Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo, A.C.

Monterrey, N.L Junio, 2005

Métodos de digestibilidad in vivo e in vitro para

ingredientes y dietas de Camarón

CYTED

Cuantificación de óxido de cromo (marcador indirecto de digestibilidad)empleando la digestión por microondas y la espectroscopia

de absorción atómica

M.C Leticia García RicoM.C. Lourdes Gutiérrez CoronadoM.C. Cristantema HernándezI. Q Rita E. Ramos Ruiz

Propiedades Marcador

Substancia naturalIndigeribleInsolubleFarmacológicamente inactivoCuantificable

Factores que afectan su recuperación

SedimentaciónInadecuada manipulaciónTamaño de partículaInterferencias químicas

DietaHecesIleon

2 mL HNO3 Pre-calcinación

Calcinación 650 °C4 h

TransferirVasos digestiónXP1500

Oxidante

García et al, 1999

Etapa 1 Etapa 2

Transferir

100 mL

Oxidante

García et al, 1999

4 mL HNO3 []1 mL HCL []4 mL HF []

25 mL H3BO3

10 mL HNO3 []

Oxidantes empleados

6 mL H2O2 30%

Etapa 1 Etapa 2

Parámetros Etapa 1 Etapa 2

Poder 100 100 100 100 100 100 100 100Tiempo (min) 8 8 10 10 6 6 6 15Presión (psi) 60 120 160 90 120 160 180 200Temperatura (°C) 120 140 160 130 145 160 170 180

1 Horno de microondas modelo MARSX2 Programa de digestión para 14 vasos

Programa de digestiPrograma de digestióón por microondasn por microondas1,21,2

ParámetrosLongitud de onda 357.9 nmAncho de ranura 0.2 nmCorriente 7 mALlama reductora aire-acetileno

0

0.3

0 1 2 3

Conc

Abs

Ley de Lambert-Beer

Control de calidad

Blanco reactivoTriplicadosMuestra certificada

Domestic Sludge, NIST

Tipo de dietas

Carne y huesoHarina de pescadoSemilla de algodónHarina de gallinaHarina de SangreCaseína

SoyaGónada Atún

Precisión del método

Muestra N Χ±DE, μg/g CV,%

Material de Referencia 9 181±8.6 4.8Dieta 9 1205±5.5 5.5Heces 8 9905±4.6 4.6Ileon 9 7182±8.2 8.2

Exactitud del método

Muestra N Intervalo,μ/g Χ±DEc R,%

Dietaa 41 1132-1610 1411±148 103.16±10.83Hecesb 11 4233-4967 4805±382 100.35± 7.95

a 0.2% óxido de cromob 0.7% Cr2O3c Cr2O3= 68.43% Cr

Muestra Dieta HecesR,% CV Χ±DE CV

Comercial 62.17±11.25 18.10 13145.34±2671.85 20.33P. Soya 76.35± 8.11 10.62 12125.24±2240.93 18.48S. Extruida 91.24±15.00 16.44 9582.34±1560.99 16.29S. Gónada A 87.44±12.94 14.79 11826.43±1457.39 12.32G. Atún 87.91±14.18 16.14 15177.42±1762.20 11.61

1% Óxido Cromo

Exactitud del método

Pruebas InterlaboratorioDieta Dieta Heces

1 2 1 2Comercial 0.55 0.47 1.67 0.96P. Soya 0.79 0.71 1.64 1.57S. Extruida 0.92 0.63 1.89 0.89S. Gónada A 0.90 0.66 2.01 1.23G. Atún 0.95 0.42 2.31 1.70

1García et al, 19992Mc. Ginnis and Kasting, 1964