Cromatografía

7/10/2015 CromatografaWikipedia,laenciclopedialibre

https://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa 1/6

Cromatgrafodegases

Colectorautomticodefraccionesydemuestrasparalacromatografa

CromatografaDeWikipedia,laenciclopedialibre

La cromatografa es un mtodo fsico de separacin para lacaracterizacin de mezclas complejas, la cual tiene aplicacin entodaslasramasdelaciencia.Esunconjuntodetcnicasbasadasenel principio de retencin selectiva, cuyo objetivo es separar losdistintos componentes de una mezcla, permitiendo identificar ydeterminar las cantidades de dichos componentes. Diferenciassutiles en el coeficiente departicin de los compuestos dan comoresultadounaretencindiferencialsobrelafaseestacionariay,portanto, una separacin efectiva en funcin de los tiempos deretencindecadacomponentedelamezcla.

La cromatografa puede cumplir dos funciones bsicas que no seexcluyenmutuamente:

Separar los componentes de lamezcla, para obtenerlosmspurosyquepuedanserusadosposteriormente(etapafinaldemuchassntesis).Medir la proporcin de los componentes de la mezcla(finalidadanaltica).Eneste caso, las cantidadesdematerialempleadassuelensermuypequeas.

ndice

1Historia2 Clasificacin de los mtodos de separacin encromatografa3Trminosempleadosencromatografa[3]4Vasetambin5Referencias6Enlacesexternos

Historia

La cromatografa, como indica su nombre (proviene del griego chroma y graphos, quesignifican respectivamente "color" y "escribir", literalmente 'escritura de color') , fue empleadaoriginalmenteconsustanciascoloreadas.

Yaen1850,Rungedescribilaformacindezonascoloreadascuandosedepositabangotasdesustanciascolorantes sobre papel secante, pero el desarrollo ms importante vino con los experimentos deMijalTsweet1 (Mikhail Semenovich Tsweet, 18721919), que emple por primera vez en 1906 el trmino"cromatografa". A comienzos del ao 1903,Mijail Tsweet, botnico ruso, logr separar un mezcla depigmentosdeplantas(clorofilas)enunacolumnadecarbonatodecalcio.Mstarde,en1910,cromatografi



un extracto de yema de huevo en una columna de inulina. Sus investigaciones, sin embargo, no fueronutilizadasporotrosinvestigadoreshasta1931.EstademoraquizsedebialhechodequelostrabajosdeTswettfueronpublicadosenrusoyenunarevistaquenotenaampliacirculacin.

Elrpidodesarrollodelacromatografacomoherramientaanalticasensiblenoocurrihasta1931,cuandoKuhn, con Lederer y con Winterstein, emple la tcnica para el anlisis de pigmentos de plantas,confirmandolosprimerostrabajosdeTswettysuprediccindequeelcarotenonoeraunasolasustancia,sino una mezcla de varios homlogos estrechamente relacionados. Al mismo tiempo, el tamao de lascolumnasempleadasfueaumentandoparapoderrecuperar loscomponentesseparados.Latcnica,por lotanto,noerasoloanalticasinopreparatoria.

Lacromatografaencolumnaporestostiempotenaaplicacioneslimitadas,dadoqueloscomponentesquesepodanseparareraninvariablementelpidos.Pasaron10aosantesdequeMartinySyngedesarrollaranunatcnicamediantelacualsepudieransepararcompuestosacuososohidroflicos.Estomarcunnuevointers en la tcnica y en 1944 Consden, Gordon y Martin lograron separar mezclas complejas deaminocidosenpapelyfueronpremiadosconelPremioNobelporsustrabajos.Alpocotiempo,en1947,enEstadosUnidosdeNorteAmrica,laComisindeEnergaAtmicadioaconocerinformacinsobreelusodelacromatografadeintercambioinicoparalaseparacindeproductosdefisinnuclear.

EldesarrollomsrecienteenelcampodelacromatografasederivadelostrabajosdeStahl,quienen1956present una tcnica prctica mediante la cual una capa delgada slice gel, celulosa o almina eradiseminada sobre una placa de vidrio. Esta tcnica, llamada cromatografa de capa fina, result en unanlisismsrpidoymssensibleparaelexamendemezclascomplejasy,enmuchoscasos,hasustituidoaotrosmtodossimilaresmsantiguosdecromatografaenpapel.

En1959,PorathyFlodinintrodujeronunanuevatcnicallamadacromatografadefiltracindegel.Estasehaconvertidoenunapoderosaynuevaherramientaparalaseparacindesustanciasdealtopesomolecular,particularmente las protenas, y ha encontradomuchas aplicaciones en los campos de la bioqumica, lamedicina, la fisiologa y la biologa.Lamayora de las tcnicas de filtracin en gel utilizan columnas yrecientementesehanhechotrabajosconunacombinacindefiltracinengelymaterialesdeintercambioinico,lograndoquelasseparacionescomplejasseanextremadamenterpidasyeficientes.

LosprimerosequiposdecromatografadegasesaparecieronenelmercadoamediadosdelsigloXX.Asuvez, la cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC High Performance Liquid Chromatography, eningls) comenzadesarrollarse en los aos1960, aumentando su importancia en lasdcadas siguientes,hastaconvertirseenlatcnicacromatogrficamsempleada.Sinembargoestoseirmodificandoconelpasodelosaos.

Clasificacindelosmtodosdeseparacinencromatografa

Lasdistintastcnicascromatogrficas2sepuedendividirsegncmoestdispuestalafaseestacionaria:

Cromatografa plana. La fase estacionaria se sita sobre una placa plana o sobre un papel. Lasprincipalestcnicasson:

CromatografaenpapelCromatografaencapafina

Cromatografa en columna. La fase estacionaria se sita dentro de una columna. Segn el fluidoempleadocomofasemvilsedistinguen:



Separacindeclorofilasmediantecromatografaenpapel

CromatografadelquidosCromatografadegasesCromatografadefluidossupercrticos

La cromatografa de gases se aplica a numerosos compuestos orgnicos. En el caso de compuestos novoltiles,serecurreaprocesosdenominadosde"derivatizacin",afindeconvertirlosenotroscompuestosquesevolatilicenenlascondicionesdeanlisis.

Dentrode lacromatografa lquida,destaca lacromatografa lquidadealtaresolucin(HPLC,del inglsHigh Performance Liquid Chromatography), que es la tcnica cromatogrfica ms empleada en laactualidad,normalmenteensumodalidaddefasereversa,en laque la faseestacionaria tienecarcternopolar, y la fasemvil posee carcter polar (generalmente agua omezclas con elevada proporcin de lamisma o de otros disolvente polares, como por ejemplo, metanol). El nombre de "reversa" viene dadoporquetradicionalmentelafaseestacionariaestabacompuestadesliceoalmina,decarcterpolar,yportantolafasemvileraundisolventeorgnicopocopolar.Unaserieeluotrpicaesunrangodesustanciasdediferentespolaridadesqueactancomo fasemvilyquepermitenobservarunmejordesplazamientosobreunafaseestacionaria.



Tipos Fasemvil Faseestacionaria

Cromatografaenpapel Lquido Papeldecelulosa.

Cromatografaencapafina Lquido Geldesliceoalmina.

Cromatografadegases Gas

Columnascapilaresdeslicefundida,conrecubrimientosinternosdevariostiposdesiloxanosenlazados,columnasempaquetadascontierrasdiatomeashechasde

tubosdevidrioometal.Cromatografa

lquidaenfasereversa

Lquido(polar) Rellenodesiloxanodeoctiloosiloxanodeoctadecilo.

Cromatografalquidaenfasenormal

Lquido(menospolar)

Rellenodeslice,alminaounsoportealqueseunenqumicamentegrupospolares(ciano,amino,etc).

Cromatografalquida

deintercambio

inico

Lquido(polar) Resinasdeintercambioinico.

Cromatografalquida

deexclusinLquido Rellenodepequeaspartculasdesliceopolmerosconreddeporosuniforme.

Cromatografalquida

deadsorcinLquido Partculasfinamentedivididasdesliceodealmina.

Cromatografade

fluidossupercrticos

Lquido Columnasabiertasdeslicefundidaconrecubrimientosinternosdevariostiposdesiloxanosenlazadosydeenlacescruzados.

Trminosempleadosencromatografa3

Analitoeslasubstanciaquesevaaseparardurantelacromatografa.Fasemvileslafasequesemueveenunadireccindefinida.Puedeserunlquido(cromatografadelquidosoCEC).ungas(cromatografadegases)ounfluidosupercrtico(cromatografadefluidossupercrticos).Lamuestraqueestsiendoseparada/analizada(formadadeanalito/syeldisolvente)se inyecta en la fasemvil que semueve a travs de la columna. En el caso de la cromatografalquida de alta resolucin, HPLC, la fase mvil es un disolvente nopolar como el hexano (fasenormal)obienalgndisolventepolar(cromatografadefasereversa).Faseestacionariaeslasustanciaqueestfijaenunaposicindurantelacromatografa.Unejemploeslacapadegeldesliceenlacromatografaencapafina.Cromatografa analtica se emplea para determinar la existencia y posiblemente tambin laconcentracindeunanalitoenunamuestra.



Cromatogramacorrespondienteaunacromatografalquidaenfasereversaparacompuestosfenlicos

Faseenlazadaesunafaseestacionariaqueseunedeformacovalentealaspartculasdesoporteoalasparedesinternasdelacoluma.Cromatograma es el resultado grfico de la cromatografa. En el caso de separacin ptima, losdiferentes picos o manchas del cromatograma se corresponden a los componentes de la mezclaseparada.

EnelejeXserepresentael tiempoderetencin,yenelejeYunaseal(obtenida,porejemplo,apartir de un espectrofotmetro, un espectrmetro de masas o cualquier otro de los diversosdetectores)correspondientealarespuestacreadaporlosdiferentesanalitosexistentesenlamuestra.Enelcasodeunsistemaptimo, la sealesproporcionala laconcentracindelanalitoespecficoseparado.

Cromatgrafoeselequipoquepermiteunaseparacinsofisticada.Porejemplo,uncromatgrafodegasesouncromatgrafodelquidos.Cromatografaeselmtodofsicodeseparacinenelcualloscomponentesquesevanasepararsedistribuyenentredosfases,unade lascualesesestacionaria(faseestacionaria)mientras laotra(lafasemvil)semueveenunadireccindefinida.Eluyenteeslafasemvilqueatraviesalacolumna.Serieeluotrpicaesunalistadedisolventesclasificadossegnsupoderdedilucin.Faseinmovilizadaesunafaseestacionariaqueestinmovilizadasobrepartculasdesoporte,oenlaparedinteriordeltubocontenedorocolumna.

Cromatografapreparativaseusaparapurificarsuficiente cantidad de sustancia para un usoposterior,msqueparaanlisis.Tiempoderetencinesel tiempocaractersticoque tarda un analito particular en pasar a travsdelsistema(desdelacolumnadeentradahastaeldetector) bajo las condiciones fijadas. Vasetambin:ndicederetencindeKovatsMuestraes lamateriaquevaaseranalizadaenla cromatografa. Puede consistir en un simplecomponente o unamezcla de varios. Cuando lamezclaestratadaenelcursodelanlisis,lafaseofases que contienen los analitos de inters esllamadaigualmentemuestramientrasel restodesustancias cuya separacin no resulta de intersesllamadaresiduo.Soluto es cada uno de los componentes de lamuestraquevaaserseparado.



Disolvente es toda sustancia capaz de solubilizar a otra,y especialmente la fase mvil lquida encromatografadelquidos.CapacidaddecargaEslacantidadmximademuestraquepuedeserseparadaenunasolacarga.CapacidaddefraccionamientoEselnmeromximodecomponentesquepuedenserseparadosenunasolaoperacin.SelectividadEslacapacidaddepoderdiscriminarydistinguirentredoscomponentes.

Vasetambin

WikimediaCommonsalbergacontenidomultimediasobreCromatografa.ProcesodeseparacinSerieeluotrpicaCromatografadegasesCromatografacuantitativaencapadelgadaCromatografadeinmunoafinidad

Referencias1. Lacromatografa.(http://books.google.es/books?id=XH2HzSlJPywC&pg=PA159)Fundamentosde tecnologade

productosfitoteraputicos.NikolaiSharapin.EditorrialConvenioAndrsBello,2000. ISBN:9586980014.Pg.159190.l

2. Tcnicas de bioqumica y biologa molecular. (http://books.google.es/books?id=iW0yHGmEJwC&pg=PA179)JorgeDavidRoriguezMiranda.EditorialRevert,1991.ISBN:8429118195.Cap.8:Cromatografa.Pg.179

3. Glosario de los trminos ms usados en cromatografa. (http://books.google.es/books?id=efw9ydz9weYC&pg=PA15) Introduccina laCromatagrafa.StellaTorresdeYoung.Edicionesde laUniv.NacionaldeColombia.ISBN:9581701192.Pg.15

EnlacesexternosCromatografa.(http://www.ugr.es/~quiored/lab/oper_bas/crom.htm)UniversidaddeGranada.http://www.ulpgc.es/hege/almacen/download/39/39360/separaciones_por_cromatografia_1.pdfSeparacionesporcromatografa.]UniversidaddeLasPalmasdeGranCanaria.

Obtenidodehttps://es.wikipedia.org/w/index.php?title=Cromatografa&oldid=85511226

Categoras: Cromatografa Procesosdeseparacin TcnicasyherramientasbiolgicasCienciadelosaos1900 1903

Estapginafuemodificadaporltimavezel1oct2015alas20:08.EltextoestdisponiblebajolaLicenciaCreativeCommonsAtribucinCompartirIgual3.0podranseraplicablesclusulasadicionales.Lanselostrminosdeusoparamsinformacin.WikipediaesunamarcaregistradadelaFundacinWikimedia,Inc.,unaorganizacinsinnimodelucro.

Documents

Cromatografía