EFEKTI AKUTNE PRIMENE LOSATRANA, … Archive/69/5-6/01-Bogunovic.pdf · Kroz kateter plasiran u jugularnoj veni, naglo je ubrizgano 0,2 ml hladnog ... SAP, DAP i MAP su značajno

323

* Rad primljen za štampu 23.12.2015.**NatalijaBogunović,masterbiol.;drsc.biol.ZoranMiloradović,naučnisavetnik;drsc.med.ĐurđicaJovović,naučnisavetnik;drsc.biol.NevenaMihailović-Stanojević,naučnisavetnik;dr sc. biol.,Milan Ivanov, naučni saradnik; Una JovanaVajić, dipl. ing. tehnol., istraživačsaradnik; Danijela Karanović, dipl. biol., istraživač saradnik; dr sc. biol. Jelica Grujić-Milanović*, viši naučni saradnik; Grupa za Kardiovaskularna Istraživanja, Laboratorija zaEksperimentalnuHipertenziju, Institut zaMedicinska IstraživanjaUniverziteta uBeogradu,Beograd,Srbija

ORIGINALNI RAD / ORIGINAL PAPER

DOI:10.2298/VETGL1506323B UDC:616.12-008.331.1-085

EFEKTI AKUTNE PRIMENE LOSATRANA, ANTAGONISTA ANGIOTENZIN II TIP 1 RECEPTORA, NA HEMODINAMIKU I PARAMETRE OKSIDATIVNOG

STRESA U MODELU MALIGNE HIPERTENZIJE PACOVA* THE EFFECTS OF ACUTE ADMINISTRATION OF LOSARTAN, ANGIOTENSIN II

TYPE-1 RECEPTOR ANTAGONIST, ON HEMODYNAMICS AND OXIDATIVE STRESS PARAMETERS IN MALIGNANT HYPERTENSIVE RATS

Natalija Bogunović, Zoran Miloradović, Đurđica Jovović, Nevena Mihailović-Stanojević, Milan Ivanov, Una Jovana Vajić, Danijela Karanović,

Jelica Grujić-Milanović**

Maligna hipertenzija predstavlja posebno težak oblik hipertenzije čija patogeneza nije u potpunosti razjašnjena. Cilj naše studije bio je ispitivanje uloge Angiotenzina II (Ang II) u regulaciji hemodinamskih i parametara oksidativnog stresa u modelu maligne hipertenzije. Mužjaci odraslih pacova su podeljeni u tri grupe: normotenzivne Wistar pacove, kontrolne hipertenzivne (SHR) i losartanom tretirane hipertenzivne pacove (SHR+LOS). Kontrolna i SHR grupa su primile po jednu bolus dozu fiziološkog rastvora, dok je SHR+LOS grupa primila losartan, receptorni blokator Ang II . Nakon toga su mereni krvni pritisak, minutni volumen srca (MV), karotidni protok krvi (KPK) i odredjivani odgovarajući otpori: ukupni periferni otpor (UPO) i karotidni vaskularni otpor (KVO). Parametri oksidativnog stresa: aktivnost katalaze (CAT), aktivnost superoksid dismutaze (SOD) i marker lipidne peroksidacije (TBARS) su određivani iz uzoraka krvi. Tretman losartanom je značajno snizio vrednost krvnog pritiska. Nije došlo do značajnih promena vrednosti MV ni KPK, ali je tretman losartanom doveo do smanjenja UPO i KVO. U ovoj grupi je uočena tendencija povećanja aktivnosti SOD ka vrednostima normotenzivnih životinja, ali nije bilo promena u vrednostima CAT i TBARS. Naši rezultati pokazuju

324

Vet.glasnik69(5-6)323-335(2015)BogunovićNatalijaisar.:Efektiakutneprimenelosatrana,antagonistaAngiotenzinIItip1receptora,nahemodinamikuiparametre...

da jednokratna aplikacija losartana ima snažan hipotenzivni efekat i da Ang II igra značajnu ulogu u mehanizmima maligne hipertenzije, delimično preko antioksidativnog delovanja.

Ključne reči: losartan, maligna hipertenzija, hemodinamika, oksidativni stres

Esencijalnahipertenzija jeheterogenporemećaj,okarakterisandugoročnopovišenim sistolnim arterijskim pritiskom (SAP) iznad 140mmHg i dijastolnimarterijskimpritiskom(DAP)višimod90mmHg(VikrantiTiwari,2011).Sindrommaligne hipertenzije predstavlja naročito težak oblik hipertenzije (SAP>200;DAP>130mmHg)(Benderisar.,2010).Zbogoštećenjaorgana,kaoštosulezijenabubrezimaikrvnimsudovima,prisutnajevisokastopasmrtnostiuranimfazamaovebolesti,štootežavapostavljanjedijagnozeirazvojadekvatneterapije.Čestofatalanishodjemogućvećtokomprvegodine,ukolikosebolestneleči(Ahmedisar.,2014).

Pacovisaurođenomhipertenzijom(engl.spontaneouslyhypertensiverats-SHR) se odlikuju sličnim progresivnim tokom hipertenzije i prehipertenzivnomfazomkaoipacijenti,zbogčegapredstavljajudobremodelezastudijevisokogkrvnog pritiska (Doggrell i Brown, 1998). Životinje sa malignom hipertenzijommogu biti selekcionisane u sukcesivnim generacijama SHR radi proučavanjaovogpatološkogstanja(Okamotoisar.,1991).

Renin-angiotezinsistem(RAS)igraznačajnuuloguubrojnimporemećajima,uključujućihipertenziju.Reninoslobođenizoštećenihbubregadovodidopove-ćanog lučenjaAngiotezina II (AngII), a samim tim i aldosterona, što uzrokujeznačajan porast krvnog pritiska i pojavumaligne hipertenzije (Laragh, 2001).Pojačana stimulacija efektornih receptora za AngII tipa 1 (AT1 receptori),posledicajepovišeneaktivnostiRASipovišenognivoaAngII(Xuisar.,2009).Losartan,nepeptidniantagonistAT1receptora,specifičnodelujevezujućisezapreglomerularneipostglomerularnearteriole,štojepraćenosniženjempritiskauglomerulu(Xuisar.,2009).

Brojne studije su pokazale da oksidativni stres igra značajnu ulogu upatogenezi različitih kardiovaskularnih komplikacija izazvanih hipertenzijom(Lassègue i Clempus, 2003). AngII, vezivanjem za AT1 receptore stimulišerazličitesignalneputeveipromovišeformiranjereaktivnihvrstakiseonika(ROS,eng.).Esencijalnahipertenzijaječestopovezanasapovišenimstepenomlipidneperoksidacijeipromenamauoksidativnomstatusu,implicirajućitimedaoksidativnistres igra značajnu ulogu i u patogenezi esecijalne hipertenzije (Russo i sar.,1998).CiljnašestudijejebioispitivanjeulogeAngIIuregulacijihemodinamskihiparametaraoksidativnogstresaueksperimentalnojmalignojhipertenziji.

Uvod / Introduction

325


Ueksperimentusukorišćeniodrasli pacoviWistar iSHRsojeva,muškogpola, prosečne telesne mase oko 300 g, odgajani u vivarijumu Institutaza medicinska istraživanja Univerziteta u Beogradu. Životinje su hranjenestandardnom hranom za laboratorijske životinje (Veterinarski zavod, Subotica,Srbija).Korišćenesusamojedinkesadijastolnimpritiskomvišimod130mmHg,štosesmatragraničnomvrednošćuzamalignuhipertenziju(Benderisar.,2010).SvieksperimentinaživotinjamasuizvođeniusaglasnostisaZakonomodobrobitiživotinja(“Sl.glasnikRS”,br.41/2009)iodobrenjemMinistarstvapoljoprivredeizaštiteživotnesredine(Broj:323-07-02450/2014-05).Eksperimentisu izvođeninadživotinjamautotalnojanesteziji.Anestetik,natrijum-pentobarbital(Nembutal)jedavanintraperitonealnoudoziod35mg/kgtelesnemase.

Eksperimentalne grupe i dizajn / Experimental groups and design

Životinje su bile podeljene u tri eksperimentalne grupe: Prvu grupunormotenzivnipacovisojaWistar(Wistar,n=7).Drugagrupakontrolnispontanohipertenzivni pacovi SHR (SHR, n=8), treća SHR tretirani losartanom (SHR +LOS, n=8). PacoviWistar i SHR grupe su jednokratno primili dozu od 0,2mlfiziološkog rastvora u bolusu, dok su životinje SHR+LOS grupe primile na istinačindozulosartana(30mg/kgt.m.)rastvorenogu0,2mlfiziološkograstvora.

Hemodinamska merenja / Haemodynamic measurements

Sistolni, dijastolni i srednji arterijski pritisak (SAP,DAP iMAP) sumerenikanuliranjemlevefemoralnearterijePE-50kateterom(Clay-AdamsParsippany,NY,USA)ipovezanisauređajemzaregistracijuhemodinamskihsignala(9800TCRCardiomaxIII-TCR,Columbus,OH,USA).Merenjasuvršenapredavanjabolusa,kaoiu15.,30.i60.minutunakonaplikacije.

Karotidniprotokkrvi (KPK)meren jepomoćuultrazvučnesondedijametra1mm(1RB),postavljeneokodesnekarotidnearterijepovezanesaregistratoromprotoka(TransonicT106SmallAnimalFlowmeter,TransonicSistemInc.,Ithaca,USA).Karotidnivaskularniotpor (KVO) računat jekaokoličniksrednjegarterij-skogpritiskaikarotidnogprotokaizraženummHgminkg/ml.

Minutnivolumensrca(MV)jemerenmetodomtermodilucije.KanuliranajejugularnavenapolietilenskimkateteromPE-50,zatimjeubačentermosenzorulevukarotidnuarterijuipovezansaCardiomaxIIIuređajem.Drugitermosenzor,povezansaistimuređajem,jeubačenuposudusahladnimfiziološkimrastvorom.Kroz kateter plasiran u jugularnoj veni, naglo je ubrizgano 0,2 ml hladnogfiziološkog rastvora. Na osnovu promene temperature krvi životinje u jedinicivremenaizračunatjeMV,kojijezatimizraženuml/min/kg.Ukupniperiferniotpor(UPO)računatjenaosnovuodnosaMAPiMViizraženummHgminkg/ml.

Materijal i metode rada / Material and methods

326

Biohemijski parametri / Biochemical parameters

Nakonhemodinamskihstudija,uzorcikrvisuuzetizabiohemijskuanalizuuz korišćenje Litijum-heparin (Li-heparin, Sigma, USA) kao antikoagulanta.Uzorcikrvisucentrifugirani(UltracentrifugaHeraeusMegafuge1.0R),na4000obrtaja,na4˚C,tokom20min,nakončegasueritrocitiizdvojeni,auzorciplazmesakupljeni. Istaloženi eritrociti su resuspendovani, apotomcentrifugirani još triputasaponovnimodlivanjemsupernatanta.

Marker lipidne peroksidacije u plazmi, TBARS (engl. Thiobarbituricacid reactive substances), određivan je upotrebom 2-tiobarbiturne kiseline(2,6-dihidropirimidin-2-tiol,TBA).Pomoćukoeficijentaekstinkcije156000M-1cm-1,anaosnovu izmerenihvrednosti, izračunat jenivoTBARSi izraženunmolpomililitruplazme(Ohkawaisar.,1979).

Koncentracijahemoglobina(Hb)jeodređivanametodomDrabkina(DrapkiniAustin, 1935). Za spektrofotometrijske analize plazme i eritrocita, korišćen jeUltrospec3300proUV/Visiblespectrophotometer,AmershamBiosciencesCorp.,USA.

Aktivnost superoksid dismutase (SOD) u eritrocitima, određivana jeindirektnommetodom (Misra i Fridovich, 1972) koja se zasniva na smanjenjubrzine redukcije citohroma c i prikazana je u jedinicama SOD aktivnosti po ghemoglobina(U/gHg).

Aktivnostkatalaze(CAT)ueritrocitimajeodređenapoBeutlerovojproceduri(Beutler, 1982). Metoda se sastoji u spektrofotometrijskom praćenju brzinerazgradnjeH2O2uprisustvukatalazena230nm.Aktivnostenzimajeizraženaujedinicipogramuhemoglobina(U/gHb).

Statistička analiza / Statistical analysis

Rezultati našeg eksperimenta su grafički prikazani kao srednja vrednostdatogparametrasastandardnomgreškomsrednjevrednosti.Zaobradurezultataje korišćena jednostepenaanalizavarijanse (ANOVA).Uslučajuda jeANOVApokazalastatističkiznačajnurazliku,zaodređivanjestepenaznačajnostikorišćenjeFišerovtestnajmanjeznačajnerazlike(LSD,leastsignificantdifference,eng.)sa stepenima značajnosti p<0,05; p<0,01 i p<0,001. Svi dobijeni rezultati suobrađivaniupotrebomSTATISTICA10.0računarskogsoftvera.

Hemodinamska merenja / Haemodynamic measurements

SAP, DAP i MAP su značajno smanjeni u losartanom tretiranoj grupi.Padpritiska jebiouočljivveću15.minutu,a trendpadasenastaviodokrajapraćenja(Grafikon1).NijezabeleženaznačajnapromenauvrednostimaMVkod

Rezultati / Results


327

eksperimentalnih grupa.UPO je bio značajnopovećan kodSHRuodnosunaWistargrupu.Tretman losartanom jedoveodoznačajnogsmanjenjavrednostiUPOupoređenjusakontrolnomSHRgrupom(Grafikon2).NijebiloznačajnihpromenauvrednostimaKPKmeđueksperimentalnimgrupama,dok je tretmanlosartanomsnizioKVOupoređenjusakontrolnomSHRgrupom(Grafikon3).

Grafikon 1.Sistolni(SAP),diastolni(DAP)isrednji(MAP)arterijskipritisakkodeksper-imentalnihgrupa.**p<0.01;***p<0.001vs.Wistar;#p<0.05;##p<0.01;###p<0.01–vs.netretiraniSHR;Wistar-normotenzivnipacovi;SHR-spontanohiperten-zivnipacovi;SHR+LOS-spontanohipertenzivnipacovitretiranilosartanom/

Graph 1. Systolic (SAP), diastolic (DAP) and mean (MAP) arterial blood pressure in ex-perimental groups. ** p < 0.01; *** p < 0.001 vs. Wistar; # p < 0.05; ## p < 0.01; ###p<0.01– vs. untreated SHR; Wistar-normotensive rats; SHR-spontaneously hy-pertensive rats; SHR+LOS- spontaneously hypertensive rats treated with losartan

Grafikon 2. Minutnivolumen(MV)iukupniperifernivaskularniotpor(UPO)kodeksperi-mentalnihgrupa.** p < 0.01;*** p < 0.001vs.Wistar;## p < 0.01vs.netretiraniSHR.


328

Wistar-normotenzivnipacovi;SHR-spontanohipertenzivnipacovi;SHR+LOS-spon-tanohipertenzivnipacovitretiranilosartanom/

Graph 2. Cardiac output (CO) and total peripheral vascular resistance (TPR) in experi-mental groups. ** p < 0.01; *** p < 0.001 vs. Wistar; ## p < 0.01 vs. untreated SHR. Wistar-normotensive rats; SHR- spontaneously hypertensive rats; SHR+LOS- spon-taneously hypertensive rats treated with losartan

Grafikon 3.Protokkrvikrozkarotidnuarteriju(KP)ikarotidnivaskularniotpor(KVO)kodeksperimentalnihgrupa** p < 0.01vs.Wistar,# p < 0.05vs.netretiraniSHR.Wis-tar-normotenzivnipacovi;SHR-spontanohipertenzivnipacovi;SHR+LOS-spontanohipertenzivnipacovitretiranilosartanom/

Graph 3. Blood flow through carotid artery (CBF) and carotid vascular resistance (CVR) in experimental groups.** p < 0.01 vs. Wistar, # p < 0.05 vs. . untreated SHR. Wis-tar-normotensive rats; SHR- spontaneously hypertensive rats; SHR+LOS- sponta-neously hypertensive rats treated with losartan

Biohemijski parametri / Biochemical parameters

Vrednosti TBARS-a u plazmi su bile karakteristično povećane u obehipertenzivnegrupepacovaupoređenjusaWistargrupom(Grafikon4),atretmanlosartanomnijedoveodopromenauodnosunakontrolnugrupuhipertenzivnihpacova.PostojalajepovećanaaktivnostiCATuhipertenzivnimgrupama(Grafikon5).AktivnostSODjebilaznačajnonižakodhipertenzivnegrupepacova,dokjelosartanpokazaotendencijupovećanjaaktivnostiovogenzima,približavajućijevrednostimanormotenzivnekontrole.


329

Grafikon 4.NivoTBARSuplazmikodeksperimentalnihgrupa.**p<0.01vs.Wistar.Wis-tar-normotenzivnipacovi;SHR-spontanohipertenzivnipacovi;SHR+LOS-spontanohipertenzivnipacovitretiranilosartanom

Graph 4. TBARS level in plasma in experimental groups. **p<0.01 vs. Wistar. Wistar- nor-motensive rats; SHR- spontaneously hypertensive rats; SHR+LOS- spontaneously hypertensive rats treated with losartan

Grafikon 5.Aktivnostkatalaze(CAT)isuperoksiddismutase(SOD)kodeksperimentalnihgrupa. * p < 0.05vs.Wistar.Wistar-normotenzivnipacovi;SHR-spontanohiperten-zivnipacovi;SHR+LOS-spontanohipertenzivnipacovitretiranilosartanom

Graph 5. Catalase activity (CAT) and superoxide dismutase (SOD) in experimental groups.. * p < 0.05 vs. Wistar. Wistar- normotensive rats; SHR- spontaneously hypertensive rats; SHR+LOS- spontaneously hypertensive rats treated with losartan

RezultatinašestudijepokazujuznačajnopovišenSAP,MAP iDAPuobehipertenzivnegrupe,upoređenjusanormotenzivnomkontrolom,štojeuskladu

Diskusija / Discussion


330

sa literaturnim podacima o eksperimentalnoj malignoj hipertenziji (Okamoto iAoki, 1963).Akutna aplikacija losartana, selektivnog blokatoraAT1 receptora,utiče na hemodinamske i biohemijske parametre kod pacova sa malignomhipertenzijom.MerenjapokazujuznačajnosmanjenjeMAPveć15minutanakonaplikacijelosartana.Tendencijapadapritiskaodržavasesledećih45minuta,takodanakrajustudije,MAPugrupitretiranojlosartanomjeopaoza40mmHgodsvojeinicijalnevrednosti.SličnerezultatedobiojeNunez-a(Nunezisar.,1997)kodSHRprimenomistedozelosartanauhroničnomtretmanutokom12nedeljadošlojodosmanjenjapritiskaza30mmHg.PočetnevrednostiSAPunašojstudijiiznosilesupreko230mmHg,aposlesatvremenanakonaplikacijeopaojeza45mmHgpanasdobijenosniženjenavodinazaključakdaAngIIimaznačajnuuloguuakutnojregulacijiSAPiuslučajevimamalignehipretenzije.

Pre administracije losartana, DAP u obe hipertenzivne grupe je bio višiod130mmHg,štopotvrđujestanjemalignehipertenzije (Bender i sar., 2010).VrednostDAPpočelajedaopadaveću15.minutunakonprimenelosartana,inastaviladaopadadokrajaprvogsata,štonasnavodinazaključakdaAngIIigraznačajnuuloguuregulacijiDAPuovojformieksperimentalnemalignehipertenzije.Naš rezultatkorelirasa rezultatimakliničkestudijeRompa (Rump isar.,2006)ukojojjelosartanukombinacijisahidrohlorotiazidom(100mg/hidrohlorotiazida25mg)doveodosmanjenjaDAPza16.5mmHgkodpacijenatasaumerenomhipertenzijom.Rezultatidrugihistraživača(Naidooisar.,1999)pokazujudakodpacijentasaesencijalnomhipertenzijom,posle12nedeljatretmanalosartanom(100 mg/hidrohlorotiazida 25 mg), DAP je smanjen za 13.7 mmHg, odnosnovraćenajevrednostipritiskaudomennormotenzivnihpacijenata(Naidooisar.,1999). Smatramo da naši rezultati, potkrepljeni prethodnim studijama ukazujunaznačajnuuloguAngIIuregulacijiDAP,štobimoglobitiodznačajauterapijidijastolnedisfunkcijesrčanogmišića.

HumanuesencijalnuhipertenzijukarakterišepovišenMAP,alinormalanMV(MulvanyiHalpern,1977)štorezultujepovišenimUPO.Unašojstudiji,MVnijebioznačajno različitkodSHR+LOSgrupeuodnosunahipertenzivnukontrolu.NaosnovustudijeFitzpatricka(Fitzpatrickisar.,1992),kojatvrdidalosartanomindukovanablokadaAT1receptoranerezultujepromenomMV,inašihrezultata,možemopretpostavitidaAngII igramaluuloguuregulacijiMVuovommodelumaligne hipertenzije. Takođe, naši rezultati su u skladu sa kliničkom studijomrađenomnapacijentimasahroničnomesencijalnomhipertenzijom(Frohlichisar.,1967),ukojojjezabeleženopovećanjeUPObezobzirananiskevrednostiMV.

Pokazanojedajednogodišnji tretmanlosartanom(Parkisar.,2000)sma-njujepritisakunutarkrvnihsudova,snižavavaskularniotporiublažavapovećanjerezistentnostisubkutaniharterijakodpacijenatasaesencijalnomhipertenzijom.Takođe, istraživanje (Ruzicka i sar., 1994) sprovedeno na pacovima tretiranimlosartanom jepokazalodahroničnaprimena losartana tokomnekolikonedeljadovodi do smanjenja UPO. Na osnovu ovih studija, a i u skladu sa našimrezultatima,možemozaključitidablokadaAT1receptoraimapozitivanefekatnaredukcijuotporakrvnihsudovaueksperimentalnojmalignojhipertenziji.


331

Oksidativnistresjedirektnopovezansaprogresijomkardiovaskularnihobo-ljenja. Naime, angiotenzin II aktivacijom enzima NAD(P)H oksidaze direktnopovećavaprodukciju reaktivnih vrsta kiseonika (RVK), a kao signalnimolekuli,nishodnodelujunabrojnedrugesignalneputeveukardiovaskularnomsistemu(Hitomi i sar., 2007). U našemmodelu maligne hipertenzije, oksidativni stres,praćenprekoindeksalipidneperoksidacije,povišenjekodSHRpacovauodnosunanormotenzivnukontrolu,anepromenjenjekodhipertenzivnihživotinjanakonakutneprimenelosartanaudoziod30mg/kg.Yaoisaradnici(Yaoisar.,2007)su u hipertenzivnommodelu, pokazali da dvonedeljna blokadaAT1 receptora(losartanom, u dozi od 10 mg/kg) kod SHR-SP pacova snižava nivo lipidneperoksidacijeupoređenjusanetretiranimgrupama.Ustudiji(Polizioisar.,2009)sprovedenojnaWistarpacovimakodkojih jehipertenzija indukovana ligacijomabdominalneaorte, takođe jepokazanoznačajnosmanjenjevrednostiTBARSnakon 8 dana tretmana losartanom. Izostanak antioksidativnog odgovora unašemmodelumogaobi sepripisatidelimičnoakutnojprirodieksperimenta,atakođeimogućimmehanizmimakojiumalignojhipertenzijipovećavajunivoRVKnezavisnoodAngII.

Kaoposledicaoksidativnogstresaunašojstudiji,aktivnostCATueritrocitimajepovišenauobehipertenzivnegrupeupoređenjusanormotenzivnomkontrolom,što jekonzistentnosanalazimaprethodnihstudija (Kitts i sar.,1998).UstudijiPolizia iPena (Polizio iPena,2005) losartan (10mg/kg) jedavanSHR tokomdve nedelje, zapažena je redukovana aktivnost CAT u moždanom tkivu, doku tkivu jetre ibubreganijedošlodopromenenjeneaktivnosti.Sdrugestrane,tretmanlosartanom16nedeljajedoveodoneznatnogpadaaktivnostiCATkodSprague-Dawleypacova(KhaperiSingal,2001).Uskladusaovimrezultatima,možemopretpostavitidaaktivnostCATimatendencijusmanjenjanakonblokadeAT1 receptroa, ali damera efekta, kao i tkivna specifičnost ostaju nedovoljnorazjašnjene.NaširezultatisupokazalidajeaktivnostCATbilapovišenaumalignojhipertenziji,aliidatretmanlosartanomnijeuticaonanjenuaktivnost,štobimoglodoprinetipovišenojlipidnojperoksidacijikodovedvegrupeživotinja.

Aktivnost SOD kod hipertenzivne grupe u našoj studiji je bila snižena uodnosu naWistar grupu, što je u skladu sa rezultatima Itoa (Ito i sar., 1995),kojijepokazaodajeaktivnostSODnižakodstarijihSHRsahipertrofijomsrcaupoređenjusaWistarpacovimaistoguzrasta.Nakonakutnogtretmanalosartanom,aktivnost SOD se u našemmodelumaligne hipertenzije povećala, pokazujućitendencijudadostignenivonormotenzivnekontrole.

U uslovima hronične primene losartana de Cavanagh i saradnici (deCavanagh i sar., 2006), su ispitivali povezanost hipertenzije, oksidativnogstresaimitohondrijalnihoštećenjaSHRiWistarpacova,pokazavšidalosartanznačajno povećava aktivnosti mitohondrijalne SOD, što posledično dovodido snižavanja koncentracije peroksida. Uzevši u obzir ozbiljnost kliničke slikemalignehipertenzije,možemopretpostaviti daakutnadoza losartanaunašem


332

eksperimentalnomdizajnu nije dovoljna da bi se značajno promenila aktivnostSOD,CATiposledično,oksidativnistatus.

Celokupno posmatrano, naši rezultati pokazuju da jednokratna aplikacijalosartana,blokatoraAT1receptora,ostvarujepovoljanefekatnakrvnipritisak ivaskularni otpor, snižavajući njihove vrednosti ka vrednostima normotenzivnihživotinja.BlokadavezivanjaAngIIzareceptorenijeostvarilaznačajneefektenaMViKPK,alijeznatnosnizilavaskularneotpore,kakoukupnitakoikarotidni.Poredovihjasnihhemodinamskihpoboljšanja,možemopretpostavitidaAngIIostvarujeodređeniefekatinaparametreoksidativnogstresa,ali idabitajefekattrebalodetaljnijeispitatiustudijisahroničnomaplikacijom.NaosnovusvegaiznesenogmožemozaključitidaAngIIigraznačajnuuloguusindromumalignehipertenzije,kojubitrebalopodrobnijeispitatizbogpotencijalnihterapijskihprimena.

ZAHVALNICA / ACKNOWLEDGEMENTS:Rezultatiradasudeonaučno-istraživačkihprojekatauoblastiosnovnihistraživanja,evi-dencionibroj:OI175096,kojefinansiraMinistarstvoprosvete,naukeitehnološkograzvojaRepublikeSrbije.The results of this work are a part of the scientific research projects in the field of basic re-search, register number: OI 175096, financed by Ministry of Education, Science and Tech-nological Development of the Republic of Serbia

1. AhmedLA,ShehataNI,AbdelkaderNF,KhattabMM.Tempol,aSuperoxideDismutaseMimeticAgent,AmelioratesCisplatin-InducedNephrotoxicitythroughAlleviationofMitochondrialDysfunctioninMice.PlosOne2014;9(12).DOI:10.1371/journal.pone.0115983

2. BenderJ,RussellK,RosenfeldL,ChaudryS.OxfordAmericanHandbookofCardiology.1ed.USA:OxfordUniversityPress;2010.

3. BeutlerE.Catalasa.In:RedCellMetabolism,aManualofBiochemicalMethods.Beutler,editor.NewYork:GruneandStratton;1982.

4. de Cavanagh EM, Toblli JE, Ferder L, Piotrkowski B, Stella I, Inserra F. Renal mitochondrialdysfunction in spontaneously hypertensive rats is attenuated by losartan but notby amlodipine. Am J Physiol Regulatory, integrative and comparative physiology2006;290(6):R1616-25.

5. DoggrellSA,BrownL.Ratmodelsofhypertension,cardiachypertrophyandfailure.CardiovascularRes1998;39(1):89-105.

6. DrabkinDL,AustinJ.H.SpectrophotometricstudiesII.Preparationsfromwashedbloodcells;nitricoxidehemoglobinandsulfhemoglobin.JournalofBiologicalChemistry1935;112(1):51-65.

7. Fitzpatrick MA, Rademaker MT, Charles CJ, Yandle TG, Espiner EA, Ikram H.Angiotensin IIreceptor antagonism in ovine heart failure: acute hemodynamic, hormonal, and renaleffects.AmJPhysiol1992;263(1Pt2):H250-6.

Zaključak / Conclusion

Literatura / References


333

8. FrohlichED,UlrychM,TaraziRC,DustanHP,PageIH.Ahemodynamiccomparisonofessentialand renovascularhypertension.Cardiacoutputand totalperipheral resistance:supineandtiltedpatients.Circulation1967;35(2):289-97.

9. HitomiH,KiyomotoH,NishiyamaA. AngiotensinIIandoxidativestress.CurrOpinCardiol.2007Jul;22(4):311-5.

10. Ito H, Torii M, Suzuki T. Decreased superoxide dismutase activity and increased superoxideanion production in cardiac hypertrophy of spontaneously hypertensive rats.ClinExpHypertens1995;17(5):803-16.

11. KhaperN,SingalPK.ModulationofoxidativestressbyaselectiveinhibitionofangiotensinIItype1receptorsinMIrats.JAmCollCardiol2001;37(5):1461-6.

12. KittsDD,YuanYV,GodinDV.Plasmaandlipoprotein lipidcompositionandhepaticantioxidantstatusinspontaneouslyhypertensive(SHR)andnormotensive(WKY)rats.CanJPhysiolPharmacol1998;76(2):202-9.

13. LaraghJ.Laragh’slessonsinpathophysiologyandclinicalpearlsfortreatinghypertension.AmJHypertens2001;14(9):837-54.

14. Lassègue B, Clempus RE. Vascular NAD(P)H oxidases: specific features, expression, andregulation.AmJPhysiolRegulIntegrCompPhysiol.2003;285(2):R277-97.Review

15. MisraHP,FridovichI.Theroleofsuperoxideanionintheautoxidationofepinephrineandasimpleassayforsuperoxidedismutase.JBiolChem1972;247(10):3170-5.

16.MulvanyMJ,HalpernW.Contractilepropertiesofsmallarterialresistancevesselsinspontaneouslyhypertensiveandnormotensiverats.CircRes1977;41(1):19-26.

17.NaidooDP,SareliP,MarinF,Aroca-MartinezG,MaritzFJ,JardimPC,etal.Increasedefficacyand tolerability with losartan plus hydrochlorothiazide in patients with uncontrolledhypertension and therapy-related symptoms receiving two monotherapies. Adv Ther1999;16(5):187-99.

18.NunezE,HosoyaK, SusicD, FrohlichED.Enalapril and losartan reduced cardiacmass andimprovedcoronaryhemodynamicsinSHR.Hypertension1997;29(1):519-24.

19.OhkawaH,OhishiN,YagiK.Assay for lipidperoxides inanimal tissuesby thiobarbituricacidreaction.AnalBiochem1979;95(2):351-8.

20. Okamoto K,Aoki K. Development of a strain of spontaneously hypertensive rats. Jpn Circ J1963;27:282-93.

21. Okamoto K, Ohta Y, Morita N, Shiokawa H, Chikugo T, Hamada Y. Therapy and preventionof hypertension of M-SHRSP. Clin Exp Hypertens Part A, Theory and practice.1991;13(5):1033-42.

22. Park JB, IntenganHD,SchiffrinEL.Reduction of resistance artery stiffness by treatmentwiththeAT(1)-receptor antagonist losartan in essential hypertension. J ReninAngiotensinAldosteroneSyst2000;1(1):40-5.

23. PolizioAH,BalestrasseKB,GornalusseGG,GorzalczanySB,Santa-CruzDM,YannarelliGG,et al. Losartan exerts renoprotection through NAD(P)H oxidase downregulation in arenovascularmodelofhypertension.RegulPept2009;156(1-3):28-33.

24. PolizioAH,PenaC.EffectsofangiotensinIItype1receptorblockadeontheoxidativestressinspontaneouslyhypertensiverattissues.RegulPept2005;128(1):1-5.

25. Rump LC, Ambrosioni E, Burnier M, Horl W, Rabelink AJ. Initial combination therapy witholmesartan/hydrochlorothiazide inmoderate-to-severehypertension.JHumHypertens2006;20(4):299-301.

26.RussoC,OlivieriO,GirelliD,FacciniG,ZenariML,LombardiS,etal.Anti-oxidantstatusandlipidperoxidationinpatientswithessentialhypertension.JHypertens1998;16(9):1267-71.

27.RuzickaM,YuanB, Leenen FH. Effects of enalapril versus losartan on regression of volumeoverload-inducedcardiachypertrophyinrats.Circulation1994;90(1):484-91.

28.VikrantS,TiwariS.EssentialHypertension–PathogenesisandPathophysiology.JournalIndianAcademyClinicalMedicine2011;2[3],140-161.


334

ENGLISH

29.XuF,MaoC,HuY,RuiC,XuZ,ZhangL.Cardiovasculareffectsoflosartananditsrelevantclinicalapplication.CurrMedChem2009;16(29):3841-57.

30. XuF,MaoC,LiuY,WuL,XuZ,ZhangL.LosartanchemistryanditseffectsviaAT1mechanismsinthekidney.CurrMedChem2009;16(28):3701-15.

31. Yao EH, Fukuda N, Matsumoto T, Kobayashi N, Katakawa M, Yamamoto C, et al. Losartanimproves the impaired function of endothelial progenitor cells in hypertension via anantioxidanteffect.HypertensRes2007;30(11):1119-28.

THE EFFECTS OF ACUTE ADMINISTRATION OF LOSARTAN, ANGIOTENSIN II TYPE-1 RECEPTOR ANTAGONIST, ON HEMODYNAMICS AND OXIDATIVE STRESS

PARAMETERS IN MALIGNANT HYPERTENSIVE RATS

Natalija Bogunović, Zoran Miloradović, Đurđica Jovović, Nevena Mihailović-Stanojević, Milan Ivanov, Una Jovana Vajić, Danijela Karanović, Jelica Grujić-

Milanović

Malignanthypertensionisasevereformofhypertensionwhichpathogenesisisnotfullyelucidated.TheaimofourstudywastoinvestigatetheroleofAngiotensinIIonhemo-dynamicandoxidativestressparametersinmodelofmalignanthypertensionbyusinglo-sartan.Adultmalesweredividedintothreegroups:normotensiveWisterrats,controlSHRandlosartantreatedSHR.ControlandSHRgroupreceivedasinglebolusdosageofsa-line,whiletheSHR+LOSgroupreceivedalosartan.Bloodpressure,cardiacoutput,bothtotal peripheral and carotid vascular resistanceand carotid blood flowweremeasured.CAT,SODandTBARSweredeterminedinthebloodsamples.Thetreatmentsignificantlydecreasedthebloodpressure.Therewasnosignificantchangeincardiacoutputorcarot-idbloodflow,buttreatmentresultedindiminishmentofvascularresistances,bothtotalpe-ripheralandcarotid.TherewasatendencytorestorethevaluesofSODactivitytowardsthoseofthenormotensivegroup,buttherewerenochangeinCATandTBARSlevels.Tak-entogether,ourresultsshowthatasingleapplicationoflosartanhasastronghypotensiveeffect.AngiotensinIIseemstohaveasignificantroleinthemalignanthypertensionsyn-dromeanditpartiallyaffectsoxidativestressparameters.

Keywords:losartan,malignanthypertension,hemodynamics,oxidativestress

ЭФФЕКТЫ АКУТОВОГО ПРИМЕНЕНИЯ ЛОЗАРТАНА, АНТАГОНИСТА АНГИОТЕНЗИНА II ТИПА 1 РЕЦЕПТОРА НА ГЕМОДИНАМИКУ И ПАРАМЕТРЫ

ОКИСЛИТЕЛЬНОГО СТРЕССА В МОДЕЛИ ЗЛОКАЧЕСТВЕННОЙ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ У КРЫС

Наталия Богунович, Зоран Милорадович, Джурджица Йовович, Невена Михайлович-Станоевич, Милан Иванов, Уна Йована Вайич, Даниела

Каранович, Елица Груич-Миланович

Введение: Злокачественная артериальная гипертензия представляет собойособо тяжелуюформу гипертензии, чейпатогенезполностьюнеясен.Цельнашейработы состояла в исследовании роли ангиотензина II (Ang II) в регулировании

РУССКИЙ


335

гемодинамическихпоказателейокислительногострессавмоделизлокачественнойартериальнойгипертензии.Материалиметоды:Взрослыесамцыкрысбылиподеленынатригруппы:нормотензивныекрысыWistar, контрольныегипертензивные(SHR)и принимающие лозартан гипертензивные крысы (SHR+LOS). Контрольная группаи группа SHR приняли по одной болюсной дозе физиологического раствора, агруппаSHR+LOSпринялалозартан,рецепторныйблокаторAngII.Послеэтогоунихизмеренокровяноедавление,минутныйобъемсердца(МОС),каротидныйкровоток(ККТ)иопределеносоответствующеесопротивление:общеепериферическоесопро-тивлениесосудов(ОПСС)икаротидноесопротивлениесосудов(КСС).Показателиокислительного стресса: CAT, SOD и TBARS определены на основании образцовкрови.Результаты:Применениелозартаназначительноснизилозначениекровяногодавления. Значительного изменения показателей МОС и ККТ не произошло, ноприменение лозартана привело к уменьшению ОПСС и КСС. В данной группезамеченатенденцияувеличенияактивностиSODдопоказателейнормотензивныхживотных,однакоизменениепоказателейCATиTBARSненаблюдалось.Дискуссияи заключение: Наши результаты показывают, что однократное применение ло-зартанаимеет сильный гипотензивный эффект и чтоAng II играет важнуюроль вмеханизмах злокачественной артериальной гипертензии, частично посредствомантиокислительноговоздействия.

Ключевыеслова:лозартан,злокачественнаяартериальнаягипертензия,гемо-динамика,окислительныйстресс.


336

Documents

EFEKTI AKUTNE PRIMENE LOSATRANA, … Archive/69/5-6/01-Bogunovic.pdf · Kroz kateter plasiran u jugularnoj veni, naglo je ubrizgano 0,2 ml hladnog ... SAP, DAP i MAP su značajno