Efecto de la Coca-cola en Citosis Celular .

Integrantes :Cintya Leiva Camila zarate Mauricio MelinDaniza Paz Electivo 5.

Introducción:

La bebida mas consumida a nivel mundial es la Coca-Cola junto a sus derivados (Light, Zero).

Mediante nuestro trabajo hemos querido demostrarles los efectos de estas tres bebidas en la mitosis de las células de ápices de cebolla, Allium cepa, en donde también le daremos conocer los componentes dañinos y la diferencia entre estas tres bebidas.

Marco Teórico

Endulcorantes: Sustancias que endulzan los alimentos, sinteticos o naturales.

Citotoxicidad: Concepto que alude a la muerte celular o alteracion en su metabolismo.

Mitosis Celular: Proceso de división de células somaticas, en las que el material genetico se duplica. Consta de 4 fases: profase, metafase, anafase y telofase.

Indice Mitotico: Relación entre el número de células que se hallan en estado de mitosis y aquellas que no.

Coca-Cola: Refresco efervecente mas vendido en el mundo. En su composicion encontramos:

Agua Acido cítrico Jugo de lima Vainilla Dióxido de carbono Caramelo E-150 d Aceite de naranja, limón, nuez moscada.

Acido Fosfúrico: Le entrega el sabor acido a la bebida, contiene fosforo, 250 mL de contienen 43 mg.

Azúcar (Sacarosa): Compuesto por Fructosa y Glucosa a partes iguales, 250 mL contienen 27 g, aprox 4 o 5 cucharadas pequeñas.

Cafeína: Aporta un gusto amargo a la bebida, 235 mL contiene 23 mg de cafeina aprox.

Coca-Cola Zero: Es una versión de Coca-Cola sin azúcar, se caractriza por ocupar endulcorantes como:

Estevia rebiana - 200 veces más dulce que el azúcar. Sucralosa - Derivado del azúcar 600 veces más dulce

que esta. Sacarina - 300 veces más dulce que el azúcar. Acelsufamo posatico (ace-k o acesulfamo-k) 200

veces más dulce que el azúcar.

Aspartame o Aspartamo: Entre 180 y 200 veces más dulce que el azúcar se utiliza en más de 6000 productos en todo el mundo.

Ciclamato de Sodio: Edulcorante sin calorías 30 veces más dulce que el azúcar. Este componente hace diferenciar esta bebida con la Coca-Cola Light , que no lo contiene. Por cada 100 cc. hay 25-27 g de ciclamato de sodio.

Coca-Cola Light: Es la versión de Coca-Cola con pocas calorías y sin azúcar.

En la fórmula encontramos los mismos ingredientes de la bebida anterior con excepción del ciclamato de sodio. Contiene 24 g. de aspartamo por cada 100 cc. y 16 g de Ace-K en la misma ración.

Objetivos

Reconocer los efectos de las diferentes bebidas (Coca-cola coca cola zero y coca cola light) a nivel mitótico en ápices de cebolla Allium cepa mediante la técnica te tinción de células, observación microscópica y calculo de índices mitóticos e índices de fases.

Diferenciar las diferentes bebidas según los ingredientes contenidos en cada una de ellas y determinar el grado de daños que producen sus componentes.

Hipótesis

1. Disminución del índice mitótico en los 3 casos por efecto de la cafeína.

2. Aberraciones cromosómicas y disminución del índice mitótico por efecto del aspartamo

3. En el caso de la C-C Zero disminución mas elevada en el IM por el ciclamato de sodio.

4. Deterioro de la pared celular en los 3 casos por el acido fosfórico contenido en los líquidos.

Materiales :

Materiales del procedimiento en muestras: - 4 cebollas pequeñas - 4 envases de colados - 3 Bebidas (Coca-cola, Coca-cola Zero, Coca-Cola Light) 120 mL de

cada una. - 8 Capsulas petri - Goteros - Porta y cubre objetos - Microscopio - Acido Clorhidrico 1 M - Bisturi - Pinzas - Camara fotográfica - Agua destilada

Materiales Tincion:- Orceína en polvo- Acido Acético- Agua destilada- Acido clorhídrico 1 M

Procedimiento 4 cebollas pequeñas, 3 para cultivar con las bebidas y una

de control (agua) se dejaron en los frascos llenos con agua una semana partiendo el día 10 de septiembre hasta el día 17.

El día 17 cambiamos el agua de 3 de ellas por las bebidas, se dejaron una semana hasta el 24 del mismo mes. Llegamos ese día y comenzamos a hacer las primeras muestras, con azul de metileno de la siguiente manera:

Con pinzas se eligió una de las raíces i se corto el ápice, se llevo a una capsula petri y se le cubrió con 2 gotas de HCl 1M, unos 5-6 minutos. Luego se trasladó a otra cápsula que contenía agua destilada, el mismo tiempo.

Se llevo a un portaobjetos, donde con un bisturí se molió la raíz y se le añadió con una gota de azul de metileno; pasados 3 minutos se procedió a hacer el aplastado o squash. La tincion no era la correcta, debíamos ocupar Orceína acética clorhídrica, y como no contábamos con ella, procedimos a prepararla así:

Preparacion Orceina Acetica Clorhidrica

Dos soluciones: Sol A: - Orceína en polvo – 1.3 g. - Acido acético 45 cc. Se midieron los 1.3 g de orceína ,luego, en un vaso pp de 1000

cc. y con otro vaso pp. de 100 mL rodeado de hielo se vertió el acido. Se preparó en frio añadiendo lentamente la orceina al acido.

Sol B: - Acido acético 45 cc - Agua destilada 100 cc Se mezclaron ambos líquidos medidos en 2 probetas de 100 cc en

un vaso pp de 250 cc. Solucion definitiva: Se mezcló la solución A y solución B en partes

iguales y se añadió 1 parte de acido clorhídrico por lada 10 de la solución en una vaso pp de 250 cc. Esta se filtró y madurar durante la noche.

Al siguiente día procedimos a hacer las muestras con la nueva tinción.

Comenzamos a utilizar el microscopio empezando en objetivo 4x l10x y 40x, se observaron los núcleos de las células y algunas fases mitóticas que se describirán a continuación.

Resultados

Como nuestro objetivo es identificar efectos en mitosis debemos hacer un índice mitótico (IM) e índices de fases (IF) estos se llevaron a cabo usando las ecuaciones: IM = Nº de núcleos en mitosis/ Total de núcleos observados × 100 y el IF se obtuvo utilizando la ecuación: IF = Nº de célula en fase/ Total de células en mitosis × 100.

Control (agua) Indice Mitotico (IM) N° nucleos totales: 47 x 4 = 188 N° nucleos en división = 57 57/188 = 0.101063829.. x 100 = 10.10% (valor muy bajo en

comparación con el rango de IM normal de la allium cepa entre 50 y 60 %

Indice de Fases (IF) Profase: 56/57 = 0.982456.. x 100 = 98.24% Metafase: 0% Anafase: 0% Telofase: 1/56 = 0.0175 x 100 = 1.75%

Coca cola normal: Indice mitótico (IM) N° nucleos totales: 63 x 4 (contando solo un cuarto del

campo) = 252 nucleos N° nucleos en división: 97 nucleos 97/252 = 0.384920634.. x 100 = 38.49% IM = 38,49% Indice de Fases (IF) Profase: 94/97 = 0.969072.. x 100 = 96. 90 % Metafase: 0/97 = 0% Anafase: 2/97 = 0.02061855.. x 100 = 2.06 % Telofase: 1/97 = 0.0103092.. x 100 = 1.03%

Coca cola Zero: Indice Mitotico (IM) N° nucleos totales: 78 x 4 = 312 nucleos N° nucleos en división = 60 nucleos 60/312 = 0.19230769.. x 100 = 19.23 % Indice de fases (IF) Profase: 14/60 = 0.233333 x 100 = 23.33% Metafase: 0% Anafase: 1/60 = 0.016666.. x 100 = 1.66% Telofase: 0%

Coca-Cola Light : Indice Mitotico (IM) N° nucleos totales = 56 x 4 = 224 N° nucleos en división: 96 96/224 = 0.4285714.. x 100 = 42.85 % Indice de Fases (IF) Profase: 92/96 = 0.9583333.. x 100 = 95.83% Metafase: 0% Anafase: 3/96 = 0.03125 x 100 = 3.1 % Telofase: 1/96 = 0.0104166.. x 100 = 1.04 %

Vistas Microscópicas

C-C Normal

C-C Zero

C-C Light

Control

Discusion

Como dijimos en teoría, los índices mitóticos disminuyeron de manera significativa, encontramos diversas anormalidades tanto en estructura celular como en su metabolismo.

Sin embargo después de haber comprobado nuestras hipotesis nos dimos cuenta que en el control no encontramos muchos estados mitóticos, lo cual se debe a que la actividad mitótica varia durante el dia. En general la horas optimas de actividad mitóticas en allium cepa van desde el amanecer hasta las 10:30 a 11 am.

Conclusiones

Podemos decir que la bebida Coca-Cola y sus derivados afectan de manera muy significativa la mitosis celular y se debe a sus componentes, que son considerablemente perjudiciales para nuestra salud. Finalmente y con evidencias podemos decir que la bebida Coca-Cola y sus derivados afectan de manera muy significativa la mitosis celular y se debe a sus componentes, que son considerablemente perjudiciales para nuestra salud, cosa que pasa totalmente desapercibida gracias a las miles de publicidades que se muestran en los medios y debido a la censura de información.