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Diagnóstico laboratorial como herramienta para la vigilancia y el control de la rabia
Aislados del virus rábico prevalentes en la Amazonía y en la región nordeste de BrasilAislados del virus rábico prevalentes en la Amazonía y en la región nordeste de Brasil
Instituto PasteurOctubre 2006
Instituto PasteurOctubre 2006
Consulta de Expertos de OPS/OMS sobre rabia transmitida por Consulta de Expertos de OPS/OMS sobre rabia transmitida por murcimurciéélagos hematlagos hematóófagos en la Amazonfagos en la Amazonííaa
(Brasilia, 10 al 11 de octubre de 2006)(Brasilia, 10 al 11 de octubre de 2006)
Técnicas convencionales de diagnóstico laboratorial de la rabia
Inmunofluorescencia directa
Inmunofluorescencia directa
Aislamiento viralAislamiento viral
RatonesRatones Cultivo celular(N2A)
Cultivo celular(N2A)
Otras técnicas
Tipificación antigénica
RT-PCR
Estudios genéticos
Filogenia
Tipificación antigénica
RT-PCR
Estudios genéticos
Filogenia
Panel de anticuerpos monoclonales antinucleoproteína, cedido por el CDC/Atlanta/USA, través del Consorcio de Laboratorios de Referencia para la Rabia coordinado por la OPS/OMS.
Objetivo: Fortalecer la Vigilancia y el Control de la Rabia en las Américas, base de sustentación de las decisiones político-estratégicas de prevención y control.
Panel de anticuerpos monoclonales antinucleoproteína, cedido por el CDC/Atlanta/USA, través del Consorcio de Laboratorios de Referencia para la Rabia coordinado por la OPS/OMS.
Objetivo: Fortalecer la Vigilancia y el Control de la Rabia en las Américas, base de sustentación de las decisiones político-estratégicas de prevención y control.
Tipificación antigénica
Limitaciones: No permite la perfecta caracterización de los aislados de murciélagos insectívoros, dada su diversidad.
Permitir la comparación de las distintas variantes aisladas en diferentes regiones
Conocer la distribución geográfica y temporal de las variantes
Permitir la comparación de las distintas variantes aisladas en diferentes regiones
Conocer la distribución geográfica y temporal de las variantes
Ventaja de la utilización del mismo panel de anticuerpos monoclonales
Reconocer especies que mantienen el ciclo silvestreReconocer especies que mantienen el ciclo silvestre
Identificar variantes conocidas en nuevos huéspedesIdentificar variantes conocidas en nuevos huéspedes
El estudio filogenético es de poco valor, si no se disponen de datos de la vigilancia epidemiológica, que permitan identificar las circunstancias en las cuales se desencadenó el foco, las especies involucradas y los aspectos de la historia natural de los animales que contribuyeron para la perpetuación del virus en la naturaleza.
El estudio filogenético es de poco valor, si no se disponen de datos de la vigilancia epidemiológica, que permitan identificar las circunstancias en las cuales se desencadenó el foco, las especies involucradas y los aspectos de la historia natural de los animales que contribuyeron para la perpetuación del virus en la naturaleza.
Estudios genéticos y filogenéticos
Determinación de la secuencia de un pequeño segmento delgenoma del virus aislado y la comparación con las secuencias de virus disponibles en el bancos de datos genéticos internacionales.
Determinación de la secuencia de un pequeño segmento delgenoma del virus aislado y la comparación con las secuencias de virus disponibles en el bancos de datos genéticos internacionales.
Los focos registrados únicamente por vigilancia epidemiológica pasiva pueden estar viciados,
involucrando supuestamente a especies animalesque en determinadas regiones no tiene
participación en el ciclo de la rabia.
Los focos registrados únicamente por vigilancia epidemiológica pasiva pueden estar viciados,
involucrando supuestamente a especies animalesque en determinadas regiones no tiene
participación en el ciclo de la rabia.
Rabia humana por murciélagos hematófagos en la región (2004–2005)
PaísPaís 20042004 20052005 TOTALTOTAL
Brasil
Ecuador
Perú
Colombia
Venezuela
Bolivia
22
0
8
14
2
0
42
2
7
0
0
1
64
2
15
14
2
1
TOTAL 46 52 98
Fuente: PANAFTOSA/OPS.
EcuadorEcuador
Pará (Brasil)Pará (Brasil)
Maranhão (Brasil)Maranhão (Brasil)
Fuente: SVS / Ministério da Saúde, Brasil.
Portel, Pará, Brasil
Fuente: SVS / Ministério da Saúde, Brasil.
Viseu, Pará, Brasil
Turiaçú, Maranhão, Brasil
Fuente: Vladimir Nogueira, CDA/SAA-SP, Brasil.
Pastaza, Ecuador
Fuente: Wikipedia (www.de.wikipedia.org)
AgV3Desmodus Rotundus
AgV3Desmodus Rotundus
Estudios antigénicos
Fueron procesadas 29 muestras (27 Brasil, 2 Ecuador)Fueron procesadas 29 muestras (27 Brasil, 2 Ecuador)
Panel de anticuerpos monoclonales cedidos por CDC-Atlanta, EUAPanel de anticuerpos monoclonales cedidos por CDC-Atlanta, EUA
IP9854T/05
IP9847T/05
IP9844T/05
IP9853T/05
IP9846T/05
IP9851T/05
IP9849T/05
IP9852T/05
IP9848T/05
IP5448AC/05
IP4795AC/05
IP5213V/04
IP5447AC/05
IP5450AC/05
IP5449AC/05
IP5453AC/05
IP5858T/05
IP7697CM/05
IP7541V/05
IP5214V/04
AB083811
AB083809
AB083810
IP2293EQ/05
IP2294EQ/05IP3067P/04
IP3072P/04
IP3068P/04
IP3066P/04
IP3069P/04
IP3522P/04
IP3070P/04
M13215
D42112
IP1297M/06
AB083792
AB083797
AB08379698100
100
61
96100
126
62
100
100100
69
5776
50
100
4055
37
94
0.02
AgV3
Muestras fixas
AgV2
1-A
1-B
1-C
1-D
Maranhão (1-A)Maranhão (1-A)
Pará (1-A y 1-D)Pará (1-A y 1-D)
Ecuador (1-C)Ecuador (1-C)
Cluster Media
1A/PA-MA 99,8
1B/BR 99,6
1C/EQ 99,9
1D//PA 99,6
Clusters Media
1A X 1B 96,6
1A X 1C 96,9
1A X 1D 95,9
1C X 1D 97,4
1B X 1C 97,4
Identidad media de los nucleotídeos intra-cluster fue:Identidad media de los nucleotídeos intra-cluster fue:
Identidad media de los nucleotídeos inter-cluster fue:Identidad media de los nucleotídeos inter-cluster fue:
ÁrbolPastazaPastazaPortelPortel
Augusto CorréaAugusto CorréaViseuViseu
Cândido MendesCândido MendesTuriaçuTuriaçu
Rabia humana del año 2006
AB201804
AB201803
IP4435MG/06
AB083803
AB201802
AB083813
AB083814
IP3946AL/06
AB201820
M13215
DQ286762
IP7170M/06
IP1297M/06
AB083798
AB083792
AB083797
AB08379699
96
100
100
99
98
100
9999
72
100
68
70
73
0.02
Cepa relacionada con murciélagos hematófagos
Cepa fija
Cepa relacionada con perros
• Pseudalopex vetulus• Pseudalopex vetulus
Rabia en cánidos silvestres en el nordeste del Brasil
• Cerdocyon thous• Cerdocyon thous
Rabia en cánidos silvestres en el nordeste del Brasil
Rabia en cánidos silvestres en el nordeste del Brasil
Fuentes: Fumio H. Ito y Romualdo Spíndola.
Casos de rabia en cánidos:Teresina, Piauí, Brasil
Fuentes: Fumio H. Ito y Romualdo Spíndola
FOX BA 10
FOX BA 77
FOX BA 65
FOX BA 66
FOX PE 33
FOX PE 43
FOX PE 45
FOX PE 38
FOX PE 40
FOX PI 55
FOX PE 37
FOX BA 4
FOX BA 64
FOX PE 41
Cerd bcth184 PE
FOX PE 46
FOX PE 36
Cerd bcth228 MA
FOX PI 23
FOX PE 42
FOX PE 44
Cerd LG212 MT
FOX PI 25
Cerd bcth198 MG
FOX BA 2
Lgymno LG166
Lgymno LG45(RS)
Lvetulus LG282
Lvetulus LG185 MG
Lvetulus LG184 BA
FOX PI 26
FOX PI 59
DOG PE 51
DOG PE 48
DOG PE 34
DOG PE 49
100
67
100
99
62
81
100
100
57
53
55
68
48
95
98
57
35
38
99
88
68
87
62
91
87
55
78
36
26
29
15
23
9
0.01
Identificación genética del
Cerdocyon thous
P. vetulusP. vetulus
C. thousC. thous
C. familiaresC. familiares
PIPI PBPBPEPE
BABA
Distribución de la muestras estudiadasdel Cerdocyon thous
Fuente: Pedro Carnieli Jr.
Árbol del virusde la rabia
Cepas V3Cepas V3
Cepas domésticasCepas domésticas
Ceptas de C. thousCeptas de C. thous
AB206408Pfx2
AB206407Pfx1
AB206413Pfx8
AB206412Pfx7
41/FX/PE/05
AB207884Pfx6
44/FX/PE/05
AB206411Pfx5
40/FX/PE/05
08/FX/PE/02
38/FX/PE/05
06/FX/BA/03
45/FX/PE/05
62/FX/PI/05
20/FX/PI/05
55/FX/PI/05
09/FX/PI/05
21/FX/PI/05
23/FX/PI/05
59/FX/PI/05
22/FX/PI/05
26/FX/PI/05
27/FX/PI/04
35/FX/PE/05
46/FX/PE/05
34/DG/PE/05
01/FX/PE/02
24/FX/PE/02
64/FX/BA/05
05/FX/PE/02
33/FX/PE/05
43/FX/PE/05
AB206409Pfx3
AB206410Pfx4
37/FX/PE/05
47/HM/PE/05
02/FX/BA/04
66/FX/BA/05
65/FX/BA/05
54/DG/PB/03
53/CT/PB/03
16/CT/PB/03
14/CT/PB/03
52/DG/PB/05
11/CT/PB/03
12/CT/PB/03
56/DG/SE/05
57/DG/SE/05
76/DG/AL/05
49/DG/PE/05
51/DG/PE/05
50/DG/PE/05
70/DG/PA/05
75/DG/PA/05
71/DG/PA/05
73/DG/PA/05
AB206417Pbt4
AB206414Pbt1
AB206419Pbt6
AB206415Pbt2
AB206418Pbt5
AB206416Pbt3
4690
64
100
100
88
100
7099
99
49
68
86
73
95
93
55
55
99
8472
94
96
94
60
77
75
75
59
30
32
50
98
24
75
46
70
63
99
43
84
100
6260
61
97
92 46
84
59
40
0.02
DQ116771
DQ116769
DQ116768
DQ116772
DQ116762
DQ149104
DQ146727
DQ146726
DQ116763
DQ116770
DQ116776
DQ116775
DQ116766
DQ116761
DQ116774
DQ116773
DQ116764
DQ116767
DQ116765
AF406696
M31046
DQ314577
DQ314579
DQ314574
DQ314576
DQ314578
DQ314580
DQ314575
AB083809
AB083818
DQ177278
AB083817
AB083812
AB083816
AB083815
84
63
57
100
99
99
7565
56
0.05
VARIANT 2: BRAZILIAN DOMESTIC AND WILD CARNIVORE-RELATED STRAINS
FIXED STRAINS
VARIANT 3: VAMPIRE-BAT-RELATED STRAINS
Esfuerzos del Instituto Pasteur y del Ministerio de Salud en el diagnóstico in vivo
Esfuerzos del Instituto Pasteur y del Ministerio de Salud en el diagnóstico in vivo
Cepas relacionadas con Desmodus rotundus
(AgV3)
AB117972AB117970
AB117971AB083816
AB083815AB117969.
IP3895folículoAB083812
AB083807AB083806.
DQ314575DQ314574
DQ314578DQ314577DQ314579DQ314576
U27220U27221
U27219U27218
X03673X13357
AB083798AB083792AB083797AB083796
91
99
99
99
0.05
Cepas de mapache
Cepas relacionadas con perros
(AgV2)
Esfuerzos del Instituto Pasteur y del Ministerio de Salud en el
diagnóstico in vivo
Esfuerzos del Instituto Pasteur y del Ministerio de Salud en el
diagnóstico in vivo
Recomendaciones
• Alertar las unidades de la salud de la región Amazónica
• Promover busca activa de casos
• Estimular la coleta de muestras
• Capacitar al personal de la red de laboratorios en las técnicas convencionales y en la tipificación antigénica
• Integrar instituciones de Salud, Agricultura y Medio Ambiente
• Alertar las unidades de la salud de la región Amazónica
• Promover busca activa de casos
• Estimular la coleta de muestras
• Capacitar al personal de la red de laboratorios en las técnicas convencionales y en la tipificación antigénica
• Integrar instituciones de Salud, Agricultura y Medio Ambiente
Colaboradores
• Secretaria da Vigilância em Saúde, Ministério da Saúde (SVS/MS), Brasil
• Instituto Evandro Chagas, Ministério da Saúde, Estado de Pará, Brasil
• Instituto Nacional de Higiene Leopoldo Izquieta Pérez, Ecuador
• Red LACEN
• Laboratório de Apóio Animal, Estados de Pernambuco y Mapá, Brasil
• Fundação Municipal de Saúde, Teresina, Estado de Piauí, Brasil
• CENAP, IBAMA, Ministério do Meio Ambiente, Brasil
• Pontifícia Universidade Católica (PUC), Estado de Rio Grande do Sul, Brasil
• Secretaria da Vigilância em Saúde, Ministério da Saúde (SVS/MS), Brasil
• Instituto Evandro Chagas, Ministério da Saúde, Estado de Pará, Brasil
• Instituto Nacional de Higiene Leopoldo Izquieta Pérez, Ecuador
• Red LACEN
• Laboratório de Apóio Animal, Estados de Pernambuco y Mapá, Brasil
• Fundação Municipal de Saúde, Teresina, Estado de Piauí, Brasil
• CENAP, IBAMA, Ministério do Meio Ambiente, Brasil
• Pontifícia Universidade Católica (PUC), Estado de Rio Grande do Sul, Brasil
Gracias por su atención…Gracias por su atención…