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BIBLIOTECA DE FARMACIA Y BIOQUIMICA UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA TESIS I “Efecto del látex de Croton alnifolius Lam. (Cabra- cabra) en las úlceras gástricas inducidas en Rattus norvegicus var. albinusAUTORES: CÁCERES BERNAL, JACK NIXON ESQUIVEL SANCHEZ, MARTHA CECILIA ASESORA: Dra. Ana María Guevara Vásquez Trujillo Perú 2012 Biblioteca Digital - Dirección de Sistemas de Informática y Comunicación Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú. Para ver una copia de dicha licencia, visite http://creativecommons.org/licences/by-nc-sa/2.5/pe/

Croton alnifolius Lam. (Cabra- cabra) en las FARMACIA DE

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

TESIS I

“Efecto del látex de Croton alnifolius Lam. (Cabra- cabra) en las

úlceras gástricas inducidas en Rattus norvegicus var. albinus”

AUTORES:

CÁCERES BERNAL, JACK NIXON

ESQUIVEL SANCHEZ, MARTHA CECILIA

ASESORA:

Dra. Ana María Guevara Vásquez

Trujillo – Perú

2012

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Dedicatorias

Con eterno amor y gratitud a nuestros

padres

Por ser mi motivación, ejemplo a seguir,

quienes con su sacrificio, amor y

compresión supieron guiarnos por el

sendero del bien e hicieron posible la

culminación de nuestra carrera profesional.

Con amor a nuestros hermanos:

Por su cariño, compresión, por

compartir con nosotros gratos y

difíciles momentos y por todo su

apoyo brindado.

Jack y Martha

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Agradecimiento

A los profesores:

Dra. Elena Mantilla Rodríguez

Dra. Ana María Guevara Vásquez

Mg. Marilú Roxana Soto Vásquez

Por concedernos su apoyo y compartir sus conocimientos con

nosotros, así como por su acertado asesoramiento en el presente

trabajo de investigación.

Jack y Martha

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PRESENTACIÓN

SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR

De conformidad con las disposiciones legales y vigentes del reglamento de grados y

títulos de la Facultad y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, sometemos a

vuestro elevado criterio el presente informe de Tesis I intitulada:

“Efecto del látex de Croton alnifolius Lam. (cabra- cabra) en las úlceras gástricas inducidas

en Rattus norvegicus var. albinus”

Esperando vuestra aprobación Señores Miembros del Jurado dejamos a su criterio la

calificación del presente informe de tesis.

Trujillo, Abril del 2012

Jack Nixon Cáceres Bernal Martha Cecilia Esquivel Sánchez

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Jurado

DRA. ELENA MANTILLA RODRÍGUEZ (PRESIDENTE)

DRA. ANA MARIA GUEVARA VÁSQUEZ (MIEMBRO)

M Sc. ROXANA MARILÚ SOTO VÁSQUEZ (MIEMBRO)

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ÍNDICE

Resumen………………………………………………………………..i

Abstract…………………………………………………......................ii

INTRODUCCION………………………….……………… …………1

MATERIAL Y METODO…………………………………………......4

RESULTADOS …………………………………………………..…..16

DISCUSION…………………………………………………………..24

CONCLUSIONES…………………………….....................................34

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS…………………………..……35

ANEXOS

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Resumen

El objetivo de este trabajo fue demostrar el efecto del látex de Croton alnifolius Lam. (cabra-

cabra) en las úlceras gástricas inducidas en Rattus norvergicus var. albinus. Realizándose la

recolección del Croton alnifolius Lam. (cabra-cabra), en la población Callancas – Otuzco, lugar de

recolección de la planta para la obtención del látex, el cual se obtiene al realizar cortes transversales

en los tallos, los cuales fueron recolectados en recipientes de capacidad apropiada, que contenían

los siguientes solventes: Cloroformo, Etanol, Agua y Agua/ácido. Las muestran fueron trasladadas

al Laboratorio de Farmacognosia de la Facultad de Farmacia, para el tamizaje fitoquímico

preliminar, encontrándose los siguientes fitoconstituyentes: Cumarinas, Catequinas, Saponinas,

Flavonoides y Mucilagos, los cuales actúan protegiendo en el mecanismo fisiopatológico de las

úlceras gástricas. Por tal motivo se planteó un esquema de tratamiento alternativo usando el látex

de Croton alnifolius Lam. (Cabra- cabra); el esquema de trabajo consistió en distribuir los

especímenes de Rattus norvegicus var. albinus en cinco grupo de cinco cada uno: Grupo I: Blanco;

Grupo II; Control: Grupo III: Problema I: Grupo IV: Problema II y Grupo V: Patrón. La inducción

de úlceras gástricas se realizó a los Grupos II, III, IV, V usando Indometacina (30 mg/Kg p.c),

administrada por vía oral, interdiario por las mañanas durante 7 días. En tratamiento al Grupo III, se

le administró 0.5 mL del látex diluido en 1mL de agua; En el Grupo IV se administró 1 mL de látex

diluido en 1 mL de agua. Al Grupo V se le administró Ranitidina(100 mg/Kg c.p). Los resultados

demuestran que el grupo IV tiene mejor respuesta frente a las úlceras gástricas, por lo cual el efecto

del látex tiene la acción terapéutica esperada, pero al comparar con el Grupo V se evidencia que

ranitidina tiene una acción mayor.

Palabras Claves: Úlceras Gástrica, Látex, Croton alnifolius

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ABSTRACT

The objective of this study was to demonstrate the effect of latex of Croton alnifolius Lam. (cabra-

cabra) in gastric ulcers induced in Rattus norvegicus var. albinus. Performing the collection of

Croton alnifolius Lam. (cabra-cabra) in the ville Callancas - Otuzco, point of collection of the plant

for the production of latex, which is obtained by cross cutting the stems, which were collected in

containers of appropriate capacity, containing the following solvents: Chloroform, Ethanol, Water

and water / acid. The samples were transferred to the Laboratory of Pharmacognosy, Faculty of

Pharmacy, for the preliminary phytochemical screening, meeting the following phytoconstituents:

Coumarins, catechins, saponins, flavonoids and mucilage, which act in protecting the

pathophysiological mechanism of gastric ulcers. Therefore a scheme was proposed alternative

treatment using the latex of Croton alnifolius Lam. (cabra-cabra), the working plan was to distribute

specimens of Rattus norvegicus var. albinus into five groups of five each: Group I: White, Group II;

Control: Group III: Problem I: Group IV: Problem II and Group V: Pattern. The induction of gastric

ulcers was conducted to Groups II, III, IV, V using indomethacin (30 mg / kg bw), administered

orally, inter-day in the morning for 7 days. In Treatment Group III was administered 0.5 mL of the

latex diluted in 1mL of water; In Group IV was administered 1 mL of latex diluted in 1 mL of

water. Group V Ranitidine was administered (100 mg / Kg cp). The results show that the group IV

has better response to gastric ulcers, so the effect of latex has the expected therapeutic action, but

when compared with Group V is shown that ranitidine has a major action.

Keywords: Gastric Ulcer, Látex, Croton alnifolius

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I. INTRODUCCIÓN

Las plantas han sido desde la antigüedad un recurso al alcance del ser humano para su alimentación y

curación de enfermedades, estas últimas en la actualidad son una promisoria fuente de nuevas drogas,

por lo cual la ciencia moderna debe analizar y estudiar sus efectos terapéuticos pues requiere precisar,

comprar y clasificar las diversas propiedades, no con el fin de disminuir la confianza en la naturaleza,

sino para agrupar y determinar los principios activos responsables de su actividad para luego darlos a

conocer a la humanidad 1-3.

Las enfermedades gastrointestinales (GI) ocupan una de las primeras causas de consulta médica y son

también causas de muerte en el mundo; no perdonan a nadie ni por edad, ni por condición social,

aunque el grupo más vulnerable a sus síntomas son los niños pequeños y los ancianos. Son

ocasionadas por varios motivos que pueden ser desde orgánicos y psicológicos. A menudo se

presentan con 1 o más de 4 clases comunes de síntomas y signos, como por ejemplo dolor abdominal,

ingestión alterada de alimentos (náuseas y vómitos), movimientos intestinales alterados (diarrea,

estreñimiento) y sangrado GI, que ocurren sin aviso o precedido por uno o más de lo anterior 4-6.

Las enfermedades GI pueden estar limitadas al tracto gastrointestinal (reflujo, esofagitis, úlcera

gástrica y duodenal o enfermedad diverticular), o ser la manifestación de un trastorno sistémico,

presentarse como enfermedad sistémica debida a un proceso patológico primario (deficiencia de

vitaminas u ocasionada por la mala absorción) debido a que las diferentes partes del tracto GI se

especializan en ciertas funciones las causas más prominentes , consecuencias y manifestaciones de la

enfermedad difieren de un sitio al otro 6-9.

La úlcera gástrica es una enfermedad de origen multifactorial que se caracteriza por la pérdida

de la integridad de la mucosa gastrointestinal, de forma redonda u oval, de dimensiones variables y

que se extiende, como mínimo, hasta la Muscularis mucosae 6-9.

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La prevalencia de úlcera es elevada, pues afecta al 10% de la población en algún período de la vida,

con una prevalencia de úlcera activa en un momento determinado del 1%. La úlcera gástrica era la

forma más común de úlcera péptica en el siglo pasado, sin embargo, en la actualidad su incidencia

anual es inferior a la de la úlcera duodenal. Oscilando entre 0,3 y 0,4 por 1.000 habitantes. En Europa

y en EE.UU. su incidencia es la mitad de la de la úlcera duodenal, mientras que en Japón es 5-10

veces más frecuente. Raras veces se presenta antes de los 40 años de edad y su pico de incidencia se

sitúa entre los 55 y los 65 años, siendo similar en ambos sexos 10-11.

Existen publicaciones que muestran el porcentaje de casos de úlcera péptica en el Perú, un ejemplo de

éste es el estudio realizado en el hospital Daniel Alcides Carrión del Callao-Lima en el periodo 2000-

2005, donde se realizó un estudio de prevalencia de éstas úlceras. Donde se trabajó con un grupo de

pacientes con diagnóstico de úlcera péptica mediante examen endoscópico, obteniendo como

resultado que de 10819 reportes de endoscopía, se encontraron 899 casos de úlcera péptica. La

localización más común de la úlcera gástrica fue la curvatura menor de antro gástrico y en la úlcera

duodenal fue la cara anterior de bulbo duodenal. Las úlceras gástricas en comparación con las

duodenales tendieron a ser de mayor tamaño y a presentarse en número mayor 12.

Para el caso del Departamento de La Libertad el Ministerio de Salud reporta que entre las 10

principales enfermedades prevalentes, las úlceras gástricas se encuentran en el quinto lugar con un

69% de casos de los cuales el 19% correspondería al sexo masculino y el 50 % para el sexo femenino.

En los pacientes sometidos a gastrectomía parcial por enfermedad péptica benigna se ha descrito que,

después de un largo período de tiempo, existe un riesgo aumentado para desarrollar cáncer en el

remanente gástrico y un metanálisis sugiere que el riesgo es más alto una vez han transcurrido quince

años desde la cirugía gástrica. En contraste con el cáncer gástrico desarrollado en el estómago intacto,

donde el Helicobacter pylori representa el factor carcinógeno más importante, tras una gastrectomía

parcial, el papel carcinógeno principal lo desempeña el reflujo biliar, una consecuencia invariable de

las operaciones que resecan o provocan un by-pass del píloro 12-14.

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En el tratamiento de las úlceras, tanto gástricas como duodenales, se debe tener en cuenta que su

aparición es el resultado de un desequilibrio entre los agentes irritativos y los agentes protectores.

Entre los agentes irritativos destacan, la secreción ácida del jugo gástrico, las enzimas proteolíticas y

a esto se les debe añadir la frecuente presencia de productos químico (AINEs, cafeína, etanol, etc.)

que son ingeridos como elementos exógenos. Para el caso de los factores protectores destacan la

permeabilidad de la secreción del moco por parte de las células de la mucosa, con una renovación

celular que le permite una rápida reparación del epitelio mucoso y por su rica vascularización.

También tenemos como un factor importante a las prostaglandinas las cuales influyen sobre la

producción de moco y de bicarbonato (HCO3)- en la mucosa y a su vez mantiene el flujo sanguíneo

local, su inhibición con los AINEs modifica intensamente la capacidad protectora de la mucosa

gastrointestinal. De acuerdo a todos estos conceptos el tratamiento farmacológico está dirigido a:

Neutralizar o inhibir la secreción de acido y pepsina; y reforzar la resistencia de la mucosa y facilitar

la cicatrización. Durante muchas décadas la terapéutica ha destacado sobre el primero de los

mecanismos, alcanzándose el máximo éxito cuando se conseguía mantener reducida la secreción

ácida sin excesivos efectos secundarios. Pero en la actualidad se está presentando atención creciente

al desarrollo de fármacos que estimulen el mecanismo de protección 8,9,15,16.

En la valoración última del tratamiento a adoptar es preciso considerar las posibles complicaciones

(hemorragias, perforaciones), las peculiaridades de cada método de tratamiento, tanto farmacológico

como quirúrgico, sus respectivas indicaciones, complicaciones y las condiciones personales de cada

enfermo, puesto que su adquisición y continuidad también esta relacionado con el poder adquisitivo

del paciente a los fármacos que actúan sólo de manera sintomática 8,9,15,16.

Esta realidad es el motivo principal para que el paciente no continúe con el tratamiento farmacológico,

proponiendo así el tratamiento alternativo con plantas medicinales, estos remedios antiguos que han

traspasado milenios, y forman parte de las tradiciones de todos. La función de la fitoterapia en el

tratamiento de las úlceras gástricas consiste en utilizar plantas medicinales para coadyuvar la terapia

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prescrito por el médico, mediante el uso de las plantas antiácidas, antiinflamatorias, asépticas. Existe

una amplia gama de recetas y productos naturales que se recomiendan frente a esta enfermedad 3,13,14.

Dentro de la flora del Perú se cuenta con especies vegetales muy variadas, muchas de ella únicas en el

mundo, que no se han difundido debido al escaso conocimiento científico que se tiene de ellas y el

poco apoyo que en general se le brinda a la investigación 1.

La función de la fitoterapia en el tratamiento de las úlceras pépticas consiste en utilizar plantas

medicinales para coadyuvar la terapia prescrita por el médico, mediante el uso de plantas antiácidas,

antiinflamatorias, asépticas. Existe una amplia gama de recetas y productos naturales que se

recomienda frente a esta enfermedad como por ejemplo es el uso de col, que se usa en como antiácido

y cicatrizante natural por su alto contenido de glutamina; también se utiliza la manzanilla, por sus

propiedades antisépticas y se considera un excelente protector y reparador de la membrana gástrica; de

esta índole se aprecian un sin número de especies con importancia terapéutica en el tratamiento de

úlceras tanto gástricas como duodenales, sólo para citar algunas más tenemos: regaliz, tilo, sábila,

alfalfa, entre otras 1.

También existen otras especies poco conocidas, pero de gran importancia que ofrecen muchos

beneficios para el tratamiento de úlceras gástricas, una de ella en particular es Croton alnifolius Lam,

conocido como cabe-cabe o cabra-cabra, Esta planta crece en la localidad de Otuzco es utilizada para

el tratamiento de muchas heridas caseras, cortes poco profundos y también para en tratamiento de

úlceras gástricas sangrantes. Los habitantes le atribuyen propiedades cicatrizantes muy significativas y

trasmitida con el paso del tiempo; la emplean en infusiones, y manera directa sobre las heridas, o

ingiriendo el látex. Todos estos atributos nacen del conocimiento empírico de la población el cual

ante accidentes producidos prefieren utilizarlo el látex en lugar de algún fármaco 1.

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Nuestro principal interés es proporcionar una fuente de tratamiento accesible a la población que se

encuentra con este tipo de patología, y así disminuir muchas de las complicaciones que se presentan,

siendo una de estas complicaciones con elevadas tasas de morbilidad mundial el cáncer gástrico. Por

todo lo antes expuesto presentamos la investigación en el látex del Croton alnifolius Lam. (Cabra-

cabra) en las úlceras gástricas inducidas en Rattus norvegicus var. albinus” 1, 2.

Por lo que surge la siguiente interrogante ¿Qué efecto tiene el látex de Croton alnifolius Lam. en las

úlceras gástricas inducidas en Rattus norvergicus var. albinus?

Ante lo cual se propone que el látex de Croton alnifolius Lam. mejora y cicatriza las úlceras gástricas

inducidas en Rattus norvegicus var. albinus

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1. OBJETIVOS:

1.1. General

Determinar el efecto del látex del Croton alnifolius Lam. sobre las úlceras gástricas

inducidas en Rattus norvegicus var. albinus.

1.2. Específicos

Identificar los Fitoconstituyentes presentes en el látex del Croton alnifolius Lam

Inducir las úlceras gástricas en Rattus norvegicus var. albinus mediante el uso de

indometacina.

Demostrar el efecto antiulceroso del látex del Croton alnifolius Lam. sobre las úlceras

gástricas inducidas en Rattus norvegicus var. albinus y compararlo con respecto a un

fármaco patrón.

Realizar el estudio macroscópico y microscópico de las lesiones gástricas inducidas en

Rattus norvegicus var. albinus.

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II. MATERIAL Y MÉTODO

A. MATERIALES:

a) Biológico:

Botánico: Látex que se obtuvo de la planta Croton alnifolius Lam. La planta fue

recolectada en el poblado de Callancas, Provincia de Otuzco del Departamento La

Libertad.

Animales de experimentación: 25 Rattus norvegicus var. albinus, de 3 a 4 meses

de edad con un peso entre 150 - 300 g. Los cuales fueron adquiridos en el

Instituto Nacional de Salud - Chorrillos en Lima y alojados en el Bioterio de la

Facultad de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo.

Fueron alimentadas de manera estándar y mantenidas a una temperatura

ambiental de 22 a 24 °C con ciclos de luz/oscuridad de 12/12 horas y consumo de

agua y alimentos ad libitum.

b) De laboratorio:

Material de vidrio: de uso común en laboratorios de Farmacognosia, de Fisiología

Humana y Fisiopatología.

Reactivos:

- NaCl 0.9%

- Indometacina 25 mg.

- Equipos: estufa, balanza y otros

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B. MÉTODOS Y TÉCNICAS:

1. IDENTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN TAXONÓMICA DE LA ESPECIE

Se llevó un ejemplar de la planta al Herbarium Truxillenxis (HUT) para su identificación

y posterior verificación taxonómica según el sistema filogenético de la especie.

2. RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA:

La especie de Croton alnifolius Lam. (cabra - cabra) fue recolectada en el poblado de

Callancas, ubicada a 2645 m.s.n.m., situado a 7° 53' 54" LS Y 78° 26' 21" LO 1,2 de la

provincia de Otuzco, del Departamento La Libertad, en el mes de enero del 2011. La

recolección de la especie se realizó por el método convencional o clásico de

herborización, seleccionando el material en el campo y verificando que esté en buenas

condiciones.

3. ANÁLISIS FITOQUÍMICO PREPARACIÓN DE LA MUESTRA

a) SELECCIÓN DE LA MUESTRA:

El material recolectado fue trasportado al laboratorio de Farmacognosia de la Facultad

de Farmacia y Bioquímica de la Universidad Nacional de Trujillo, en donde se

eliminaron las sustancias extrañas presentes en el material vegetal.

b) LAVADO DE LA DROGA:

Luego de la separación de las sustancias extrañas, se procedió a lavar el material

vegetal con agua potable a chorro y después con agua destilada.

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c) EXTRACCIÓN DEL LÁTEX:

- Se limpió y desinfectó el área de trabajo; así como los materiales a utilizar

para el proceso de extracción del látex.

- Se colocó guantes descartables para evitar alguna irritación en la piel.

- Se realizaron cortes transversales en el tallo de Croton alnifolius Lam. (cabra-

cabra) para obtener el látex, hasta completar un volumen de 50 mL.

- Se guardó el látex en un recipiente de vidrio de color ámbar debidamente

rotulado, luego se pesó para el respectivo tamizaje fitoquímico.

4. TAMIZAJE FITOQUÍMICO PRELIMINAR:

Se colocó 1 mL de látex y se le agregó 10 mL del solvente (para extracto

clorofórmico, Etanólico, Acuoso ácido y Acuoso). Luego se llevó a reflujo controlado

por 10 minutos en Baño María. Luego se dejó enfriar y posteriormente se filtro.

Finalmente se realizó los ensayos correspondientes para cada extracto 17.

MÉTODO Y PROCEDIMIENTO:

En este caso se empleó un esquema general, el cual utiliza una extracción sucesiva

con solventes de polaridad creciente. De este modo, se realizó la extracción sucesiva

del material vegetal para la Aplicación de Técnicas de Tamizaje Fitoquímico

detallado en el esquema I (según Anexo 1).

Posteriormente en cada extracto por separado se procedió de acuerdo a los esquemas

II, III y IV. En cada caso, para realizar los ensayos se procedió de la siguiente forma:

ENSAYO DE SUDAN: Permitió reconocer en un extracto la presencia de

compuestos grasos, para ello, a la alícuota de la fracción en el solvente de

extracción, se le añadió 1 mL de una solución diluida en agua del colorante Sudan

III. Se calentó en baño de agua hasta evaporación del solvente. La presencia de

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compuestos grasos se considera positiva si aparecen gotas o una película

coloreada de rojo en el seno del líquido o en las paredes del tubo de ensayo 17.

ENSAYO DE DRAGENDORFF: Permitió reconocer en un extracto la

presencia de alcaloides, para ello, si la alícuota del extracto estuviera disuelta en

un solvente orgánico, éste se ha de evaporar en baño de agua y el residuo

redisolverse en 1 mL de ácido clorhídrico al 1%. Si el extracto es acuoso, a la

alícuota se le añade I gota de ácido clorhídrico concentrado, (se calienta

suavemente y se deja enfriar). Con la solución acuosa acida se realizó el ensayo,

se añadieron III gotas del reactivo de Dragendorff, si existe: opalescencia se ha de

considerar (+), turbidez definida (++), precipitado (+++) 17.

ENSAYO DE MAYER: Se realizó según la forma descrita anteriormente, hasta

obtener una solución acida. Se añadió luego, una pizca de cloruro de sodio en

polvo, se agitó y filtró. Se ha de añadir II ó III gotas de la solución reactiva de

Mayer, y si observase: opalescencia (+), turbidez definida (++), precipitado

coposo (+++) 17.

OBSERVACIÓN: En el caso de alcaloides cuaternarios y los aminoácidos libres,

éstos sólo se encuentran en el extracto acuoso y para considerar su presencia la

reacción debe ser (++) ó (+++), puesto que un resultado (+) puede provenir de

una extracción incompleta de bases primarias, secundarias o terciarias.

ENSAYO DE WAGNER: Se partió al igual que en los casos anteriores de la

solución acida, se añadió II ó III gotas del reactivo y clasificando los resultados

de la misma forma 17.

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ENSAYO DE BALJET: Permitió reconocer en un extracto la presencia de

compuestos con agrupamiento lactónico, en particular cumarinas, aunque otros

compuestos lactónicos pueden dar positivo al ensayo. Para ello, si la alícuota del

extracto no se encontrase en alcohol, debe evaporarse el solvente en baño de agua

y redisolverse en la menor cantidad de alcohol (1 mL). En estas condiciones se

adiciona 1 mL del reactivo, considerándose un ensayo positivo la aparición de

coloración o precipitado rojo (++ y +++) respectivamente 17.

ENSAYO DE BORNTRAGER: Permitió reconocer en un extracto la presencia

de quinonas. Para ello si la alícuota del extracto no se encuentra en cloroformo, el

solvente se evapora en baño de agua y el residuo se redisuelve en 1 mL de

cloroformo. Se agrega 1 mL de hidróxido de sodio, hidróxido de potasio ó

amonio al 5%. Se agita, mezclando las fases y se deja en reposo hasta su ulterior

separación. Si la fase acuosa alcalina (superior) se colorea de rosado o rojo, el

ensayo se considera positivo. Coloración rosada (++), coloración roja (+++) 17.

ENSAYO DE LIEBERMANN-BURCHARD: Permitió reconocer en un

extracto la presencia de triterpenos y/o esteroides, por ambos tipos de productos

poseer un núcleo del androstano, generalmente insaturado en el anillo B y la

posición 5-6. Para ello, si la alícuota del extracto no se encuentra en cloroformo,

el solvente debe evaporarse en baño de agua y el residuo se redisuelve en 1 mL de

cloroformo. Se adiciona 1 mL de anhídrido acético y se mezcla bien. Por la pared

del tubo de ensayo se dejan resbalar II a III gotas de ácido sulfúrico concentrado

sin agitar. Un ensayo positivo se reconoce por un cambio rápido de coloración:

- Rosado-azul muy rápido.

- Verde intenso-visible aunque rápido.

- Verde oscuro-negro-final de la reacción.

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Muy pocas veces puede observarse el primer cambio. El tercer cambio

generalmente ocurre cuando el material evaluado tiene cantidades importantes de

estos compuestos.

IMPORTANTE: Para realizar este ensayo no puede haber agua en el medio de la

reacción, pues ésta con el ácido sulfúrico reacciona de forma violenta y puede

ocurrir un accidente. La reacción de Liebermann-Burchard se emplea también

para diferenciar las estructuras esteroidales de los triterpenoides, las primeras

producen coloraciones azul o azul verdoso, mientras que para las segundas se

observa rojo, rosado o púrpura. Estas coloraciones pueden variar por

interferencias producidas por carotenos, xantofilas y esteroides saturados que

puedan estar presentes 17.

ENSAYO DE CATEQUINAS: Para ello se tomó I gota de la solución

alcohólica, con la ayuda de un capilar lo aplicamos sobre un papel filtro. Sobre la

mancha se aplicó solución de carbonato de sodio. La aparición de una mancha

verde carmelita a la luz UV, ha de indicar un ensayo positivo 18.

ENSAYO DE RESINAS: Para detectar este tipo de compuesto, se añadió a 2

mL de la solución alcohólica, 10 mL de agua destilada. La aparición de un

precipitado indica un ensayo positivo 18.

ENSAYO DE FEHLING: Permitió reconocer en un extracto la presencia de

azúcares reductores. Para ello, si la alícuota del extracto no se encuentra en agua,

debe evaporarse el solvente en baño de agua y el residuo se redisuelve en 1 a 2

mL de agua. Se adicionan 2 mL del reactivo y se calienta en baño de agua 5 a 10

min. El ensayo se considera positivo si la solución se colorea de rojo o aparece

precipitado rojo 18.

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ENSAYO DE LA ESPUMA: Permitió reconocer en un extracto la presencia de

saponinas, tanto del tipo esteroidal como triterpénica. De modo que si la alícuota

se encuentra en alcohol, se hace diluir con cinco veces su volumen en agua y se

agita, dicha mezcla, fuertemente durante 5 a 10 min. El ensayo se considera

positivo si apareciese espuma en la superficie del líquido de más de 2 mm de

altura y persistente por más de 2 min 18.

ENSAYO DEL CLORURO FÉRRICO: Permitió reconocer la presencia de

compuestos fenólicos y/o taninos en un extracto vegetal. Si el extracto de la

planta se realizara con alcohol, el ensayo determina tanto fenoles como taninos.

A una alícuota del extracto alcohólico se le añaden III gotas de una solución de

tricloruro férrico al 5% en solución salina fisiológica. Si el extracto es acuoso, el

ensayo determina fundamentalmente taninos. A una alícuota del extracto se

añadió acetato de sodio para neutralizar y III gotas de una solución de tricloruro

férrico al 5% en solución salina fisiológica, un ensayo positivo puede dar la

siguiente información general:

- Desarrollo de una coloración rojo-vino: compuestos fenólicos en general.

- Desarrollo de una coloración verde intensa: taninos del tipo

pirocatecólicos.

- Desarrollo de una coloración azul, taninos del tipo pirogalotánicos 18.

ENSAYO DE SHINODA: Permitió reconocer la presencia de flavonoides en un

extracto de un vegetal. Si la alícuota del extracto se encuentra en alcohol, se

diluye con 1 mL de ácido clorhídrico concentrado y un pedacito de cinta de

magnesio metálico. Después de la reacción se espera 5 min, luego se añadió 1

mL de alcohol amílico, se mezclan las fases y se dejó reposar hasta que se

separen. Si la alícuota del extracto se encuentra en agua, se procedió de igual

forma, a partir de la adición del ácido clorhídrico concentrado. El ensayo se

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considera positivo cuando el alcohol amílico se coloree de amarillo, naranja,

carmelita o rojo; intenso en todos los casos 18.

ENSAYO DE KEDDE: Permitió reconocer en un extracto la presencia de

glucósidos cardiotónicos. Una alícuota del extracto en etanol se mezcló con 1 mL

del reactivo y se dejó reposar durante 5 a 10 min. En un ensayo positivo se

desarrolla una coloración violácea, persistente durante 1 a 2 h 18.

ENSAYO DE ANTOCIANIDINAS: Permitió reconocer en los extractos

vegetales la presencia de estructuras de secuencia C6-C3-C6 del grupo de los

flavonoides. Se calentó 2 mL del extracto etanólico 10 min con 1 mL de HC1cc.,

se dejó enfriar y se añadió 1 mL de agua y 2 mL de alcohol amílico. Se agitó y se

dejó separar las dos fases. La aparición de color rojo a marrón en la fase amílica

indica un ensayo positivo 18.

ENSAYO DE MUCÍLAGOS: Permitió reconocer en los extractos de vegetales

la presencia de una estructura tipo polisacárido, el cual forma un coloide hidrófilo

de alto índice de masa que aumenta la densidad del agua donde se extrae. Para

ello una alícuota del extracto se enfrió en agua de 0 a 5 °C y si la solución toma

una consistencia gelatinosa el ensayo es positivo 18.

ENSAYO DE PRINCIPIOS AMARGOS Y ASTRINGENTES: El ensayo se

realizó, saboreando I gota del extracto acuoso del vegetal y reconociendo el sabor

de cada uno de estos principios, bien diferenciados al paladar 18.

ENSAYO DE HIDROCARBUROS: Se tomaron 10 mL del extracto y se dejó

evaporar al aire, se disolvió el residuo obtenido en acetona calentando

suavemente sobre baño de agua, de ser necesario. Se dejó algunas horas en el

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refrigerador. La aparición de un precipitado, indica la presencia de hidrocarburos

18.

En el estudio fitoquímico se buscaron los siguientes componentes: Alcaloides, aceites

esenciales, aminoácidos, antocianidinas, azúcares reductores, carotenos, catequinas,

compuestos grasos, cumarinas, esteroides, fenoles, flavonoides, glicósidos

cardiotónicos, hidrocarburos, lactonas, mucílagos, quinonas, resinas, saponinas,

taninos, triterpenoides.

5. DEMOSTRACIÓN DEL EFECTO DEL LÁTEX DE Croton alnifolius Lam.

5.1. INDUCCIÓN DE ÚLCERAS GÁSTRICAS UTILIZANDO Indometacina

MÉTODO DE DJAHANGURI: Lesión gástrica inducida por Indometacina 19.

1. Se pesó e identificó los animales de experimentación que estuvieron en ayunas de

sólidos por 16 horas con libre acceso de agua.

2. Se administró Indometacina en dosis de 30 mg/Kg p.c por vía oral, interdiario

durante 7 días (4 dosis). Luego de administrar la Indometacina se dejó sin

alimentos a los animales de experimentación durante 5 horas, después tuvieron

libre acceso de agua y alimentos.

3. Transcurrida la semana de administración de indometacina se sacrificaron los

animales por anestesia etérea.

4. Se abrió el abdomen, luego se localizó y retiró el estómago, lavándolo

externamente y abrirlo por la pequeña curvatura.

5. Se descartó el contenido gástrico y luego se lavó la mucosa interna de forma muy

ligera con agua destilada.

6. Se mantuvo el estómago en solución salina helada hasta inspección en el

estereoscopio y se llevó a estudios histopatológicos.

7. Se determinó el índice de lesión y el número de úlceras según tabla de puntuación

de lesión gástrica, (ver anexo 2)

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5.2. DISEÑO EXPERIMENTAL: Los animales de experimentación, 25 Rattus

norvegicus var. albinus fueron distribuidos al azar en cinco grupos de trabajo, de

cinco animales cada uno. Dichos animales fueron alimentados con dieta estándar y

agua ad libitum durante el tiempo que duró el experimento.

Grupo I: Blanco: Estuvo constituido por cinco especímenes seleccionados al azar,

las cuales fueron alimentados sólo con dieta estándar y agua ad libitum.

Grupo II: Control: Estuvo constituido por cinco especímenes seleccionados al azar,

a las cuales se les indujo úlceras gástricas utilizando Indometacina tal como se

describe en el método. Recibió 2 mL de agua hervida vía oral todas las tardes

durante una semana, fueron alimentadas con dieta estándar y agua ad libitum.

Grupo III: Problema I: Estuvo constituido por cinco especímenes, se les indujo

úlceras gástricas, y se les administró vía oral 0.5 mL de látex de Croton alnifolius

Lam. diluido en agua hervida csp. 2 mL todas las tardes durante una semana;

fueron alimentadas con dieta estándar y agua ad libitum.

Grupo IV: Problema II: Estuvo constituido por cinco especímenes y se les indujo

úlceras gástricas con Indometacina y se les administró vía oral 1 mL de látex de

Croton alnifolius Lam. diluido en agua hervida csp. 2mL todas las tardes durante

una semana, fueron alimentadas con dieta estándar y agua ad libitum.

Grupo V: Patrón: Estuvo constituido por cinco especímenes y se les indujo úlceras

gástricas con Indometacina y se les administró Ranitidina a dosis de 100 mg/Kg al

día, por vía oral todas las tardes durante una semana.

La administración por vía oral fue realizada a través de una sonda gástrica adaptada

para tal propósito. Al final de los siete días del experimento se sacrificaron a los

animales de todos los grupos y se les extrajo los estómagos para el estudio

histopatológico respectivo.

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5.3. ESTUDIO HISTOPATOLÓGICO DEL ESTÓMAGO:

Una vez sacrificados los animales de experimentación se les efectuó una laparotomía

para extraer el estómago, el cual fue abierto por la curvatura menor, se lavó

cuidadosamente utilizando solución salina fisiológica muy fría.

Para el estudio macroscópico se consideraron los siguientes parámetros: coloración de

la mucosa, pérdida de pliegues, petequias, edema, hemorragia, pérdida de moco,

lesiones necrohemorrágicas (úlceras), y la evaluación de las lesiones gástricas se

realizó de acuerdo a la tabla de puntuaciones del anexo 2.

Luego los estómagos fueron fijados en solución de formol al 10% por un día; se

realizaron los cortes más adecuados del estómago y se les tiñó con

hematoxilina/eosina para el estudio microscópico, donde se consideraron los

siguientes parámetros histopatológicos:

Inflamación: hiperemia, infiltración celular

Lesión epitelial (erosión)

Cambios regenerativos

Úlceras

Colocando una cruz si son leves, dos si son moderadas, tres si son graves y signo negativo si no hay

evidencia de los parámetros histopatológicos descritos.

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III. RESULTADOS

1. Tabla N° 1: Tamizaje Fitoquímico Preliminar del látex de Croton alnifolius Lam.

METABOLITO ENSAYO TIPO DE EXTRACTO

Clorofórmico Etanólico Acuoso Acuoso ácido

Aceites y grasas Sudan III + X X X

Alcaloides

Dragendorff - X - -

Mayer - X - -

Wagner - X - -

Hager - X - -

Lactonas y cumarinas Baljet + ++ X X

Catequinas Catequinas X + X X

Triterpenos y/o esteroides Liebermann-Burchard + ++ X X

Resinas Resinas X - X X

Azucares reductores Fehling X +++ +++ X

Saponinas Espuma X +++ +++ X

Fenoles y taninos FeC13 X ++ + X

Aminoácidos Ninhidrina X X X X

Quinonas Borntrager X ++ X X

Flavonoides Shinoda X +++ +++ X

Cardenólidos Kedde X ++ X X

Antocianidina Antocianidina X +++ X X

Mucílago Mucílago X X +++ X

Principios amargos Principios amargos X X +++ X

Fuente: Resultados del Estudio Fitoquímico de látex de Croton alnifolius Lam.

Leyenda:

(+++) Significa que se obtuvo una respuesta positiva de mayor cantidad para este metabolito en el extracto

(++) Significa que se obtuvo una respuesta positiva de mediana cantidad para este metabolito en el extracto

(+) Significa que se obtuvo una respuesta positiva de poca cantidad para este metabolito en el extracto

(-) Significa que se obtuvo una respuesta negativa para este metabolito en el extracto

(X) Significan que estos ensayos no se realizaron al extracto

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2. ESTUDIO HISTOPATOLÓGICO

A. ESTUDIO MACROSCÓPICO

PRUEBA ANOVA

TABLA N° 2: PRUEBA ESTADÍSTICA ANOVA

Suma de

cuadrados

gl

Media

cuadrática

F Sig.

Inter-grupos 353.200 3 117.733

4.835 0.014 Intra-grupos 389.600 16 24.350

Total 742.800 19

TABLA N° 3: PRUEBA ESTADÍSTICA POST-ANOVA

HSD de Tukey

Grupo N

Subconjunto para alfa

= 0.05

1 2 1

Grupo patrón 5 19.2000

Grupo Problema I 5 26.0000 26.0000

Grupo Problema II 5 26.2000 26.2000

Grupo Control 5 31.0000

Sig. 0.154 0.405

Se muestran las medias para los grupos en los subconjuntos homogéneos.

Usa el tamaño muestral de la media armónica = 5.000.

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B. ESTUDIO MICROSCÓPICO

GRUPO CONTROL

Inflamación Lesión epitelial Cambios regenerativos Úlceras

ESPECIMEN 1 +++ ++ - ++

ESPECIMEN 2 +++ ++ - +++

ESPECIMEN 3 +++ +++ - +++

ESPECIMEN 4 +++ +++ - +++

ESPECIMEN 5 +++ ++ - ++

Grado de afectación en cada parámetro evaluado:

(-) : Ausencia (+): Leve (++) : Moderado (+++): Grave

GRUPO PROBLEMA I

Inflamación Lesión epitelial Cambios regenerativos Úlceras

ESPECIMEN 1 ++ ++ - -

ESPECIMEN 2 +++ ++ - -

ESPECIMEN 3 +++ ++ - +

ESPECIMEN 4 ++ ++ - -

ESPECIMEN 5 +++ ++ - -

Grado de afectación en cada parámetro evaluado:

(-) : Ausencia (+): Leve (++) : Moderado (+++): Grave

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GRUPO PROBLEMA II

Inflamación Lesión epitelial Cambios regenerativos Úlceras

ESPECIMEN 1 ++ ++ - -

ESPECIMEN 2 +++ ++ + -

ESPECIMEN 3 ++ ++ + -

ESPECIMEN 4 ++ ++ + -

ESPECIMEN 5 +++ ++ + -

Grado de afectación en cada parámetro evaluado:

(-) : Ausencia (+): Leve (++) : Moderado (+++): Grave

GRUPO PATRON

Inflamación Lesión epitelial Cambios regenerativos Úlceras

ESPECIMEN 1 ++ ++ ++ -

ESPECIMEN 2 ++ ++ ++ -

ESPECIMEN 3 ++ ++ ++ -

ESPECIMEN 4 ++ ++ ++ -

ESPECIMEN 5 ++ + ++ -

Grado de afectación en cada parámetro evaluado:

(-) : Ausencia (+): Leve (++) : Moderado (+++): Grave

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IV. DISCUSIÓN

Las plantas medicinales han acompañado la evolución del hombre y está ligada a la forma de curar

ancestralmente. Es por ello que forma parte de lo que ahora se conoce como medicina tradicional.

Lamentablemente, la situación en nuestro país, de reconocida y abundante flora, son muy escasas las

investigaciones científicas realizadas por los peruanos, la mayoría de los conocimientos que tenemos

de la química de nuestras plantas han sido proporcionados por extranjeros. De acuerdo con esta

realidad, el objetivo de esta investigación es dar a conocer el uso tradicional de la especie Croton

alnifolius Lam., que crece de forma silvestre en áreas poco irrigadas, zonas muy amplias en la costa y

sierra norte 1.

Se conoce de las propiedades protectoras frente a la injuria aguda de la mucosa gástrica de la Familia

Euphorbiaceae, así como su poder cicatrizante, habiéndose estudiado principalmente Croton lecleri

(sangre de grado). En la actualidad, existe la tendencia a rescatar las bondades de los productos

naturales en el tratamiento de diversas enfermedades y entre ellas las del aparato digestivo, que se

encuentran entre los cinco principales registros de defunciones en el Perú 20,21.

La especie estudiada en este trabajo de investigación es el de Croton alnifolius Lam.; perteneciente a

la familia de las Euphorbiaceae, el cual es un arbusto, cuya altura puede llegar hasta un metro, con

hojas coriáceas (a manera de cuero), algo brillosas, con ápice no tan agudo sino obtuso o casi

redondeado. Las hojas, al contacto desprenden un polvo que le brinda aspereza y que se queda

adherida a la piel. Es muy olorosa como todos los "Croton". Presenta tubos lacticíferos por donde

recorre abundante látex, generalmente de un color blanco o amarillento. También presentan estípulas

de diferentes formas. Sus flores son unisexuales y generalmente apétalas. El perianto, envoltura que

rodea a los órganos sexuales, se reduce a una sola cubierta floral en la mayoría; el androceo, conjunto

de estambres. El gineceo, también llamado pistilo, se compone la mayor parte del tiempo de tres

carpelos (hojas modificadas que forman la parte reproductiva femenina). Sus semillas contienen

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grandes cantidades de aceite y granos proteicos. Finalmente, el fruto es casi siempre esquizocárpico o

capsular 22,23.

En el tamizaje fitoquímico preliminar del látex Croton alnifolius Lam., cada muestra fue sometida a

la acción extractiva de solventes de polaridad diferente: Cloroformo, Etanol, Agua y Agua ácida,

luego de separar las fracciones se realizó la identificación de los metabolitos secundarios haciendo uso

de reactivos de coloración y precipitación 24.

En la tabla N° 1 Se presentan los resultados del Tamizaje Fitoquímico Preliminar realizado en el látex

del Croton alnifolius Lam. (Cabra-cabra).

Aceites y grasas, fitoconstituyentes encontrados en el extracto clorofórmico, tiene función estructural

dentro de las células tales como fosfolípidos, glucolípidos, céridos, esteroles y esfingolípidos. Tienen

la función de revestimiento dado por las ceras, y también la función de reserva que es la fuente de

energía del vegetal 25,26.

Lactonas y Cumarinas, se obtuvieron en los extractos clorofórmico y etanólico, son metabolitos

secundarios con una variedad de acciones farmacológicas: Tiene acción Vitamínica P, disminuye la

permeabilidad capilar, refuerza los capilares, venotónico, vasodilatador coronario, anticoagulante 12, 13,

27.

Las catequinas, son solubles en solventes polares, tienen una directa relación con los flavonoides,

dentro de su variedad de acciones farmacológicas tenemos: efecto antihemorrágico, protectores de la

pared vascular o capilar, antirradicales libres 25-27.

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Los azúcares reductores son compuestos solubles en agua y alcohol, por lo cual las mayores

concentraciones que fueron extraídas están en los extractos con solventes polares, estos compuestos

orgánicos son resultado del metabolismo primario. Son los primeros que se forman en el proceso

fotosintético y su función principal es estructural y metabólica 25,26.

Las Saponinas son heterósidos (azúcar – aglicon), se caracterizan por su capacidad para producir

espuma, cuando se agita en una solución acuosa, debido a que disminuye la tensión superficial del

agua, son por lo tanto tensioactivos naturales. Las principales acciones reconocidas para las saponinas

son: Acción irritante de las células, producen aumento de secreciones en células pulmonares, por lo

consiguiente tiene efecto expectorante y antitusígeno, en las células renales aumenta la circulación

sanguínea, consecuentemente aumenta la filtración glomerular. En el caso de las células sanguíneas

tienen un efecto tóxico, pues producen lisis si se administra por vía intravenosa, este efecto es

prácticamente despreciable por vía oral. El efecto antiedematoso, antiinflamatorio y cicatrizante es la

más significativa y de mucho interés en el caso de nuestra investigación, pues en los extractos acuoso

y alcohólico es donde se identifica su presencia, por cual podemos afirmar que la acción

farmacológica contribuye en el tratamiento de las úlceras gástricas. Otro de los efectos importantes es

su acción adaptogena, es decir surten un efecto estimulante, tonificante y anti estrés. Así también tiene

acción antimicrobiana, antivírico, antimicótico y molusquicida 25,26,28,29.

Dentro de la diversidad de fitoconstituyentes presentes en la especie estudiada, tenemos a los Taninos,

identificados en los extractos alcohólico y acuoso; que están constituidos por un amplio grupo de

compuestos hidrosolubles con estructuras polifenólicas, solubles en agua y en disolventes orgánicos

polares. Las acciones y usos esta relacionados con sus propiedades. Tiene acción de antídoto en

intoxicaciones por metales pesados, acción astringente debido a su capacidad para precipitar proteínas

de la piel, acción cicatrizante, antiséptica, protectora, analgésica, hemostática o antihemorrágica,

antioxidante 25,26,28,29.

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Los flavonoides están ampliamente distribuidos en los vegetales, fueron identificados en el extracto

etanólico y acuoso, entre sus funciones tenemos: antioxidantes, cardiotónicas: tienen un efecto tónico

sobre el corazón. Tiene actividad en la fragilidad capilar: mejorando la resistencia de los capilares y

favorecen el que éstos no se rompan, por lo que resultan adecuados para prevenir el sangrado:

propiedades antitrombóticas: disminuye la formación de trombos en los vasos sanguíneos lo que

posibilita una mejor circulación y una prevención de muchas enfermedades cardiovasculares. Actúan

a nivel de estomago, tienen propiedades anti ulcerosas al proteger la mucosa gástrica 29,30,31.

La capacidad antioxidante de muchos compuestos fenólicos ha sido estudiada recientemente con un

gran interés. Muchos investigadores han reportado la actividad antioxidante de los flavonoides y han

tratado de relacionar esta actividad con su estructura 32.

Parece que los ácidos fenólicos, como el cafeíco, clorogénico, ferúlico, sinápico y p-cumárico, son

antioxidantes más activos que los derivados hidroxilados del ácido benzoico, como el p-

hidroxibenzoico, vanílico y siríngico. Muchos de los flavonoides presentan una gama de efectos

biológicos, como actividades antibacterianas, antivirales, antiinflamatorias, antialérgicas,

antitrombóticas y vasodilatadoras. La actividad antioxidante es propiedad importante para la vida 32.

Los mucílagos, son metabolitos secundarios, que fueron identificados en el extracto acuoso, la

principal acción es su capacidad para reducir la irritación. Esto se debe a que el mucílago se distribuye

en forma de una capa fina y delgada sobre las mucosas y, las protege contra las sustancias irritantes

locales, actuando como atenuante de la excitación. Las inflamaciones, especialmente las que se

producen en las mucosas, disminuyen rápidamente bajo ese efecto protector 25,26.

En nuestra investigación se logró identificar distintos fitoconstituyentes, entre ellos tenemos:

cumarinas, catequinas, saponinas, flavonoides y mucílagos, los cuales podrían ser responsables de la

acción antiulcerosa, cicatrizante y antihemorrágica atribuida al látex del Croton alnifolius Lam.

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Los fitoconstituyentes identificados en este estudio preliminar tienen actividad sinérgicas; los

protectores (Mucílagos) se adhieren a la mucosa gástrica como una barrera protectora ante los agentes

irritantes producidos en el proceso de digestión, lo cual permite que la lesión presente en la mucosa

gástrica no progrese hasta tejidos internos, la acción antiinflamatoria seria atribuida a la presencia de

saponinas. Por otro lado cuando la lesión ha progresado la actividad cicatrizante de las catequinas y

cumarinas favorecería, pues la acción en la vitamina P permite disminuir la permeabilidad y adhesión

capilar, iniciando así el proceso de coagulación; los flavonoides contribuirían en la regeneración

celular con su actividad antioxidante. Este podría ser un mecanismo de acción terapéutica en el

tratamiento de gastritis y úlceras gástricas 25,26.

El efecto protector de la “cabra-cabra” Croton alnifolius Lam., se debe en gran medida a la

estimulación de la formación de moco que produce, cuando se le aplica directamente sobre la mucosa

gástrica, con la característica de la presencia de grupos SH-no proteicos en el moco, que le confieren

mayor capacidad protectora 15,32.

Se ha descrito también el mecanismo de acción cicatrizante del látex de Croton alnifolius Lam.

mediante la presencia de los taninos, los cuales tiene un efecto directo sobre la migración celular y la

síntesis de colágeno, lo que activa la cicatrización, así como su actividad anti inflamatoria 16.

La úlcera gástrica es una enfermedad de origen multifactorial que se caracteriza por la pérdida

de la integridad de la mucosa gastrointestinal, de forma redonda u oval, de dimensiones variables y

que se extiende, como mínimo, hasta la muscularis mucosae. Desde hace más de un siglo la úlcera

gástrica constituye una causa importante de morbilidad y mortalidad a nivel mundial, por lo cual esta

investigación plantea una tratamiento alternativo, basado en el uso del látex del Croton alnifolius

Lam., al cual se le atribuye propiedades antiinflamatorias y cicatrizante, de acuerdo a los resultados

obtenido en el tamizaje preliminar se considera que los fitoconstituyentes responsables de esta

actividad son: mucílagos, cumarinas, catequinas y flavonoides. Para evidenciar dichas acciones se

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planteó un esquema de inducción y tratamiento de úlceras gástricas en el espécimen Rattus norvegicus

var. albinus. Los cuales esta organizados en cinco grupos conformados por 5 especies, denominados

Grupo I: Blanco, Grupo II: Control, Grupo III: Problema I, Grupo IV: Problema II, Grupo V: Patrón.

En la actualidad, existe evidencia contundente que indica que los radicales libres causan daño

oxidativo a los lípidos, proteínas y ácidos nucleicos. Los radicales libres se encuentran naturalmente

en el cuerpo humano como un subproducto del metabolismo y pueden ser generados por los

macrófagos como parte del proceso de fagocitosis. También, se pueden formar por exposición a

radiación, humo del tabaco, ciertos contaminantes, disolventes orgánicos, pesticidas e inclusive

durante el ejercicio intenso. Los radicales libres tienen que ver con la etiología o historia natural de

muchos padecimientos, como el cáncer y enfermedades cardiacas, vasculares y neurodegenerativas.

Por lo tanto, los antioxidantes, que pueden neutralizar a los radicales libres, pueden ser de vital

importancia en la prevención de estas enfermedades 16.

Muchas de las funciones biológicas, como la antimutagenicidad, anticarcinogenicidad y retraso del

envejecimiento, derivan de la capacidad antioxidante.

La citoprotección que confiere el Croton alnifolius Lam., lo realiza también mediante la formación de

una capa de protección física a la mucosa, como lo hacen algunos fármacos, como el sucralfato, y la

presencia de grupos sulfhidrilos en la mucosa 15,32.

En los resultados macroscópicos se hizo uso de la prueba estadística de Anova (tabla n° 2) donde se

observa que existe una valor de significancia menor a 0,05 (0,014) lo que nos indica que hay

diferencia significativa entre los grupos de estudio, dando la posibilidad de usar la prueba post Anova

(Tabla N° 3) para saber cual de los grupos de estudio tiene mejor respuesta gastro protectora contra la

Indometacina dando como resultado que el Grupo Patrón ha tenido una mejor respuesta contra la

lesión gástrica, teniendo como segundo grupo al Grupo Problema II y luego el Grupo Problema I,

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estos últimos como una diferencia no muy significativa, esto tal vez se deba a una mala

administración del extracto de Croton alnifolius Lam. o tal vez a que el efecto no es dosis

dependiente.

En el estudio microscópico se observa que la lesión gástrica es muy marcada en el Grupo Control, esto

debido a que la Indometacina es un fármaco que actúa impidiendo la formación de prostaglandinas en

el organismo, ya que inhibe a la enzima ciclooxigenasa. Las prostaglandinas se producen en respuesta

a una lesión o a ciertas enfermedades y provocan inflamación y dolor. La Indometacina reduce la

inflamación y el dolor y su mecanismo de acción se asocia a la inhibición que logran los

antiinflamatorios no esteroideos (Aines) sobre la enxima COX II, y como consecuencia inhibe la

síntesis de prostaglandinas, como PgE2 y PgI2, responsables de las respuestas inflamatorias en los

tejidos. Las propiedades fisicoquímicas y el mecanismo de acción de estos fármacos, están

directamente implicados en la patogenia de las lesiones gastrointestinales, al inhibir la síntesis de

prostaglandinas (PG). Las PG tienen un efecto citoprotector de la mucosa gástrica ya que aumentan, la

secreción de mucus, la secreción de bicarbonato, el flujo sanguíneo y la restauración epitelial. Por

tanto, su inhibición altera los mecanismos de protección y permite que los ácidos biliares, la pepsina y

el ácido clorhídrico ataquen a la mucosa. Las lesiones originadas en la mucosa gastroduodenal se

producen por tanto, por un efecto tóxico local, y por un efecto tóxico sistémico tras la absorción y

activación hepática del fármaco, mediado éste por el mecanismo de acción farmacológico que es la

inhibición de la síntesis de PG. Entonces, encontramos congruencia en nuestros resultados, al observar

que el grupo control fue el que observó niveles menores de recuperación tanto macro como

microscópica a nivel gástrico 15.

Luego tanto en el Grupo Problema I y II se observa una mejoría a nivel gástrico y en la mucosa

gástrica de los animales de experimentación que fueron tratados con el látex del árbol de Croton

alnifolius Lam. mediante la formación de una capa de protección física a la mucosa, como lo hacen

algunos fármacos, como el sucralfato, y la presencia de grupos sulfhidrilos en la mucosa. Otros

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estudios demuestran que la cicatrización de las úlceras se favorecen por acciones antimicrobianas y

antiinflamatorias 15.

Por últimos vemos que en el Grupo Patrón hay una mejoría mucho más marcada, lo que indica que el

tratamiento con ranitidina es más efectivo, esto se debe a que este fármaco actúa inhibiendo la

secreción gástrica, es un antagonista del receptor H2 de la histamina aceptado para utilización clínica.

Esta droga es antagonista competitivo reversible del receptor H2 de la histamina, sus efectos primarios

y la base para su utilización clínica son la reducción de la secreción ácida gástrica mediada por

histamina en la célula parietal. Los bloqueantes H2 de la histamina compiten solamente por el receptor

H2 y no tienen efectos sobre otros receptores, incluyendo los receptores H1 de la histamina,

muscarínicos, nicotínicos o α o β adrenérgicos. Aunque ranitidina posee una alta especificidad por el

receptor H2 de la histamina, este agente también inhibe la secreción de la célula parietal estimulada

por agentes colinérgicos, gastrina, alimentos o estimulación vagal, lo cual indica que el tratamiento

con ranitidina es mejor, pero para tener una acción mucho más rápido podría usarse el látex del

Croton alnifolius Lam. Estos efectos fisiológicos extra histamina receptor es probablemente el

resultado de la importante interdependencia que existe entre los efectos de la vía neuroendocrina

(acetilcolina), endocrina (gastrina) y paracrina (histamina) sobre la secreción ácida de la célula

parietal 15.

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V. CONCLUSIONES

1. Se realizó el Tamizaje Fitoquímico Preliminar del látex del Croton alnifolius Lam en el cual

se encontraron distintos fitoconstituyentes entre los cuales tenemos: Aceites y grasas,

Lactonas y cumarinas, Catequinas, Triterpenos y esteroides, Azucares reductores, Saponinas,

Taninos, Quinonas, Flavonoides, Cardenólidos, Antocianidinas, Mucílagos y Principios

Amargos.

2. La dosis de mayor concentración del látex de Croton alnifolius Lam. produjo mayor

cicatrización y menor número de lesiones gástricas que la dosis de menor concentración del

látex.

3. El grupo patrón (recibió ranitidina) evidencia menor número de lesiones gástricas y mejor

cicatrización que el grupo problema (recibió el látex de Croton alnifolius Lam.)

4. El látex de Croton alnifolius Lam. cicatriza y disminuye la gastrolesividad de indometacina.

5. La prueba de Anova para el estudio Macroscópico, demuestra que existe diferencia

significativa entre los grupos de estudio (p< 0,05).

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m=196&searchString=(@authors ORGANIZACION and MUNDIAL and DE and LA and

SALUD and OMS) and (@biblioteca VON or MISES or CEES) and (@buscable

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ANEXOS

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ANEXO Nº01

TAMIZAJE FITOQUÍMICO DEL LÁTEX DE Croton alnifolius Lam. (cabra – cabra)

ESQUEMA I

Reflujo 10 min en Baño maria

MUESTRA DE Croton

alnifolius Lam,.

EXTRACTO

CLOROFÓRMICO

EXTRACTO

ETANÓLICO

EXTRACTO

ACUOSO

EXTRACTO

ACUOSO/ÁCIDO

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EXTRACCIÓN SUCESIVA DEL MATERIAL VEGETAL PARA LA APLICACIÓN DE

TÉCNICAS DE TAMIZAJE FITOQUÍMICO

ESQUEMA II

REACCIONES A REALIZAR EN EL EXTRACTO CLOROFÓRMICO

EXTRACTO DE ÉTER DIETÍLICO

DIVIDIR EN FRACCIONES

5mL ENSAYO DE

SUDAN (Aceites y

Grasas)

15mL (dividido en 3

porciones)

ENSAYOS DE

DRAGENDORFF

MAYER Y WAGNER

(Alcaloides)

10 mL ENSAYO DE

HIDROCARBUROS

5mL

ENSAYO DE

LIEBERMANN-

BUCHART

(Triterpenos -

Esteroides)

5mL ENSAYO DE

BALJET (Lactonas y Cumarinas)

5mL

ENSAYO DE

LIEBERMANN-

BUCHART

(Triterpenos -

Esteroides)

15mL (dividido en 3

porciones)

ENSAYOS DE

DRAGENDORFF

MAYER Y WAGNER

(Alcaloides)

EXTRACTO CLOROFÓRMICO

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ESQUEMA III

REACCIONES A REALIZAR EN EL EXTRACTO ALCOHOLICO AL 70º

EXTRACTO ALCOHÓLICO

DIVIDIR EN FRACCIONES

1mL ENSAYO

DE CATEQUINAS

2 mL ENSAYO

DE RESINAS

2 mL ENSAYO DE

FELHING (Azúcares

reductores)

2mL ENSAYO DE

BALJET (Lactonas)

2mL ENSAYO DE LIEBERMAN-BOURCHARD (Triterpenos y Esteroides)

2mL ENSAYO DE

ESPUMA (Saponina)

2mL ENSAYO DE

FeCl3 (Fenoles y Taninos)

2mL ENSAYO DE

BORNTRAGER (Quinonas)

2mL ENSAYO DE

KEDDE (Cardenólidos)

2mL ENSAYO DE

SHINODA (Flavonoides)

2mL ENSAYO DE

ANTOCIANIDINA

6 mL en 3 porciones

ENSAYOS DE DRAGENDORFF

MAYER Y WAGNER

(Alcaloides)

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ESQUEMA IV

REACCIONES A REALIZAR EN EL EXTRACTO ACUOSO

5 mL en 3 porciones ENSAYO DE DRAGENDORFF,

MAYER Y WAGNER (Alcaloides)

2mL ENSAYO DE CLORURO FERRICO

(Taninos)

2 mL ENSAYO DE

SHINODA (Flavonoides)

2mL ENSAYO DE FEHLING (Azúcares Reductores)

2 mL ENSAYO DE

ESPUMA (Saponinas)

DIVIDIR EN FRACCIONES

10mL ENSAYO DE MUCILAGOS

I ó II gotas ENSAYO DE PRINCIPIOS

AMARGOS Y ASTRINGENTES

EXTRACTO ACUOSO

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ANEXO Nº 02

TABLA"A" EVALUACIÓN DE LAS LESIONES GÁSTRICAS AGUDAS

Considerar el número total de úlceras y el promedio de los índices de lesión que serán determinados de

acuerdo con el grado de lesión que serán determinados de acuerdo con el grado de lesión.

Coloración de la mucosa.

Normal................................................................. 1 punto

Hiperémica......................................................... 1 punto

Descolorida……................................................ 1 punto

Pérdida de los pliegues de la mucosa.

Leve……………................................................... 1 punto

Moderado……...................................................... 1 punto

Fuerte………….................................................... 1 punto

Petequias

Leve………………................................................. 1 punto

Moderado……….................................................... 2 punto

Fuerte.................................................................. 3 punto

Edema

Leve……………................................................... 1 punto

Moderado ……....................................................... 2 punto

Fuerte................................................................... 3 punto

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Hemorragia

Leve……………................................................... 1 punto

Moderado……..................................................... 2 punto

Fuerte.................................................................... 3 punto

Pérdida de muco

Leve…………….................................................... 1 punto

Moderado……...................................................... 2 punto

Fuerte................................................................... 3 punto

Lesiones necrohemorrágicas (úlceras)

Hasta 1mm …...................................................... 1 punto

Mayor de 1mm…..................................................... 1 punto x mm

Perforados …....................................................... 5 puntos x mm

Exudado celular...................................................... 3 puntos

Se considera leve cuando el área afectada es menor al 25%, moderado cuando llega al 50% y fuerte

cuando es mayor que el 50%.

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ESTUDIO MACROSCÓPICO

Grupo I: Blanco

Especificación espécimen 1 espécimen 2 espécimen 3 espécimen 4 espécimen 5

Coloración de la mucosa - - - - -

Pérdida de pliegues - - - - -

Petequias - - - - -

Edema - - - - -

Hemorragia - - - - -

Pérdida de moco - - - - -

Úlceras (mm) - - - - -

Exudado celular - - - - -

Puntuación total 0 0 0 0 0

Grupo II: Control

Especificación espécimen 1 espécimen 2 espécimen 3 espécimen 4 espécimen 5 promedio

Coloración de la mucosa 1 1 1 1 1 1

Pérdida de pliegues 1 1 1 1 1 1

Petequias 2 2 2 2 1 1.8

Edema 3 3 3 3 3 3

Hemorragia 2 2 1 1 2 1.6

Pérdida de moco 3 2 2 2 2 2.2

Úlceras (mm) 11 16 16 24 13 16

Exudado celular 2 3 2 3 2 2.4

Puntuación total 35 30 28 37 25 31

Grupo III: Problema I

Especificación espécimen 1 espécimen 2 espécimen 3 espécimen 4 espécimen 5 promedio

Coloración de la mucosa 1 1 1 1 1 1

Pérdida de pliegues 1 1 1 1 1 1

Petequias 2 1 2 2 1 1.6

Edema 3 3 3 3 3 3

Hemorragia 2 2 1 1 2 1.6

Pérdida de moco 3 2 2 2 2 2.2

Úlceras (mm) 11 9 14 20 15 13.8

Exudado celular 2 2 2 3 2 2.2

Puntuación total 25 21 26 33 26 26.2

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Grupo IV: Problema II

Especificación espécimen 1 espécimen 2 espécimen 3 espécimen 4 espécimen 5 promedio

Coloración de la mucosa 1 1 1 1 1 1

Pérdida de pliegues 1 1 1 1 1 1

Petequias 2 1 2 2 1 1.6

Edema 3 3 3 3 3 3

Hemorragia 2 2 1 1 2 1.6

Pérdida de moco 3 2 2 2 2 2.2

Úlceras (mm) 10 6 12 20 18 13.2

Exudado celular 2 2 2 3 2 2.2

Puntuación total 25 18 24 33 30 26

Grupo V: Patrón

Especificación espécimen 1 espécimen 2 espécimen 3 espécimen 4 espécimen 5 promedio

Coloración de la mucosa 1 1 1 1 1 1

Pérdida de pliegues 1 1 1 1 1 1

Petequias 1 2 2 2 1 1.6

Edema 1 2 1 2 2 1.6

Hemorragia 1 2 1 1 2 1.4

Pérdida de moco 1 2 1 2 2 1.6

Úlceras (mm) 10 5 5 10 15 9

Exudado celular 2 2 2 2 2 2

Puntuación total 18 17 14 21 26 19.2

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LIMITES AL 95% DE CONFIANZA

Comparaciones múltiples

Variable dependiente: Dato

HSD de Tukey

(I) Grupo (J) Grupo

Diferencia de

medias (I-J)

Error

típico

Sig.

Intervalo de confianza al

95%

Límite

inferior

Límite

superior

Límite

inferior

Límite

superior

Límite

inferior

Control

2.00 4.80000 3.12090 0.439 -4.1289 13.7289

3.00 5.00000 3.12090 0.405 -3.9289 13.9289

4.00 11.80000(*) 3.12090 0.008 2.8711 20.7289

Problema I

1.00 -4.80000 3.12090 0.439 -13.7289 4.1289

3.00 .20000 3.12090 1.000 -8.7289 9.1289

4.00 7.00000 3.12090 0.154 -1.9289 15.9289

Problema II

1.00 -5.00000 3.12090 0.405 -13.9289 3.9289

2.00 -.20000 3.12090 1.000 -9.1289 8.7289

4.00 6.80000 3.12090 0.171 -2.1289 15.7289

Patrón

1.00 -11.80000(*) 3.12090 0.008 -20.7289 -2.8711

2.00 -7.00000 3.12090 0.154 -15.9289 1.9289

3.00 -6.80000 3.12090 0.171 -15.7289 2.1289

(*) La diferencia de medias es significativa al nivel 0.05.

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ESTUDIO HISTOPATOLOGICO

GRUPO CONTROL

a) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 1: se observa esófago, estómago (fondo y cuerpo),

fragmentos de tejido amorfo.

Esófago: presenta hiperplasia (aumento del número de células) de la basal, con figuras de

mitosis escasas e hiperqueratosis moderada, del epitelio de la mucosa.

Estómago: fondo y cuerpo presenta autolisis, degeneración quística leve de las glándulas de la

mucosa de la zona del cuerpo gástrico.

Tejido amorfo, abundante, hialinizado con áreas de necrosis, e infiltración por leucocitos

neutrófilos polimorfonucleares, linfocitos, macrófagos y cordones de material algo

homogéneo, acidófilo (colágeno).

b) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 2: Se observa esófago, estomago (fondo, cuerpo y

antro pilórico), tejido adiposo.

Esófago: presenta marcada hiperplasia de la basal (hileras de células) con algunas figuras de

mitosis, además acantosis e hiperqueratosis del epitelio de la mucosa.

Estómago: cuerpo presenta algunas glándulas con degeneración quística leve. En la región

antropilórica se observa una amplia zona con perdida de tejido de todo el espesor de la

mucosa incluyendo musculare mucosae, úlcera, contiene tejido necrótico, leucocitos

neutrófilos polimorfonucleares, abundante macrófagos y leucocitos eosinófilos, este infiltrado

inflamatorio compromete hasta submucosa. La membrana serosa no es observable.

Tejido adiposo, presenta necrosis con denso infiltrado por leucocitos, neutrófilos

polimorfonucleares, macrófagos y fibroblastos.

c) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 3: Se observa esófago, estomago (fondo, cuerpo),

tejido adiposo.

Esófago: completamente desprendida la capa queratínica, en el corte con pared completa,

presenta hiperplasia de la basal e hiperqueratosis del epitelio de la mucosa.

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Estómago: presenta autolisis marcada del epitelio de la mucosa.

Tejido adiposo: con focos de necrosis en el espesor del tejido, de preferencia en la periferia,

además infiltración por neutrófilos polimorfonucleares, macrófagos y fibroblastos, abundante

cordones de material acidófilo, algo homogéneo (colágeno).

d) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 4: se observa esófago, estómago (fondo y cuerpo),

fragmentos de tejido amorfo.

Esófago: ¾ cortes, pared incompleta, grandes áreas con esfacelación del epitelio de la

mucosa.

Estómago: fondo y cuerpo presenta autolisis leve, degeneración quística leve de las glándulas

de la mucosa de la zona del cuerpo gástrico.

Tejido amorfo, abundante, hialinizado con áreas de necrosis, e infiltración por neutrófilos

polimorfonucleares, linfocitos, macrófagos.

e) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 5: se observa esófago, estómago (fondo y cuerpo),

fragmentos de tejido amorfo.

Esófago: completamente desprendida la capa queratínica, en el corte con pared completa,

presenta hiperplasia de la basal e hiperqueratosis del epitelio de la mucosa.

Estómago: fondo y cuerpo presenta autolisis leve, degeneración quística leve de las glándulas

de la mucosa de la zona del cuerpo gástrico.

Tejido amorfo, abundante, hialinizado con áreas de necrosis, e infiltración por neutrófilos

polimorfonucleares, linfocitos, macrófagos.

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GRUPO PATRÓN

a) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 1: Se observa esófago, estómago (fondo y cuerpo) y

tejido adiposo (epiplón).

Esófago: epitelio de la mucosa es estratificado plano ligeramente queratinizado (con 3-5 hileras

de células epiteliales y capa cornea delgada). El tejido conectivo (corion) de la mucosa y

submucosa es de textura intermedia, el de la adventicia es laxo. El tejido muscular en los

estratos de la musculare mucosae y en los estratos interno y externo de la capa muscular

propiamente dicha, es de tipo liso, dispuestos oblicuamente y transversalmente (por la

orientación del corte al seccionarlo). Todas las estructuras mencionadas se encuentran sin

cambios histológicos significativos.

Estómago: zonas de fondo y cuerpo, presentan autolisis moderada del epitelio de la mucosa que

compromete 1/3 de su espesor, musculares mucosae, submucosa y muscular sin cambios

significativos, la serosa está desprendida en zonas y en otras, no se observa.

Tejido adiposo, infiltración por leucocitos neutrófilos polimorfonucleares, macrófagos,

fibroblastos y cordones de material acidófilo, algo homogéneo (colágeno), que también

compromete al resto de tejido adiposo, pero solamente en la periferia del fragmento.

b) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N°2: Se observa esófago, estómago, tejido adiposo.

Esófago: epitelio de la mucosa presenta hiperqueratosis (aumento de la capa córnea), leve, el

resto de pared sin cambios significativos.

Estómago: fondo y cuerpo, presenta autolisis moderada del epitelio de la mucosa, del fondo,

autolisis leve en la mucosa del cuerpo, en la cual también se observa degeneración quística leve

de algunas glándulas, hiperemia moderada en la capa submucosa.

Tejido adiposo: sin cambios significativos.

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c) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 3: Se observa esófago, estómago (fondo y cuerpo) y

tejido adiposo.

Esófago: epitelio de la mucosa presenta hiperqueratosis (aumento de la capa córnea), leve, el

resto de pared sin cambios significativos.

Estómago: fondo y cuerpo, presenta autolisis marcada del epitelio de la mucosa, el resto de la

pared sin cambios significativos.

Tejido adiposo: pequeño fragmento de, contiguo a zona fúndica del estomago, presenta

hiperemia leve y proliferación de fibroblastos que aumenta la contextura del tejido.

d) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 4: observa esófago, estómago (fondo y cuerpo) y

tejido adiposo.

Esófago: epitelio de la mucosa presenta hiperqueratosis (aumento de la capa córnea), leve, el

resto de pared sin cambios significativos.

Estómago: fondo y cuerpo, presenta autolisis marcada del epitelio de la mucosa, el resto de la

pared sin cambios significativos.

Tejido adiposo: pequeño fragmento de, contiguo a zona fúndica del estomago, presenta

hiperemia leve y proliferación de fibroblastos que aumenta la contextura del tejido.

e) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 5: Se observa esófago, estómago.

Esófago: epitelio de la mucosa presenta hiperqueratosis (aumento de la capa córnea), leve, el

resto de pared sin cambios significativos.

Estómago: fondo y cuerpo, presenta autolisis moderada del epitelio de la mucosa, del fondo,

autolisis leve en la mucosa del cuerpo, en la cual también se observa degeneración quística leve

de algunas glándulas, hiperemia moderada en la capa submucosa.

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GRUPO PROBLEMA I

a) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 1: Se observa esófago (fondo y cuerpo), estómago

(fondo y cuerpo).

Esófago: presenta focos de hiperplasia marcada de la basal, con tendencia a formar nódulo

(acumulo de células), en otras áreas la hiperplasia es moderada, en ambas zonas presenta además

capa granulosa e hiperqueratosis del epitelio de la mucosa.

Esófago de caracteres estructurales sin cambios significativos, ausencia del epitelio en zonas,

por esfacelación.

Estomago: autolisis marcada del epitelio de la mucosa fúndica y moderada en la mucosa del

cuerpo gástrico. En algunas áreas de la subserosa esta muy ensanchada por la presencia de

leucocitos neutrófilos polimorfonucleares, macrófagos, fibroblastos, y células adiposas,

pequeños focos de necrosis e hiperemia (vasos sanguíneos dilatados y llenos de sangre), también

compromete a tejido adyacente.

b) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 2: Se observa esófago, estómago (fondo y cuerpo),

tejido adiposos.

Esófago: presenta focos de hiperplasia marcada de la basal, con tendencia a formar nódulo

(acumulo de células), en otras áreas la hiperplasia es moderada, en ambas zonas presenta además

capa granulosa e hiperqueratosis del epitelio de la mucosa.

Estómago: con marcada autolisis del epitelio de la mucosa en fondo y cuerpo.

Tejido adiposo, presenta hiperemia de grado leve.

c) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 3: Se observa esófago, estómago (fondo y cuerpo),

tejido adiposo.

Esófago: se observa un pequeño fragmento el cual presenta hiperqueratosis leve, el resto de pared

sin cambios significativos.

Estómago: fondo y cuerpo, presenta autolisis leve del epitelio de la mucosa, en la subserosa se

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observa una zona ensanchada, hiperemia e infiltración moderada por linfocitos, macrófagos y

fibroblastos. La membrana serosa no es observable.

Tejido adiposo, con áreas de necrosis con denso infiltrado por leucocitos neutrófilos

polimorfonucleares, macrófagos, linfocitos y fibroblastos, otras áreas presenta moderada y

marcada hiperemia.

d) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 4: Se observa esófago, estómago (fondo y cuerpo).

Esófago: se observa un pequeño fragmento el cual presenta hiperqueratosis leve, el resto de pared

sin cambios significativos.

Estómago: fondo y cuerpo, presenta autolisis leve del epitelio de la mucosa, en la subserosa se

observa una zona ensanchada, hiperemia e infiltración moderada por linfocitos, macrófagos y

fibroblastos. La membrana serosa no es observable.

e) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 5: Se observa esófago, estómago.

Esófago: se observa un pequeño fragmento el cual presenta hiperqueratosis leve, el resto de pared

sin cambios significativos.

Estómago: presenta autolisis leve del epitelio de la mucosa, en la subserosa se observa una zona

ensanchada, hiperemia e infiltración moderada por linfocitos, macrófagos y fibroblastos.

GRUPO PROBLEMA II

a) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 1: Se observa esófago y estómago.

Esófago: presenta hipotrofia del epitelio de la mucosa, con una hilera de células correspondiente a

los basales y capa cornea con hiperqueratosis.

Estómago. Fondo y cuerpo con autolisis marcada. Subserosa ensanchada con infiltración por

leucocitos polimorfonucleares, macrófagos, fibroblastos, células adiposas. La membrana serosa

no es observable.

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b) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 2: Se observa esófago y estómago.

Esófago: presenta hipotrofia del epitelio de la mucosa y capa cornea con hiperqueratosis.

Estomago: pared completa en los que el epitelio de la mucosa presenta degeneración quística

moderada, además hiperemia leve, en mucosa y submucosa. La membrana serosa no es

observable.

c) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 3: Se observa esófago, estomago (fondo y cuerpo),

tejido adiposo.

Esófago: en zonas fragmentado, sin cambios significativos, ausencia del epitelio en zonas, por

esfacelación.

Estómago: fondo y cuerpo, presenta hiperemia moderada en la mucosa.

Tejido adiposo: sin cambios significativos.

d) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 4: Se observa esófago, estomago (fondo y cuerpo),

tejido adiposo.

Esófago de caracteres estructurales sin cambios significativos, ausencia del epitelio en zonas, por

esfacelación.

Estómago: fondo y cuerpo, presenta hiperemia moderada en la mucosa.

Tejido adiposo: sin cambios significativos.

e) ANIMAL DE EXPERIMENTACIÓN N° 5: Se observa esófago y estómago.

Esófago: presenta hipotrofia del epitelio de la mucosa, con una hilera de células correspondiente a

los basales y capa cornea con hiperqueratosis.

Estómago. Fondo y cuerpo con autolisis marcada. Subserosa ensanchada con infiltración por

leucocitos polimorfonucleares, macrófagos, fibroblastos, células adiposas.

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GRUPO CONTROL

Fig. 1: se observa esófago, estómago (fondo y

cuerpo), fragmentos de tejido amorfo:

Hiperplasia, fondo y cuerpo presenta autolisis

leve, hialinizado con áreas de necrosis, e

infiltración por leucocitos neutrófilos

polimorfonucleares, linfocitos, macrófagos y

cordones de material algo homogéneo,

acidófilo

GRUPO PROBLEMA I

Fig. 2: Se observa esófago, estómago

(fondo y cuerpo), tejido adiposo: Se

observa un pequeño fragmento el cual

presenta hiperqueratosis leve, fondo y

cuerpo, presenta autolisis leve del epitelio

de la mucosa, en la subserosa se observa

una zona ensanchada, hiperemia e

infiltración moderada por linfocitos,

macrófagos y fibroblastos.

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GRUPO PROBLEMA II

Fig. 3: Se observa esófago, estomago

(fondo y cuerpo), tejido adiposo: en zonas

fragmentado, sin cambios significativos,

ausencia del epitelio en zonas, por

esfacelación. fondo y cuerpo, presenta

hiperemia moderada en la mucosa. Tejido

adiposo: sin cambios significativos.

GRUPO PATRON

Fig. 4: Se observa esófago, estómago

(fondo y cuerpo) y tejido adiposo:

epitelio de la mucosa presenta

hiperqueratosis (aumento de la capa

córnea), leve, el resto de pared sin

cambios significativos, fondo y cuerpo,

presenta autolisis marcada del epitelio de

la mucosa, el resto de la pared sin

cambios significativos.

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ESTUDIO FITOQUÍMICO

Fig. 5: Recolección de la planta Croton alnifolius Lam. (cabra-cabra en la localidad de Callancas,

Provincias de Otuzco, La Libertad

Fig. 6: Extracción del látex del Croton alnifolius Lam.

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Fig.7: Látex de Croton alnifolius Lam.

Fig. 8: Clasificación Taxonómica de la planta cabra- cabra en el Herbarium Truxillense

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Fig. 9: Obtención de los extractos en diferentes solventes por su polaridad (de derecha a izquierda:

H2O/H+, Éter etílico, Etanol y Agua)

MARCHA FITOQUIMICA

EXTRACTO CLOROFÓRMICO

Fig. 10:

1: Ensayo de Sudan

2a: Ensayo de de Dragendorff

2b: Ensayo de Mayer

2c. Ensayo de Wagner

3: Ensayo de Baljet

4: Ensayo de Liebermann- Buchart

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EXTRACTO ALCOHÓLICO

Fig. 11: Ensayo de Catequinas

Fig. 12:

2: Ensayo de Resinas

3: Ensayo de Felhing

4: Ensayo de Baljet

5: Ensayo de Lieberman-Bourchard

6: Ensayo de la Espuma

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Fig. 13:

7: Ensayo de FeCl3

8: Ensayo de Borntrager

9: Ensayo de Shinnoda

10: Ensayo de Kedde

11: Ensayo de Antocianidina

EXTRACTO ACUOSO

Fig. 14:

1a: Ensayo de Dragendorff

1b: Ensayo de Mayer

1c: Ensayo de Wagner

1d: Ensayo de Hager

2: Ensayo de Cloruro férrico

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Fig. 15:

3: Ensayo de Shinnoda

4: Ensayo de Felhing

5: Ensayo de la Espuma

6: Ensayo de Mucilagos

7: Ensayo de Principios Amargos y

Astringentes

EXTRACTO ACUOSO ÁCIDO

Fig. 16:

1: Ensayo de Dragendorff

2: Ensayo de Mayer

3: Ensayo de Wagner

4: Ensayo de Hager

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ESTUDIO FISIOPATOLOGICO

Fig. 17: Clasificando los espécimen por grupo de trabajo

Fig. 18: Pesando los especímenes

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Fig. 19: Haciendo la laparoscopia a los especímenes para su posterior extracción del estómago

Fig. 20: Estómago de Rattus norvergicus var. albinus

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Fig. 21: Conservación de los estómagos para su posterior análisis histopatológico

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