una anemia, el valor porcentual debe corregirse según el

hematocrito empleando la siguiente fórmula:

Hct paciente / Hct normal x valor de reticulocitos observados en

% = reticulocitos corregidos %.

En caso de anemia intensa, el número de reticulocits circulantes

suele ser superior al que corresponde al grado de regeneración

eritroblástica. Ello obedece a que la anemia se acompaña siempre

de un estímulo eritropoyético compensador, que facilita una

salida precoz de reticulocitos desde la médula a sangre

periférica, y un acortamiento de su periodo de maduración

intramedular, lo que supone un aumento del periodo de

maduración periférica. Con esto se observará en sangre

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periférica con tinción Wright, glóbulos rojos grandes

(macrocitos) y de una tonalidad azulada (policromasia).

Como se observa existe una relación inversa, aproximadamente

lineal, entre el hematocrito y el periodo de maduración periférica

de reticulocitos. De esta forma puede calcularse otra magnitud

de interés clínico denominada índice de producción

reticulocitaria (IPR) o índice de maduración reticulocitaria (IMR)

Cuanto más severa es la anemia más inmaduro es el reticulocito

liberado, por tanto el IPR es el indicador más preciso de una

adecuada respuesta medular frente a la anemia.

HEMATOCRITO DÍAS DE MADURACIÓN

EN MO

DÍAS DE MADURACIÓN

EN SP

15 1 3

25 2 2

35 2 1½

45 3 1

IPR = % reticulocitos corregidos/tiempo de maduración de los

reticulocitos en mo.

Un IPR > 3 indica aumento de actividad eritropoyética medular

(anemia regenerativoa), mientras que un IPR < 2 indica escasa

actividad eritropoyética.

CAUSAS DE ERROR EN UN RECUENTO VISUAL DE

RETICULOCITOS.

Relación sangre/colorante insuficiente

Realizar un recuento sobre un mínimo reducido de

eritrocitos.

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Realizar el recuento en áreas donde los eritrocitos se

hallan mal distribuidos o mal inidvidualizados.

Confundir los precipitados de ARN con cuerpos de Heinz,

cuerpos de Howell.Jolly, precipitados del propio colorante.

En casos de esplenectomía, confundir las inclusiones

intraeritrocitarias con reticulocitos.

Fuente: Terán Ivette, Dra. Documentos de Laboratorio de

Hematología. PUCE.

Vives Joan, Aguilar Josep. (2000) Manual de Técnicas de

laboratorio de hematología. Masson: España