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Mtodo de Estudio para el Diagnostico BacteriolgicoProf. Edgar A. Mejas Tirado
La muestras es el comienzo... Toda la informacin diagnostica del laboratorio depende de conocer que muestras clnicas se escogen y con que cuidado son tomadas y transportadas Cynthia A. Needham
Paciente Enfermo
Clnico interpreta e instaura terapiaIdenticacin del agente, informe nal, envo al clnico
Medico establece diagnostico presuntivo
El ciclo clnico
Toma de muestra, recipiente bien rotulado
Evaluacin de cultivos y pruebas especiales
Traslado e ingreso al laboratorio
Informe presuntivo y cultivo en medios especiales
Examen directo de la muestra al microscopio
Criterios para recurrir al laboratorio1. Enfermedad aguda. 2. Proceso febril. 3. Muerte sbita. 4. Cuadros gastrointestinales o diarreicos. 5. Reacciones inflamatorias con formacin de abscesos y/o exudados. 6. Cualquier otra que el veterinario requiera de acuerdo a su experiencia clnica.
ClnicoObtener la muestra adecuada de acuerdo al caso evaluado
LaboratorioProporcionar al clnico sobre la presencia o ausencia de microorganismos que pueden estar involucrados en el cuadro patogeno
Que se espera del clnico con los resultados? Establecer un diagnstico Indicar la prognosis y posibles complicaciones de la enfermedad Identificar el origen de la infeccin y riesgo de transmisin a humanos u otros animales Identificar producto especfico necesario para inmunizacin que ayude a prevenir la infeccin en otros animales Formular programas especficos de tratamientos
Los ResultadosVan a depender de: Calidad de la muestra Tiempo y cuidado durante la recoleccin Habilidad de la tcnica y experiencia del personal de laboratorio
Recordar Ninguna prueba permitir la identicacin y caracterizacin de todos los patgenos potenciales La informacin clnica es importante
Consideraciones para toma de muestras
Anlisis RequeridoMuestra o espcimen
Tincin
Antibiograma
Cultivo Etctera
Serologa
Muestra o Espcimen Elemento ms importante Su seleccin depende de: Anamnesis Evaluacin clnica Diagnostico Presuntivo
Condiciones de las MuestrasDebe ser identificada (acompaada) con una Historia clnica. La muestra debe ser Representativa del proceso infeccioso. Debe ser Oportuna. Suficiente. Debe evitarse en lo posible su contaminacin por la flora normal. Recolectar las muestras en condiciones de Asepsia y Esterilidad. Transportada y procesada prontamente.
Materiales para RecoleccinASPIRACION DE MUESTRAS LQUIDAS.HISOPADOS. BIOPSIAS DE TEJIDO. ANIMALES ENTEROS U RGANOS.
Materiales Usados
Forma Apropiada
Manejo del animalUso de medidas de contencin: Aguaitacaina Tranquilizante Anestesia local o general Limpieza previa de detritus dezona
la
Pelos,
tierra, costras, etc.
tejido
necrotico,
Evitar riesgos sanitariosDescarte loe materiales perforantes y/o cortantes (agujas, laminas, bistures, tubos quebrados o conteniendo uidos): En cajas especiales o de paredes rgidas, bien identicadas.
Evitar riesgos sanitariosMateriales contaminados y/o potencialmente infectantes (jeringas, gorros, algodones, gasa): En bolsas adecuadamente identicadas
Transporte de la MuestraHisopados Para Cultivo de Bacterias Aerbicas y Facultativas: Medios de transporte: Cary y Blair, Stuart, Amies, o Culturette Swab . No requiere refrigeracin. Hisopados Para Cultivos de Bacterias Anaerbicas: Mantener condiciones anaerbicas, pH, y temperatura ( incluyen muchas bacterias entricas): Medio de Cary y Blair, sistemas especiales para anaerbios como tubos de Port-A-Cult, Tubos de Scott, Sistemas BD de Vacutainer. No deben ser refrigerados. Aspirados: Transportados en jeringa, tubos estriles o medios de cultivo especiales. Leche, exudados bronquiales, nasofaringeos, orina, no deben refrigerarse (relativo). Las Muestras De Tejido, en frascos de vidrio estril o medios de transporte para anaerobios.
Embalaje de la Muestra Establecer un adecuado sistema de envasado y proteccin de la muestra El recipiente debe ser identicado de forma clara y legible Colocarlo en bolsa hermtica y sellada para evitar derrame
Embalaje de la Muestra Si el traslado es lejos, se recomienda colocar en un envase mas resistente Si se va a enviar mas de una muestra, se debe proteger cada una Muestras variadas (bacteriologa, serologa, histopatologa) deben ser envueltas individualmente, bien selladas
Embalaje de la Muestra Si es necesario, se colocan en cavas, bien sujetas para evitar agua (hielo) movimientos por el bruscos y protegidos del generada sistema de refrigeracin
Requerimiento de Historia Nombre del propietario, direccin y telfono Nombre del medico veterinario, direccin, telfono Identicacin del animal: Nombre, edad, especie, raza, sexo Tratamiento, si viene al caso Diagnostico presuntivo o sospecha clnica Tipo de anlisis requerido:Tinciones de muestras, biopsias de tejidos, aislamiento e identificacin en cultivos, deteccin de antgeno, presencia de toxina microbiana, deteccin de genes especficos del patgeno, etc.
Tipos de Muestras
Aspirado o PuncinVejiga (orina). Lquidos: Pleural Sinovial Pericardico Cefalorraquideo Peritonial Sangre Lesiones cerradas (abscesos encapsulados)
Consideraciones para una PuncinRasurar el sitio. Lavar con agua y jabn. Desinfectar con solucin de iodo jabonosa por 1 min. Limpiar con alcohol al 70 %. Permitir el secado espontneo. Utilizar jeringa y aguja estril
Secreciones Respiratorias Hisopados intranasales Lavados traqueales Lavado endotraqueal Lavado Broncoalveolar Broncoscopa Aspiracin pulmonar por aguja fina
Hisopados Usar hisopos de rayn o alginato de Ca, no usar algodn Evitar contaminar con ora normal. Limpiar rea a muestrar. Muestrar la zona afectada. Colocar el hisopo en medio de transporte
Hisopados Canal auditivo externo Piel, para algunos casos, en otros no Abscesos abiertos o supuraciones Secreciones vaginales o uterinas Heces (algunos casos)
Biopsias Se recomienda cuando es difcil obtener liquido. Debe manejarse con asepsia quirrgica. Se evalan adicionalmente las alteraciones en lo tejidos lo cual puede ayudar en diagnostico.
Tejidos Condiciones: Enviar muestras inmediatamente En necropsias: Enviar hasta 35 cm3 de seccin de rgano
o tejido Separar cada muestra en recipientes estriles o bolsa
plsticas Recolectar los rganos con lesiones patolgicas Conservacin: refrigeracin Biopsias: Se manejan como proceso quirurgicos
LABORATORIO
Medico Veterinario
Realizar pruebas bacteriolgicassimples
Interpretar los resultados Los procedimientos complejos sedejan al bacterilogo clnico
Comunicacion Clnico-Laboratorio
Considerar el numero de agentes quecausan enfermedades
Tecnicas de laboratorio varan de
acuerdo al sndrome clnico y el tipo de agente
La informacin clnica es importante
Comunicacion Clnico-Laboratorio
Clinico: Establece un diagnostico
presuntivo (agente que se sospecha) sin esperar resultados pertinentes
Solicitar las pruebas que considere Casos extremos: Informespreliminares
Criterios para NO Recibir una Muestra No hay historia clnica y descripcin de lesiones observadas. Transportadas inadecuado. Conservadas en formol neutro al 10 %. Colocadas en envases inadecuados, no estriles o contaminados, muestras derramadas, varios rganos junto a secciones de intestino, envases mal sellados o rotos. Insucientes. Inapropiada. Mal estado de conservacin. Sembrada en medios lquidos para aislamiento primario y se reciben con sobrecrecimiento bacteriano.
Pruebas de LaboratorioEspcimenDeteccin del microorganismo
Ac
C e n t r o s
e s p e c i a l i z a d o s
Deteccin del genoma
Aislamiento o deteccin de sus productos Componentes estructurales o extracelulares
Hibridacin Amplicacin
T o d o s
Serologa
Inmunologa
Pruebas de LaboratorioMuestra o espcimen
Bacteriologa convencional
Bacteriologia no convencional Identicacin: Pruebas bioqumicas, serologicas, etc.
Cultivo medios crecimiento
Molecular
Inmunologica
AislamientoPruebas de susceptibilidad a agentes antimicrobianos
Genero y especie, tratamiento
Flujograma de Laboratorio
Esquema de Aislamiento e Identicacin1.- Recoleccin de la muestraMuestra de:______________________ Tcnica de recoleccin: Hisopado Aspirado Biopsia Necropsia Fecha:__________________________ Datos Clnicos____________________ Transporte al laboratorio:___________
Esquema de Aislamiento e Identicacin2.Examen macroscpico y microscpico de la muestra
Caractersticas Macroscpicas: Caractersticas MicroscpicasColoracin de GramGram +:____Morfologa: cocos bacilos cocobacilos pleomrficos espirilos Agrupacin: sencillo parejas cadenas racimos otros
Gram -:___Morfologa: cocos bacilos cocobacilos pleomrficos espirilos Agrupacin: sencillo parejas cadenas racimos otros
Esquema de Aislamiento e Identicacin3.- Aislamiento Primario
Agar Sangre BovinaTemperatura: 25C 37C 42C
Atmsfera: Aerobiosis Microaeroflia Anaerobiosis
Crecimiento: Caract. Colonias: Hemolisis: Pigmentos: Olor:
Agar Manitol Sal37C 24-48 h Crecimiento: Caract. colonias: Utilizacin de manitol Pigmentos: Otros
Agar MacConkey
37C 24-48 h
Crecimiento: Caract. colonias: Utilizacin de lactosa: Pigmentos: Otros:
Sistema API
Causas de un Cultivo Negativo No haba infeccin. Muestra no representativa, insuciente e inoportuna. Agente causal no es cultivable por medios ordinarios de que dispone el laboratorio. Los agentes microbianos no eran viables. Presencia de sustancias antimicrobianas en la muestra. Retraso excesivo en la siembra de la muestra. Mala seleccin de los medios de cultivo por falta de informacin. Condiciones de incubacin inadecuadas. Error humano.
GRACIAS