膵 腫 瘍 組 織 にお け る腫 瘍 マ ー カー(CEA, TPA, CA19-9,

POA,フ ェリチ ン)と 膵逸 脱 酵 素(Amylase, Elastase 1)

の 免 疫 組 織 化 学 的検 討

岡山大学第一内科学教室

脇 谷 勇 夫

(昭和61年11月5日 受稿)

Key words:膵 癌組 織 膵腫 瘍組 織 腫 瘍 マ ー カー,

膵 逸脱 酵 素,免 疫組 織 化 学 的検 討

は じ め に

膵癌 の早 期 診断 は現 在 の と ころ は なは だ困 難

で あ る と言 わ ざ るを え ない.最 近 の画像 診 断 の

進 歩 およ びcacinoembryonic antigen(CEA),

carbohydrate antigen 19-9(CAl9-9)を は じ

め とする各 種 腫瘍 マーカーとElastase 1, Amylase

な どの膵逸 脱 酵 素 を最大 限 に活 用 して も十 分 な

成 果 をあ げ る に は い た って い な い状 態 で あ る.

各 種腫 瘍 マ ー カー お よび膵 逸脱 酵 素 の膵 腫瘍 組

織 にお け る産生 様 式 を観 察 す るこ と によ り,そ

れ らの産 生 時点 での 特徴 と血 清 お よ び尿 中 レベ

ルへ の反 映 の機 序 を検 討 し,そ の上 で そ れ ぞれ

の血 清 お よび尿 中 レベ ルの 判 定 をす るこ とは膵

癌 の早 期 診 断 をめ ざす た め には重 要 なこ と と思

われ る.現 在の と ころ こ れ らの膵 腫瘍 組 織 にお

け る発 現様 式 を比較 検 討 した報 告 は 散見 され る

にす ぎない1,2).そ こで 著 者 は近 年 臨 床 応 用 が

可 能 となった各 種腫 瘍 マ ー カ ー の う ち, CEA,

tissue polypeptide antigen(TPA), CA19-9,

pancreatic oncofetal antigen(POA),フ ェリチ

ンお よび 膵 逸 脱 酵 素 のAmylase, Elastase 1

について膵腫 瘍26例 で その局 在 を免疫 組 織 化 学的

に観察 した,さ らに血 清 レベルを測 定 しえた症 例 に

つ いて は その組 織 局 在 と血 清 レベ ル との 関連 に

つ いて も検 討 し,あ わせ 文献 的 考察 も加 えた.

対 象 と 方 法

対象は倉敷中央病院で保存している膵癌23例,

膵島 細胞 腫2例(1例 は肝転 移 組 織), Apudoma

1例 の膵 腫瘍26例 の組 織 で,手 術 組織21,剖 検

組 織5で あ る.

方 法 は通 常の10%中 性 緩 衝 ホ ルマ リン固 定,

パ ラフィン包埋 材 料 の3-4μmの 切 片 を用い,免

疫 組織 化 学 的方 法 は ペ ル オ キ シ ダー ゼ を用 い た

酵 素抗 体 法 で ある. CA19-9以 外 はPAP法 に よ

り, CA19-9は 直 接 法 を用 いた.第 一抗 体 は同

院 で採 用 して い る血 清 レベ ルの測 定 キ ッ トと可

能 な限 り同 一 の抗 体 を使 用 し, CEAはMILAB

ICC-KIT(NCAで 処理 済 み). TPAは 抗TPA:

B1抗 体(Sangtec), CA19-9は 抗CA19-9抗 体

(富士 レ ビオ), POAはGelderら の精 製POA

に対 する抗 体(三 菱 油化),フ ェ リチ ンは抗 肝 フ ェ

リチ ン抗 体(DAKOPATTS)を 使 用 した.ま た

Amylaseは 抗 唾 液腺Amylase抗 体(Nordic),

Elastase 1は 抗Elastase 1抗 体(ダ イナ ボ ッ

ト)を使 用 した. PAP法 お よび 直 接 法 は 表1の

ごと くお こ なっ た.免 疫 組 織 化 学 の結 果 は腫 瘍

部 に おけ る染色 陽 性 細 胞 の割 合 で1)陰 性(-),

2)1/3ま で を(+), 3)2/3ま で を(〓),4)

2/3以 上 を(〓)の4段 階 に分 類 した.さ らに染

色 部位 は以 下 の よ うに分類 した.す なわ ち1)

細 胞 質 内, 2)細 胞 辺 縁 お よび 管腔 構 造 のlu

minal border, 3)管 腔 構 造 の内容 物, 4)癌

周 囲 の 間 質部 の4種 類 で あ る,あ わせ て 膵腫 瘍

組 織 中 の壊 死部 と近 傍 の 正 常部 膵 組 織 に関 して

も検 討 をお こな った.

対 照 試験 は第 一抗 体 と同 種 の正 常 血 清 を400

69

70 脇 谷 勇 夫

Table 1 Flow chart for localizations of tumor markers and pancreatic exocrine enzymes

by immunoperoxidase methods

Table 2 Sensitivities of tumor markers and pancreatic exocrine enzymes

for the diagnosis of pancreastic cancer and specificities of these

markers studied in cases of chronic pancreatitis

ƒÁ UAm/Cr: Am/Cr ratio in urine

method

normal range

倍 に希釈 し置 換 して お こ な った.核 染 色 は ヘ マ

トキ シ リ ン染 色(ギ ル液)を 使 用 して い る.

血 清 お よび 尿 中 レベ ルの 測 定 法 は表2の 方 法

を用 い て い る.す な わちCEAとElastase 1は

RIA(ダ イナ ボ ット), TPAと フ ェリチ ンはRIA

(第 一RI), CA19-9はRIA(セ ン トコ ア), POA

はRIA, EIA(三 菱 油 化),血 清および 尿 中Amyl

aseはG7PNP法(べ ー リン ガー),尿 中Amyl

ase/Creatinine比(以 下rUAm/Cr)で はCREN;

Jaffe法(第 一化学)で あり,正 常域を逸脱する

ものを全て陽性とし特定のcut off levelは 設

定しなかった.ま た相関係数の意義の検定にはt検

定を用いた.さ らに膵腫瘍の組織学的分類は膵

癌取扱い規約(日 本膵臓病研究会編)に よった.

結 果

倉敷中央病院における各腫瘍マーカーの血清

レベルでの成績は表2の とおりで,膵 癌患者31

膵 腫瘍 組 織 に おけ る腫瘍 マ ー カー(CEA, TPA, CA19-9, POA,フ ェ リチ ン)と膵逸 脱 酵 素(Amylase. Elastase 1)の 免疫 組 織 化 学 的検 討

71

Table 3 Correlation between various serum markers and urinary amylase in cases of pancreatic cancer

Each value means correlation coefficient* p<0.05

Table 4 Distribution of various tumor markers

and pancreatic exocrine enzymes in

the tissues of normal part of pancreas

studied in formalin-fixed, paraffin

sections (19 cases)

(): Case number of exceptional cases (Table 6)+: positive+:

negative

例 で のSensitivityはCEA 53%, TPA 67%,

CA19-9 79%, POA 38%,フ ェリチ ン76%で あ っ

た.一 方慢 性 膵 炎 に おけるSpecificityはCEA 71

Table 5 Distribution of various tumor markers and pancreatic exocrine enzymes in the

necrotic tissue (11 cases) and intraluminal deposits of pancreas tumors (22 cases) studied in formalin-fixed, paraffin sections

(): Case number of exceptional cases (Table 6)+: positive-:

negative

%, TPA 80%, CA19-9 96%, POA 92%,フ ェ

リチ ン80%で あった.ま た同 じ膵 癌 患者 での膵逸

脱 酵素 の成績 は,血 清Amylase(以 下S-Amy)は

7 2 脇 谷 勇 夫

Tab

le

6 E

xpre

ssio

n of

tu

mor

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arke

rs

and

panc

reat

ic

exoc

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No.

4•

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膵腫 瘍 組 織 にお け る腫瘍 マ ー カー(CEA, TPA, CA19-9, POA,フ ェ リチ ン)と膵逸 脱 酵 素(Amylase, Elastase 1)の 免疫 組織 化学 的検 討

73

a. CEA and TPA

b. CEA and CA 19-9

c. CEA and POA

d. TPA and CA 19-9

e. TPA and POA

f. CA 19-9 and POA

•œ

: pancreatic cancer•›

: other tumors

Fig. 1 Relationship between the expression of tumor markers in the tissues of

pancreatic tumors

35%, rUAm/Crが61%, Elastase 1が66%

のSensitivityでCA19-9の 鋭 敏性 が示 唆 され

た.さ らに これ らの 相 関 を検 討 す る と,表3の

ようにS-AmyとCA19-9と の間 にR=-0.368

(P<0.05)の 弱 い逆 相 関 を認 めた以 外 は 全 く相

関 を認 め な かっ た.

1)正 常 部 膵管 での 検討

表4の ごとくTPA全 例 とCA19-9の 大部 分

の例 で 膵 管上 皮 のluminal borderに 染色 され,

CEAは 陰性 で あった.さ らにPOA, Amylase,

Elastase 1の 一部 で 陽性 とな っ た.

2)正 常 部 膵腺 房 細胞 とラ ンゲ ルハ ンス島(以

下 ラ島)に おけ る検討

表4の よ うにTPA全 例 とAmylase, Elast

ase 1の 一 部 で 腺 房 細胞 は陽 性 に染色 され,ラ

島 は フ ェ リチ ンで陽 性 とな っ た.

3)膵 腫 瘍 組織 の壊 死 部 と管腔 内 容物 の検 討

表5の ご とく壊 死 部 で は, CEA, CA19-9は

74 脇 谷 勇 夫

a. Localization of CEA on the luminal border, cytoplasma, marginal region of cancer cells and intra

luminal deposits. The intensity of the staining is different from one cancer cell to another. 3.3•~

4 Left lower corner is the high power view. 3.3•~20

b. Localization of TPA on the luminal border, cytoplasma and marginal region of cancer cells. No stain

ing of the intraluminal deposits. Marginal region of the cell is more strongly stained than that of

CEA. Acinar epithelial cells are also stained. 3.3•~4 Left lower corner is the high power view.

3.3•~20

Fig. 2 Well differentiated adenocarcinoma of the pancreas (Case No. 16 Table 6)

膵 腫 瘍組 織 に お け る腫 瘍 マ ー カ ー(CEA, TPA, CA19-9, POA,フ ェ リチ ン)と膵 逸脱 酵 素(Amylase, Elastase 1)の 免 疫組 織 化 学 的 検討

75

a. CA19-9-staining of the same specimen of fig. 2. Localization of CA19-9 resembles that of CEA. 3.3•~

4 Left lower corner is the high power view. 3.3•~20

b. Modelately differentiated adenocarcinoma of the pancreas (Case No. 18 Table 6)

Elastase 1-staining is strong on cytoplasma of cancer cells. 3.3•~4 Left lower corner is the high

power view. 3.3•~20

Fig. 3

76 脇 谷 勇 夫

a. POA-staining showing granular pattern in cytoplasma of cancer cells and exceptional staining of

intraluminal deposits. 3.3•~4 Left lower corner is the high power view. 3.3•~20

b. Localization of Ferritin. No staining on cancer cells but on surronding stroma. 3.3•~4 Left lower

corner is high power view. 3.3•~20

Fig. 4 Modelately differentiated adenocarcinoma of the pancreas (Case No. 9 Table 6)

膵腫 瘍組 織 に お け る腫 瘍 マ ー カ ー(CEA, TPA, CA19-9, POA,フ ェ リチ ン)

と膵逸 脱 酵 素(Amylase, Elastase 1)の 免 疫 組織 化 学 的検 討 77

a. CEA

b. TPA

c. CA 19-9

d. POA

Undiff. Undifferentiated

Poor. diff. Poorly differentiated

Moder. diff. Moderately differentiated

Fig. 5 Relationship between the expression of tumor markers and tumor-cell

differentiation in specimens of pancreatic cancer

陽性 に染 色 されTPAは 陰 性 で あった. POA,フ

ェリチ ン, Amylase, Elastase 1は1例 を除 き陰

性 とな っ た.

管腔 内 容物 で も同 様 にCEA, CA19-9で 染 色

され, TPAで 陰 性 で あった が,他 の もの は一 部

で陽 性 と なった.ま たCA19-9に は2例 の陰 性

例 が含 まれ て い る.

4)膵 腫瘍 組 織 に お け る検 討

表6と 図1に 示 す よ うに膵癌 例 そ れ ぞれ で各

腫 瘍 マ ー カー と膵逸 脱 酵 素 の組 織 染 色性(-～

〓)を 比 較 する と,症 例 ご とで異 な った パ ター

ンと な り一 定 の 形式 を認 め なか っ た.組 織 染 色

性 の各 腫 瘍 マ ー カー 間 に おけ る相 関 を検 討 す る

と, CEAとTPAに 正 の 相 関 が み られ た が,他

には特 有 の相 関 関係 は認 め られ な か った,

島細 胞 腫2例 とApudoma 1例 の検 討 で は,

TPA, Elastase 1と フ ェ リチ ンが 島細 胞 腫 の例

で 陽 性 に な った以 外 は陰性 とな った.

膵癌 組 織 で の 染色 陽 性 率 はCEA, TPAで そ

れ ぞれ96%, 100%と 高 かった が,血 清 レベ ルで

最 も陽性 率 の 高 いCA19-9で はむ しろ78%と 低

い結 果 で あった.ま たPOAは61%と 低 い 染 色

陽 性率 で あった が, CEAで(+)の2例 とCA19-

9で(+)の3例 でPOAが(〓)と な った.

膵癌 組 織 で の染 色 部位 は,図2,図3,図4

のごとくCEA, TRA, CA19-9は 癌 細 胞 のlumi

nal borderと 細胞 辺 縁 および 細胞 質内 に種々 の

程 度 に, POAは 癌 細 胞 の細 胞 質 内 に大 部 分顆

粒状 に染 色 され た.フ ェ リチ ンは癌 細 胞 細胞 質

内 に3例 で 陽性 とな った が,他 の症 例 で は癌 細

胞 周 囲 の間 質 主 に組 織球 内 に陽 性 とな っ た,ま

たAmylaseで は一 部luminal border上 に染 色

され る ように見 えた が陰 性 と した. Elastase 1

はAFP産 生性 の島細 胞 腫1例 と,膵 癌1例 で 腫

瘍 細胞 の細 胞 質 内 に染色 された(図3b)が 他 は

陰 性 で あ っ た.

膵癌 組 織 の分 化度 と組 織染 色 性(-～ 〓)と の

関 連 は,図5の ように, CEA, TPA, CA19-9で

はmoder.～ well diff.の 例 に(〓),(〓)の 例

が 大部 分 を しめ,な か で もTPAは(〓)が16例

78 脇 谷 勇 夫

a. CEA _??_ normal range

Expression of CEA in the tissues

_??_ normal range

b. TPA

Expression of TPA in the tissues

C. CA 19-9 _??_ normal range

Expression of CA 19-9 in the tissues

•œ

: measured with RIA (_??_ normal range)•›

: measured with EIA (_??_ normal range)

d. POA

Expression of POA in the tissues

Fig. 6 Comparison of the expression of CEA, TPA, CA19-9 and POA in the tumor specimens with their levels in serum

(74%)で あった.し か しundiff.とpoor. diff.

の例 で も(〓), (〓)の 例 は み られ た. CEAで

も同 様 の傾 向 は認 め られ た がwell diff.で も(+)

が3例 あ りTPAほ ど顕 著 な傾 向 は示 さな かった.

またCA19-9で はundiff.で(-)だ が, moder.

diff.とwell diff.の 症 例 の 中 に染 色(-), (+)

が7例 あ り, 3例 の(-)の う ち後 の検 討 で血 中

Lea抗 原 陰性 の症 例 が1例 含 ま れ て いた.こ の

症例 で は正 常 部 膵 管 も陰 性 と なっ た. POAの

検 討 で はundiff.とpoor. diff.で は(-)だ が,

moder. diff.とwell diff,で も(-), (+)が10

例 あった.フ ェリチ ン, Amylase, Elastase 1で

は比較 で きな か った.

血 清 レベ ル と組 織染 色 性(-～ 〓)と の 関 連 を

膵腫 瘍 組 織 にお け る腫瘍 マ ー カー(CEA, TPA, CA19-9, POA,フ ェ リチ ン)

と膵逸 脱 酵 素(Amylase, Elastase 1)の 免疫 組 織化 学 的 検 討 79

検 討 す ると, CEAで は 図6aの よ うに組 織 染 色

(-)及 び(+)の 血 清 レベル は2.5ng/ml以 下の

陰性 で あった が, (〓)で は大 部 分 が(〓)で は

全 て が2.5ng/ml以 上 の陽性 となった. CA19-9

も同様 の結 果(図6c)で あるが,症 例 は 少 な い

ものの(〓), (〓)の 症例 で は全 て血 清 レベ ルは

高値 を と り,大 部 分 は 高度 の異 常 とな った.な

お組 織 染 色(-)の うち血 清 レベ ルが 高値 を示 す

もの が2例 あり,同 様 な例 がTPAで1例(図6b),

POAで も1例(図6d)み られ た.逆 にCEA,

TPA, POAで 組織 染 色 が陽性 でも血 清 レベ ル が

高 値 とな ら ない例 が あっ た.

考 案

膵癌 の各 種腫 瘍 マ ー カー の血 清 レベ ルで の検

討 で は,表2の ごとくCEA 53%, TPA 67%, CA

19-9 79%とCEAで や や低 め なが らほぼ 諸家 の

報 告3～9)と 同様 のSensitivityで あ った.今 回

の検 討 でも他 のマ ーカー と比 べCA19-9がSen

sitivityとSpecificity共 に最 も優 れた腫 瘍 マー

カー と考 えられ た.著 者 の使 用 したPOA測 定kit

は 胎児 膵 を免疫 原 として作製 したGelderの 精 製

POAに 対 す る抗 体 で,同 じ抗体 を使 用 した報

告 で は48%10), 60%11)と 膵 癌 例 で の陽 性 率 を

あ げて い る.ま た抗 原 が免疫 学 的 にidenticalと

され るPCAAで の陽性 率67%2)に 比 して も著 者

の検 討 で は38%と かなりSensitivityが 低 い.フ

ェリチ ンで は膵 癌例 で72%が250ng/ml以 上の高

値 を とった と い う報 告12)が あ る.今 回 の検討 で

は 特 にcut off levelを 設 けず に正 常域 を逸 脱

した もの を全 て異 常 と した た め,本 来 の悪性 腫

瘍 か ら産 生 され ると考 え られ る フェ リチ ンに加

え,肝 機 能 障害,感 染,輸 血 な ど によ る影響 が

含 まれ て い る もの と考 え られ る.

腫 瘍 マー カー とほぼ 同 時 点 で測 定 した膵逸 脱

酵 素 で あるS-Amy, Elastase 1及 びrUAm/Cr

を膵癌 患 者 で比 較 して み ると, Elastase 1がSen

sitivity 66%と 最 も鋭 敏 で,次 いでrUAm/Crが

61%, S-Amyが35%と 渡 辺 らの 報 告13)と 同様

にElastase 1がS-Amyよ りも高いSensitivity

を示 した.こ れ は各 逸 脱 酵 素 の膵癌 によ る随伴

性 膵 炎 の あ らわ れ方 の差 によ る と考 え られた.

膵腫 瘍 組 織 の 近傍 に おけ る正 常 組 織(膵 管,

膵 腺房 細 胞,ラ 島)で の各 種 腫瘍 マ ー カー と膵

逸 脱酵 素 の 免疫 組 織 化 学的 な検 討 をお こ なった.

CEAとPOAは 成 人 の膵組 織 では 染色 され ない

と報告2, 14, 18, 19)されてい る,著 者の検討 ではPOA

で 膵管 上 皮 に3例 陽性 と な った 以外 は陰性 で あ

った. TPAで は 諸家 の報 告3, 15)と同 様 に膵 管 上

皮 で染 色 され,ラ 島 は陰 性 で あっ た.膵 管 上 皮

細胞 は強 く染 色 され,癌 部 よ りむ しろ強 く染 色

される例 もみ られ た. CA19-9で も膵 管 上 皮 の

luminal borderに19例 中16例 で 染色 され,諸 家

の 報告16, 17, 22)と同 様 で あった.ま た 血 清Lea抗

原 陰性 の症 例(症 例25,表6)で は正 常部 膵 管 上

皮 も陰性 であった,以 上のようにTPAと 一 部 を

除 く例 でCA19-9お よ び一 部 の 例 でPOAは,

腫瘍 近傍 という条 件付 きで 正 常 部 膵管 上 皮 のlu

minal borderに 存 在す ることが わ かった.フ ェ

リチ ン, Amylase, Elastase 1で の 報 告 は散 見

され るの み で あ る.フ ェリチ ンで は染色 陰 性23)

と されて い るが,著 者 の検 討 で は ラ島 で 染色 陽

性 とな り,こ の こ とは膵 組 織 フ ェ リチ ン を認 識

して い る可 能性 が あ る. Amylase, Elastase 1

が腺 房細 胞 に染 色 され るの は, Amylaseは 腺 房

細胞 に活性 を持 った分 泌 顆 粒 と して存 在 す る こ

とから理 解 で きる.ま たElastase 1は 腺 房細 胞

に おい てproenzymeと して存 在 してい るが免

疫 活性 は示 しうるの でProelastase 1を 認 識 し

て い る もの と考 えられ る.著 者 の検 討 で 一部 を

除 き組 織 染 色 陰性 と なっ た原 因 は 不 明だ が,固

定,包 埋 条 件 及び 抗 体 の特 異 性 特 に膵Amylase

と免疫 学的 に は ほ ぼ 同 一 と されて いるが唾 液 腺

Amylaseに 対 する抗 体 を使 用 した点 な どで今後

の検討 が必 要 と なろ う.

膵 腫瘍 組 織 の壊 死 部 と管腔 内 容物 にお け る検

討 では 一部 の例 外 を除 きCEA, CA19-9が(+)

でTPA, POAが(-)で あった.こ の こ と か ら

CEA全 例 と一部 を除 く例 でCA19-9は 腫 瘍 部

か ら管 腔へ 分 泌 され, TPA全 例 と大 部 分 の例 で

POAは 分 泌 され な い もの と考 え られた.ま た

壊 死部 にお け る染色 は癌 細 胞 また は正 常 細胞 が

壊 死 に お ちい っ た際 に細 胞 中 の 腫瘍 マ ー カー が

同部 に沈 着 し た もの と考 え られ る.上 記 の結 果

は,壊 死 部 から各腫 瘍 マーカーがclearさ れ る速

さの違 い,即 ちTPA, POAはCEA, CA19-9

80 脇 谷 勇 夫

よりもより速 くclearさ れ るた め と考 え られ た.

TPAは 著 者 が 正 常 例,慢 性 膵 炎例 を対 象 と し

てPSテ ス ト時 に腫 瘍 マ ー カー を 測 定 した結 果

か らみ て も明 らか に膵 液 中へ 分 泌 され て い る と

考 え られ,腫 瘍 組 織 の管腔 構 造 内 に分 泌 され ぬ

原 因 は 不 明 で あ るが む しろこの マ ー カーの癌 化

に伴 う変 化 と も考 え られ る.ま た フ ェ リチ ン,

Amylase, Elastase 1の 一部 で腫瘍 組 織 が陰 性

で あ るの に染色 陽 性 と なっ た原 因 は 不明 だ が血

中 に存 在す る もの を認 識 した り,フ ェ リチ ンの

場 合 は特 に鉄 分 の組 織 内沈 着 を認識 して い る可

能性 が あ る.

膵癌 組 織 にお け る各 種腫 瘍 マ ー カ ー と膵逸 脱

酵 素 の免 疫 組織 化 学 の 結 果 を組織 染 色性(-～

〓)で 表 し比 較 す る と,各 症 例 ご とで全 く異 な

った様 相 を呈 し,一 定 の パ ター ン を見 出 し得 な

か った.し か し各 腫瘍 マ ー カー 間 の組 織 染色 の

相 関 をみ る とCEAとTPAで 正 の相 関 を認 め

た.こ れは血 清 レベ ルで 両者 に相 関 を認 め な い

こ と を考慮 す る と興 味深 い.す なわ ちCEAは

TPAと 比 べ 腫瘍 組 織 内 に存 在 はす るが血 中へ は

反 映 され に くい マー カー とも考 え られ る,ま た

他 の腫 瘍 マ ー カー間 で は相 関 は認 めず,各 々 の

産 生 の時 点 で も全 く独 立 した様 式 をと る もの と

思 わ れ た.こ れ は同 一切 片 上,同 一 視 野 にお い

て も観 察 され た.

膵 腫 瘍 の うち膵 癌 以外 の組織 染色 性 の検 討 で

は,島 細胞 癌 の2例 でPOAが 組 織 染 色 が陽 性

で あった とい う報告18)が あ る.著 者 の検 討 で は

島 細胞 腫 例 でTPA,フ ェリチ ン, Elastase 1が

陽性 で あったが他 は陰 性 となり, Apudomaで は

全 て 陰性 となった. TPAは 上 皮 性 腫瘍 の共 通癌

抗 原 と して作製 され た もの で あ る か らそ の細 胞

起 源 か ら考 え る と島 細 胞腫 で陽 性 に な る可 能性

は あ るよ うに思 わ れ る,同 様 に,正 常組 織 に お

け る検 討 で ラ島 に フ ェ リチ ンを認 め る こと か ら

も島細 胞腫 で 検 出 しうる可 能1生はある. Elastase 1

につ い ては 染色 陽 性 の機 序 は不 明 で あ る.

膵 癌 組 織 での染色 陽性 率 を検討 するとCEA 96

%, TPA 100%, CA19-9 78%, POA 61%で

あった. CA19-9の 陽 性 率 は 諸 家 の報 告16, 22)と

ほぼ 同 様 で あ っ た が,血 清 レベ ルで の検 討 に比

し染 色 陽 性 率 がCEA, TPAよ り低 率 で あ り,

必 ず し も血 清 レベ ル での 鋭 敏性 は癌 組 織 か らの

直 接 的 な反 映 で は な い もの と考 え られ た.一 方

POAは 諸 家 の報 告2,18)よ りも低 い陽 性 率 で あり

血 清 レベ ルでSensitivityが 低 率 で あ る一 因 と

考 えられた.し か しCEA, CA19-9が 弱 陽 性 の

4例 でPOAは 強 陽 性 に染色 され,こ の よ うな

症例 でPOAはCEA, CA19-9に 相 補 的 に働 き

うる可 能性 を示 唆 した.血 清 レベ ル が測 定 され

た1例 で実 際 上CEAは 正 常域 でもPOAが 高 値

となり,こ れ らの症 例 でPOAの 有 用性 を うか が

わせ た.

膵癌 組 織 にお け る局 在 は, CEA, TPA, CA

19-9で は癌 細 胞 のluminal border,細 胞辺 縁 と

細胞 質内 に様 々 な程 度 に, POAで は 癌 細 胞 の

細胞 質内 に大部 分 顆 粒状 に染 色 され諸家2,3,16,18,

19,20,22)と同様 の結 果 で あった. CEAの 消 化 管 お

よび 胆 道 系 粘膜 上 皮 での 悪性 化 に伴 う変 化 の 電

顕 的 な観 察 の 報告25)に よれば,癌 化 に伴 いapi

cal sulrfaceの ほ かbaso-lateral plasma mem

braneや 細 胞 質 の染 色性 は著 し く増 強 し,腺 管

ご と細 胞 ご との染 色 性 は 不 規則 とな り,粘 膜 表

層 に強 く腺 底部 に弱 くな る とい う分 化 極 性 は喪

失 す ると さ れて い る.こ れ は 著者 が光 顕 的 に観

察 した膵 癌 組織 でのCEA, TPA, CA19-9で の

検討 に も当 ては ま る特 徴 と考 え られ,膵 癌 細 胞

にお け る こ れ ら腫 瘍 マー カー の特 有 な表 現 形 式

と考 えられ る.ま たPOAは 全 例 癌 細 胞 の細 胞

質 内 に(大 部 分顆 粒 状 に)染 色 され る こ とか ら

も他 の マ ー カーCEA, TPA, CA19-9と は異 な

った血 中へ の反 映 の機 序 を考 えさせ る,フ ェ リ

チ ンで の検 討 で は,血 清 フ ェ リチ ン高値 例 で も

膵 癌細 胞 に は局 在 を認 め な いとい う報 告23)が あ

るが,一 方 癌 細 胞 の細 胞 質 が微 細 顆 粒状 にび慢

性 に染 色 され た とす る報 告24)も み られ る.著 者

の 検討 で は3例 で癌 細 胞 細 胞 質内 に染 色 さ れた

以 外 は癌 細 胞 の周 囲 の 間 質 内 主 に組 織 球 に染色

され た.こ れ ら染 色 性 の 違 い は使 用 して い る抗

体 の 違 い(大 館24)は 抗 ヒト脾 フ ェ リチ ン抗 体 を

使 用)か ら生 じる も の と も考 え られ るが,著 者

の結 果 か らみ れ ば フ ェ リチ ンは一 部 で は癌 細 胞

か ら産 生 され るも の の大 部 分 は正 常組 織 が破 壊

され てゆ く際 の 反応 と考 えた 方 が 良 さそ うで あ

る.

膵腫 瘍 組 織 にお け る腫 瘍 マ ー カー(CCA, TPA, CA19-9, POA,フ ェ リチ ン)

と膵 逸脱 酵 素(Amylase, Elastase 1)の 免疫 組 織 化 学的 検 討 81

組 織 分 化 度 との 関連 をみ るとCEAの 場 合ana

plastic例 で 染色(-), well diff.例 でmoder.

diff.例 に比 べ よ り多量 に染色 されたとい う報 告21)

が ある.著 者 の検討 で もCEAに お い て組 織 染

色性 は組 織 分 化度 が 高 くな るにつ れ よ り強 度 に

なる傾 向 が み られた.さ らにその傾 向 はTPAで

いっそう顕著 で ありCA19-9で は逆 に弱 く, POA

で は 報告18)と 異 な り明 らか な傾 向 を認 め なか っ

た.

血 清 レベ ル と組 織 染色 性 の 関連 を検 討 すると,

症例 は少 ないもののCA19-9で は 組 織 染 色 陽 性

の6例 全例 で血 清 レベ ル は全 て陽 性 と な り,こ

れ らは組 織 産生 の程 度 を直 接 的 に血 清 レベ ル に

反映 した結 果 と考 え られ る.同 様 のことはCEA

で も染 色(〓)の 例 で認 め られた.し か しCEA

で は(＋)～(〓)の6例 で, TPAで は(〓)の

2例, POAで は(+)～(〓)の3例 で血 清 レベ

ル は陰 性 となった.同 様 の ことはCA19-9で の

検 討 で 観察 されて いる16).ま た血 清CEA値 に

影 響 す る因 子 として, CEAのproductionに 加

えそのclearance, excretionが 主 にKupffer

cellを 介 して肝細 胞 で おこなわれ るとい う報 告26)

もあ る. CEAの これらの症 例 で は手 術,剖 検例

とも に肝 転 移 の 所見 を認 め ず,上 記 の よ うに肝

によるclearanceが 充 分 になされかつproduction

も量 的 に少 ない症 例 と考 え られ る.ま た その局

在 が細 胞 質 内に限局 されることか ら, POAは 分

泌 され に くいた め血 中 に反映 され が た い の か も

しれ ない.

組織 染 色 陰性 例 の うち, CA19-9の2例, TPA

の1例, POAの1例 で血 清 レベ ルが 高値 とな っ

た. CEAで 免 疫 組 織 化 学 的 に組 織 内濃 度 と染

色 閾値 の関 連 を検 討 して,染 色 陰性 は組 織 内濃

度 が そ の閾値 に達 しないためとする報 告21)が あり,

同様 の機序 が これ ら につ い て も考 え られ る.ま

た血 清CA19-9値 に影響 を及 ぼ す 要 因 につ い て

胆 嚢,胆 管 炎 を併発 した 胆 石症 で血 清CA19-9

値 の高 度異 常 が 報 告27)さ れ ている.そ してその機

序 を胆 管 の 閉塞機 転 によ り胆 管上 皮 に正 常 で も

存 在 するCA19-9が 血 中 へ 逸脱 す る と考 察 し,

さら に慢 性 膵 炎 で も急 性 増 悪 に一 致 して上 昇 を

認 め て い る.著 者が 経 験 したCA19-9の 症 例 は,

1例 はT-Bil値 が26mg/dlに 及 ぶ 閉 塞性 黄疸 例

で,他 の1例 は主 膵 管 が 体 尾 部 で完 全 閉 塞 し,

Elastase 1が5000ng/dl以 上 の 高値 をとる随 伴

性 膵 炎 を合併 した症 例 で あ っ た.

膵 逸 脱 酵 素 の免 疫 組織 化 学 的検 討 で は膵 癌例

でS型Amylaseの 組織 染 色 が少 数例 で陽 性 で

あっ た と い う報 告1)が あ る が,続 発 性 膵 炎 な ど

膵癌 に も とづ く二 次 的病 変 に原 因 され る もの と

考察 して い る.著 者の検 討 ではAmylase, Elast

ase 1と もに陰 性 で あったが, Elastase 1の 組 織

染色 例 の 中 で膵 癌 細胞 内 に明 らか に陽 性(〓)に

染色 され て い る1例 と,膵 島 細胞 腫 の1例 で リ

ボ ン状 に配列 した癌 細胞 内 に(〓)に 染 色 され る

1例 があ り,術 前 のElastase 1値 が前 者 が1015

ng/dl,後 者 が5000ng/dl以 上 といず れ も異 常 高

値 を示 し後 者 は手術 後 急 速 に その値 が低 下 して

いるこ とな どか らもElastase 1産 生 性 の 膵腫 瘍

の可 能性 が示 唆 され た.

結 論

膵 腫 瘍26例 の手 術,剖 検 組 織 標 本 につ き,

CEA, TPA, CA19-9, POA,フ ェリチ ンの各 種

腫 瘍 マ ー カー とAmylase, Elastase 1の 膵逸

脱酵 素 を免 疫組 織 化 学 的 に染 色 し,検 討 をお こ

なっ た.同 時 に血 清 およ び尿 中 レベ ル での 検討

も加 え以 下 の結 果 を得 た.

1)膵 腫瘍 近傍 の正 常 部 膵 組 織 の 検 討 で は,

TPAの 全例 とCA19-9の 大 部 分 およびPOAの

一部 の例 で 膵管 上 皮 のluminal borderが 染 色

され た.

2)膵 腫瘍 組 織 の管 腔 内容 物 における検 討 で は,

CEAの 全例 とCA19-9の 大 部 分 の例 で腫 瘍 部

か ら管 腔へ 分泌 されるが, TPAは 全 く, POA

は一 部 の例 を除 き分 泌 され な い腫 瘍 マ ー カ ー と

考 え られ た.

3)膵 腫 瘍 組 織 の壊 死 部 に お け る検 討 で は ,

TPA, POAはCEA, CA19-9よ りも壊 死部 か

らよ り速 くclearさ れ る と考 え られた.

4)膵 癌組 織 で は症 例 ご とで各種 腫 瘍 マ ー カ ー

は染 色性 が異 な り一 定 のパ タ ー ンを示 さな か つ

た.組 織 染 色 性の相 関 をみ る とCEAとTPA

で正 の 相 関 を認 めた.

5)島 細 胞 腫 とApudomaに おける検 討 で は,

島細 胞 腫 でTPA,フ ェ リチ ン, Elastase 1が 陽

82 脇 谷 勇 夫

性 に染 色 され た が, Apudomaで は 全 て 陰 性 で

あ っ た。

6)膵 癌 組織 で染 色 陽性 率 を比較 す る と血 清 レ

ベ ル で最 も鋭敏 と考 えられ たCA19-9がCEA ,

TPAよ り低 率 で あ った.

7)膵 癌組 織 に おけ る各 種 腫瘍 マ ー カー の局 在

は, CEA, TPA, CA19-9で は癌細 胞のluminal

border,細 胞 辺 縁,細 胞 質内 に種 々の程 度 に染

色 され, POAは 癌 細 胞 の細 胞 質内 に染色 され

た.こ れ らの観 察 は 各腫 瘍 マ ー カ ーの 産 生様 式

の特 徴 と考 え られた.

8)膵 癌組 織 に おけ る組 織 分化 度 と染色 性 を比

較 すると, CEA, TPA, CA19-9で 高 分化 型 の

例 で染 色性 が 強 陽性 とな る傾 向 を認 め た.そ の

傾 向 はTPAで 最 も顕 著 でCA19-9で 弱 かった.

9)膵 腫瘍 で各 種腫 瘍 マ ー カー の組 織 染色 性 と

血 清 レベ ル を比 較検 討 するとCEA, CA19-9で

血 清 レベ ル が高 値 と なるの は染 色 が 強陽 性の例

で あっ た.

10)膵 腫 瘍 組 織 にお い て染 色 陰性 で血 清 レベ ル

が 高値 となる例 がTPA, CA19-9, POAで み ら

れた.こ れ らで は正 常 部 膵 管 上 皮 が 染 色 され,

同部 お よ び胆 管 上 皮 か らの血 中へ の逸 脱 が示 唆

され た.

11) Elastase 1が 腫 瘍 細 胞 内 に染 色 さ れ る

Elastase 1産 生 腫瘍 の存 在 が 示 唆 され た.

本論文の要 旨は第28回 日本消化 器病 学会総会 で発

表 した.

稿 を終 えるに臨 み,御 指導,御 校 閲 をいた だいた

長島秀夫教授 に深甚 なる謝 意 を表 す とともに,御 懇

篤 なる御指導 をいただいた遠藤浩博 士,切 片作製 に

あた り協 力 していただいた片 山博正 氏,服 部洋子氏

ほ か倉敷中央病院病理検査 技師の諸氏 に深謝 いた し

ます.

文 献

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84 脇 谷 勇 夫

Immunohistochemical study of tumor markers (CEA, TPA, CA19-9,

POA and Ferritin) and pancreatic exocrine enzymes

(Amylase and Elastase 1) in pancreatic tumors

Isao WAKIYA

First Department of Internal Medicine, Okayama University Medical School

The distribution of carcinoembryonic antigen (CEA), tissue polypeptide antigen (TPA),

carbohydrate antigen 19-9 (CA19-9), pancreatic oncofetal antigen (POA), Ferritin, Amylase and Elastase 1 was studied immunohistochemically using an immunoperoxidase method in 26 conven

tional histopathologic sections of pancreatic tumor. CEA and CA19-9 were regarded as markers secreted into the glandular lumina from cancer cells, but TPA and POA were not. The expression

of these markers was different from one case to another and had no fixed pattern in cases of

pancreatic cancer. The degree of CEA staining correlated positively with that of TPA. CEA, TPA and CA19-9 were demonstrated on the luminal border, cytoplasma and marginal region of cancer cells in various degrees, but POA was only found in the cytoplasma of cancer cells.

CEA, TPA and CA19-9 tended to be stained more strongly as the pancreatic cancer was more highly differentiated. The specimens were more frequently stained with CEA and TPA than

with CA19-9. In two cases, CA19-9 was not expressed in tumor specimens, although serum levels of this marker were abnormally elevated. In these cases CA19-9 in normal epithelium

of the pancreatic duct and choledochus may have leaked into the blood stream. The same process was considered in one case each of TPA and POA expression. TPA, Ferritin and Elastase 1

were expressed in two cases of islet cell tumor, while none of them was expressed in one case of apudoma. Elastase 1 was stained intensively on tumor cells in one case of pancreatic cancer and one case of islet cell tumor.