Upload
raja
View
58
Download
0
Embed Size (px)
DESCRIPTION
Tkanka tłuszczowa pochodząca ze stawów pacjentów chorych na RZS aktywnie produkuje cytokiny prozapalne. E. Kontny, M. Jastrzębska, I. Janicka, P. Małdyk, W. Maśliński Zakład Patofizjologii i Immunologii , Klinika Reumoortopedii Instytut Reumatologii, Warszawa. Rola tkanki tłuszczowej. - PowerPoint PPT Presentation
Citation preview
Tkanka tłuszczowapochodząca ze stawów
pacjentów chorych na RZS
aktywnie produkuje cytokiny prozapalne
E. Kontny, M. Jastrzębska, I. Janicka, P. Małdyk, W. MaślińskiZakład Patofizjologii i Immunologii,
Klinika ReumoortopediiInstytut Reumatologii, Warszawa
Rola tkanki tłuszczowej
Działanie przeciw miażdżycowe Reaktywność na insulinę
Reaktywność na insulinęReaktywność na insulinę
Adipocyty
MakrofagiAdiponektynaLeptyna
TNFIL-6
Prawidłowa masa ciała Otyłość
Insulinooporność Insulinooporność
ZapalenieNacieki Mf
InsulinoopornośćMiażdżyca
Zapa
leni
e
Adipocyty
Makrofagi
Leptyna
TNFIL-6
Adiponektyna
CRP
Zmodyfikowane wg Bastard JP et al., Eur Cyt Netw 2006, 17:4-12
RZS
Limf. T
Otyłość
Łagodny przebiegSeronegatywność
Kacheksjareumatoidalna
U 2/3 chorych, choroba destrukcyjna, nasilony proces zapalny + choroby
metaboliczne,Seropozytywność
AdipokinyDominują właściwości prozapalne
+ udział w procesach destrukcyjnychTkanka tłuszczowa może dostarczać sygnały prozapalne i przeciw zapalne?
Cytokiny, chemokiny
Chorzy na RZS
Endoprotezoplastyka stawu kolanowego
Eksplanty
Tkanki tłuszczowej
Błony maziowej
WewnątrzstawowejPodskórnej
okołostawowej(z miejsca założenia szwu)
100 mg tkanki/ml DMEM/ 18 godz LPS (1 g/ml), IL-1 (1 ng/ml),TNF (10 ng/ml),
IL-15, IL-17, IL-23 (10 i 40 ng/ml)
Hodowla in vitro:
Nadsącza hodowlane
TkankaStężenie IL-6, IL-8,TNF
(ELISA)Ekspresja mRNA kodującego
cytokiny/receptory(RT-PCR)
Czy tkanka tłuszczowa związana ze stawem wytwarza cytokiny prozapalne?
0.0
2.5
5.0
7.5
10.0
mR
NA
IL-6
/GAP
DH
0
1
2
mR
NA
IL-8
/GAP
DH
Błona maziowa
Tkanka tłuszczowawewnątrzstawowa
Tkanka tłuszczowapodskórna
p TT vs Bm p TTs vs TTp
n=6
IL-6 IL-8
Ekspresja mRNA kodującego IL-6 i IL-8 w tkankach pochodzących od tych samych pacjentów
Na poziomie mRNA spontaniczna ekspresja IL-6 i IL-8 jest wyższa w tkance tłuszczowej niż w błonie maziowej
Wytwarzanie IL-6
Wewnątrzstawowa Podskórna
Wydzielanie IL-6 przez tkankę tłuszczową
wewnątrzstawową po LPS i TNF podskórną po LPS
Tkanka tłuszczowa
0
10
20
30
K LPS TNF IFN IL-15 IL-17 IL-23
IL-6
(ng
/100
mg
tkan
ki)
n=20
0
10
20
30
K LPS TNF IFN IL-15 IL-17 IL-23
IL-6
(ng/
100
mg
tkan
ki)
n=4
0
25
50
75
K LPS TNF IFN IL-15 IL-17 IL-23
IL-6
(ng
/ 100
mg
tkan
ki)
n=11
Błona maziowa
p vs K
IL-6
(ng/
100
mg
tkan
ki)
IL-6
(ng/
100
mg
tkan
ki)
0
25
50
75
0
25
50
75Wewnątrzstawowa Błona maziowa
Wytwarzanie IL-6 przez tkanki pochodzące od tych samych pacjentów
n=10
n=3
K LPS TNF IFN IL-15 IL-17 IL-23 K LPS TNF IFN IL-15 IL-17 IL-23
K LPS TNF IL-1IFN IL-15 IL-17 IL-23
Tkanka tłuszczowa
0
10
20
30
40
IL-6
(ng
/100
mg
tkan
ki)
Wewnątrzstawowa
K LPS TNF IL-1IFN IL-15 IL-17 IL-23
p vs K p Ts vs Tp
0
10
20
30
40
IL-6
(ng
/100
mg
tkan
ki)
Podskórna
Wewnątrzstawowa tkanka tłuszczowa wytwarza więcej IL-6 po stymulacji TNF i IFN
p Ts vs Bm
0
25
50
75
K LPS TNF IFN IL-15 IL-17 IL-23
IL-8
(ng/
100
mg
tkan
ki)
Wewnątrzstawowa Podskórna
Błona maziowan=7
Wydzielanie IL-8 przez tkankę tłuszczową
wewnątrzstawową po LPS i TNF podskórną po LPS
(cytokinach ?)
0
10
20
30
40
K LPS TNF IFN IL-15 IL-17 IL-23
IL-8
(ng/
100
mg
tkan
ki) n=4
Wytwarzanie IL-8 Tkanka tłuszczowa
p vs K
0
10
20
30
40
K LPS TNF IFN IL-15 IL-17 IL-23
IL-8
(ng
/100
mg
tkan
ki)
n=14
Wytwarzanie IL-8 przez tkanki pochodzące od tych samych pacjentów
Tkanka tłuszczowa
n=7
n=3
K LPS TNF IFN IL-15 IL-17 IL-23
K LPS TNF IL-1 IFN IL-15 IL-17 IL-23
K LPS TNF IFN IL-15 IL-17 IL-230
25
50
75
IL-8
(ng
/100
mg
tkan
ki) Wewnątrzstawowa
0
25
50
75
IL-8
(ng
/100
mg
tkan
ki)
Błona maziowa
0
10
20
30
40
IL-8
(ng
/100
mg
tkan
ki)
Wewnątrzstawowa
0
10
20
30
40
IL-8
(ng
/100
mg
tkan
ki)
K LPS TNF IL-1 IFN IL-15 IL-17 IL-23
Podskórna
p Ts vs Bm
p vs K
Obie tkanki tłuszczowe wydzielają spontanicznie i po stymulacji podobnie ilości IL-8
0
100
200
300
400
500
TNF
(pg/
100
mg
tkan
ki)
0
500
1000
1500
2000
2500
TNF
(pg/
100
mg
tkan
ki)
0
250
500
750
TNF
(pg/
100
mg
tkan
ki)
0
250
500
750
TNF
(pg/
100
mg
tkan
ki)
Wytwarzanie TNF przez tkanki pochodzące od tych samych pacjentów
K LPS IFNIL-15 IL-17 IL-23K LPS IFNIL-15 IL-17 IL-23
K LPS IL-1 IFNIL-15 IL-17 IL-23 K LPS IL-1 IFNIL-15 IL-17 IL-23
Tkanka tłuszczowa
Wewnątrzstawowa
Wewnątrzstawowa Podskórna
Błona maziowa
n=8
n=4
Obie tkanki tłuszczowe wydzielają po stymulacji podobnie ilości TNF
p vs K p Ts vs Bm
IL-15
Pacjent: HJ JM WS BW
IL-15R
W tkance tłuszczowej i błonie maziowej występuje mRNA kodujące IL-15 i jej swoisty receptor (IL-15 R)
W obu rodzajach tkanki tłuszczowej ekspresja mRNA kodującego wydzielniczą/błonową formę IL-15 jest wyższa niż w błonie maziowej
TTs BM TTs BMBMBM TTs TTs
0.0
0.5
1.0
1.5
mRNA
IL-15/GAP
DH
SSP
LSP
L
S
IL-15
BM - Błona maziowaTTs- tk. tłuszczowa wewnątrzstawowa
TTp – tk.tłuszczowa podskórna
n=6 p TT vs Bm
BM TTs TTp
SSP – cytozolowaLSP – wydzielnicza/błonowa
Podsumowanie wynikówTkanka tłuszczowa (wewnątrzstawowa i podskórna/okołostawowa):
wytwarza znaczne ilości IL-6 i IL-8 (lecz nie TNF)( 1 ng/100 mg tkanki; 5% ilości wydzielanej przez błonę maziową),
wykazuje ekspresję mRNA IL-15 i mRNA IL-15R
Spontaniczne wytwarzanie cytokin
Wewnątrzstawowa tkanka tłuszczowa
Po stymulacji
W obu rodzajach tkanki tłuszczowej wytwarzanie IL-6 i IL-8 wzrasta wielokrotnie (po LPS,TNF, IFN) ,
( 25 – 50% ilości wydzielanej przez błonę maziową); wytwarzanie TNF znamiennie wzrasta (po LPS),
( 0,5 ng/100 mg tkanki, tj. 20% ilości wydzielanej przez błonę maziową)
Pod wpływem cytokin (TNF, IFN) wytwarza znamiennie więcej IL-6 niż tkanka tłuszczowa podskórna
Podsumowanie wyników
Wnioski
1. U chorych na RZS tkanka tłuszczowa (wewnątrzstawowa i okołostawowa/podskórna)
jest istotnym źródłem cytokin prozapalnych (IL-6, IL-8, TNF)
2. Udział wewnątrzstawowej tkanki tłuszczowej w podtrzymywaniu sieci cytokinowej wydaje się ważniejszy, gdyż
wykazuje ona większą reaktywność na cytokiny (TNF, IFN) i wytwarza większe ilości IL-6
3. TNF może wpływać na tkankę tłuszczową drogą autokrynową
4. Wydaje się, że także IL-15 może autokrynnie wpływać na metabolizm stawowej tkanki tłuszczowej,
gdyż tkanka ta wykazuje ekspresję IL-15 i IL-15Ra.