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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS FACULDADE DE EDUCAÇÃO FÍSICA JOÃO FRANCISCO BARBIERI EFEITO DO USO DA MÁSCARA DE RESTRIÇÃO AO FLUXO DE AR (MRFar) SOBRE AS RESPOSTAS GASOMÉTRICAS, VENTILATÓRIAS E ELETROMIOGRÁFICAS EM EXERCÍCIO AERÓBIO CONTÍNUO E INTERVALADO Campinas 2017

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS

FACULDADE DE EDUCAÇÃO FÍSICA

JOÃO FRANCISCO BARBIERI

EFEITO DO USO DA MÁSCARA DE RESTRIÇÃO AO FLUXO DE AR

(MRFar) SOBRE AS RESPOSTAS GASOMÉTRICAS, VENTILATÓRIAS E

ELETROMIOGRÁFICAS EM EXERCÍCIO AERÓBIO CONTÍNUO E

INTERVALADO

Campinas

2017

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS

FACULDADE DE EDUCAÇÃO FÍSICA

JOÃO FRANCISCO BARBIERI

EFEITO DO USO DA MÁSCARA DE RESTRIÇÃO AO FLUXO DE AR (MRFar)

SOBRE AS RESPOSTAS GASOMÉTRICAS, VENTILATÓRIAS E

ELETROMIOGRÁFICAS EM EXERCÍCIO AERÓBIO CONTÍNUO E

INTERVALADO

Orientador: Prof. Dr. Antônio Carlos de Moraes

Dissertação apresentada à Faculdade de Educação

Física da Universidade Estadual de Campinas

como parte dos requisitos exigidos para a obtenção

do título de Mestre em Educação Física, na Área de

Biodinâmica do Movimento e Esporte

ESTE EXEMPLAR CORRESPONDE À VERSÃO

FINAL DA DISSERTAÇÃO DEFENDIDA PELO

ALUNO JOÃO FRANCISCO BARBIERI E

ORIENTADA PELO PROF. DR.

ANTONIO CARLOS DE MORAES

Campinas

2017

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Informações para Biblioteca Digital Título em outro idioma: Effect of the use of the air flux restriction mask (MRFar) on

gasometric, ventilatory and electromyographic responses in continuous and intervaled

aerobic exercise

Palavras-chave em inglês:

Hypoxia

Interval training

Endurance training

Technology-Equipment and acessories

Physical exercises

Área de concentração: Biodinâmica do Movimento e Esporte

Titulação: Mestre em Educação Física

Banca examinadora:

Antonio Carlos de Moraes [Orientador]

Celene Fernandes Bernades

Rômulo Cássio de Moraes Bertuzzi

Data de defesa: 05-07-2017

Programa de Pós-Graduação: Educação Física

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COMISSÃO EXAMINADORA

Prof. Dr. Antonio Carlos de Moraes

Orientador

Profa. Dra. Celene Fernandes Bernardes

Membro Titular

Prof. Dr. Rômulo Cássio de Moraes Bertuzzi

Membro Titular

Ata da defesa com as respectivas assinaturas dos membros encontra-se no processo de vida

acadêmica do aluno.

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AGRADECIMENTOS

Ciente de que toda jornada tem um fim e de que o logro só é possível quando

somos cercados de bons amigos. Venho apresentar meus humildes agradecimentos à aqueles

que tornaram uma ideia, um projeto possível.

Gostaria de agradecer primeiramente o professor Antonio Carlos de Moraes, que

se dispôs a me aceitar prontamente como aluno e orientando, sem sua benevolência, nada

disto seria possível.

Gostaria de agradecer também a figura incógnita de Arthur Fernandes Gáspari

(vulgo Tuí) fonte quase que inesgotável de conhecimento e energia, cuja a mera presença é

capaz de trazer a tranquilidade e a certeza de que tudo vai dar certo. Deixo aqui à você Arthur,

meus sinceros agradecimento, sem sua paciência e dedicação, nada disto seria possível.

Estendo o agradecimento para a senhora Celene Fernandes, que dentre toda a ajuda que

prestou a este projeto, sem nunca pedir algo em contrapartida, me acolheu em seu lar em

momentos de infortúnios. Encerrando os agradecimentos à família Fernandes, agradeço à

Nina pelo carinho e afeto irrestrito.

Agradeço aos colegas de laboratório Leonardo, Manuel, Gabriel, Cássia e Patrícia,

que prontamente me ajudaram nas coletas, saibam que vocês foram os pilares deste projeto.

Vale a menção aqui, para que meu amigo Leonardo Motta não se esqueça, de que “Quem

acorda cedo sempre escolhe as melhores vagas, mas se você for estacionar seu carro em Barão

Geraldo, nenhuma vaga é boa”.

Ao meu amigo Renan, gostaria de agradecer pelas diversas consultorias, pela

insistência e discussões profícuas, graças a você este mestrado foi possível.

Gostaria de agradecer também meu querido amigo Guilherme Telles, por todo a

discussão sem conclusão e todo problema sem solução, nossas discussões são sim sempre

inúteis, mas sempre muito agradáveis.

Não poderia deixar de agradecer aqui ao meu irmão Jack, a única pessoa que

conheço que desgraduou. Sem sua ajuda Jack, nada disso seria possível.

Gostaria de agradecer também a todos os integrantes do laboratório FISEX, foi

um grande privilégio ser parceiro de vocês. Em especial, agradeço à professora Mara Patrícia,

sem sua ajuda, nada disso seria possível.

Estendo especial agradecimento a minha namorada Luz. Sua presença alegra e

ilumina minha vida. Te Amo.

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Gostaria de agradecer também ao Conselho Nacional de Desenvolvimento

Científico e Tecnológico (CNPq) por todo suporte financeiro prestado ao longo deste

mestrado. Assim como devo agradecimentos aos funcionários da FEF, em especial a

secretária da pós-graduação Simone, por toda a ajuda oferecida.

E por fim gostaria de agradecer à minha família, meu pai João Antônio, minha

mãe Marissol Fornazari e meu irmão João Pedro, saibam que a distância só aumenta meu

amor por vocês.

“Aos átomos”

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RESUMO

Introdução: É crescente no mercado o número de produtos alegando acelerar/aumentar os

ganhos e adaptações provenientes do treinamento físico. Dentre esses produtos destacam-se as

máscaras de restrição ao fluxo de ar (MRFar), que alegam simular ambientes de hipóxia e

propiciar treinamento para a musculatura respiratória. São poucos os estudos sobre o uso

destas máscaras e os resultados são controversos. Há trabalhos mostrando aumento do

consumo de oxigênio e da potência no ponto de compensação respiratória, enquanto outros

indicam nenhum efeito. Trabalhos que se propuseram a investigar os efeitos agudos do uso da

máscara durante o exercício demostraram haver maior queda na saturação, sendo esta queda

dependente do grau de restrição do fluxo de ar. No entanto, os níveis de hipóxia alcançados

são modestos e não se tem informação sobre os demais parâmetros metabólicos e

neuromusculares que podem ser afetados por este implemento. Desta forma, este trabalho

pretende analisar os ajustes fisiológicos causados pelo uso da MRFar em diferentes protocolos

de exercício aeróbio. Métodos: O estudo foi aleatorizado e cruzado, com a MRFar

configurada a 15000 pés (4572m) em 4 distintos protocolos, sendo eles, exercício contínuo

sem máscara (EC), exercício contínuo com máscara (EC-MRFar), exercício intervalado sem

máscara (EI) e exercício intervalado com máscara (EI-MRFar). Foram avaliadas variáveis

metabólicas sanguíneas (gasometria de sangue arterializado) e respiratórias (analise contínua

de gases expirados), foi analisado ainda a ativação muscular dos músculos do quadríceps

(Soma do sinal normalizado dos músculos reto femoral, vasto lateral e vasto medial).

Resultados: O EC-MRFar foi capaz de causar mudanças significativas quando comparado ao

EC, sendo as seguintes variáveis maiores para EC-MRFar: pressão sanguínea de CO2,

consumo de O2 e pressão expirada de CO2 (todos p<0,05). As seguintes variáveis foram

menores para EC-MRFar: pH, ventilação, pressão expirada de O2 (todos p<0,05). Já para a

condição EI-MRFar, em comparação com EI, temos as seguintes variáveis que se

apresentaram elevadas em EI-MRFar: pressão sanguínea de CO2, próton de H+ ligado à

hemoglobina, pressão expirada de CO2 (todos p<0,05). As seguintes variáveis foram menores

para EI-MRFar: saturação de oxigênio, ventilação, frequência respiratória, pressão expirada

de O2 e atividade eletromiográfica apenas no último minuto de teste. Conclusão: Foi

demonstrado a intrínseca relação entre o uso da MRFar e mudanças no padrão ventilatório,

sendo que a magnitude dessas mudanças influenciaram nas respostas metabólicas como

pressão sanguínea de CO2. Concluímos que o uso da máscara propicia um desequilíbrio no

sistema ácido/base do organismo e sugerimos que este esteja relacionado a adaptações

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benéficas ao desempenho observadas em estudo crônico. Adicionalmente, os resultados deste

trabalho aponta o uso da MRFar como provável ferramenta para o treinamento da musculatura

respiratória.

Palavras-chave: Treinamento Intervalado, Treinamento Contínuo, Gasometria, Recurso

Ergogênico, Hipóxia.

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ABSTRACT

Introduction: The number of products claiming to accelerate / increase gains and adaptations

from physical training are increasing in the market. Among these products we highlight the

airflow restriction masks (MRFar), which claims to simulate hypoxia environments and

provide training for the respiratory musculature. There are few studies on the use of these

masks and the results are controversial. There are studies showing increased oxygen

consumption and power at the compensatory respiratory point, while others indicate no effect.

Studies that aimed to investigate the acute effects of mask use during exercise demonstrated a

greater fall in saturation, being this fall dependent on the airflow restriction degree. However,

the levels of hypoxia achieved are modest and there is no information about the other

metabolic and neuromuscular parameters that can be affected by this implement. In this way,

this work intends to analyze the physiological adjustments caused by the use of MRFar in

different aerobic exercise protocols. Methods: The study was randomized and had across-

over design, with the MRFar configured at 15000 feet (4572m) in 4 different protocols, being

continuous exercise without mask (EC), continuous exercise with mask (EC-MRFar), interval

exercise without mask (EI) and interval exercise with mask (EI-MRFar). Metabolic variables

(arterialized blood gasometry) and respiratory variables (continuous expired gases analysis)

were evaluated. Muscle activation of the quadriceps muscle was also evaluated (sum of the

normalized signal from the rectus femoris, vastus lateralis and vastus medialis muscles).

Results: EC-MRFar was able to cause significant changes when compared to EC, with the

following variables being greater in EC-MRFar: CO2 blood pressure, O2 consumption and

CO2 expired pressure (all p <0.05). The following variables were lower for EC-MRFar: pH,

ventilation, expired O2 pressure (all p <0.05). For the EI-MRFar condition, in comparison to

EI, we have the following variables that were elevated in EI-MRF: CO2 blood pressure,

hemoglobin-bound H + proton, CO2 expired pressure (all p <0.05). The following variables

were lower for EI-MRFar: Oxygen saturation, ventilation, respiratory rate, expired O2

pressure and electromyographic activity only at the last minute of the test. Conclusion: The

intrinsic relationship between the use of MRFar and changes in the ventilatory pattern was

demonstrated, the magnitude of these changes influenced the metabolic responses as CO2

blood pressure. We conclude that the use of the mask leads to an imbalance in the acid / base

system of the organism and we suggest that it is related to the beneficial adaptations observed

in a chronic study. In addition, the results of this work point out the use of MRFar as a

probable tool for respiratory muscle training.

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Key words: Interval Training, Continuous Training, Gasometry, Ergogenic Resource,

Hypoxia.

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LISTA DE FIGURAS

FIGURA 1. Elevation Training Mask 2.0.................................................................................17

FIGURA 2 – Desenho experimental da intervenção e da sessão de treinamento.....................28

FIGURA 3. Colocação dos eletrodos de acordo com a literatura.............................................31

FIGURA 4. Peça confeccionada em impressora 3D para adaptação com a MRFar.................33

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LISTA DE TABELAS

TABELA 1. Características dos voluntários.............................................................................34

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LISTA DE SIGLAS E ABREVIATURAS

O2 Oxigênio

MRFar Máscara de Restrição ao fluxo de ar

SpO2 Saturação venosa de Oxigênio

TMR Treinamento da musculatura respiratória

SaO2 Saturação arterial de Oxigênio

VA-TA Viver Alto – Treinar Alto

VA-TB Viver Alto – Treinar Baixo

VB-TA Viver Baixo – Treinar Alto

THI Treinamento de Hipóxia Intermitente

TMV Treinamento da musculatura ventilatória

TCLE Termo de consentimento livre e esclarecido

EC-MRFar Exercício contínuo com MRFar

EC Exercício contínuo sem as válvulas da MRFar

EI-MRFar Exercício Intervalado com MRFar

EI Exercício Intervalado sem as válvulas MRFar

VO2máx Capacidade aeróbia máxima

Pmáx Potência máxima

rpm Rotações por minuto

VO2 Volume de oxigênio

VCO2 Volume de dióxido de carbono

VE Volume ventilatório

RR Frequência respiratória

PETO2 Pressão expirada de O2

PETCO2 Pressão expirada de CO2

FC Frequência cardíaca

FCmáx Frequência cardíaca Máxima

EMG Eletromiografia

RF Reto Femoral

VL Vasto Lateral

VM Vasto Medial

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RMS Root Mean Square

SOMA QF Soma dos RMSs do Quadríceps

PO2 Pressão Parcial de Oxigênio

PCO2 Pessão Parcial de Gás Carbônico

pH pH

HHb Desoxihemoglobina

BE Excesso de base

Hct Hematócrito

HCO3 Bicarbonato

[Lac] Concentração de Lactato

VO2abs Consumo de Oxigênio Absoluto

TFMR Treinamento de Força da Musculatura Respiratória

HIT Treinamento Intervalado de Alta Intensidade

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SUMÁRIO 1. INTRODUÇÃO ................................................................................................................ 16

Uso da Elevation Training Mask no exercício e treinamento aeróbio ..................................... 17

Treinamento em hipóxia ........................................................................................................... 20

Treinamento da musculatura respiratória ................................................................................. 22

2. MÉTODOS ....................................................................................................................... 25

Sujeitos ..................................................................................................................................... 25

Desenho Experimental .............................................................................................................. 26

Protocolo experimental ............................................................................................................. 27

3. TESTES E AVALIAÇÕES .............................................................................................. 29

Teste Incremental Máximo ....................................................................................................... 29

Coleta e Processamento dos Sinais Eletromiográficos (EMG) ................................................ 30

Coleta e análise de sangue periférico ....................................................................................... 32

Peça de adaptação da MRFar ao analisador automático de gases ............................................ 32

4. RESULTADOS ................................................................................................................ 34

5. ARTIGO 1 – EFEITO DO USO DE MÁSCARA DE RESTRIÇÃO AO FLUXO DE AR

(MRFar) EM EXERCÍCIO CONTÍNUO SOBRE AS RESPOSTAS METABÓLICAS,

VENTILATÓRIAS E ELETROMIOGRÁFICAS. .................................................................. 34

6. ARTIGO 2 – EFEITO DO USO DE UMA MÁSCARA DE RESTRIÇÃO AO FLUXO

DE AR (MRFar) EM EXERCÍCIO INTERVALADO DE ALTA INTENSIDADE SOBRE

AS RESPOSTAS METABÓLICAS, VENTILATÓRIAS E ELETROMIOGRÁFICAS. ...... 53

7. CONCLUSÃO GERAL ................................................................................................... 74

8. REFERÊNCIAS ............................................................................................................... 74

9. ANEXOS .......................................................................................................................... 78

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1. INTRODUÇÃO

Encontramos relatos históricos do consumo e uso de produtos com fins de

aumentar a competitividade de atletas que remontam a 776 anos antes de cristo, data das

primeiras competições da antiguidade, na Grécia antiga. Destacam-se atletas olímpicos como

Pausanias e Milo de Crotona, que possuem seus feitos históricos atribuídos, entre outros, a

elevada quantidade de carne consumida, sendo este um dos relatos do primeiro uso de

recursos ergogênicos descritos (Grandjean, 1997).

Observamos hoje no mercado esportivo o lançamento de diversos produtos

tecnológicos relacionados à saúde, estética e bem estar, muitos se propõem, por exemplo,

acelerar a perda de peso ou aumentar o ganho de massa muscular (Blendon et al., 2001;

Hirschbruch et al., 2008). Dentre estes produtos as tecnologias “vestíveis” tem ganhado

destaque por sua praticidade. Existem tecnologias “vestíveis” nos mais diversos formatos

como calças (Loturco et al., 2016), calçados (Rixe et al., 2012), meias (Ali et al., 2007) e

bandagens (Thelen et al., 2008). Tem sido proposto que o uso de tais tecnologias acelere ou

potencialize os efeitos adaptativos esperados do treinamento, assim como melhorar o

desempenho em tarefas específicas. O uso destes produtos abrange um grande público, indo

desde entusiastas da atividade física até atletas profissionais (Ali et al., 2007; Thelen et al.,

2008; Loturco et al., 2016).

Algumas tecnologias visam agregar às sessões de treinos normais estímulos

adicionais, como o treinamento com oclusão vascular periférica (Takarada, 2016) e o

treinamento em hipóxia simulada (Faiss et al., 2013), ambos apresentam vantagens

adaptativas quando comparados com o treinamento convencional. O treinamento em hipóxia

simulada é realizado através de equipamentos específicos que são capazes de gerar ambientes

com baixa disponibilidade de oxigênio (O2) (Lopata e Serebrovskaya, 2012). Diversos

regimes de treinamento tem sido propostos para intervenções hipóxicas, sendo que o resultado

de sua aplicação de maneira aguda tem demonstrado aumento na potência muscular (Alvarez-

Herms, J et al., 2015). Já de maneira crônica o treinamento em hipóxia tem demonstrado

maximizar o desempenho em provas de endurance, aumentar a potência e hipertrofia

muscular, dentre outras adaptações, quando comparado com o treinamento convencional

(Levine e Stray-Gundersen, 2006; Manimmanakorn et al., 2013).

O treinamento em hipóxia simulada possui um grande respaldo científico sobre

sua aplicação e resultados no treinamento de endurance (Rusko et al., 2004; Gore et al.,

2007), contudo, a aplicação de tal metodologia se mostra muito custosa e de difícil logística.

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Neste sentido, novas tecnologias têm sido lançadas no mercado com a proposta de simularem

ambientes de hipóxia de maneira prática e portátil, mas ainda não foram submetidas a

protocolos rigorosos afim de terem seus efeitos atestado.

Dentre as novas tecnologias que alegam induzir hipóxia, destacamos as máscaras

de restrição ao fluxo de ar (MRFar). As MRFar são implementos vendidos com o pretexto de

dificultar a troca de ar durante a respiração (ciclo inspiração e expiração), aumentando a

resistência oferecida aos músculos inspiratórios/expiratórios. Um exemplo dessa tecnologia é

a Elevation Training Mask 2.0 (Training Mask LLC; Cadillac, MI, USA) (FIGURA 1), seus

efeitos ergogênicos (relacionados à melhora no desempenho) estariam atrelados à dois

principais mecanismos: 1º Treinamento em Hipóxia e 2º Treinamento da Musculatura

Respiratória. Neste presente trabalho a Elevation Training Mask será tratada como MRFar.

Pouco se sabe sobre a eficácia do uso dessa MRFar devido ao baixo número de publicações

científicas disponíveis. Os artigos de maior relevância científica abordando o tema serão

discutidos à seguir.

FIGURA 1. Elevation Training Mask 2.0

Modelo esquemático da Máscara de Restrição ao Fluxo de ar (MRFar), destaca-se a proposta dos fabricantes de

que cada configuração das válvulas poderia simular uma altitude diferente. www.trainingmask.com

Uso da Elevation Training Mask no exercício e treinamento aeróbio

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Em estudo agudo, Granados et al. (2016) utilizaram um protocolo single-blinde

em 10 homens recreacionalmente ativos. Foram realizadas 3 sessões de maneira aleatorizada,

cada sessão foi executada em ciclo ergômetro com carga constante correspondente a 60% do

VO2 pico de cada indivíduo e teve duração de 20 minutos. As configurações da MRFar

utilizadas foram 2743m, 4572m e a condição SHAM, que utilizou o aparato sem as válvulas

de restrição. Granados et al. (2016) utilizaram uma adaptação na MRFar para que fosse

possível coletar os gases expirados, tal adaptação consistia na retirada das válvulas da MRFar

e inseri-las em um tubo adaptado, o que possibilitou a investigação sobre os efeitos do uso das

válvulas durante o exercício, porém, descaracterizou o uso da MRFar como tal.

De toda forma, como resultado foi encontrada queda de aproximadamente 20

litros na ventilação por minuto, para ambos os protocolos que usaram a máscara (2743m e

4572m), quando comparado com SHAM. Para os dados da fração expirada de O2 encontrou-

se que os valores foram significantemente menores para as condições que utilizaram a

MRFar, enquanto que a fração expirada de CO2 foi significantemente maior para as condições

com MRFar em comparação ao SHAM, fato atribuído a menor frequência respiratória

observada e ao espaço morto de 240ml do complexo peça mais válvulas. Não foram

encontradas diferenças no consumo de O2 entre as condições avaliadas e somente a condição

4572m apresentou queda na quantidade de CO2 exalado com relação ao SHAM. O trabalho

também avaliou respostas da frequência cardíaca, Saturação Sanguínea de Oxigênio (SpO2)

de maneira indireta (oximetria de pulso) e percepção subjetiva de esforço. Foi encontrado que

o uso da MRFar causou queda na saturação de até 89,3%, este dado foi significantemente

diferente entre as condições MRFar e SHAM, porém, sem diferença estatística entre as

condições 4572m e 2743m. Os participantes também identificaram as sessões com máscara

como sendo mais exaustivas que a condição SHAM, porém, sem diferenças estatísticas entre

os grupos 4572m e 2743m. Os autores concluem que a máscara utilizada assemelhou-se a um

implemento de treinamento da musculatura respiratória (TMR) e realmente causou hipóxia,

embora a magnitude de hipóxia encontrada foi menor do que a magnitude esperada pela

altitude simulada (4572m de altitude deveria proporcionar uma queda da SpO2 de

aproximadamente 85%).

Granados et al. (2016) nós traz importantes informações acerca da utilização das

válvulas da MRFar em um implemento adaptado. Os autores relatam importantes variações na

SpO2, um indicativo de que a MRFar, de fato, pode causar hipóxia, mas métodos diretos de

avaliação da SaO2 (gasometria arterial) e a análise dos demais parâmetros metabólicos ainda

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se fazem necessários pra comprovar este efeito e entender os ajustes fisiológico causadores

desta hipóxia.

Em estudo investigando os efeitos crônicos do uso da MRFar, Porcari et al.

(2016) investigaram 24 voluntários de ambos os sexos, em dois grupos distintos, MRFar e

grupo controle, os mesmos foram submetidos a 6 semanas de treinamento intervalado em

ciclo-ergômetro, os treinos foram realizados duas vezes na semana e tinham a duração de 30

minutos, sendo 20 minutos correspondentes a 10 tiros de 30 segundos na potência máxima,

intercalado por 90 segundos de recuperação.

Porcari et al. (2016) usaram ao longo das semanas de treino um sistema de

incremento de “carga” respiratória, sendo que, na primeira semana, a MRFar foi ajustada a

914m, na segunda a 1829m, na terceira e quarta a 2743m e finalmente na quinta e sexta

semana a máscara foi ajustada a 3658m. Ao longo das semanas algumas variáveis foram

coletadas, como lactato sanguíneo e oximetria de pulso. Como não foram apresentadas

diferenças entre homens e mulheres, o pacote de dados foi analisado como um só. O protocolo

empregado por Porcari et al. (2016) foi eficaz em aumentar o VO2máx para ambos os grupos,

porém, sem diferença significativa entre eles. Não foram observadas mudanças entre os

grupos para a potência máxima alcançada no teste incremental. Somente o grupo que utilizou

a MRFar obteve incrementos significativos no consumo de O2 no limiar ventilatório, na

potência alcançada no limiar ventilatório, no consumo de O2 no ponto de compensação

respiratório e na potência alcançada no ponto de compensação respiratório. Somente os

valores para o consumo de O2 no ponto de compensação respiratória e na potência alcançada

no mesmo, foram significantemente diferentes entre os grupos. Não foram observadas

mudanças significativas na frequência cardíaca. A percepção subjetiva de esforço foi maior

para o grupo que utilizou a MRFar durante toda a intervenção. Não houveram diferenças nas

variáveis hematológicas e de função pulmonar após a intervenção. Foram encontradas

diferenças significativas com relação à potência empregada pelos dois grupos nas duas

últimas semanas, tendo o grupo com MRFar se exercitado em maior carga. A análise de

lactato nas semanas 2, 4 e 6 não apresentaram diferenças entre os grupos. Já a SpO2

mensurada nas semanas 4 e 6 apresentaram menores valores para o grupo com MRFar,

alcançando níveis médios de 93,2% na última semana. Os autores concluem que as

adaptações adicionais causadas pelo uso da máscara tem efeitos significantes na performance,

porém, frente a pequena queda na SpO2, os autores sugerem que a máscara funcione mais

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como um implemento de TMR do que um hipoxicator (instrumento capaz de gerar hipóxia),

embora não tenha sido observado mudanças nos testes de função pulmonar.

Investigações que utilizam a MRFar em intervenções crônicas (6 ou mais semanas

de treino) (Granados et al., 2016; Sellers et al., 2016; Warren et al., 2017) não têm encontrado

mudanças no VO2máx. Esses estudos nos trazem a informação de que, embora haja queda da

SpO2 com o uso da MRFar, esta queda não se estende a magnitudes similares às do

treinamento em situação de hipóxia tradicional. Somente Porcari et al. (2016) encontrou

melhoras no desempenho, utilizando um modelo de treinamento intervalado, sendo essas

melhoras atribuídas a uma possível ação da MRFar sobre a musculatura respiratória, embora

não tenha encontrado diferença para as variáveis pulmonares analisadas.

Coletivamente, os achados descritos acima apontam dois possíveis mecanismos

responsáveis pelos efeitos benéficos do MRFar no treinamento aeróbio, a queda da SpO2 e o

treinamento da musculatura respiratória. O próximo tópico se destina a revisar as principais

adaptações do treinamento em hipóxia, assim como as recomendações de intensidade e

exposição para que essas adaptações sejam observadas. Já o tópico seguinte revisa os

principais achados a respeito da aplicação do treinamento da musculatura respiratório para

melhora do desempenho aeróbio.

Treinamento em hipóxia

O treinamento em hipóxia é caracterizado pela prática de exercício físico em

ambiente com quantidade reduzida de oxigênio, o que faz com que os tecidos orgânicos

desempenhem suas funções em condição de baixa disponibilidade de O2 (Levine e Stray-

Gundersen, 2006; Chapman et al., 2014). Este método de treino tem sido utilizado tanto por

atletas de modalidades individuais como coletivas, visando o aumento do desempenho em

elevadas altitudes ou ao nível do mar (Brocherie et al., 2015).

Nos últimos 40 anos de experimentação, diversas estratégias de treinamento

envolvendo hipóxia foram propostas:

Viver Alto – Treinar Alto (VA-TA): Modelo de treino onde se vive em ambiente

hipóxico e treina em ambiente hipóxico, como é o caso de residências em elevadas altitudes;

Viver Alto – Treinar Baixo (VA-TB): Protocolos que, em geral, se utilizam de

câmaras de hipóxia para o pernoite, permitindo o treinamento em ambiente normóxico;

Viver Baixo – Treinar Alto (VB-TA): Protocolos que se utilizam de equipamentos

específicos para a indução de hipóxia, estes são usados, em geral, durante o treinamento.

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Diversos estudos se dedicaram a avaliar o efeito da frequência e duração da

exposição a ambientes com baixa saturação de oxigênio (SaO2) tanto em condições de pressão

normal, nominalmente ambientes normobáricos, quanto ambientes de baixa pressão,

nominalmente ambientes hipobáricos, como é o caso de elevadas altitudes (Hoppeler e Vogt,

2001; Saugy et al., 2014)

As estratégias VA-TA e VA-TB visam os benefícios adaptativos decorrentes da

hipóxia, basicamente as respostas desejadas são adaptações hematopoiéticas, ou seja,

relacionadas ao volume e produção de hemácias (Hoppeler e Vogt, 2001). Embora essas

sejam as adaptações mais consistentes provenientes do treinamento em hipóxia, não são as

únicas; podemos destacar outras como a melhora na capacidade de tamponamento dos

músculos, melhora na atividade das enzimas oxidativas, aumento do teor mitocondrial e

melhora na razão fibra-capilar. Para se aprofundar no tema recomendamos as revisões de

Hoppeler e Vogt (2001), Millet et al. (2012) e Navarrete-Opazo e Mitchell (2014). Estas

adaptações podem resultar em melhora no desempenho em atividades executadas em

ambientes normóxicos, efeito este que pode se prolongar por algumas semanas após a

intervenção hipóxica, fato que torna essa metodologia de treino visada por atletas e

treinadores de diversas modalidades (Saugy et al., 2014).

Levine e Stray-Gundersen (2006) postulam alguns parâmetros mínimos de

exposição a ambientes hipóxicos para que esses promovam adaptações fisiológicas

relacionadas a hematopoese (criação de células vermelhas), recomendando a exposição diária

de pelo menos 20 horas à altitudes de 2000-2500m, sendo que os estudos têm demonstrado

efeitos significativos na hematopoese entre 3-4 semanas de exposição. Vale ressaltar que

estudos recentes têm demonstrado diferenças entre a exposição a ambientes normobáricos e

hipobáricos. Saugy et al. (2014) encontraram em seu estudo diferenças significativas entre a

SaO2 e frequência respiratória entre as condições de exposição normobárica e hipobárica,

mesmo a altitude real e simulada sendo relativas, o que nos leva a pensar que os parâmetros

mínimos de exposição são relativos aos métodos de indução à hipóxia empregados.

Com relação à efetividade dos protocolos empregados, alguns estudos se

dedicaram a realizar comparações entre os métodos, como é o caso da meta-análise realizada

por Bonetti e Hopkins (2009) que, em síntese, destaca os benefícios do método VA-TB sobre

VA-TA, pois o primeiro pode atrelar além das adaptações provenientes da exposição a

hipóxia, as adaptações provenientes de treinos de alta qualidade e intensidade ao nível do mar,

tendo em vista que o exercício sob hipóxia é executado em menor intensidade (Bonetti e

Hopkins, 2009).

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Recentemente estudos têm investigado uma nova modalidade de treinamento em

hipóxia chamado “treinamento de hipóxia intermitente” (THI) ou Viver Baixo-Treinar Alto

(VB-TA), onde os sujeitos vivem sob condições de normóxia e treinam em ambientes

normobáricos de hipóxia simulada. Tal metodologia permite aos participantes que insiram, em

suas rotinas, treinos de hipóxia simulada, sem que seja necessário grandes alterações

logísticas, afetando menos a vida diária, o orçamento e a rotina de treinamento (Hamlin et al.,

2010).

Devido a dinâmica da MRFar empregada neste projeto, uma vez que sua

constituição permite seu uso durante o exercício, aprofundaremos mais nossos conhecimentos

à cerca THI.

Devido à natureza do THI, as adaptações hematológicas nem sempre são

observadas, portanto, os benefícios desta metodologia não podem ser atribuídos às adaptações

hematológicas por si só, mas sim a combinação de mecanismos que podem ou não serem

observados em hipóxia crônica, como o aumento da densidade mitocondrial, melhora na

capacidade de tamponamento dos músculos, melhora na atividade das enzimas oxidativas e

razão de capilares por fibra muscular (Desplanches et al., 1993).

Encontramos na literatura estudos que avaliam o potencial do THI em melhorar o

desempenho em atividades intermitentes, conhecidas por serem mais dependentes do

metabolismo anaeróbio, esses estudos são mais contundentes em demonstrar melhoras em

variáveis como velocidade de sprints repetidos (Brocherie, Millet et al., 2015) melhora no

desempenho de yo-yo intermitent test (Galvin et al., 2013) e melhora na potência de saltos

(Alvarez-Herms et al., 2015). Aparentemente o THI apresenta-se como um protocolo mais

eficiente em promover adaptações relacionadas às atividades intermitentes do que contínuas,

porém, diversos fatores podem influenciar essas adaptações, como a característica do

protocolo de treino empregado, tempo de exposição ao ar hipóxico, severidade do grau da

hipóxia, tipo e duração do exercício (Levine et al., 2006).

Tendo em vista o exposto acima, hipostenizamos que a MRFar, caso simule

condições de hipóxia (quedas inferiores ou iguais a SaO2 90%), promova alterações

semelhantes às observadas durante o treinamento de IHT.

Treinamento da musculatura respiratória

A fadiga muscular respiratória é conhecida por comprometer o desempenho físico

de sujeitos saudáveis (Illi et al., 2012). Evidências sugerem que a fadiga dos músculos

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inspiratórios está relacionada com o acúmulo de metabólitos durante o exercício, assim como

uma maior ativação simpática, proveniente da estimulação metaboreflexa aferente, o que

prejudicaria a vasodilatação arterial, dificultando o fornecimento de sangue para os músculos

em exercício (Derchak et al., 2002; Dempsey et al., 2006), fato que estaria diretamente

associado a queda de desempenho precoce (Babcock et al., 2002). Em contrapartida o

treinamento da musculatura respiratória tem demonstrado diminuir a fadiga dos músculos

respiratórios e consequentemente, melhorar o desempenho em testes curtos como wingate e

até testes time-trials (Chiappa et al., 2009; Illi et al., 2012).

São reconhecidos dois tipos de treinamento da musculatura respiratória: (1)

Treinamento da musculatura respiratória (TMR), que inclui o treinamento da musculatura

inspiratória e expiratória, através de cargas impostas por implementos, sendo executado com

baixa velocidade e com alta força; (2) Treinamento da musculatura ventilatória (TMV), este

método consiste no treinamento de baixa força e alta velocidade, tanto da inspiração quanto

expiração, também é conhecido como treinamento de endurance da musculatura respiratória

(Illi et al., 2012). Devido à natureza da MRFar, trataremos de TMR neste trabalho, o

treinamento realizado contra uma carga imposta, com respiração mais lenta, sendo necessário

o emprego de força.

Kido et al. (2013) utilizaram uma MRFar diferenciada, esta possuía 4 válvulas de

restrição de fluxo de ar e uma membrana que separava o ar expirado do nariz e da boca. Como

resultado de uma intervenção de 6 semanas, foi demonstrado que o grupo que treinou com a

máscara apresentou melhoras para as variáveis de potência máxima, maior consumo de O2 no

limiar ventilatório e melhora no desempenho em teste específico para a musculatura

ventilatória.

Chiapa et al. (2009) demonstram que o uso de um implemento de TMR que se

assemelha a MRFar (Threshold Inspiratory Muscle Trainer) após a execução de um estímulo

máximo de 30s em ciclo ergômetro (wingate) é capaz de reduzir os níveis circulantes de

lactato, assim como manter alta a frequência cardíaca e pressão sistólica. Foi demonstrado

também que um segundo teste de wingate, executado após 15 minutos de recuperação com o

uso do implemento de TMR, é capaz de aumentar a potência empregada no teste em até 25%,

embora também tenha aumentado a percepção de cansaço, quando comparada com a seção

que não utilizou o implemento na recuperação. Os autores atribuem a este achado a maior

recuperação causada pelo uso do implemento, demonstrada pela maior remoção de lactato. Os

autores também encontraram menor fluxo sanguíneo para o membro inferior durante a seção

que utilizou o implemento de TMR, este achado foi atribuído a maior ativação simpática,

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demonstrada pela manutenção elevada da frequência cardíaca e pressão arterial e maior

direcionamento da fluxo sanguíneo para a musculatura respiratória.

Revisada a literatura acerca do tema, é possível delinearmos hipóteses sobre o

efeito do uso da MRFar. Espera-se que seu uso acentue as respostas metabólicas decorrentes

do exercício), sendo estas relacionadas com o grau de hipóxia apresentado pelo uso da

MRFar. Espera-se que o uso da máscara influencie a mecânica ventilatória (Granados et al.,

2016), fato que se refletirá no aumento do estresse metabólico, que por sua vez, exercerá

influência na ativação simpática (Dempsey et al., 2006), refletindo em mudanças no padrão

do recrutamento muscular. Para confirmarmos estas hipóteses o presente trabalho investigou

os efeitos do uso da MRFar em dois diferentes protocolos de exercício em ciclo ergômetro,

um contínuo e outro intervalado.

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2. MÉTODOS

Abaixo descreveremos detalhadamente os procedimentos que foram utilizados para as

avaliações e testes experimentais. Como os métodos descritos abaixo são comuns a ambos os

artigos que compõem a sessão resultados desta dissertação, eles serão repetidos em cada

artigo de acordo com as especificações dos mesmos, sendo no artigo um, abordado o

exercício continuo e no artigo dois o exercício intervalado.

Sujeitos

A chamada por voluntários do presente estudo foi feita por meio de divulgação

na forma de cartazes (Anexo 1) e mídia sociais via internet. Como critérios de inclusão, os

voluntários deveriam ter idade entre 18-30 anos, fisicamente ativos e possuir disponibilidade

de horário para a participação das coletas. Os critérios de exclusão consistiram em tabagismo,

obesidade (IMC > 30 kg/m2) e quaisquer patologias ou problemas osteo-articulares que

representassem risco ou limitação para prática de exercícios físicos, tais como: hipertensão

arterial, doença arterial coronariana, arritmias, pós-infarto, diabetes mellitus, doença

pulmonar obstrutiva crônica, doenças osteo-articulares limitantes. Além destes limitantes,

potenciais voluntários que utilizavam qualquer medicação ou suplementação que interferisse

nas respostas fisiológicas das avaliações também foram excluídos, como: anti-hipertensivos

de qualquer tipo, anti-inflamatórios, antidepressivos, drogas utilizadas para controle de

dislipidemia e anabolizantes de qualquer tipo.

Foram pré-selecionados 26 voluntários que preencheram a ficha inicial de

cadastro, realizaram a anamnese e participaram da reunião explicativa, onde foram

apresentados os protocolos de exercício, calendário de atividades, possíveis riscos e

benefícios que poderiam ocorrer ao longo da intervenção. Os voluntários que concordaram

com os procedimentos e calendários de avaliação assinaram o termo de consentimento livre e

esclarecido (TCLE). O projeto, assim como o TCLE, foram aprovados pelo comitê de ética

em pesquisa da Universidade Estadual de Campinas, sob o parecer número: 1.376.230 (Anexo

2 e 3).

Por fim, oito voluntários foram excluídos do estudo; 4 por não terem tolerado o

uso da máscara e 4 por não terem concluído todas as sessões e avaliações, sendo que a

amostra final foi constituída por 18 voluntários de ambos os sexos (12 homens e 6 mulheres),

com idades entre 18 e 30 anos.

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Desenho Experimental

O estudo é caracterizado como experimental, agudo, onde foi utilizado um desenho

cruzado no qual todos os participantes participam de todos os protocolos experimentais.

Foram realizadas oito visitas ao laboratório, sendo as quatro primeiras preparatórias e as

quatro últimas experimentais. As sessões experimentais tiveram ordem de execução

aleatorizadas e balanceadas, sendo: Exercício contínuo com MRFar (EC-MRFar); Exercício

contínuo sem as válvulas da MRFar (EC); Exercício Intervalado com MRFar (EI-

MRFar) e Exercício Intervalado sem as válvulas MRFar (EI).

A MRFar foi configurada para simular uma altitude de 15000 pés (4572m) para as

condições que a utilizaram (EC-MRFar e EI-MRFar), para as condições que não utilizaram a

máscara (EC e EI), a mesma foi utilizada, afim de se manter o mesmo volume de espaço

morto, porém, sem as válvulas de restrição, permitindo que a ventilação ocorresse de maneira

normal.

Todos os voluntários realizaram os testes incremental máximo e os quatro protocolos

de exercício sempre no mesmo ciclo simulador (RacerMate®, ComputrainerTM, Seattle,

USA) e no mesmo período do dia, no intuito de evitar oscilações circadianas. Os voluntários

foram orientados a não realizar atividades físicas extenuantes e ingerir bebidas alcoólicas ou

qualquer outra droga 48 horas antes dos testes, a não consumir bebidas estimulantes, por pelo

menos 6 horas antes dos testes e ainda a se abster de refeições duas horas antes dos testes. Em

todos os testes o laboratório foi mantido com temperatura ~21°C e umidade relativa de ~60%.

Na primeira visita, os voluntários foram convidados ao laboratório onde entraram em

contato com o ambiente no qual ocorreram as sessões experimentais e testes, realizaram

avaliação da composição corporal (adipometria) e foram familiarizados com os

procedimentos avaliativos e exercício, além de assinarem o TCLE. Após a familiarização, os

voluntários retornaram ao laboratório outras duas vezes para os testes incrementais máximos,

uma quarta vez para familiarização com os protocolos de exercício com máscara (sessão

idêntica a sessão EC-MRFar), para então iniciarem as sessões experimentais (FIGURA 2).

Todos os testes e sessões experimentais foram intercalados por, pelo menos, 72 horas. A

avaliação da composição corporal foi utilizada unicamente para caracterização da amostra, já

os testes incrementais máximos foram realizados para avaliar a capacidade aeróbia máxima

(VO2máx) e a potência máxima (Pmáx) utilizada tanto para caracterização como para a

prescrição dos exercícios utilizados nas sessões experimentais.

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Protocolo experimental

O cicloergômetro utilizado foi aquecido e calibrado em todas as sessões, conforme

recomendações dos fabricantes. As descrições sobre a utilização do cicloergômetro estão

detalhadas no tópico à baixo “teste incremental”. As configurações de distância de acento,

banco e guidão do ciclo ergômetro foram anotadas e repetidas individualmente para cada

voluntário em todos os testes, incluindo os incrementais.

Previamente ao início do protocolo, os voluntários realizaram o tratamento da orelha

para as coletas de sangue, posteriormente, houve a tricotomia e assepsia da pele para a

colocação dos eletrodos nos músculos do quadríceps. Em um segundo momento, após

repouso sentado de pelo menos 10 minutos, houveram as coletas de sangue do lóbulo da

orelha e da falange distal do dedo para as análises metabólicas. Os voluntários foram

posicionados no cicloergômetro para o início do teste e realizaram coleta de gases em repouso

por 7 minutos, para então darem início ao exercício.

As condições EC-MRFar e EC tiveram suas intensidade estabelecida como a carga

correspondente a 60% da Pmáx alcançada no teste incremental, que foi mantida constante

durante todo o protocolo a uma cadencia que oscilou de 65-75 rotações por minuto (rpm).

Enquanto que as condições EI-MRFar e EI tiveram sua intensidade estabelecida como a carga

correspondente a 40-80% Pmáx, sendo o protocolo intervalado realizado em uma proporção de

1:1, ou seja, para cada 1 minuto de atividade em intensidade correspondente a 80% da Pmáx

houve 1 minuto de atividade à intensidade correspondente a 40% da Pmáx. As condições EI e

EI-MRFar iniciaram os testes a 40% da Pmáx em cadência entre 60-70 rpm, a execução do

minuto seguinte (80% da Pmáx) foi executada com cadênica entre 70-80 rpm. Todas as sessões

tiveram 20 minutos de duração.

Durante os protocolos experimentais, foram realizadas as coletas de gases respiração-

a-respiração, eletromiografia dos músculos vasto lateral, vasto medial e reto femoral do

quadríceps. Ainda foram coletadas amostras de sangue das falanges distais dos dedos da mão

nos momentos imediatamente pós, 3 min, 5 min e 7 min após o término do exercício para a

análise das concentrações de lactato. Por fim, sangue arterializado do lóbulo da orelha

esquerda foi coletado para a análise dos metabólitos no momento imediatamente pós

(FIGURA 2).

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FIGURA 2 – Desenho experimental da intervenção e da sessão de treinamento.

Ter Qua Qui Sex Sab Dom Seg Ter Qua Qui Sex Sab Dom Seg Ter Qua Qui Sex Sab Dom Seg Ter Qua

Coleta de sangue do lóbulo da orelha

Coleta contínua de gases

Familiarização 

Composição corporal

Teste incremental máximo 

Sessões experimentais aleatorizadas e balanceadas

Eletromiografia

Coleta de sangue da falange distal dos dedos da mão

72 Horas

Linha de Base

(7MIN)

RECUPERAÇÃO

(7 MIN)

Pós

3'

5'

7'

Protocolo: EC: MRFar/EC/EI-MRFar/EI

(20 MIN)

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3. TESTES E AVALIAÇÕES

Teste Incremental Máximo

O teste foi realizado no ciclo simulador (ComputrainerTM, RacerMate®, Seattle, USA),

com coleta contínua de gases, onde foram analisadas as variáveis consumo de oxigênio (VO2),

dióxido de carbono (VCO2) e volume ventilatório (VE), frequência respiratória (RR), pressão

expirada de O2 (PETO2) e pressão expirada de CO2 (PETCO2). Foi utilizado o analisador

automático de gases (CPX UltimaTM, Medgraphics®, Minnesota, EUA).

Anteriormente ao teste o pneu da bicicleta do ciclo simulador foi calibrado com

pressão de 100 a 110 libras, o câmbio foi posicionado na relação 54x17 e o rolo do ciclo

simulador aquecido e calibrado conforme recomendação do fabricante (RacerMate®,

ComputrainerTM, Seattle, USA). Em seguida, de acordo com as dimensões corporais do

sujeito, foram feitos os ajustes de altura do banco e posição horizontal de banco e guidão na

bicicleta do próprio ciclo simulador, estas informações foram anotadas para uso nos demais

testes. Simultaneamente o analisador de gases foi calibrado, também seguindo recomendações

do fabricante, sendo o volume de ar expirado, mensurado através de um sensor de fluxo

bidirecional, calibrado com seringa de calibração contendo três litros de ar (Medgraphics®,

Minnesota, EUA), enquanto que a fração expirada de O2 (sensor de zircônio) e a fração

expirada de CO2 (sensor infravermelho) foram calibrados de forma automática utilizando

cilindro com concentração conhecida de O2 (12%) e CO2 (5%) (White Martins Ltda., São

Paulo, Brasil). Os procedimentos de calibração do ciclo simulador e analisador automático de

gases, assim como relação de marchas e ajustes da bicicleta foram repetidos de maneira

idêntica antes do segundo teste incremental máximo e em todas as sessões experimentais para

cada voluntário.

Após todos os procedimentos de calibração e ajustes foi dado início ao protocolo de

teste. Os voluntários executaram um protocolo progressivo até exaustão, que consistiu de uma

fase preliminar de 5 minutos de repouso, 5 minutos de aquecimento à 50W, seguidos de

acréscimos de 25W a cada minuto. Os voluntários foram orientados a manter uma rotação de

pedal entre 70-75 rpm, quando não foi possível manter a cadência dentro desse intervalo,

foram dadas duas tentativas (estimulo verbal) para que a cadência fosse restabelecida para o

intervalo recomendado. O teste foi interrompido quando o voluntário não conseguiu manter a

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cadência dentro desse intervalo numa terceira ocasião, sendo este momento considerado como

a exaustão física. Seguiu-se um período de 7 minutos de recuperação em repouso.

Adicionalmente, durante a realização deste protocolo, foi feita a aquisição da

frequência cardíaca utilizando um transmissor cardio-frequencímetro (Polar, Kempele,

Finlândia) ligado ao analisador de gases.

O teste foi considerado máximo quando pelo menos dois dos seguintes critérios foram

atendidos: 1. Ocorrência de platô do VO2, definido como um aumento inferior a 2.1

ml/kg/min no VO2 mesmo com incremento da carga; 2. Razão de trocas respiratórias (RER) ≥

1,1; 3. Frequência cardíaca (FC) ≥ a 90% da máxima (FCmáx) predita pela idade (220 -idade).

Estes critérios foram baseados na no trabalho de Howley, Bassett e Welch (1995).

Por fim, os dados foram extraídos do software do analisador de gases e filtrado

utilizando média móvel de 5 pontos. A potência máxima (Pmáx) foi registrada como a carga do

último estágio completo pelo voluntário no teste incremental. Foram realizados dois testes

incrementais máximos no intuído de melhorar a qualidade da avaliação, visto que os

parâmetros identificados foram usados na prescrição das intensidades de exercício, foram

utilizados os valores do teste com maior Pmáx.

Coleta e Processamento dos Sinais Eletromiográficos (EMG)

Para a coleta dos sinais eletromiográficos foi utilizado o eletromiógrafo da marca

Biopac (Biopac System, Inc., Santa Barbara, CA, USA), modelo MP150 de 16 canais e

eletrodos ativos (Biopac System, Inc., CA, USA), modelo TSD-150 com relação de rejeição

do modo comum (CMRR) de >95 dB. Para a captação dos sinais foi utilizado o software

AcqKnowledge 3.8.1 (Biopac System, Inc., CA, USA). A frequência de aquisição dos sinais

eletromiográficos foi de 2000 Hz e o filtro passa-banda de 20-500 Hz.

Os eletrodos de superfície foram fixados com fita adesiva sobre a pele nos pontos

referentes aos músculos Reto Femoral (RF) a 50% da linha da espinha ilíaca ântero-superior à

borda superior da patela, Vasto Lateral (VL) a 2/3 da linha da espinha ilíaca ântero-superior a

borda lateral da patela, e Vasto Medial (VM) a 80% da linha entre a espinha ilíaca ântero-

superior e do espaço articular na frente da borda anterior do ligamento colateral medial, do

membro direito do voluntário. Foram seguidas as recomendações do “SENIAM – Surface

ElectroMyoGraphy for the Non-Invasive Assessment of Muscles” (FIGURA 3) (Hermens et

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al., 2000), mantendo a distância fixa entre os eletrodos de dois centímetros (centro a centro).

O eletrodo de referência foi posicionado na protuberância óssea da tíbia direita do voluntário.

Foi realizada a assepsia da pele no próprio laboratório visando à remoção de pilosidade e

células mortas e diminuição da impedância. Após a coleta dos sinais, foi utilizada a técnica de

Root Mean Square (RMS) com janelamento de 100 bursts para o tratamento dos dados,

utilizando o software AcqKnowledge 3.8.1 (Biopac System, Inc., CA, USA). Após o

tratamento, os dados foram extraídos e utilizou-se uma rotina específica no software

MATLAB (MATrix LABoratory) para realizar a média dos valores a cada minuto. O

resultado da RMS de cada minuto foi normalizado pela RMS do minuto inicial de cada

protocolo. O sinal normalizado dos três músculos RF, VM e VL foram somados e

apresentados como uma única variável (SOMA QF).

FIGURA 3. Colocação dos eletrodos de acordo com a literatura

RETO FEMORAL

VASTO LATERAL

VASTO MEDIAL

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Ilustrações esquemáticas da colocação dos eletrodos nos músculos do quadríceps, os eletrodos foram fixados

com fita adesiva na localização representada pela elipse preta (Hermes et al., 2000).

Coleta e análise de sangue periférico

Para análise da concentração de lactato foram coletadas amostras de 25μl de

sangue da falange distal dos dedos da mão, por punção com lancetas descartáveis, após

assepsia do local com álcool 70°GL. Esta coleta foi realizada nos momentos pré,

imediatamente após, 3min, 5min e 7min após o término da sessão. As amostras de sangue

foram imediatamente colocadas em microtubo contendo 25μl de fluoreto de sódio (NaF) 1g%

e em seguida centrifugadas por 10 min a 5000rpm (Centrífuga Excelsa Baby I, Fanem®, São

Paulo, Brasil). Utilizou-se pipeta automática para separar o plasma sobrenadante, que foi

armazenado a -80º C para posterior análise. A concentração de lactato foi analisada com o uso

de Kits comerciais (Biotecnica®, São Paulo, Brasil) e espectrofotômetro (ELx800, Biotek®,

Vermont, USA).

Para análise das variáveis gasométricas (pressão parcial dos gases sanguíneos

(PO2 e PCO2), pH, desoxihemoglobina (HHb), excesso de base (BE), hematócrito (Hct),

concentração de bicarbonato (HCO3) e saturação de O2 (SaO2) foram coletadas amostra de

aproximadamente 125μl de sangue do lóbulo da orelha por punção com lancetas descartáveis,

sendo coletado por tubo capilar (Roche, Diagnostics GmbH, Mannheim / Germany) e após

assepsia do local com álcool 70°GL. Esta coleta foi realizada nos momentos pré e após o

término da sessão. O lóbulo da orelha foi aquecido com uma compressa quente durante 5min

no momento pré teste de modo a ativar a circulação sanguínea e facilitar absorção da pomada

vasodilatadora Finalgon Crema (Laboratórios Fher, S.A., Barcelona, Espanha) que foi

aplicada 10min antes da coleta pré (Mollard et al., 2010). Quando necessário à pomada foi

aplicada novamente antes da coleta pós. As amostras de sangue foram imediatamente

analisadas no analisador de gases sanguíneos Cobas b 123 POC System (Roche Diagnostics

GmbH, Mannheim / Germany).

Peça de adaptação da MRFar ao analisador automático de gases

Os protocolos experimentais foram realizados sob análise contínua de gases, para

tal, foi utilizado o analisador de gases CPX UltimaTM (Medgraphics®, Minnesota, EUA). Para

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que fosse possível realizarmos as coletas continuas de gases, concomitante ao uso da MRFar,

foi necessária a confecção de uma peça que permitisse a ligação entre a MRFar e o analisador

de gases (FIGURA 4). A peça foi confeccionada a partir do polímero Acrilonitrila Butadieno

Estireno (ABS), utilizando a impressora 3D tipo FDM (RepRap Prussa Mendel I3, Sethi Ind

Com Prod Eletrônicos, São Paulo, Brasil). O complexo MRFar mais a peça confeccionada

possuíam volume de aproximadamente 350ml. Todas as seções experimentais foram

realizadas com o uso do complexo máscara + peça de ligação, tendo como única diferença

entre as condições a presença das válvulas de restrição. Para assegurar a devida vedação, foi

utilizado neoprene na borda interna da peça, e o complexo peça mais máscara foi vedado com

fita adesiva.

FIGURA 4. Peça confeccionada em impressora 3D para adaptação com a MRFar

Fotos da peça utilizada sobre a máscara para a comunicação com o analisador de gases.

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4. RESULTADOS

Os resultados deste projeto serão apresentados na forma de dois artigos originais a

serem submetidos à publicação em periódicos da área. O primeiro artigo trata do efeito do uso

da MRFar sobre as respostas metabólicas, ventilatórias e eletromiográficas no exercício

contínuo. O segundo artigo irá abordar as modificações causadas pelo uso da MRFar sobre as

mesmas variáveis investigadas no primeiro estudo, porém, frente ao exercício intervalado.

As características dos sujeitos que compõem os dois artigos estão apresentadas na

TABELA 1.

TABELA 1. Características dos voluntários.

Características dos Sujeitos

(n = 18) Média ± DP

Idade (anos) 25,11 ± 4,35

Estatura (cm) 170,0 ± 0,08

Massa corporal (kg) 64,91 ± 11,08

% Gordura 11,17 ± 7,24

IMC (kg/cm2) 22,37 ± 2,47

Pmáx (W) 247,22 ± 48,15

VO2abs (ml/min) 2298,44 ± 551,78

Características dos voluntários pesquisados. Os dados estão apresentados em Média ± Desvio Padrão.

5. ARTIGO 1 – EFEITO DO USO DE MÁSCARA DE RESTRIÇÃO AO FLUXO DE

AR (MRFar) EM EXERCÍCIO CONTÍNUO SOBRE AS RESPOSTAS

METABÓLICAS, VENTILATÓRIAS E ELETROMIOGRÁFICAS.

INTRODUÇÃO

Observamos no mercado o lançamento de diversos produtos tecnológicos

relacionados à saúde, estética e bem estar, muitos se propõe a acelerar a perda de peso ou a

aumentar o ganho de massa muscular e ainda melhoria do desempenho aeróbio (Blendon et

al., 2001; Hirschbruch et al., 2008). Existem inclusive tecnologias “vestíveis”, como calças

(Loturco et al., 2016), calçados (Rixe et al., 2012), meias (Ali et al., 2007) e bandagens

(Thelen et al., 2008). Tem sido proposto que o uso de tais tecnologias acelere ou potencialize

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os efeitos adaptativos esperados pelo treinamento, assim como melhorar o desempenho em

tarefas específicas. O uso destes produtos abrange um grande público, indo desde entusiastas

da atividade física até atletas profissionais (Ali et al., 2007; Thelen et al., 2008; Loturco et al.,

2016). Algumas tecnologias visam agregar às sessões treinamento estímulos adicionais como

o treinamento com oclusão vascular periférica (Takarada, 2016) e o treinamento em câmaras

ou conectado a cilindros com mistura de gases que induzem hipóxia normobárica (Faiss et al.,

2013), ambos atribuem seus efeitos positivos ao treinamento executado sob condição de baixa

disponibilidade de oxigênio aos tecidos.

O treinamento em hipóxia possui um grande respaldo científico sobre sua aplicação e

resultados, estimulando diversos sistemas no corpo humanos como o sistema nervoso central,

sistema cardiorrespiratório e sistema muscular (Rusko et al., 2004; Hamlin et al., 2010);

contudo, o deslocamento a elevadas altitudes ou a utilização de câmaras e cilindros de gases

revelam-se metodologias dispendiosas e de difícil logística. Neste sentido, novas tecnologias

de menor custo e melhor logística têm sido propostas para simular ambientes de hipóxia, mas

muitas dessas novas tecnologias ainda não tiveram seus efeitos atestados.

Dentre as novas tecnologias que alegam induzir hipóxia, destacamos as máscaras de

restrição ao fluxo de ar (MRFar). São máscaras que proporcionam resistência à troca de ar

durante a respiração (ciclo inspiração e expiração) através da utilização de um sistema de

válvulas reguláveis, que supostamente simulariam diferentes níveis de altitude, gerando

diferentes níveis de hipóxia. Além disso a MRFar aumentaria a resistência oferecida aos

músculos respiratórios, o que possibilitaria o treinamento da musculatura respiratória (TMR),

outro estímulo associada a melhora do desempenho em atividades de endurance (Illi et al.,

2012).

Pouco se sabe sobre a eficácia do uso desse implemento devido ao baixo número de

publicações científicas disponíveis. Investigações que utilizam a MRFar em intervenções

crônicas (6 ou mais semanas de treino) (Granados et al., 2016; Sellers et al., 2016; Warren et

al., 2017) não encontraram grandes mudança nas adaptações cardiovasculares e

neuromusculares. Embora estes estudos tenham relacionado a falta de aumento do VO2max a

baixa queda da Saturação de Oxigênio (SpO2), e isso tenha sido mostrado em estudos agudos

(Granados et l., 2016; Porcari et al., 2016), somente Porcari et al., (2016) encontrou melhoras

após 6 semanas de treino, sendo estas atribuídas a uma possível ação da MRFar sobre a

musculatura respiratória, embora não tenha encontrado diferença para os testes de função

pulmonar. Porcari et al., (2016) demonstrou que somente o grupo que utilizou a MRFar

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obteve incrementos significativos no consumo de O2 no limiar ventilatório, na potência

alcançada no limiar ventilatório, no consumo de O2 no ponto de compensação respiratório e

na potência alcançada no ponto de compensação respiratório. Como diferença entre as

condições (com sem MRFar), somente os valores para o consumo de O2 no ponto de

compensação respiratória e a potência alcançada no mesmo foram significantemente

diferentes. Porém, Porcari et al., (2016) não se dedicou a investigar as respostas metabólicas e

neuromusculares durante o exercício com e sem MRFar, de maneira integrada, a fim de

estudar os mecanismos envolvidos em tais adaptações decorrentes do uso da MRFar. Portanto

os mecanismos pelos quais a MRFar promove melhoras no desempenho permanecem

desconhecidos.

Desta forma, o presente estudo teve como objetivo comparar as respostas metabólicas,

ventilatórias e eletromiográficas em sessão de exercício contínuo executado em ciclo

simulador com e sem o uso da MRFar. Partimos do pressuposto de que o uso da MRFar será

eficaz em induzir queda na SaO2 e que, com isso, seja possível observar mudanças nos

metabólitos avaliados e no sinal eletromiográfico ((Dempsey et al., 2006)) tipicamente

encontradas no exercício em condição de hipóxia normobárica. Assim como, espera-se

observar que a MRFar assemelhe-se a um implemento de Treinamento da Musculatura

Respiratória (TMR) corroborando com os trabalhos de Granados et al., (2016) e Porcari et al.,

(2016).

MÉTODOS

Sujeitos

Como critérios de inclusão, os voluntários deveriam ter idade entre 18-30 anos,

fisicamente ativos e possuir disponibilidade de horário para a participação das coletas. Os

critérios de exclusão consistiram em tabagismo, obesidade (IMC > 30 kg/m2) e quaisquer

patologias ou problemas osteo-articulares que representassem risco ou limitação para prática

de exercícios físicos, tais como patologias auto-reportadas: hipertensão arterial, doença

arterial coronariana, arritmias, pós-infartado, diabetes mellitus, doença pulmonar obstrutiva

crônica, doenças osteo-articulares limitantes.

Foram pré-selecionados 26 voluntários, que concordaram com os procedimentos e

calendários de avaliação assinaram o termo de consentimento livre e esclarecido (TCLE). O

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projeto, assim como o TCLE, foram aprovados pelo comitê de ética em pesquisa da

Universidade Estadual de Campinas, sob o parecer número: 1.376.230.

Desenho Experimental

O estudo é caracterizado como experimental, agudo, onde foi utilizado um

desenho cruzado, no qual todos os participantes participam de todos os protocolos

experimentais. Foram realizadas 6 visitas ao laboratório, sendo as quatro primeiras

preparatórias e as duas últimas experimentais. As sessões experimentais tiveram ordem de

execução aleatorizadas e balanceadas, sendo: Exercício contínuo com MRFar (EC-MRFar)

e Exercício contínuo sem as válvulas da MRFar (EC).

A MRFar foi configurada para simular uma altitude de 15000 pés (4572m) para a

condição EC-MRFar, pois estudos pilotos demonstraram ser a maior configuração suportada

pelos voluntários. Já a condição EC utilizou a máscara, afim de manter o mesmo volume de

espaço morto que a condição EC-MRFar, porém, sem as válvulas, permitindo que a

ventilação ocorresse de maneira normal.

Todos os voluntários realizaram os testes incrementais máximos e os dois

protocolos de exercício no mesmo ciclo simulador (RacerMate®, ComputrainerTM, Seattle,

USA), no mesmo período do dia, no intuito de evitar oscilações circadianas, com as mesmas

configurações de banco, guidão e marcha, também foram orientados a não realizarem

atividades físicas extenuantes e ingerir bebidas alcoólicas ou qualquer outra droga 48 horas

antes dos testes, assim como a não consumirem bebidas estimulantes por pelo menos 6 horas

antes dos testes e se absterem de refeições duas horas antes dos testes.

Na primeira visita, os voluntários foram convidados ao laboratório onde entraram

em contato com o ambiente no qual ocorreram as sessões experimentais e foram

familiarizados com os procedimentos avaliativos e exercício, além de assinarem o TCLE.

Após a familiarização, os voluntários retornaram ao laboratório outras duas vezes para os

testes incrementais máximos, uma quarta vez para familiarização com os protocolos de

exercício com máscara (sessão idêntica a sessão EC-MRFar), para então iniciarem as sessões

experimentais. Todos os testes e sessões experimentais foram intercalados por, pelo menos,

72 horas. Os testes incrementais máximos foram realizados a fim de se obter a potência

máxima (Pmáx) utilizada para a prescrição dos exercícios utilizados nas sessões experimentais.

Em todas as sessões experimentais foram coletados os gases expirados respiração-a-

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respiração, para tal, foi utilizado o analisador de gases CPX UltimaTM (Medgraphics®,

Minnesota, EUA).

Peça de adaptação da MRFar ao analisador automático de gases

Devido ao formato da MRFar, foi necessária a confecção de uma peça que

permitisse a comunicação entre a MRFar e o analisador de gases. A peça foi confeccionada a

partir do polímero Acrilonitrila Butadieno Estireno (ABS), utilizando a impressora 3D tipo

FDM (RepRap Prussa Mendel I3, Sethi Ind Com Prod Eletrônicos, São Paulo, Brasil). O

complexo MRFar mais a peça confeccionada possuíam como volume aproximadamente

350ml. O testes experimentais, tanto na condição com MRFar quanto sem MRFar, ou seja,

mantendo-se a máscara, porém, removendo-se as válvulas, foram realizados com o uso da

peça, mantendo assim o mesmo volume em todas as condições. Para assegurar a devida

vedação, foi utilizado neoprene na borda interna da peça e o complexo peça mais máscara foi

vedado com fita adesiva.

Teste Incremental Máximo

O teste foi realizado no ciclo simulador (ComputrainerTM, RacerMate®, Seattle,

USA), com coleta contínua (respiração-a-respiração) utilizando o analisador automático de

gases (CPX UltimaTM, Medgraphics®, Minnesota, EUA).

Os procedimentos de calibração do ciclo simulador e analisador automático de

gases, assim como relação de marchas e ajustes da bicicleta foram repetidos de maneira

idêntica antes do segundo teste incremental máximo e em todas as sessões experimentais para

cada voluntário.

Os voluntários executaram um protocolo progressivo até exaustão, que

consistiu de uma fase preliminar de 5 minutos de repouso, 5 minutos de aquecimento à 50W,

seguidos de acréscimos de 25W a cada minuto. Os voluntários foram orientados a manter uma

rotação de pedal entre 70-75 (rpm), quando não foi possível manter a cadência dentro desse

intervalo, foram dadas duas tentativas (estimulo verbal) para que a cadência fosse

restabelecida para o intervalo recomendado. O teste foi interrompido quando o voluntário não

conseguiu manter a cadência dentro desse intervalo numa terceira ocasião, sendo este

momento considerado como a exaustão física. Seguiu-se um período de 7 minutos de

recuperação em repouso.

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Adicionalmente, durante a realização deste protocolo, foi feita a aquisição da

frequência cardíaca utilizando um transmissor cardio-frequencímetro (Polar, Kempele,

Finlândia) ligado ao analisador de gases.

O teste foi considerado máximo quando pelo menos dois dos seguintes critérios

foram atendidos: 1. Ocorrência de platô do volume de Oxigênio (VO2), definido como um

aumento inferior a 2.1 ml/kg/min no VO2 mesmo com incremento da carga; 2. Razão de

trocas respiratórias (RER) ≥ 1,1; 3. Frequência cardíaca (FC) ≥ a 90% da máxima (FCmáx)

predita pela idade (220 - idade). Estes critérios foram baseados no trabalho de Howley,

Bassett e Welch (1995).

Foram realizados dois testes incrementais máximos no intuído de melhorar a

qualidade da avaliação, visto que os parâmetros identificados foram usados na prescrição das

intensidades de exercício nos protocolos experimentais, foram utilizados os valores do teste

com maior Pmáx.

Protocolo experimental

Previamente ao início do protocolo, os voluntários realizaram o tratamento da

orelha, para as coletas de sangue arterializado, este tratamento será descrito com maiores

detalhes adiante. Posteriormente, houve a tricotomia e assepsia da pele para a colocação dos

eletrodos nos músculos do quadríceps. Em um segundo momento, após repouso sentado de

pelo menos 10 minutos, houveram as coletas de sangue do lóbulo da orelha e da falange distal

do dedo para as análises metabólicas. Os voluntário se posicionaram no ciclo ergômetro para

o início do teste e realizaram uma coleta passiva de gases por 7 minutos, para então darem

início a sessão experimental.

As condições EC-MRFar e EC tiveram suas intensidade estabelecida como a

carga correspondente a 60% da Pmáx alcançada no teste incremental, que foi mantida constante

durante todo o protocolo a uma cadencia que oscilou de 65-75 rotações por minuto (rpm).

Ambas as sessões tiveram 20 minutos de duração.

Durante os protocolos experimentais, foram realizadas as coletas de gases

respiração-a-respiração, eletromiografia dos músculos do quadríceps. Foram coletadas

amostras de sangue das falanges distais dos dedos da mão nos momentos imediatamente após,

3 min, 5 min e 7 min após o término do exercício. Sangue arterializado do lóbulo da orelha

esquerda foi coletado para a análise dos metabólitos no momento imediatamente após.

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Coleta e análise de sangue periférico

Para análise da concentração de lactato [Lac] foram coletadas amostras de 25μl de

sangue da falange distal dos dedos da mão, por punção com lancetas descartáveis, após

assepsia do local com álcool 70°GL. Esta coleta foi realizada nos momentos pré,

imediatamente após, 3min, 5min e 7min após o término da sessão. A cinética de coletas pós

sessão teve o objetivo de verificar o pico de concentração, o qual foi utilizado na análise

estatística. As amostras de sangue foram imediatamente colocadas em microtubo contendo

25μl de fluoreto de sódio (NaF) 1g% e em seguida centrifugadas por 10 min a 5000rpm

(Centrífuga Excelsa Baby I, Fanem®, São Paulo, Brasil). Utilizou-se pipeta automática para

separar o plasma sobrenadante, que foi armazenado a -80º C para posterior análise. A

concentração de lactato foi analisada com o uso de Kits comerciais (Biotecnica®, São Paulo,

Brasil) e espectrofotômetro (ELx800, Biotek®, Vermont, USA).

Para análise das variáveis gasométricas: pressão parcial dos gases sanguíneos

(pO2 e pCO2), pH, desoxihemoglobina (HHb), excesso de base (BE), hematócrito (Hct),

concentração de bicarbonato (HCO3) e saturação de O2 (SaO2) foram coletadas amostra de

aproximadamente 125μl de sangue do lóbulo da orelha por punção com lancetas descartáveis,

sendo coletado por tubo capilar (Roche, Diagnostics GmbH, Mannheim / Germany). Esta

coleta foi realizada nos momentos pré e após o término da sessão. O lóbulo da orelha foi

aquecido com uma compressa quente durante 5min no momento pré teste de modo a ativar a

circulação sanguínea e facilitar absorção da pomada vasodilatadora Finalgon Crema

(Laboratórios Fher, S.A., Barcelona, Espanha) que foi aplicada 10min antes da coleta pré

(Mollard et al., 2010). Quando necessário à pomada foi aplicada novamente antes da coleta

pós. As amostras de sangue foram imediatamente analisadas no analisador de gases

sanguíneos Cobas b 123 POC System (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim / Germany).

Coleta e Processamento dos Sinais Eletromiográficos (EMG)

Para a coleta dos sinais eletromiográficos foi utilizado o eletromiógrafo da marca

Biopac (Biopac System, Inc., Santa Barbara, CA, USA), modelo MP150 de 16 canais e

eletrodos ativos (Biopac System, Inc., CA, USA), modelo TSD-150 com relação de rejeição

do modo comum (CMRR) de >95 dB. Para a captação dos sinais foi utilizado o software

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AcqKnowledge 3.8.1 (Biopac System, Inc., CA, USA). A frequência de aquisição dos sinais

eletromiográficos foi de 2000 Hz e o filtro passa-banda de 20-500 Hz.

Os eletrodos de superfície foram fixados com fita adesiva sobre a pele nos pontos

referentes aos músculos Reto Femoral (RF) a 50% da linha da espinha ilíaca ântero-superior à

borda superior da patela, Vasto Lateral (VL) a 2/3 da linha da espinha ilíaca ântero-superior a

borda lateral da patela, e Vasto Medial (VM) a 80% da linha entre a espinha ilíaca ântero-

superior e do espaço articular na frente da borda anterior do ligamento colateral medial, do

membro direito do voluntário, conforme recomendações do “SENIAM – Surface

ElectroMyoGraphy for the Non-Invasive Assessment of Muscles” (Hermens et al., 2000),

mantendo a distância fixa entre os eletrodos de dois centímetros (centro a centro). O eletrodo

de referência foi posicionado na protuberância óssea da tíbia direita do voluntário. Foi

realizada a assepsia da pele no próprio laboratório visando à remoção de pilosidade e células

mortas e diminuição da impedância. Após a coleta dos sinais, foi utilizada a técnica de Root

Mean Score (RMS) com janelamento de 100 bursts para o tratamento dos dados, utilizando o

software AcqKnowledge 3.8.1 (Biopac System, Inc., CA, USA). Após o tratamento, os dados

foram extraídos e utilizou-se uma rotina específica no software MATLAB (MATrix

LABoratory) para realizar a média dos valores a cada minuto. O resultado do RMS de cada

minuto foi normalizado pelo RMS do minuto inicial de cada protocolo. O sinal normalizado

dos três músculos RF, VM e VL foram somados e apresentados como uma única variável

(SOMA QF).

Análise dos resultados

Inicialmente foi verificado a normalidade dos dados utilizando o teste Shapiro-

Wilk. Em seguida, foi utilizado a análise de variância (ANOVA two way) para medidas

repetidas. O teste Post Hoc de Tukey foi aplicado para identificar as diferenças quando

observado efeito de interação (condição X momento). Os efeitos principais de momento e

condição são indicados no texto quando significantes, um teste de Post Hoc para o efeito

principais de momento foi usado quando apropriado. Para todas as análises estatísticas foi

utilizado software STATISTICA 6.0 (StatSoft, Inc., Tulsa, OK, USA). Os dados são

apresentados em média e desvio padrão e o valor de significância adotado para todas as

comparações foi de p<0,05.

RESULTADOS

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Oito voluntários foram excluídos do estudo 4 por não terem tolerado o uso da

máscara e 4 por não terem concluído todas as sessões e avaliações devido a calendário interno

do laboratório, sendo que a amostra final foi constituída por 18 voluntários de ambos os sexos

(12 homens e 6 mulheres), com idades entre 18 e 30 anos.

Variáveis metabólicas

Observamos efeito de interação (p<0,05) para a variável pH, sendo que ambas as

condições EC e EC-MRFar propiciaram queda no pH após a sessão (EC p<0,05 e EC-MRFar

p<0,05), e que em EC-MRFar houve maior queda que em EC (p<0,05). As variáveis

bicarbonato (cHCO3), desoxiemoglobina (HHb), excesso de base (BE) e [Lac] não

apresentaram efeito de interação (todos p>0,11) porém, apresentaram efeito de momento

(todos p<0,05).

A variável pressão de O2 (pO2) não apresentou efeito de interação entre interação

(p=0,32), porém apresentou efeito de momento (p=0,05). A variável pressão de CO2 (pCO2)

apresentou efeito de interação (p<0,05), sendo a pCO2 para a condição EC-MRFar maior no

momento pós (p<0,05) com relação ao momento pré. Também foi identificado pelo Post Hoc

diferença entre as condições no momento pós, sendo a pCO2 em EC-MRFar maior que EC

(p<0,05). A variável hematócrito (Hct) apresentou efeito de interação (p<0,05) sendo que

ambas as condições apresentaram aumento com relação ao momento pré (EC p=0,01 e EC-

MRFar p<0,05). O teste de Post Hoc também identificou diferença entre as condições no

momento pós (p<0,05), tendo a condição EC-MRFar apresentado maiores valores de Hct que

EC. A variável Saturação de O2 (SaO2) não apresentou efeito de interação entre as condições

(p=0,08), porém, apresentou efeito de momento (p<0,05).

TABELA 1. Variáveis metabólicas

Variável Condição Pré Após

pH EC

EC-MRFar

7,42 (0,01)

7,42 (0,001)

7,33 (0,03)*

7,29 (0,06)* †

cHCO3 (mmol/L)* EC 22,31 (1,88) 17,96 (2,14)

EC-MRFar 21,76 (1,66) 17,62 (3,25)

HHb (%)* EC 1,87 (1,01) 3,14 (1,25)

EC-MRFar 1,77 (0,81) 3,79 (1,55)

BE (mmol/L)* EC -1,54 (1,52) -6,98 (2,16)

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EC-MRFar -1,98 (1,27) -8,25 (3,71)

Lactato (mmol/L)* EC 1,66 (0,51) 7,71 (3,31)

EC-MRFar 1,53 (0,45) 7,90 (2,92)

pO2 (mmHg)* EC 85,15 (7,47) 80,62 (6,32)

EC-MRFar 82,43 (4,04) 79,96 (5,39)

pCO2 (mmHg) EC 35,35 (3,19) 34,76 (3,33)

EC-MRFar 34,61 (3,25) 37,39 (4,06) * †

Hct (%) EC 44,23 (4,28) 46,93 (4,46)*

EC-MRFar 45,01 (4,37) 48,99 (4,78)* †

SaO2 (%)* EC 98,09 (1,03) 96,81 (1,26)

EC-MRFar 98,19 (0,84) 96,16 (1,58)

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). * após o valor numérico denota diferença encontrada no Post

Hoc para o efeito de interação entre momentos (pré x pós) para a mesma condição (p<0,05). * após o nome da

variável denota diferença encontrada no efeito principal de momento (p<0,05). † Denota diferença significativa

entre condições diferentes encontradas no Post Hoc do efeito de interação (EC x EC-MRFar) (p<0,05).

Variáveis Ventilatórias

Observamos que o consumo de O2 absoluto (VO2abs) apresentou efeito de interação

(p<0,05). Sendo o consumo maior para a condição EC no primeiro minuto do teste (p<0,05).

Já do sétimo ao vigésimo minuto de teste o consumo apresenta-se maior para a condição EC-

MRFar (todos p<0,05) (FIGURA 1). A variável ventilação (VE) apresentou efeito de

interação (p<0,05) sendo menor para a condição EC-MRFar do primeiro minuto até o

vigésimo minuto (todos p<0,05) (FIGURA 2). Foi encontrado para a variável pressão

expirada de CO2 (PETCO2) efeito de interação (p<0,05), sendo que a condição EC-MRFar

apresentou valores maiores no momento pré e do primeiro e o vigésimo minuto de teste

(todos p<0,05) (FIGURA 3). A variável pressão expirada de O2 (PETO2) apresentou efeito de

interação (p<0,05), sendo menor para a condição EC-MRFar no momento pré e do segundo

até o vigésimo minuto de teste (todos p<0,05) (FIGURA 4). A variável frequência respiratória

(RR) não apresentou efeito de interação (p=0,24), porém apresentou efeito de momento

(p<0,05) tendo o Post Hoc indicado que esta variável aumentou ao longo do teste. Foi

encontrado também para a variável RR efeito principal de condição (p<0,05) (FIGURA 5).

FIGURA 1 – Parâmetros ventilatórios, consumo de Oxigênio

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V O 2 a b s o lu to

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

3 0 0

6 0 0

9 0 0

1 2 0 0

1 5 0 0

1 8 0 0

2 1 0 0

E C

E C -M R F a r

T e m p o (m in )

Vo

2(m

L/m

in)

†††††††††††††

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). †Denota diferença significativa entre condições diferentes

(EC x EC-MRFar) identificadas pelo Post Hoc (p<0,05). A linha tracejada indica valor médio máximo alcançado

no teste incremental (2298,44 ml/mim).

FIGURA 2 - Parâmetros ventilatórios, Ventilação

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V E B T P S

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

2 0

4 0

6 0

8 0

1 0 0

E C

E C -M R F a r

T e m p o (m in )

VE

BT

PS

(L

/min

)

††

†† † † † † † † † † † † † † † †

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). † Denota diferença significativa entre condições diferentes

(EC x EC-MRFar) identificadas pelo Post Hoc (p<0,05). A linha tracejada indica valor médio máximo alcançado

no teste incremental (101,2144 L/mim).

FIGURA 3 - Parâmetros ventilatórios, Fração Expirada de Gás Carbônico

P E T C O 2

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

3 0

4 0

5 0

6 0

7 0E C

E C -M R F a r

T e m p o (m in )

PE

TC

O2

(mm

Hg

)

† † † † †† † † † † † † † † † † † † †

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). † Denota diferença significativa entre condições diferentes

(EC x EC-MRFar) identificadas pelo Post Hoc (p<0,05). A linha tracejada indica valor médio máximo alcançado

no teste incremental (37 mmHg).

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FIGURA 4 - Parâmetros ventilatórios, Fração Expirada de Gás Oxigênio

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

8 0

9 0

1 0 0

1 1 0

E C

E C -M R F a r

T e m p o (m in )

PE

TO

2(m

mH

g)

† † ††

† †† † † † † † † †

† † † †

P E T O 2

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). † Denota diferença significativa entre condições diferentes

(EC x EC-MRFar) identificadas pelo Post Hoc (p<0,05). A linha tracejada indica valor médio máximo alcançado

no teste incremental (102 mmHg).

FIGURA 5 - Parâmetros ventilatórios, Frequência respiratória

RR

T e m p o (m in )

RR

(b

r/m

in)

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

0

1 0

2 0

3 0

4 0

5 0

E C

E C -M F R a r

*

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). † Denota efeito principal de condição identificado pelo

ANOVA. * Denota efeito principal de momento identificado pelo ANOVA (p<0,05). A linha tracejada indica

valor médio máximo alcançado no teste incremental (49,72 br/min).

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Variável eletromiográfica

A variável eletromiográfica foi composta pela somatória dos sinais normalizados dos

três músculos analisados, reto femoral, vasto medial e vasto lateral. A análise SOMA QF nos

revela que não houve efeito de interação (p=0,27). Porém, apresentou efeito significativo de

momento (p<0,05). A análise Post Hoc do efeito de momento não localizou significância em

nenhum ponto.

FIGURA 6. Sinal eletromiográfico SOMA QF

S O M A R M S Q F

T e m p o

SO

MA

QF

RM

S (

%)

2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

1 .5

2 .0

2 .5

3 .0

3 .5

4 .0

E C

E C -M R F a r

*

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). É apresentada a soma dos sinais dos músculos RF, VL e VM

já normalizados. * Denota efeito principal de momento identificado pelo ANOVA (p<0,05).

DISCUSSÃO

Este trabalho avaliou se o uso da MRFar em exercício aeróbio contínuo simula

situações de treinamento em hipóxia, assim como proporcionaria mudanças metabólicas e

eletromiográficas relacionadas. Para tal foi utilizado um modelo experimental cruzado onde a

presença (EC-MRFar) ou ausência (EC) das válvulas de restrição foi a principal variável

independente. Como principais resultados encontramos que o uso da MRFar proporcionou

mudanças significantes nas variáveis ventilatórias, com redução na VE (p<0,05) e RR (efeito

de condição p<0,05), assim como no aumento do consumo de O2 (p<0,05), fração expirada de

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CO2 e redução nas frações expiradas de O2 (ambas p<0,05). Foi possível verificar também

mudanças significativas no perfil metabólico com o uso da MRFar, constatadas por uma

maior acidose sanguínea (pH - p<0,05), maiores concentração de CO2 diluído no sangue e

maior concentração de hematócrito (ambos p<0,05).

Nossos achados indicam que não houve hipóxia induzida pelo uso da MRFar, uma

vez que foi encontrado níveis similares de queda na SaO2 para ambas as condições.

Confirmamos esta constatação quando observamos os valores de pO2, que também não

apresentaram diferenças entre as condições (p=0,32). Outras variáveis investigadas neste

projeto corroboram a evidência da ausência de hipóxia na condição que utilizou a MRFar. O

treinamento em hipóxia propicia respostas acentuadas nas [Lac] quando comparado com o

treinamento em normóxia (Rusko et al., 2004). No presente estudo não foram encontradas

diferenças significativas entre as condições (p>0,11) para a [Lac]. Adicionalmente, a

atividade elétrica muscular mostra-se atenuada em condições de hipóxia (Rusko et al., 2004),

o que não aconteceu no presente trabalho, onde a SOMA QF não apresentou diferenças entre

as condições (p=0,27).

Apesar do quadro de hipóxia não ter sido observado, constatamos que a condição

com MRFar apresentou aumento significativo no Hct. As adaptações hematopoiéticas

provenientes da exposição a ambientes de hipóxia são tidas como primordiais para a melhora

do desempenho atlético (Levine e Stray-Gundersen, 2006). Adaptações como o aumento basal

de Hct são observadas em situações de exposição crônicas a ambientes de baixa saturação de

O2, como resultado da ação do hormônio EPO (eritropoietina) (Levine, 2002). Porém, como

demonstrado acima, neste presente trabalho não podemos atribuir o aumento agudo de Hct à

estimulação por baixa saturação de O2. Acreditamos que o aumento da variável Hct esteja

relacionada com uma tentativa do organismo de auxiliar os mecanismos de controle

ácido/base, uma vez que foi encontrado queda significante de pH para a condição EC-MRFar,

mesmo com aumento da HHb no momento pós para ambas as condições, evidenciado o uso

da hemoglobina como estratégia de tamponamento do excesso de H+ (Hall, 2015).

Adicionalmente ao uso da hemoglobina para o tamponamento de H+, observamos aumento na

pCO2 indicando que os eritrócitos disponíveis foram sobrecarregados com outras funções

além de carrear O2 o que pode ter resultado em estimulo (acidose e aumento do estimulação

simpática) para contração do baço sendo possível que reticulócitos prematuros tenham sido

lançados na corrente sanguínea para atuarem no controle do pH e tentar restabelecer os níveis

normais de hemoglobina disponível (Richardson et al., 2008).

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O ambiente mais ácido encontrado no presente trabalho foi atribuído à acidose

respiratória. Descartamos a acidose metabólica pela constatação de que a [Lac] foi igual para

ambos os grupos após a exercício (p=0,59), demonstrando que a fonte adicional de prótons H+

não proveio da musculatura do quadríceps, fato que também é comprovado pela ausência de

diferenças significativas no sinal eletromiográfico da SOMA QF (p=0,27).

A acidose respiratória é encontrada frequentemente em certas patologias

obstrutivas (Calverley, 2003), onde, devido a uma mecânica ventilatória comprometida, há o

prejuízo da regulação do equilíbrio ácido/base e consequente acúmulo de CO2 na corrente

sanguínea. Encontramos que o uso da MRFar neste trabalho comprometeu a mecânica

ventilatória, fato que se evidencia pela queda na VE (p<0,05), efeito significante de condição

para a RR (p<0,05) e acúmulo de CO2 sanguíneo, como já destacado. Essas alterações nos

levam a estabelecer uma relação entre as mudanças nos padrões ventilatórios e alterações

metabólicas frente ao uso da MRFar, sendo que no presente trabalho, a magnitude de

alteração no padrão ventilatório não foi suficiente para alterar de maneira significativa a SaO2,

sendo as variáveis relacionadas ao controle ácido/base do organismo as mais afetadas.

O quadro de acidose, com provável origem respiratória, reforça a ideia do papel

da MRFar como instrumento de treinamento da musculatura respiratória (TMR) como

demonstrado em estudos que utilizam maior volume de espaço morto para o TMR (Smolka et

al., 2014). Encontramos indícios de que a MRFar funcionou para este propósito. Destacamos

as alterações do padrão ventilatório (VE e RR) para justificarmos tal constatação, uma vez

que houve queda no volume de ar, evidenciando o aumento da dificuldade para a realização

do ciclo respiratório, e queda na frequência de respirações por minuto, indicando que a

musculatura respiratória passou maior tempo sobre tensão. A literatura reporta ainda existir

uma modalidade de treinamento de força da musculatura respiratória (TFMR), caracterizada

pela respiração contra uma carga inspiratória/expiratória externa (Illi et al., 2012). O TFMR

inclui contrações de baixa velocidade e alta demanda de força, como contatado no presente

trabalho com o uso MRFar. Argumentamos à favor do TMR com o interessante achado de

aumento no consumo de O2 para a condição EC-MRFar, evidenciado pelos valores relativos e

absolutos de consumo (VO2rel e VO2abs) elevados. Uma vez que não houve aumento na

atividade eletromiográfica da SOMA QF, é possível que o maior consumo de O2 seja

proveniente do maior trabalho da musculatura respiratória.

Estudos que utilizam elevados volumes de espaço morto para o TMR tem

demonstrado mudanças no padrão ventilatório, assim como acúmulo de CO2 sanguíneo

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(Smolka et al., 2014). A somatória desses fatores acabam culminando em condições descritas

como hipercapnia (Smolka et al., 2014) (concentrações sanguíneas de CO2 maiores que 45

mmHg). Para indução de tal estado são comumente utilizados aparatos com volume morto de

aproximadamente 1litro (Koppers et al., 2006; Smolka et al., 2014). O complexo MRFar mais

peça adaptada utilizada no presente trabalho apresentou volume morto de aproximadamente

350ml, valor bem aquém do comumente utilizado para indução de hipercapnia e dentro da

faixa de segurança proposta para atividade física moderada/leve com uso de máscaras faciais

(Stannard e Russ, 1948). Porém, a combinação de espaço reduzido com uso das válvulas da

MRFar pode ter alterado a composição do ar retido na máscara. Demostramos mudanças nas

concentrações expiradas de O2 e CO2 (p<0,05), sendo que o grupo que utilizou a MRFar

apresentou queda na fração expirada de O2 (p<0,05) e aumento na fração expirada de CO2

(p<0,05). Estes são indícios de que o ar retido no espaço morto apresentava maior composição

de CO2 e menor composição de O2 que na condição EC, fato que pode ter culminado nas

maiores concentrações sanguíneas de CO2.

Os resultados do presente trabalho, embora refutem a hipótese inicial sobre a

indução de hipóxia pelo uso da máscara, revela que a mesma apresenta características de duas

modalidades distintas de TMR, a indução a hipercapnia e o Treinamento de Força da

Musculatura Respiratória (TFMR), ambas as metodologias agem de maneiras distintas sobre o

mecanismo ventilatório, proporcionando adaptações que vão desde modulações da ventilação

pulmonar (Cathcart et al., 2005), alterações da morfologia sanguínea (Zatoń et al., 2010) a

melhora do desempenho em provas de endurance (Illi et al., 2012).

O presente estudo possui algumas limitações. Primeiro, as variáveis obtidas a

partir de amostras de sangue ilustram alterações sistêmicas, mas podem não representar

alterações no músculo. Em segundo lugar, os dados de ativação muscular avaliados foram

obtidos a partir da eletromiografia de superfície e esta não é uma medida direta da ativação

muscular e/ou da unidade motora.

Como conclusão, nossos resultados demonstram que o uso da MRFar não gerou

hipóxia significante, porém, assemelhou-se a um implemento de TMR. Foi constatado

também que a magnitude das mudanças na ventilação possuem implicância nas alterações

metabólicas avaliadas, sugerindo que o uso da MRFar durante o exercício pode representar

um desafio adicional para os mecanismos de controle ácido/base do organismo.

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6. ARTIGO 2 – EFEITO DO USO DE UMA MÁSCARA DE RESTRIÇÃO AO

FLUXO DE AR (MRFar) EM EXERCÍCIO INTERVALADO DE ALTA

INTENSIDADE SOBRE AS RESPOSTAS METABÓLICAS, VENTILATÓRIAS E

ELETROMIOGRÁFICAS.

Tecnologias para a indução de hipóxia tem sido utilizadas no treinamento de

diversas modalidades, tendo em vista a melhora do desempenho. Tem sido proposto o uso de

máscaras de restrição ao fluxo de ar (MRFar) no intuído de gerar ambientes que

proporcionem hipóxia, facilitando a logística e barateando o custo deste método de treino

(Hamlin et al., 2010). Porém, trabalhos recentes não tem demonstrado queda da saturação de

oxigênio sanguínea a níveis condizentes com o treinamento em hipóxia, nem tão pouco

adaptações que são esperadas por esse tipo de treinamento, como o aumento das células

vermelhas circulantes e VO2máx (Granados et al., 2016; Porcari et al., 2016; Warren et al.,

2017).

Foi demonstrado recentemente por nosso grupo (artigo 1 desta dissertação) que,

sessões agudas de exercício contínuo em ciclo ergômetro com o uso da MRFar, não foram

capazes de reduzir os valores de Saturação de Oxigênio (SaO2), quando comparado com o

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exercício contínuo sem a MRFar. A queda da SaO2 é fator primordial para que as adaptações

proveniente do treinamento em hipóxia sejam alcançadas (Levine e Stray-Gundersen, 2006).

Foram demonstradas mudanças nos parâmetros ventilatórios com o uso da MRFar,

evidenciadas pela queda da frequência respiratória (RR) e queda no volume de ar ventilado

por minuto (VE). Estas mudanças refletiram em maior consumo de Oxigênio (VO2) durante o

exercício, o que foi atribuído a maior atividade da musculatura respiratória. Foi observado

também que o uso da MRFar causou aumento significativo no hematócrito (Hct), esta

elevação foi associada a acidose ventilatória, constatada pela queda no pH e aumento nas

concentrações de CO2 sanguíneo (pCO2), destacando o potencial da MRFar em levar os

indivíduos a um estado próximo a hipercapnia (maiores concentrações de CO2 sanguíneo).

Por sua vez, o maior estresse metabólico, como o aumento da pCO2, tem sido associado a

queda de desempenho precoce (Subudhi et al., 2011). Nossos resultados prévios

demonstraram que mudanças nos padrões ventilatórios causadas pelo uso da MRFar estão

relacionados com as mudanças metabólicas observadas, indicando um possível efeito

sinérgico.

Em um estudo que investigou o efeito crônico da máscara em treinamento

intervalado, Porcari et al. (2016) encontrou melhoras em variáveis relacionadas ao

desempenho. Foram investigados 24 voluntários de ambos os sexos, em dois grupos distintos,

MRFar e grupo controle, os mesmos foram submetidos a 6 semanas de treinamento

intervalado em cicloergômetro, os treinos foram realizados duas vezes na semana e tiveram a

duração de 30 minutos. O protocolo empregado por Porcari et al. (2016) foi eficaz em

aumentar o VO2máx para ambos os grupos, porém, sem diferença significativa entre estes, o

mesmo foi observado para a potência máxima alcançada no teste incremental.

Adicionalmente, somente os valores para o consumo de O2 no ponto de compensação

respiratória e na potência alcançada no ponto de compensação respiratória foram

significantemente diferentes entre grupos. Os autores concluem que as adaptações adicionais

causadas pelo uso da máscara tem efeitos significantes na performance, mas que foram

causado por um conjunto de fatores que vão além da queda na SaO2, sugerindo que a máscara

funcione mais como um implemento de treinamento da musculatura respiratória (TMR).

Esses dados reforçam a ideia de que estímulos que exijam mais da dinâmica respiratória,

como o exercício intervalado, possam exacerbar as respostas metabólicas em decorrência do

uso da MRFar, o que pode refletir em queda significante da SaO2 e adaptações crônicas para

variáveis cardiorrespiratórias.

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O treinamento intervalado de alta intensidade (HIT) é conhecido por propiciar

adaptações semelhantes as apresentadas no treinamento de endurance em espaços de tempo

mais curtos (Gibala e Mcgee, 2008), atribui-se a este fenômeno uma miríade de atributos

psicológicos e fisiológicos, dentre eles destacamos as maiores demandas cardiovasculares,

metabólicas, neurais e respiratórias (Gibala e Mcgee, 2008).

Desta forma o presente estudo testa a hipótese de que o HIT associado com a

MRFar, devido as suas características, leve a maiores acúmulos de metabólitos sanguíneos e

maiores alterações nos padrões respiratórios. Tais mudanças no padrão respiratório se

refletirão em maior acúmulo de CO2, queda nas concentrações de pressão sanguínea de O2 e

queda na SaO2.

MÉTODOS

Sujeitos

Como critérios de inclusão, os voluntários deveriam ser jovens (18-30 anos),

fisicamente ativos e possuir disponibilidade de horário para a participação das coletas. Os

critérios de exclusão consistiram em tabagismo, obesidade (IMC > 30 kg/m2) e quaisquer

patologias ou problemas osteo-articulares que representassem risco ou limitação para prática

de exercícios físicos, tais como as patologias auto-reportadas: hipertensão arterial, doença

arterial coronariana, arritmias, pós-infartado, diabetes mellitus, doença pulmonar obstrutiva

crônica, doenças ostéo-articulares limitantes.

Foram selecionados para o estudo 18 voluntários (12 homens e 6 mulheres). Os

voluntários que concordaram com os procedimentos e calendários de avaliação assinaram o

termo de consentimento livre e esclarecido (TCLE). O projeto, assim como o TCLE, foram

aprovados pelo comitê de ética em pesquisa da Universidade Estadual de Campinas, sob o

parecer número: 1.376.230.

Desenho Experimental

O estudo é caracterizado como experimental, agudo, onde foi utilizado um

desenho cruzado, no qual todos os participantes participaram de todos os protocolos

experimentais. Foram realizadas 6 visitas ao laboratório, sendo as quatro primeiras

preparatórias e as duas últimas experimentais. As sessões experimentais tiveram ordem de

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execução aleatorizadas e balanceadas, sendo: Exercício intervalado com MRFar (EI-

MRFar) e Exercício intervalado sem as válvulas da MRFar (EI).

A MRFar foi configurada para simular uma altitude de 15000 pés (4572m) para a

condição que utilizou as válvulas (EI-MRFar), pois estudos pilotos demonstraram ser a maior

configuração suportada pelos voluntários. Já condição EI utilizou a máscara, afim de manter o

mesmo volume de espaço morto que a condição EI-MRFar, porém, sem as válvulas,

permitindo que a ventilação ocorresse de maneira normal.

Todos os voluntários realizaram os testes incrementais máximos e os dois

protocolos de exercício no mesmo ciclo simulador (RacerMate®, ComputrainerTM, Seattle,

USA), no mesmo período do dia, no intuito de evitar oscilações circadianas, com as mesmas

configurações de banco, guidão e marcha, também foram orientados a não realizarem

atividades físicas extenuantes e ingerir bebidas alcoólicas ou qualquer outra droga 48 horas

antes dos testes, assim como a não consumirem bebidas estimulantes por pelo menos 6 horas

antes dos testes e se absterem de refeições duas horas antes dos testes.

Na primeira visita, os voluntários foram convidados ao laboratório onde entraram

em contato com o ambiente no qual ocorreram as sessões experimentais e foram

familiarizados com os procedimentos avaliativos e exercício, além de assinarem o TCLE.

Após a familiarização, os voluntários retornaram ao laboratório outras duas vezes para os

testes incrementais máximos, uma quarta vez para familiarização com os protocolos de

exercício com máscara (sessão idêntica a sessão EC-MRFar), para então iniciarem as sessões

experimentais. Todos os testes e sessões experimentais foram intercalados por, pelo menos,

72 horas. Os testes incrementais máximos foram realizados a fim de se obter a potência

máxima (Pmáx) utilizada para a prescrição dos exercícios utilizados nas sessões experimentais.

Em todas as sessões experimentais foram coletados os gases expirados respiração a

respiração, para tal, foi utilizado o analisador de gases CPX UltimaTM (Medgraphics®,

Minnesota, EUA).

Peça de adaptação da MRFar ao analisador automático de gases

Devido ao formato da MRFar, foi necessária a confecção de uma peça que

permitisse a comunicação entre a MRFar e o analisador de gases. A peça foi confeccionada a

partir do polímero Acrilonitrila Butadieno Estireno (ABS), utilizando a impressora 3D tipo

FDM (RepRap Prussa Mendel I3, Sethi Ind Com Prod Eletrônicos, São Paulo, Brasil). O

complexo MRFar mais a peça confeccionada possuíam como volume aproximadamente

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350ml. O testes experimentais, tanto na condição com MRFar quanto sem MRFar, ou seja,

mantendo-se a máscara, porém, removendo-se as válvulas, foram realizados com o uso da

peça, mantendo assim o mesmo volume em todas as condições. Para assegurar a devida

vedação, foi utilizado neoprene na borda interna da peça e o complexo peça mais máscara foi

vedado com fita adesiva.

Teste Incremental Máximo

O teste foi realizado no ciclo simulador (ComputrainerTM, RacerMate®, Seattle,

USA), com coleta contínua (respiração-a-respiração) dos gases (consumo de oxigênio (VO2),

dióxido de carbono (VCO2) e volume ventilatório (VE) utilizando o analisador automático de

gases (CPX UltimaTM, Medgraphics®, Minnesota, EUA).

Os procedimentos de calibração do ciclo simulador e analisador automático de

gases, assim como relação de marchas e ajustes da bicicleta foram repetidos de maneira

idêntica antes do segundo teste incremental máximo e em todas as sessões experimentais para

cada voluntário.

Os voluntários executaram um protocolo progressivo até exaustão, que consistiu

de uma fase preliminar de 5 minutos de repouso, 5 minutos de aquecimento à 50W, seguidos

de acréscimos de 25W a cada minuto. Os voluntários foram orientados a manter uma rotação

de pedal entre 70-75 rotações por minuto (RPM), quando não foi possível manter a cadência

dentro desse intervalo, foram dadas duas tentativas (estimulo verbal) para que a cadência

fosse restabelecida para o intervalo recomendado. O teste foi interrompido quando o

voluntário não conseguiu manter a cadência dentro desse intervalo numa terceira ocasião,

sendo este momento considerado como a exaustão física. Seguiu-se um período de 7 minutos

de recuperação em repouso.

Adicionalmente, durante a realização deste protocolo, foi feita a aquisição da

frequência cardíaca utilizando um transmissor cardio-frequencímetro (Polar, Kempele,

Finlândia) ligado ao analisador de gases.

O teste foi considerado máximo quando pelo menos dois dos seguintes critérios

foram atendidos: 1. Ocorrência de platô do VO2, definido como um aumento inferior a 2.1

ml/kg/min no VO2 mesmo com incremento da carga; 2. Razão de trocas respiratórias (RER) ≥

1,1; 3. Frequência cardíaca (FC) ≥ a 90% da máxima (FCmáx) predita pela idade (220 - idade);

percepção de esforço ≥ 18 segundo a Escala de Borg 6-20. Estes critérios foram baseados na

no trabalho de Howley, Bassett e Welch (1995).

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Foram realizados dois testes incrementais máximos no intuído de melhorar a

qualidade da avaliação, visto que os parâmetros identificados foram usados na prescrição das

intensidades de exercício nos protocolos experimentais, foram utilizados os valores do teste

com maior Pmáx.

Protocolo experimental

Previamente ao início do protocolo, os voluntários realizaram o tratamento da

orelha para as coletas de sangue arterializado, este tratamento será descrito com maiores

detalhes adiante. Posteriormente, houve a tricotomia e assepsia da pele para a colocação dos

eletrodos nos músculos do quadríceps. Em um segundo momento, após repouso sentado de

pelo menos 10 minutos, houveram as coletas de sangue do lóbulo da orelha e da falange distal

do dedo para as análises metabólicas. Os voluntário se posicionaram no ciclo ergômetro para

o início do teste e realizaram uma coleta passiva de gases por 7 minutos, para então darem

início a sessão experimental.

As condições EI-MRFar e EI tiveram suas intensidade estabelecida como a carga

correspondente a 40% da Pmáx e 80% da Pmáx alcançada no teste incremental. O protocolo

foi caracterizado por uma razão de 1:1, ou seja, a cada minuto realizado a 40% da Pmáx, foi

realizado um minuto a 80% da Pmáx. Ambas as sessões tiveram 20 minutos de duração,

começando sempre pela carga correspondente a 40% da Pmáx. As condições EI e EI-MRFar

iniciaram os testes a 40% da Pmáx em cadência entre 60-70 rpm, a execução do minuto

seguinte (80% da Pmáx) foi executada com cadênica entre 70-80 rpm.

Durante os protocolos experimentais, foram realizadas as coletas de gases

respiração-a-respiração, eletromiografia dos músculos do quadríceps. Foram coletadas

amostras de sangue das falanges distais dos dedos da mão nos momentos imediatamente após,

3 min, 5 min e 7 min após o término do exercício. Sangue arterializado do lóbulo da orelha

esquerda foi coletado para a análise dos metabólitos no momento imediatamente após.

Coleta e análise de sangue periférico

Para análise da concentração de lactato [Lac] foram coletadas amostras de 25μl de

sangue da falange distal dos dedos da mão, por punção com lancetas descartáveis, após

assepsia do local com álcool 70°GL. Esta coleta foi realizada nos momentos pré,

imediatamente após, 3min, 5min e 7min após o término da sessão. A cinética de coletas pós

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sessão teve o objetivo de verificar o pico de concentração, o qual foi utilizado nas análises

estatística. As amostras de sangue foram imediatamente colocadas em microtubo contendo

25μl de fluoreto de sódio (NaF) 1g% e em seguida centrifugadas por 10 min a 5000rpm

(Centrífuga Excelsa Baby I, Fanem®, São Paulo, Brasil). Utilizou-se pipeta automática para

separar o plasma sobrenadante, que foi armazenado a -80º C para posterior análise. A

concentração de lactato foi analisada com o uso de Kits comerciais (Biotecnica®, São Paulo,

Brasil) e espectrofotômetro (ELx800, Biotek®, Vermont, USA).

Para análise das variáveis gasométricas (pressão parcial dos gases sanguíneos

(PO2 e PCO2), pH, desoxihemoglobina (HHb), excesso de base (BE), hematócrito (Hct),

concentração de bicarbonato (HCO3) e saturação de O2 (SaO2) foram coletadas amostra de

aproximadamente 125μl de sangue do lóbulo da orelha por punção com lancetas descartáveis,

sendo coletado por tubo capilar (Roche, Diagnostics GmbH, Mannheim / Germany). Esta

coleta foi realizada nos momentos pré e após o término da sessão. O lóbulo da orelha foi

aquecido com uma compressa quente durante 5min no momento pré teste de modo a ativar a

circulação sanguínea e facilitar absorção da pomada vasodilatadora Finalgon Crema

(Laboratórios Fher, S.A., Barcelona, Espanha) que foi aplicada 10min antes da coleta pré

(Mollard et al., 2010). Quando necessário à pomada foi aplicada novamente antes da coleta

pós. As amostras de sangue foram imediatamente analisadas no analisador de gases

sanguíneos Cobas b 123 POC System (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim / Germany).

Coleta e Processamento dos Sinais Eletromiográficos (EMG)

Para a coleta dos sinais eletromiográficos foi utilizado o eletromiógrafo da marca

Biopac (Biopac System, Inc., Santa Barbara, CA, USA), modelo MP150 de 16 canais e

eletrodos ativos (Biopac System, Inc., CA, USA), modelo TSD-150 com relação de rejeição

do modo comum (CMRR) de >95 dB. Para a captação dos sinais foi utilizado o software

AcqKnowledge 3.8.1 (Biopac System, Inc., CA, USA.). A frequência de aquisição dos sinais

eletromiográficos foi de 2000 Hz e o filtro passa-banda de 20-500 Hz.

Os eletrodos de superfície foram fixados com fita adesiva sobre a pele nos pontos

referentes aos músculos Reto Femoral (RF) a 50% da linha da espinha ilíaca ântero-superior à

borda superior da patela, Vasto Lateral (VL) a 2/3 da linha da espinha ilíaca ântero-superior a

borda lateral da patela, e Vasto Medial (VM) a 80% da linha entre a espinha ilíaca ântero-

superior e do espaço articular na frente da borda anterior do ligamento colateral medial, do

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membro direito do voluntário, recomendações do “SENIAM – Surface ElectroMyoGraphy for

the Non-Invasive Assessment of Muscles” (Hermens et al., 2000), mantendo a distância fixa

entre os eletrodos de dois centímetros (centro a centro). O eletrodo de referência foi

posicionado na protuberância óssea da tíbia direita do voluntário. Foi realizada a assepsia da

pele no próprio laboratório visando à remoção de pilosidade e células mortas e diminuição da

impedância. Após a coleta dos sinais, foi utilizada a técnica de Root Mean Score (RMS) com

janelamento de 100 bursts. Após o tratamento, os dados foram extraídos e utilizou-se uma

rotina específica no software MATLAB para análise dos valores de RMS a cada minuto do

protocolo. O resultado da RMS de cada minuto foi normalizado pela RMS do minuto inicial

de cada protocolo. O sinal normalizado dos três músculos RF, VM e VL foram somados e

apresentados como uma única variável (SOMA QF).

Análise dos resultados

Inicialmente foi verificado a normalidade dos dados utilizando o teste Shapiro-

Wilk. Em seguida, foi utilizado a análise de variância (ANOVA two way) para medidas

repetidas. O teste Post Hoc de Tukey foi aplicado para identificar as diferenças quando

observado efeito de interação (condição X momento). Os efeitos principais de momento e

condição são indicados no texto quando significantes, um teste de Post Hoc para os efeitos

principais de momento foi usado quando apropriado. Para todas as análises estatísticas foi

utilizado software STATISTICA 6.0 (StatSoft, Inc., Tulsa, OK, USA). Os dados são

apresentados em média e desvio padrão e o valor de significância adotado para todas as

comparações foi de p<0,05.

RESULTADOS

Variáveis metabólicas

Observamos efeito interação (p=0,04) para a variável pH, sendo que ambas as

condições EI e EI-MRFar propiciaram queda no pH após a sessão (todos p<0,05), e que a

condição EI-MRFar apresentou tendência de ser menor entre as condições no momento pós

(p=0,06). A variável bicarbonato (cHCO3) não apresentou efeito de interação (p=0,21),

apresentando efeito de momento (p<0,05), sendo menor no momento pós. A variável

desoxihemoglobina (HHb) apresentou efeito de interação (p=0,04), sendo maior para ambas

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as condições no momento pós (todos p>0,05), tendo o EI-MRFar apresentado diferença entre

as condições no memento pós (p<0,05). A variável excesso de base (BE) não apresentou

efeito de interação (p=0,86), porém, apresentou efeito de momento (p<0,05), sendo menor no

momento pós. Para a variável concentração de lactato [Lac] não foi encontrada efeito de

interação (p=0,91), apresentando efeito de momento significante (p<0,05), sendo maior no

momento pós.

A variável pressão de O2 (pO2) apresentou efeito de interação (p=0,03), porém, o

teste de post hoc não identificou diferença significativa entre as condições e momentos,

destacamos a tendência (p=0,08) de queda de pO2 para a condição EI-MRFar no momento

pós. A variável pressão de CO2 (pCO2) apresentou efeito de interação (p=0,03), e embora o

Post Hoc não tenha indicado diferenças pré x pós exercício, apresentou diferença entre as

condições no memento pós (p<0,05), sendo a pCO2 maior em EI-MRFar. Houve tendência

para a condição EI-MRFar apresentar aumento de pCO2 no momento pós (p=0,06). A variável

hematócrito (Hct) não apresentou efeito de interação (p=0,63), porém, apresentou efeito de

momento (p=0,05) sendo maior no momento pós. A variável Saturação de Oxigênio (SaO2)

apresentou efeito de interação (p=0,05), sendo menor para ambas as condições com relação ao

momento pré (todos p<0,05), tendo a condição EI-MRFar apresentado menor valor em

relação a EI no memento pós (p<0,05).

TABELA 1. Variáveis metabólicas

Variável Condição Pré Após

pH EI 7,42 (0,01) 7,29 (0,05)*

EI-MRFar 7,42 (0,01) 7,26 (0,06)*

cHCO3 (mmol/L) * EI 21,69 (2,25) 15,04 (2,91)

EI-MRFar 22,10 (3,10) 16,65 (2,18)

HHb (%) EI 2,13 (0,79) 3,70 (0,89)*

EI-MRFar 2,36 (0,71) 4,92 (1,50)* †

BE (mmol/L) * EI -2,04 (1,69) -10,38 (3,45)

EI-MRFar -1,53 (2,41) -9,55 (2,85)

Lactato (mmol/L) * EI 1,33 (0,50) 9,06 (3,12)

EI-MRFar 1,66 (0,75) 9,47 (2,30)

pO2 (mmHg) EI 81,37 (7,08) 82,43 (6,54)

EI-MRFar 83,22 (4,98) 78,33 (3,44)

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pCO2 (mmHg) EI 34,18 (4,55) 32,47 (3,61)

EI-MRFar 35,23 (4,40) 36,99 (3,62)†

Hct (%)* EI 44,06 (3,88) 49,26 (4,69)

EI-MRFar 44,72 (3,69) 50,33 (4,26)

SaO2 (%) EI 97,83 (0,79) 96,23 (0,91)*

EI-MRFar 97,58 (0,73) 94,99 (1,54)* †

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). * após o valor numérico denota diferença encontrada no Post

Hoc para o efeito de interação entre momentos (pré x pós) para a mesma condição (p<0,05). * após o nome da

variável denota diferença encontrada no efeito principal de momento (p<0,05). † Denota diferença significativa

entre condições diferentes encontradas no Post Hoc do efeito de interação (EC x EC-MRFar) (p<0,05).

Variáveis Ventilatórias

O consumo de O2 absoluto (VO2abs) apresentou efeito de interação entre as

condições, (VO2abs p<0,05) (FIGURA 1), porém, o teste de Post Hoc não identificou

diferença entre as condições para nenhum momento (todos p>0,05). A variável ventilação

(VE) apresentou efeito de interação (p<0,05), sendo que a condição EI-MRFar apresentou

menor VE do segundo ao vigésimo minuto de teste (todos p<0,05) (FIGURA 2). A variável

frequência respiratória (RR) apresentou efeito de interação (p<0,05), foi encontrado para a

condição EI-MRFar menor RR do segundo ao vigésimo minuto de teste (todos p<0,05)

(FIGURA 3). A variável pressão expirada de CO2 (PETCO2) apresentou efeito de interação

(p<0,05), a condição EI-MRFar apresentou maiores valores do terceiro ao vigésimo minuto de

teste (todos p<0,05) (FIGURA 4). A variável pressão expirada de O2 (PETO2) apresentou

efeito de interação (p<0,05), observamos que a condição EI-MRFar apresentou menores

valores do segundo ao vigésimo minuto de teste (todos p<0,05). Foi identificado também

diferença significativa para a variável PETO2 para o momento pré (p<0,05) entre as

condições, as diferenças estão ilustradas no FIGURA 5.

FIGURA 1 – Parâmetros ventilatórios, consumo de Oxigênio

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V O 2 a b s o lu to

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

3 0 0

6 0 0

9 0 0

1 2 0 0

1 5 0 0

1 8 0 0

2 1 0 0

2 4 0 0

2 7 0 0

E I

E I-M R F a r

T e m p o (m in )

VO

2(m

L/m

in)

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). A linha tracejada indica valor médio máximo alcançado no

teste incremental (2298,44 ml/min).

FIGURA 2 – Parâmetros ventilatórios, Ventilação

V E B T P S

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

5 0

1 0 0

E I

E I-M R F a r

T e m p o (m in )

VE

BT

PS

(L

/min

)

††

††

††

††

††

††

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Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). †Denota diferença significativa entre condições diferentes

(EI x EI-MRFar) identificadas pelo post-hoc (p<0,05). A linha tracejada indica valor médio máximo alcançado

no teste incremental (101,21 l/min).

FIGURA 3 – Parâmetros ventilatórios, Frequência Respiratória

RR

T e m p o (m in )

Fre

qu

en

cia

Re

sp

ira

tória

(fr

/min

)

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

0

2 0

4 0

6 0

E C

E C -M R F a r

† †† †

††

† †† †

† †† †

††

††

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). †Denota diferença significativa entre condições diferentes

(EI x EI-MRFar) identificadas pelo post-hoc (p<0,05). A linha tracejada indica valor médio máximo alcançado

no teste incremental (49,72 br/min).

FIGURA 4 – Parâmetros ventilatórios, Pressão Expirada de Dióxido de Carbono

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P E T C O 2

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

3 0

4 0

5 0

6 0

7 0E I

E I-M R F a r

T e m p o (m in )

PE

TC

O2

(mm

Hg

)

††

††

††

††

††

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). †Denota diferença significativa entre condições diferentes

(EI x EI-MRFar) identificadas pelo post-hoc (p<0,05). A linha tracejada indica valor médio máximo alcançado

no teste incremental (37 mmHg).

FIGURA 5 – Parâmetros ventilatórios, Pressão Expirada de Oxigênio

P E T O 2

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

8 0

9 0

1 0 0

1 1 0

E I

E I-M R F a r

T e m p o (m in )

PE

TO

2(m

mH

g)

†† †

† † † † †† † † † † † † † † †

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Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). †Denota diferença significativa entre condições diferentes

(EI x EI-MRFar) identificadas pelo post-hoc (p<0,05). A linha tracejada indica valor médio máximo alcançado

no teste incremental (102 mmHg).

Variável eletromiográfica

A variável eletromiográfica foi composta pela somatória dos sinais normalizados dos

três músculos analisados, reto femoral, vasto medial e vasto lateral. A análise SOMA QF nos

revela que houve efeito de interação (p=0,05), o teste de Post Hoc indica diferença

significativa entre as condições para o vigésimo minuto, tendo a condição EI-MRFar

apresentado menor valor de RMS (p=0,02). O Post Hoc identificou também diferenças

significativas entre os momentos, tendo a condição EI apresentado menores valores para os

minutos 3,5,7,9,11,13,15,17,19 (todos p<0,05) com relação ao momento pré. Já a condição

EI-MRFar apresentou valores significativamente menores, com relação ao momento pré, nos

minutos 3,5,7 e do nono ao vigésimo minuto (todos p<0,05). Os dados estão apresentados no

FIGURA 6.

FIGURA 6. Sinal eletromiográfico SOMA QF.

S O M A R M S Q F

T e m p o

SO

MA

RM

S (

%)

2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4 1 5 1 6 1 7 1 8 1 9 2 0

0

1

2

3

4

5

6

E I

E I-M R F a r

** * * * * * * *

# # # #

#

#

#

#

#

#

#

#

#

#

#

Dados estão expressos em Média (Desvio Padrão). * Denota diferença significativa (p<0,05) com relação ao

momento pré para a condição EI. # Denota diferença significativa (p<0,05) com relação ao momento pré para a

condição EI-MRFar. † Denota diferença significativa (p<0,05) entre condições diferentes (EI x EI-MRFar).

Valores identificados pelo Post Hoc de Tukey.

Discussão

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No presente trabalho foram investigadas as respostas metabólicas, ventilatórias e

eletromiográficas do exercício intervalado realizado com MRFar. Foi demonstrado

anteriormente por nosso grupo que as mudanças causadas na dinâmica respiratória estão

ligadas às mudanças metabólicas encontradas no exercício aeróbio contínuo quando realizado

com uso da MRFar. Neste estudo utilizamos o exercício intervalado, no qual as respostas

ventilatórias fossem exacerbadas, afim de observar as possíveis mudanças que ocorreriam nos

metabólitos e sinal eletromiográfico. Partimos da hipótese inicial de que os prejuízos causado

na mecânica ventilatória pelo uso da máscara causariam o acumulo excessivo de CO2 e H+ no

protocolo intervalado, o que, por sua vez, levaria a queda na SaO2, que não foi observada no

exercício continuo de menor exigência sobre a ventilação.

Como principais resultados encontramos que o uso da máscara foi capaz de

aumentar os valores de HHb (p>0,05) de pCO2 (p>0,05) e diminuir os valores de SaO2

(p<0,05) quando comparados com EI. Foram encontradas ainda tendência para menores

valores de pH sanguíneo e menor pO2 para a condição que utilizou a MRFar. Como

anteriormente, foram encontradas queda significante na VE, RR, PETO2, assim como

aumento da PETCO2 com o uso da MRFar. Como resultado adicional, foi demonstrada queda

na atividade eletromiográfica para a condição que utilizou a MRFar.

Foi demonstrado anteriormente (artigo 1 desta dissertação) o maior consumo de

O2 durante o exercício contínuo para a condição com MRFar, este maior consumo estaria

relacionado com a maior requisição da musculatura inspiratória, o que ficou indicado pela

pior dinâmica respiratória (menor VE) e maior tempo em contração da musculatura

respiratório (menor RR) para a condição que utilizou a MRFar. No presente estudo, embora

os valores de VE e RR também tenham sido menores para a condição EI-MRFar (p<0,05 para

ambos), não foram encontradas diferenças entre condições para o consumo de O2. Para tal,

argumentamos que a demanda muscular do quadríceps tenha sido maior durante o exercício

intervalado, o que tornou o consumo de O2 pela musculatura respiratória desprezível. Porém,

medidas diretas da ativação dos músculos inspiratórios não foram feitas, tornando estes

argumentos meramente especulativos.

Assim como em trabalhos anteriores (Granados et al., 2016), é possível observar o

aumento na PETCO2 no EI-MRFar, concomitantemente observamos uma redução da PETO2,

quando comparada com a condição EI. Essa diferença de pressão dos gases não pode ser

explicada pela presença do volume morto não fisiológico causado pelo complexo da máscara

mais peça de ligação, mas está diretamente relacionada a presença das válvulas, uma vez que

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68

ambos os protocolos foram realizados com o mesmo volume de espaço morto (350 ml) e

diferenciados pela presença ou não das válvulas.

Estudos que utilizam espaço morto não anatômico para o treinamento da

musculatura respiratória tem mostrado ser uma ferramenta segura entre indivíduos saudáveis

(Koppers et al., 2006). A respiração do próprio ar exalado, através da adição de espaço morto

ao sistema respiratório é conhecida como uma maneira eficiente de aumentar a pCO2

sanguíneo e reduzir o pH, o que é caracterizado como acidose ventilatória ou respiratória

(Smolka et al., 2014). Esses estudos empregam implementos de aproximadamente 1 litro de

volume (Koppers et al., 2006; Smolka et al., 2014) para alcançar valores de pCO2 maiores que

45mmHg, o que caracteriza hipercapnia. No presente estudo o uso da MRFar causou aumento

das concentrações de CO2 diluídos no sangue (p<0,05), porém, os valores foram aquém dos

propostos pela literatura para serem considerados como hipercapnia (EI 32,47±3,61mmHg e

EI-MRFar 36,99±3,62mmHg). Foi encontrada também tendência para menor valor de pH

para a condição EI-MRFar (p=0,06). Esses dados nos revelam o potencial do emprego da

MRFar como implemento de TMR induzido pelo aumento do espaço morto, tendo as válvulas

o papel de potencializar este efeito.

Nota-se que os maiores valores de CO2 sanguíneo não interferiram de maneira

significativa nos valores de Hct, BE, cHCO3. Porém, as variáveis SaO2 e HHb mudaram

significativamente na condição EI-MRFar (HHb p=0,04 e SaO2 p=0,05). A maior presença de

CO2 na corrente sanguínea pode acarretar a acidose respiratória, como discutido anteriormente

(Smolka et al., 2014). Esses valores elevados de CO2 podem ter contribuído para queda do pH

(p=0,06), uma vez que este, em contato com a água, torna-se ácido carbónico (Hall, 2015).

Tendo em vista a ação desse processo, espera-se que os valores de pH diminuam em

condições que apresentem maiores valores de pCO2. Os maiores valores de pCO2 e a queda

modesta, porém não significante de pH, indicam que outros mecanismos estão sendo

responsáveis pelo tamponamento dos prótons de H+ excedentes na condição que utilizou a

MRFar. Destacamos o aumento da desoxihemoglobina (HHb) para a condição EI-MRFar

(p=0,04). A hemoglobina possui ação tamponante, sequestrando o excesso de H+ na corrente

sanguínea, isto acontece em condições de baixa afinidade da hemoglobina com O2, o que

ocorre durante o exercício ou em situações de baixo pH (Hall, 2015). Foi constatado neste

trabalho a diminuição de afinidade da hemoglobina pelos menores valores de SaO2 após o

exercício para ambas as condições, EI e EI-MRFar (ambos p<0,05), tendo a condição EI-

MRFar obtido os menores valores de SaO2 (p=0,05).

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69

O uso da máscara, em exercício intervalado, não promoveu o aumento adicional

do sistema energético anaeróbio lático, refletido pelos valores iguais de [Lac] para ambas as

condições (EI 9,06 mmol/L; EI-MRFar 9,47 mmol/L), fato que torna nosso achado acerca da

ativação eletromiográfica curioso. Foi encontrado no presente trabalho, diferença significativa

para a ativação da soma dos músculos avaliados (SOMA QF) tendo a condição EI-MRFar

apresentado menor ativação eletromiográfica no último minuto de teste (p<0,05). Estudos tem

demonstrado que a fadiga pode ser representada pela queda do sinal RMS, o que nos leva a

argumentar que o protocolo de EI-MRFar foi mais intenso que EI, uma vez que o sinal de

RMS se apresenta menor (St Clair Gibson e Noakes, 2004; Amann, 2012).

Este fato pode estar associado com a fadiga central. É relatado na literatura (St

Clair Gibson e Noakes, 2004) que o acumulo de metabólitos é detectado pelos

metaboreceptores, que por sua vez, possuem papel na estimulação central através de vias

aferentes III e IV. A maior estimulação de metaboreceptores derivada da acidose respiratória

pode ter influenciado na resposta eferente de estimulação dos neurônios motores alpha, o que

refletiria em menor sinal de RMS (St Clair Gibson e Noakes, 2004; Amann, 2012).

Os achados deste trabalho corrobora os achados de estudo crônico de Porcari et al.

(2016), uma vez observado que o exercício com a MRFar exige do sistema de tamponamento,

tendo nele, possivelmente, suas adaptações benéficas ao desempenho. As adaptações do

sistema tampão estão relacionadas à quantidade de proteínas envolvidas no transporte de

prótons H+ e na quantidade de tampões presentes no sangue (Juel, 2008). Embora Porcari et

al. (2016) não tenha avaliado estas variáveis, foram demonstradas adaptações relacionadas a

estes mecanismos, sendo que o treinamento com o uso da máscara proporcionou aumento da

potência empregada nos limiares ventilatórios 1 e 2, um indicativo de melhora no sistema de

controle ácido/base (Meyer et al., 2004).

São destacadas algumas limitações no presente trabalho. Primeiro, as variáveis

obtidas a partir de amostras de sangue ilustram alterações sistêmicas, mas podem não

representar alterações no músculo. Em segundo lugar, os dados de ativação muscular

avaliados foram obtidos a partir da eletromiografia de superfície e esta não é uma medida

direta da ativação muscular e/ou da unidade motora.

Por fim, neste estudo foram investigados os efeitos do uso da MRFar sobre as

variáveis ventilatórias, metabólicas e eletromiográficas, frente ao exercício intervalado de alta

intensidade. Destaca-se as variações encontradas para as medidas ventilatórias, metabólicas e

eletromiográficas quando comparada com o uso da MRFar em exercício contínuo (artigo 1

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70

desta publicação). Salienta-se também o uso da máscara em propiciar acidose respiratória, o

que possivelmente refletiu na queda da ativação eletromiográfica, indicando maior nível de

fadiga com o uso da MRFar. Concluímos que o uso deste implemento cause perturbações no

sistema de controle ácido/base do organismo. Mais estudos com desenhos crônicos se fazem

necessários afim de se estabelecer as ligações entre as respostas agudas e as adaptações

crônicas.

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7. CONCLUSÃO GERAL

A Máscara de Restrição ao Fluxo de ar (MRFar) mostrou-se incapaz de causar

hipóxia a valores que mimetizem o treinamento em elevadas altitudes (<90% da SaO2)

(Levine e Stray-Gundersen, 2006). Este foi o primeiro trabalho a realizar medidas diretas de

saturação de oxigênio (SaO2), confirmando as hipóteses levantadas pela literatura (Granados

et al., 2016; Porcari et al., 2016; Warren et al., 2017). Embora tenha sido encontrado, no

segundo estudo, que o EI-MRFar propiciou queda significativa da SaO2, a mesma ainda

encontra-se acima dos valores preditos para o treinamento em hipóxia (EI-MRFar

94,99±1,54%).

Encontramos evidências de que o uso da máscara induz significante aumento da

pressão sanguínea de dióxido de carbono (pCO2) tanto para o exercício contínuo quanto para

o exercício intervalado. Foram encontradas também que o uso da MRFar causou alterações

consistentes na mecânica ventilatória, demonstradas pela queda na VE e na RR, o que reforça

o argumento do uso da MRFar como implemento de TMR. Acreditamos que o uso da máscara

cause estímulo adicional ao sistema ácido/base, tendo nele seus prováveis mecanismos para

adaptações benéficas ao desempenho, sendo essas alterações protocolo dependente, tendo

apresentado diferenças entre o protocolo contínuo e o intervalado. Identificamos que os

fatores ventilatórios são primordiais para as mudanças metabólicas e eletromiográficas

observadas, como constatado pelo achado de queda significante na SaO2 para a condição EI-

MRFar e não na EC-MRFar.

Por fim, sugerimos que estudos longitudinais controlados, empregando diferentes

protocolos, sejam realizados afim de atestar as adaptações frente ao treinamento com este

implemento. Sugerimos ainda que medidas diretas da capacidade respiratória e testes

específicos de desempenho sejam realizados para que sua real influência no desempenho seja

atestada.

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9. ANEXOS

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ANEXO 1 – Folder de divulgação

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ANEXO 2 – Parecer Consubstanciado do Comitê de Ética em Pesquisa

ANEXO 3 – Termo de Consentimento Livre e Esclarecido

TERMO DE CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO

Você está sendo convidado a participar como voluntário de um estudo. Este documento,

chamado Termo de Consentimento Livre e Esclarecido, visa assegurar seus direitos como

participante e é elaborado em duas vias, uma que deverá ficar com você e outra com o

pesquisador. Por favor, leia com atenção e calma, aproveitando para esclarecer suas dúvidas.

Se houver perguntas antes ou mesmo depois de assiná-lo, você poderá esclarecê-las com o

pesquisador. Se você não quiser participar ou retirar sua autorização, a qualquer momento,

não haverá nenhum tipo de penalização ou prejuízo.

PROJETO DE PESQUISA: EXERCÍCIO E TREINAMENTO COM O USO DE

IMPLEMENTOS DE RESTRIÇÃO AO FLUXO DE AR

RESPONSÁVEL PELO PROJETO: João Francisco Barbieri

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LOCAL DO DESENVOLVIMENTO DO PROJETO: Faculdade de Educação Física

(FEF/UNICAMP)

JUSTIFICATIVA E OBJETIVOS

É de meu conhecimento que este projeto será desenvolvido em caráter de pesquisa científica.

O objetivo é verificar a influência nas respostas metabólicas e no desempenho para diferentes

exercícios ou treinamento ou treinamento crônico, quando esses são associados ou não ao uso

de implementos de restrição ao fluxo de ar.

PROCEDIMENTOS

O projeto prevê a realização de duas fases, sendo a 1° Fase constituída por exercícios agudos,

exigindo-se dos voluntários visitas pontuais ao laboratório, estas serão previamente mercadas.

Já a 2° Fase será constituída por treinamento crônico de 8 semanas, exigindo do voluntário

visitas rotineiras ao laboratório durante este período.

Os procedimentos do estudo serão realizados nas dependências da FEF/UNICAMP em datas

previamente agendadas, sendo os participantes devidamente orientados, tanto em relação aos

benefícios como em relação aos sinais, sintomas e manifestações de intolerância ao esforço

que poderão ou não apresentar. Antes do início dos experimentos, os participantes deverão

apresentar atestado médico que ateste plenas condições para a prática de atividade física.

Após a entrega do atestado médico e a devida liberação para a prática de atividade física,

houve um sorteio para a alocação dos voluntários nas seguintes condições experimentais.

1. Condição Exercício contínuo com Implemento de Restrição ao Fluxo de ar (EC-

IRFar);

2. Condição Exercício contínuo sem Implemento de Restrição ao Fluxo de ar (EC);

3. Condição Exercício Intervalado com Implemento de Restrição ao Fluxo de ar (EI-

IRFar);

4. Condição Exercício Intervalado sem Implemento de Restrição ao Fluxo de ar (EI);

5. Condição Exercício Resistido com Implemento de Restrição ao Fluxo de ar (ER-

IRFar);

6. Condição Exercício Resistido sem Implemento de Restrição ao Fluxo de ar (ER).

Grupos que irão constituir a segunda fase:

1. Condição treinamento com Implemento de Restrição ao Fluxo de ar (T-IRFar)

2. Condição treinamento sem Implemento de Restrição ao Fluxo de ar (T)

3. Condição Controle

Após o sorteio, os voluntários serão submetidos a avaliações e familiarização com os

exercícios e equipamentos, isto tudo acontecerá dentro das dependências da FEF/UNICAMP.

As avaliações e familiarização estão previstas para serem concluídas em, no máximo, 3

semanas para a 1° Fase. As mesmas avaliações serão realizadas ao término da 2° Fase. Serão

as seguintes:

1. Composição corporal pelo equipamento Body Pod, trata-se de uma câmara fechada,

onde o voluntário irá adentrar com a menor quantidade de roupa possível e sentar-se, o ar

deslocado nesse procedimento será avaliado pelo equipamento, e convertido através de uma

equação em informações sobre a composição corporal do indivíduo.

2. Realizarão a familiarização com o teste em ciclo ergômetro ou esteira, será um teste

carga incremental até a exaustão voluntária. Nesta mesma visita o voluntário será

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familiarizado com os equipamentos de musculação, onde receberá orientações com relação a

correta execução dos movimentos.

3. Realizarão teste cardiorrespiratório em ciclo-ergômetro ou esteira, o teste será

realizado com uma máscara acoplada a um analisador de gases. Este teste será fundamental

para a determinação do Volume de Oxigênio máximo (VO2 máx). Um reteste deste mesmo

protocolo será realizado após 72 horas para confirmação dos valores.

4. Será realizado um teste de 1 repetição máxima para os exercícios supino reto e leg-

press, este teste também será refeito após 72 horas para confirmação dos valores.

5. Para a 1° Fase serão 6 diferentes protocolos experimentais, ou seja, o voluntário

visitará o laboratório em 6 momentos diferentes, todos separados por ao menos 72 horas, a

ordem de execução dos protocolos será aleatorizada: EC-IRFar e EC terão suas intensidades

estabelecida como a velocidade ou carga correspondente a 60-70% VO2max, que será mantida

constante durante todo o protocolo. Enquanto que as condições EI-IRFar e EI terão suas

intensidades estabelecida como a velocidade ou carga correspondente a 60-90% VO2max,

sendo o protocolo intervalado realizado em uma proporção de 4:1, ou seja, a cada 4 minutos

de atividade em uma intensidade correspondente a 60% do VO2max teremos 1 minuto de

atividade a intensidade correspondente a 90% do VO2max. Todos os protocolos serão

precedidos de aquecimento de 5 minutos a velocidade de 6km.h-1 ou 50w. Para equalizar o

volume das condições, todos irão completar 25 minutos de exercício excluindo aquecimento.

Por sua vez, as condições ER-IRFar e ER terão suas intensidades estabelecidas como a carga

em quilos correspondente a 70% 1RM, que será mantida constante durante todo o protocolo.

Ambos os protocolos de exercício resistido serão constituídos de 2 series de 8 – 12 repetições,

com 1 minuto e 30 segundos de pausa entre séries e exercícios, para todos os 6 exercícios

(supino reto, puxador alto, elevação lateral, leg press, cadeira extensora e cadeira flexora).

6. Durante os protocolos experimentais ocorrerão coletas de sangue da ponta dos dedos

(5 coletas ao total) assim como será captado o sinal eletromiográfico do músculo da coxa dos

voluntários e a variabilidade cardíaca 20 minutos antes e 20 minutos após as sessões de treino

da 1° Fase. Estes procedimentos serão refeitos ao final da 2° Fase.

DESCONFORTOS E RISCOS

Os testes deste estudo são seguros e bem tolerados, os riscos envolvidos são baixos. Porém,

podem ocorrer alguns desconfortos como dores de cabeça, tonturas e cansaço, todos

transitórios.

O treinamento com restrição ao fluxo de ar mostrou-se em estudos prévios como bem seguro

no que tange possíveis riscos e desconfortos. Sendo usado inclusive em pacientes com

patologias pulmonares obstrutivas crônicas (DPOCs).

BENEFÍCIOS

Não haverá compensação financeira pela participação do voluntário neste estudo. Contudo, a

contribuição do participante ajudará a melhor compreensão do efeito do uso de um

implemento de restrição ao fluxo de ar durante o exercício físico e o treinamento. Além disso,

o participante receberá um relatório contendo informações sobre seu condicionamento físico,

composição corporal e desempenho nos testes.

ACOMPANHAMENTO E ASSISTÊNCIA

Durante todo o desenvolvimento do projeto os participantes serão acompanhados de

profissionais de Educação Física aptos para a assistência necessária, onde todas as dúvidas

que surjam no decorrer do projeto possam ser prontamente sanadas.

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SIGILO E PRIVACIDADE

Todas as informações obtidas durante as avaliações laboratoriais e sessões de exercício do

programa de treinamento serão mantidas em sigilo e não poderão ser consultadas por pessoas

leigas. As informações assim obtidas somente serão utilizadas para fins de pesquisa científica,

tendo sua privacidade sempre resguardada.

RESSARCIMENTO

Todos os custos com o deslocamento até o local de realização das avaliações do treinamento

físico, com como outros gastos adicionais não relacionados ao desenvolvimento do projeto,

não serão de responsabilidade dos pesquisadores.

CONTATO

Em caso de dúvida sobre o estudo, você poderá entrar em contato com o pesquisador

responsável, João Francisco Barbieri, pelo telefone (11) 99491-4733 ou pelo e-mail

[email protected]

Em caso de denúncias ou reclamações sobre sua participação e sobre questões éticas do

estudo, você pode entrar em contato com a secretaria do comitê de ética em pesquisa (CEP da

UNICAMP: Rua Tessália Vieira de Camargo, 126; CEP 13083-887, Campinas – SP; Tel:

3521-8936; FAX (19) 3521-7187: [email protected]

CONSENTIMENTO LIVRE E ESCLARECIDO

Após ter sido esclarecido sobre a natureza da pesquisa, seus objetivos, métodos, benefícios

previstos, potenciais riscos e os possíveis incômodos que esta possa acarretar, aceito

participar:

Nome do(a) participante:

Data:_____/_____/_____

____________________________

Assinatura do Participante

RESPONSABILIDADE DO PESQUISADOR

Asseguro ter cumprido as exigências de resolução 466/2012 CNS/MS e complementares na

elaboração do protocolo e na obtenção deste Termo de Consentimento Livre e Esclarecido.

Asseguro, também, ter explicado e fornecido uma cópia deste documento ao participante.

Informo que o estudo foi aprovado pelo CEP perante o qual o projeto foi apresentado.

Comprometo-me a utilizar o material e os dados obtidos nesta pesquisa exclusivamente para

as finalidades previstas neste documento ou conforme consentimento dado pelo participante .

_________________________________________Data_____/_____/_____

Assinatura do Pesquisador

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84

______________________ _____________________

Rubrica do pesquisador Rubrica do Participante