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Cromatografía multidimensional
R. Carabias Martínez
Cromatografía multidimensional
Cromatografia Monodimensional
Cromatografia multidimensional
Todos los componentes de la muestra están sujetos a dos separaciones.
Los componentes que se han separado en la primera columna deben permanecer separados
en la segunda columna
TIPOS DE CROMATOGRAFIA MULTIDIMENSINAL
2D TLC Elucion en una dirección seguida de una elución formando un ángulo con la primera ( 1944)
CGxCG
LCxGC
LCxLC
CGxCGxLC
Cromatografía de gases en dos dimensiones
1991 Phillips
Acronimo de comprehensive GCxGC
Inyección secuencial de segmentos de
la primera columna ( dimensión 1 D1)
son inyectados en la segunda columna
( dimensión 2 D2)
Inyector no clave.
Columnas, selección adecuada con fases
estacionarias diferentes
Detectores, respuesta rápida
Etapa clave el modulador ( INTERFASE ENTRE
LAS DOS COLUMNAS)
Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
FORMAS DE TRABAJO
Utilización de dos columnas con fases diferentes
La primera no polar de 25 m
La segunda polar de 1m ( la elución es completa en 2-8 min)
Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
TRABAJAR CON DOS COLUMNAS EN SERIE
Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
MODULADORES La parte más importante
Tiene dos funciones:
focalización de los analitos
transferencia rápida.
TIPOS: valvulas, focalizadores térmicos
VENTAJAS DE LA FOCALIZACIÓN TÉRMICA
Incremento de señal
Un pico cromatográfico eluye en 10segundos
Se suelen tomar al menos cinco fracciones del pico.
Duración de la señal de 2segundos.
Aumento de la sensibilidad por cinco
Suma de las cinco áreas igual al área total
Cromatografía de gases en dos dimensiones
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Cromatografía de gases en dos dimensiones
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Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
Cromatografía de gases en dos dimensiones
DETECTORES
Se obtienen señales de semianchura de pico de 0.2segundos.
Detectores de respuesta rápida:
Detector de ionización por llama (FID)
Detectores de captura electrónica ( ECD)
Detectores de tiempo de vuelo (TOP-MS)
Detectores de quadrupolo ( MS)
Cromatografía de gases en dos dimensiones
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Cromatografía de gases en dos dimensiones
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Cromatografía Líquida-Gases
Dificultades de ¨on line¨LC- GC.
El empleo de LCxCG ´off line¨se usa frecuentemente.
Uso de NP ( fase normal) y SEC 8 exclusión por tamaño) y acoplamiento a gases
Necesidad de una interfase. En la interfase tiene lugar la evaporación del disolvente.
Problemas con las fases móviles que tienen agua
Problemas con los analitos volátiles
Soluciones
Microcromatografía ( 10L ).
Usar un SPE previo
Las más utilizadas son NP con evaporación del disolvente
Para volátiles usar SPE o bien un PTV
Cromatografía Líquida-Gases
Cromatografía Líquida-Gases
Cromatografía Líquida-Gases
Programación de temperatura para la evaporación (PTV)
Cromatografía Líquida-Gases
Triglicéridos. Separación en función de el numero de átomos de carbono, dobles enlaces, ácidos grasos
Cromatografía Líquida Líquida
Dificultades de ¨on line¨LC- LC inmiscibilidad de las fases móviles precipitación de las sales del tampón incompatibilidad de fases móviles
Propuestas de ´on line¨
Uso de micro y nano cromatografía líquidapermite inyectar volúmenes pequeños de fases inmiscibles75% n-hexano 25% acetato de etilo en una fase móvil 50% agua 50% acetonitrilo.
Uso de separación con columna de cambio iónico seguido de una columna de C18
Uso de separación con C18 seguido de exclusión por tamaño
Cromatografía Líquida Líquida
Cromatografía Líquida Líquida
Cromatografía Líquida Líquida
Cromatografía Líquida Líquida
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Cromatografía multidimensional
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Cromatografía de gases en dos dimensiones
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