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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA “CALIDAD DE ADN DE PERSONAS IMPACTADAS POR LA MINERÍA ARTESANAL EN EL CERRO EL TORO, HUAMACHUCO, LA LIBERTAD 2010” Tesis para Optar el Grado de Doctor en Farmacia y Bioquímica AUTOR: M.Sc. CASANOVA HERRERA HUGO ENRIQUE ASESORA: Dra. MIRIAM ELIZABETH GUTIERREZ RAMOS TRUJILLO PERÚ 2013

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO ESCUELA DE POSTGRADO

DOCTORADO EN FARMACIA Y BIOQUÍMICA

“CALIDAD DE ADN DE PERSONAS IMPACTADAS POR LA MINERÍA

ARTESANAL EN EL CERRO EL TORO, HUAMACHUCO, LA LIBERTAD 2010”

Tesis para Optar el Grado de Doctor en

Farmacia y Bioquímica

AUTOR: M.Sc. CASANOVA HERRERA HUGO ENRIQUE ASESORA: Dra. MIRIAM ELIZABETH GUTIERREZ RAMOS

TRUJILLO – PERÚ

2013

Page 2: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

1

ESTE TRABAJO DE INVESTIGACIÓN ESTA DEDICADO A MIS

HIJOS

HUGO, SHAROM, MAYRA Y HUGUITO Y A MI MADRE ITA

QUIENES

FUERON MI FUERZA PARA LOGRAR ESTE GRADO ACADÉMICO.

LOS AMO MUCHO

AGRADECIMIENTO:

PARA MI ASESORA DRA. MIRIAM E. GUTIÉRREZ RAMOS

POR SU APOYO Y ESPECIAL ATENCIÓN EN LA EJECUCIÓN DEL

PRESENTE TRABAJO DE INVESTIGACIÓN

Page 3: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

2

UN RECONOCIMIENTO ESPECIAL

A MI MAESTRO DR. VALDEMAR VIGO ALCANTARA

AMIGO Y COLEGA QUE SIEMPRE ESTUVO

APOYÁNDOME EN ESTE ESFUERZO

POR LOGRAR MI SUPERACIÓN.

PRESENTACIÓN SEÑORES MIEMBROS DEL JURADO DICTAMINADOR

Page 4: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

3

Dando cumplimiento a las disposiciones emanadas del Reglamento para la

obtención de Grados de la Escuela de Post Grado de la Universidad Nacional

de Trujillo, me es honroso presentar y someter a vuestra consideración y

elevado criterio, el presente trabajo de tesis titulado “Calidad del ADN de

personas Impactadas por la Minería Artesanal en el Cerro El Toro,

Huamachuco, La Libertad 2010” con el que pretendo obtener el Grado de

Doctor en Farmacia y Bioquímica.

Espero que el presente trabajo sea de vuestra aprobación

Trujillo 10 de Junio del 2013

M.Sc. HUGO E CASANOVA HERRRERA

JURADO DICTAMINADOR DR WILLIAM SAGASTEGUI GUARNIZ ………….………………… DRA. MIRIAM E. GUTIERREZ RAMOS ……………………………. DR. ROBERTO YBAÑEZ JULCA …………………………….

Page 5: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

4

INDICE

Pág.

1. RESUMEN 0

2. ABSTRACT 1

3. INTRODUCCIÓN 2

4. MATERIAL Y MÉTODO 13

5. RESULTADOS 23

6. DISCUSIÓN 30

7. CONCLUSIÓN 37

8. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS 38

9. ANEXOS 42

Page 6: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

5

RESUMEN

El presente trabajo de Investigación consiste en determinar las sustancias tóxicas

y el daño del ADN de las personas impactadas por la minería artesanal del Cerro

El Toro, mediante el Ensayo Cometa. Sabiendo que en la actualidad el impacto de

la minería es un problema que afecta al medio ambiente mundial y al Perú por la

extracción de oro, ocasionando en las personas problemas de salud diversas que

pudieran llegar hasta enfermedades cancerígenas, originadas por un efecto

genotóxico por las sustancias químicas utilizadas en la minería afectando el ADN

cromosomal. La absorción atómica fue utilizada como método espectroscópico

para determinar los metales en aguas y suelos impactados por la minería y el

ensayo cometa para la determinación del efecto genotóxico en el ADN.

Se logró determinar la presencia de mercurio en tierra y agua, hierro, cobre y

plomo en tierra, cianuro en agua y arsénico en tierra y agua, así como el efecto

genotóxico en el ADN de personas impactadas por la minería artesanal del Cerro

el Toro encontrándose que el 77.78% de muestras presentan resultado negativo,

y un 22.22% presentan daño del ADN, siendo factores determinantes el tiempo de

exposición y el tipo de contacto, evidenciándose el daño del ADN a través de la

observación microscópica por el Efecto Cometa Los metales ingresan al

organismo por las diferentes vías de absorción y se acumulan en tejidos adiposos,

siendo difícil su eliminación del organismo, originando en el tiempo reacciones

químicas y transformaciones de grupos funcionales provocando la desintegración

del ADN.

Palabras claves: Calidad de ADN, minería, ensayo cometa.

Page 7: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

6

ABSTRACT

The present research work is to determine the toxic substances and DNA damage

for people impacted by artisanal mining of Cerro El Toro, using the comet assay.

Knowing that at present the impact of mining is a problem that affects the global

environment and to Peru by the. gold mining in people causing health problems

that could reach various cancer diseases, caused by a genotoxic effect of the

chemicals used in mining affecting chromosomal DNA. Atomic absorption

spectroscopy was used as a method to determine the metals in soil and water

impacted by mining and the comet assay for the determination of genotoxic effects

in DNA.

It was possible to determine the presence of mercury in soil and water, iron, copper

and lead in soil, water cyanide and arsenic in soil and water as well as the

genotoxic effect in the DNA of people impacted by artisanal mining of Cerro El

Toro finding 77.78% of the samples show negative, and 22.22% have DNA

damage, being determinants exposure time and the type of contact, showing DNA

damage through microscopic observation by entering Effect Comet metals the

organism by different routes of absorption and accumulate in adipose tissues,

being difficult to remove from the body, causing chemical reactions in time and

functional group transformations causing the disintegration of the DNA.

Keywords: Quality of DNA, mining, comet assay.

Page 8: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

7

1. INTRODUCCION

Todos los seres vivos tienen una manera de vivir que depende de su

estructura y fisiología y también del tipo de ambiente en que viven, de

manera que los factores físicos y biológicos se combinan para formar una

gran variedad de ambientes en distintas partes de la biosfera. Así, la vida de

un ser vivo está estrechamente ajustada a las condiciones físicas de su

ambiente y también a las bióticas, es decir a la vida de sus semejantes y de

todas las otras clases de organismos que integran la comunidad de la cual

forma parte.

Los recursos naturales son todos los componentes del medio ambiente

renovable o no renovable, que satisfacen necesidades económicas, sociales,

espirituales, culturales y de la defensa nacional, garantizando el equilibrio de

los ecosistemas y la continuidad de la vida en la tierra1.

Los recursos naturales deben ser suficientes para satisfacer las necesidades

de todos los organismos. No obstante, el crecimiento desmedido de la

población humana y el urbanismo desenfrenado plantean problemas serios al

respecto. En la actualidad, se hace necesario una cuantificación rigurosa de

los recursos naturales y una planeación racional de su aprovechamiento.

Aunque se han realizado numerosos estudios, no es posible establecer cuál

es el número máximo de habitantes que pueden vivir en la tierra. Se sabe

con certeza que mucho de los recursos con los que cuenta la humanidad no

son eternos y que no están lejos de su agotamiento. Algunos recursos son

llamados renovables, porque pueden regenerarse de manera natural o

artificial, constituyen los recursos naturales y si son bien manejados pueden

utilizarse por siglos. Entre los más importantes está la energía solar, que

constituye una fuente inagotable si se considera que el sol dejara de producir

luz dentro de unos 5.000 millones de años, otros recursos son el agua y los

nutrimentos, sometidos a ciclos que los mantienen más o menos constantes

Page 9: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

8

en la naturaleza. Los recursos orgánicos como la agricultura, los recursos

silvícolas como los bosques y plantaciones de árboles; los cultivos especiales

como hongo crustáceos, lombrices, peces, algas; la ganadería, la caza y la

pesca2.

Y los No Renovables Incluyen recursos indispensables para la supervivencia

humana, como el carbón, el petróleo y el gas natural, que se han formado

mediante procesos de millones de años de duración. Estos recursos se

pueden acabar muy pronto y nada se podrá hacer para recuperarlos si no se

toman las medidas necesarias y oportunas.

Las actividades cotidianas de todos los seres humanos, comunidades y

países guardan estrecha relación con los cambios demográficos, las

modalidades y los niveles de utilización de los recursos naturales, el estado

del medio ambiente y el ritmo y la calidad del desarrollo económico y social.

Hay acuerdo general en que la pobreza persistente y generalizada y las

graves desigualdades sociales entre hombres y mujeres tienen una gran

influencia en parámetros demográficos tales como el crecimiento, la

estructura y distribución de la población y, a su vez, se ven influidas por ellos.

También hay acuerdo general en que las modalidades irracionales de

consumo y producción contribuyen al uso insostenible de los recursos

naturales y a la degradación del medio ambiente, así como a reforzar las

desigualdades sociales y la pobreza, con las consecuencias ya mencionadas

respecto de los parámetros demográficos. En la Declaración de Río sobre el

Medio Ambiente y el Desarrollo y en el Programa se pidió que se adoptaran

modalidades de desarrollo que reflejaran una nueva comprensión de estos

vínculos intersectoriales y de otros3.

El desarrollo sostenible entraña, entre otras cosas, la viabilidad a largo plazo

de la producción y el consumo en relación con todas las actividades

económicas, entre ellas la industria, la energía, la agricultura, la silvicultura,

Page 10: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

9

las pesquerías, el transporte, el turismo y la infraestructura, con objeto de

utilizar los recursos de la forma más racional desde un punto de vista

ecológico y de reducir al mínimo los desperdicios. Sin embargo, en las

políticas macroeconómicas y sectoriales raramente se ha prestado atención

a las consideraciones demográficas. Integrar explícitamente la población en

las estrategias económicas y de desarrollo acelerara el ritmo del desarrollo

sostenible y del alivio de la pobreza y a la vez contribuirá al logro de los

objetivos demográficos y a un aumento de la calidad de vida de la población4.

En base al Mapa de Perfil Ambiental del Perú, publicado por la Oficina

Nacional de Evaluación de los Recursos Naturales y la Agencia para el

Desarrollo Internacional, en el año 2005 se ha efectuado la apreciación de la

problemática climatológica de la provincia de Sánchez Carrión5.

Problema 1: Áreas con serios problemas erosivos e Impactos de

Deforestación.- Esta área se extiende desde el Chugay hasta el centro

poblado Chucuambo, y posee una forma de franja que se extiende hacia

ambos lados de la Red Nacional de código 13010. Esta zona presenta u

fuerte pendiente, la cual al no poseer una cobertura vegetal, hace vulnerable

la red vial a problemas de derrumbes.

Problema 2: Áreas con Impactos de Deforestación.- Esta área se ubica en la

parte norte de la provincia en las extensiones de los distritos de Huamachuco

y Marcabal y también se encuentra a ambos lados de la red nacional de

código 13586.

Problema 3: Áreas con serios problemas erosivos.- Esta superficie se ubica

en la parte Nor Este del distrito de Sanagoran, y posee una superficie de

5853.47 hectáreas. A diferencia de las otras dos anteriores, esta no posee un

sistema vial.

Page 11: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

10

Problema 4: Zona de Minería Informal.- Esta zona se ubica en las laderas del

Cerro El Toro, en el distrito de Huamachuco. Aquí se hace explotación

minera aurífera, la cual no posee ningún tipo de control ambiental en el

tratamiento de sus aguas residuales.

Problema 5: Contaminación con Aguas Servidas sin tratamiento.- Esta área

corresponde a la ciudad de Huamachuco, porque no tiene el proyecto

integral del agua potable.

Laguna Sausacocha, en la cual, durante la práctica de campo se apreció que

las casas ubicadas a los alrededores de esta laguna, evacuan sus aguas

directamente a la laguna, disminuyendo con ello el potencial piscícola de

esta laguna y limitando el potencial turístico que esta presenta.

Existen alrededor de 1.500 sustancias clasificadas como contaminantes

acuáticos, siendo algunos de ellos los más importantes6: Organismos

Patógenos los que tienen su origen en las aguas residuales domésticas y

residuos procedentes de animales. Causan enfermedades como la fiebre

tifoidea, hepatitis, cólera, disentería y la poliomielitis. Estos patógenos

pueden no ser detectados en un test directo de las aguas, por lo que para

saber si un agua tiene contaminación fecal se recurre al recuento de

coliformes (Escherichia coli, bacteria presente en el intestino en grandes

cantidades y que no causa daño al hospedador) en una muestra diluida de

agua.

Residuos Orgánicos Biodegradables los que provienen de las aguas

residuales domésticas, estiércol animal, basuras industriales, restos de

plantas, escorrentías naturales de la tierra y de zonas urbanas en lluvias

torrenciales. Son aquellas sustancias que pueden ser degradadas por los

organismos. Es esta degradación aerobia la que crea la demanda

bioquímica de oxígeno (DBO). Se define como DBO la cantidad de oxígeno

Page 12: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

11

necesaria para descomponer la materia orgánica en una muestra de agua.

En el proceso de descomposición las bacterias consumen oxígeno

disminuyendo la cantidad del mismo en el agua disuelta, lo que resulta en la

muerte o migración de los peces, la muerte de las plantas acuáticas, mal olor

y envenenamiento del ganado. Los peces son los mayores demandantes de

oxígeno en el medio acuático, seguido de los invertebrados y las bacterias5.

Los Ácidos siendo sus fuentes la minería, los residuos industriales y la lluvia

ácida. Mata algunos organismos (vertebrados, algunos invertebrados y

microorganismos), incrementa la solubilidad de algunos metales peligrosos

como el aluminio, corroe infraestructuras (puentes, puertas en canales,

barcos metálicos), daña los cultivos regados con esta agua.

Las Sales que provienen de escorrentías naturales de la tierra y de zonas

urbanas en lluvias torrenciales, de los residuos industriales y del deshielo de

carreteras con sales. Causa la muerte de organismos en el agua, aumenta la

salinidad de los suelos y hace el agua no apta para el uso doméstico.

El Mercurio que se encuentra en la naturaleza a bajas concentraciones en

rocas, suelos, aguas de ríos y en el aire. En estas concentraciones no es

peligroso, pero su incremento llega a ser muy tóxico para los humanos, en

especial su forma metilada. El incremento de concentración proviene de los

residuos industriales y de los funguicidas (que absorbe la planta y pasa a los

animales), el carbón y los lodos obtenidos tras la depuración de las aguas

residuales El mercurio inorgánico tiende a acumularse en el hígado y los

riñones, y aunque es excretado por la orina el daño en los órganos

permanece, en general, esta forma inorgánica se acumula poco en los

tejidos. Sin embargo, cuando el mercurio se asienta en las profundidades de

los lagos es metilado por los microorganismo anaerobios y pasa a las forma

de ión metilmercurio (CH3Hg+) y dimetilmercurio ((CH3)2Hg) que es fácilmente

Page 13: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

12

absorbido por los animales acuáticos y concentrado en sus tejidos grasos.

De esta forma se concentra cada vez más en la cadena alimenticia7.

El Cadmio cuya contaminación en el agua puede venir de fuentes

industriales y de residuos de minas de zinc. Es ampliamente usado en

recubrimientos metálicos y en pigmentos naranjas usados en pintura y

esmaltes. Es altamente tóxico. El límite superior recomendado para el agua

de beber es de 10 ppb. Causa subida de la presión sanguínea, daños en los

riñones y destrucción de los glóbulos rojos.

El Plomo donde los carburantes con plomo, los cristales y cerámicas que

contienen plomo y las tuberías antiguas, son fuentes que pueden aportar

plomo al agua. Las partículas de hollín y plomo de los vehículos pueden

caer sobre los cultivos y del suelo llegar a los ríos o a las aguas

subterráneas. En aguas blandas es preciso que el incremento de pH

mediante la adición de hidróxido de calcio para impedir que se disuelva el

plomo.

El Arsénico que está presente en la rocas y con impureza de los fosfatos en

fertilizantes y detergentes. El nivel natural de las aguas es de 2 ppb y el

límite recomendado para el agua potable de 50 ppb. Es acumulado en la

cadena alimenticia y al igual que el mercurio, adquiere mayor toxicidad

cuando es metilado por las bacterias a (CH3)2As+. Los síntomas del

envenenamiento por arsénico son debilidad, vómitos, diarreas pérdida de

sensación en pies y manos. En casos severos puede producir la muerte8.

La existencia de contaminación que sufren los ecosistemas terrestres y

acuáticos ocasionados por diversas actividades, es un tema social y

ambiental de primer orden. No obstante, el estudio de los ecosistemas no ha

tenido la preocupación y el desarrollo, que cabria esperar para conservar

nuestros recursos naturales. En la evaluación del estado ecológico de

Page 14: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

13

ecosistemas acuáticos, como los ríos de muchos países, se utilizan los

protocolos de evaluación rápida de la calidad; que se fundamentan en la

determinación de la integridad ecológica, mediante la caracterización, sobre

la base de una labor de monitoreo en las comunidades biológicas del área,

que requieren definir parámetros sensibles a cambios ambientales, que

además tengan la propiedad de ser fácilmente replicados y comparados en el

tiempo9.

La vida como lo conocemos está especificada por los genomas de los

innumerables organismos con los que compartimos el planeta. Todo

organismo tiene un genoma que contiene información biológica necesaria

para construir y mantener un ejemplo viviente de ese organismo. La mayoría

de los genomas, incluido el genoma humano están compuestos por ADN

(Acido desoxirribonucleico). El genoma Humano que es típico de los

genomas de todos los animales multicelulares, está formado por dos partes

distintas: el genoma nuclear y el genoma mitocondrial. Muchas

enfermedades genéticas son causadas por mutaciones puntiformes que

modifican o desactivan un producto génico. Cuando se identifica por primera

vez el gen causal de una enfermedad genética suele ser necesario examinar

muchas versiones de ese gen en diferentes individuos para detectar la

mutación o las mutaciones responsables del estado patológico. Segundo

cuando se ha caracterizado una mutación causante de una enfermedad se

requieren de métodos de detección de alto rendimiento para que los

médicos puedan examinar el ADN con el fin de identificar a los individuos

que presentan la mutación y están expuestos a sufrir la enfermedad o

transmitirla a sus hijos10.

Los genotoxicos son sustancias que producen efectos nocivos, letales y

heredables sobre el material hereditario en células somáticas y germinativas.

Los ensayos tradicionales de genotoxicidad lo constituyen esencialmente los

análisis de alteraciones cromosómicas y el intercambio entre cromátidas

Page 15: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

14

hermanas ( ICH ), los mismos evalúan la capacidad de productos químicos

que causan daño en el ADN, las mutaciones, que se hacen evidentes

durante la mitosis11.

Indicadores Biológicos de exposición a sustancias genotóxicas pretenden

evaluar y valorar los riesgos para la salud, especialmente el cáncer, algunos

síndromes y otras enfermedades pro efecto cromosómico. Así tenemos

registros experimentales llevados a cabo en ratones, ratas y cobayos

manifestando disminución en el tamaño al nacer, defectos histopatológicos,

malformaciones craneo-faciales, lesiones musculares, neoplasias en tiroides,

riñón, vejiga. De acuerdo a la literatura consultada son muy pocos trabajos

encontrados sobre efecto genotóxicos en seres humanos12.

Las fallas en los mecanismos de control celular y reparación del ADN se

traducen en alteraciones cromosómicas, y si estas se mantienen in vivo es

posible que un individuo expuesto ocupacionalmente pueda desencadenar

enfermedades de origen genético y más aun ser transmitidas a su

descendencia. Por otro lado, se conoce que las respuestas individuales a los

diferentes tóxicos está influenciada por factores ambientales, estilos de vida,

hábitos alimenticios y la capacidad metabólica de biotransformación que

evidencian diferentes grados de susceptibilidad13.

Así mismo se recomienda que los efectos genotóxicos no se deben

extrapolar en terminos individuales y menos poblacionales sino a nivel celular

in vitro, ya que las tasas de alteraciones cromosómicas son bajas y por ello

se requiere de exposiciones apreciables o grupos expuestos con un rango

muy amplio. Por ello es importante el desarrollo de pruebas que permitan

evaluar con certeza la capacidad dañina de estos agentes, hasta la fecha no

existen ningún ensayo utilizado de manera estándar. Sin embargo la

alternativa más promisoria es el análisis de alteraciones cromosómicas en

que es posible detectar puentes anafásicos y telofásicos, fragmentos

Page 16: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

15

cromosómicos o cromosomas rezagados; utilizando como tejido blanco a

células de líquido amniótico, médula ósea o linfocitos14.

La prueba del cometa es una excelente herramienta rápida, sensible que

sirve para analizar células individuales de mamíferos y plantas para detectar

daño en el ADN (efecto genotóxico) de células expuestas a radiación o

sustancias tóxicas inducido por agentes químicos, físicos y hasta biológicos

en células de cualquier ser vivo, además, posee gran sensibilidad,

reproducibilidad y es sencilla. Con un creciente uso, la prueba empieza a

utilizarse en diferentes disciplinas biológicas con diversos propósitos.15

Con PCA es posible obtener imágenes, lo que facilita la observación y el

análisis, además de que su costo es sumamente bajo, por lo que es una

excelente herramienta para la detección de agentes genotóxicos, bastan

sólo unas cuantas células (1-10,000) para realizar el ensayo y los resultados

se obtienen en un día. Con esta prueba se estudió la inducción de daño

sobre el ADN en células cultivadas y en suspensión, así como en sistemas

in vivo. La PCA tiene varias ventajas como investigar el grado de

rompimiento del ADN en pequeñas muestras de tejidos animales y biopsias

humanas.

Debido a la alta cotización del oro, en estos momentos la minería ilegal e

informal se extiende como un “cáncer” por todo el país, ocasionando graves

problemas ambientales y de salud de las personas, En este tipo de minería

no se hace ningún estudio de impacto ambiental ni se realiza un Programa

de Adecuación y Manejo del Medio Ambiente (PAMA) y en donde existen

más de 30 mil personas trabajando en todo el Perú es que hace que esta

actividad se realice en pésimas condiciones sociales y ambientales. Es por

ello que se debe tener una minería limpia y con responsabilidad social, con

trabajadores sanos y con esperanza de futuro y de vida normal que todos y

eso se debe lograr en plazos adecuados para que esta actividad produzca

socialmente trabajo, divisas canon e impuestos, pero que sea una actividad

Page 17: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

16

productiva que se adecúe a estándares mínimos ambientales que no

produzca repercusiones de salud en las personas que trabajan en la minería

informal así como de las que no trabajan en ella. De allí la Educación

Ambiental para que tanto autoridades, propietarios, Industriales y población

en general conozca la consecuencias del impacto ambiental de la minería

informal en la salud de las personas y de toda una población teniendo en

cuenta el manejo de los recursos naturales y el desarrollo de los pueblos

aledaños a la ciudad de Huamachuco.

La Contaminación Ambiental a causa de la Minería Informal que ocurre en el

Cerro el Toro en la ciudad de Huamachuco está ocasionando un grave

problema de salud en un gran número de personas que trabajan en esta

actividad económica. Personas que están siendo afectados por el contacto

directo de los gases y polvos emanados producto de la extracción de

minerales en socavones sin las mínimas protecciones de las vías de

respiración, manos y cuerpo que con el tiempo están sufriendo de

enfermedades broncopulmonares, estomacales digestivas, riñones, hígado y

pulmón pudiéndose predecir la generación de un problema de salud tan

importante como el cáncer14. Es por ello que se hace necesaria la

investigación de una serie de factores que conllevan a la disminución de la

calidad y esperanza de vida de niños que trabajan en la minería informal del

Cerro el Toro. Por esas razones se debe incidir en determinar la calidad de

ADN de las personas impactadas por la minería y poder así identificar los

problemas de salud que provocaría este impacto en el tiempo con los análisis

respectivos

Todo ello permitirá obtener la Calidad y Esperanza de vida de las personas

impactadas por la minería informal del Cerro el Toro, datos que

proporcionarán las suficientes bases científicas para que autoridades

pertinentes puedan tomar las decisiones en los Gobiernos Locales, Gerencia

Regionales de Salud y Gobierno Regional para iniciar las modificatorias de

Page 18: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

17

Normas y Reglamentos que permitan la protección de la Salud como

prioridad en las Actividades Extractivas de Minerales de las diferentes formas

de Explotación que permite el Ministerio de Energía y Minas del Gobierno

Peruano con lo cual se producirá la disminución de los Impactos Ambientales

en la Salud de las personas que trabajan en la minería artesanal e informal

en la ciudad de Huamachuco. Es por ello que se planteó el siguiente

problema ¿Cuál será la Calidad del ADN en personas que son Impactadas

por la Minería Artesanal en el Cerro el Toro – Huamachuco La Libertad

2010? Por lo que se propone que las personas que son impactadas por la

Minería Artesanal del Cerro el Toro tienen una disminución considerable de

la calidad de ADN cromosomal por presentar desintegraciones o

fraccionamientos del ADN estructuralmente a consecuencias de las

sustancias tóxicas. Es por ello que se formuló determinar la Calidad

estructural del ADN de personas impactadas por la minería informal así como

las sustancias tóxicas que son eliminadas producto de la minería artesanal

en el Cerro el Toro

Page 19: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

18

2. MATERIAL Y METODO

2.1. MATERIAL DE ESTUDIO

2.1.1. ÁREA DE ESTUDIO

La comunidad de Shiracmaca, está situado en el Distrito de Huamachuco,

Provincia: Sánchez Carrión Departamento de La Libertad, Latitud: -7.81391,

Longitud: -78.03445. en la sierra norte del Perú, y con una Altitud: 2,400

m.s.n.m.

A nivel de Centro Poblado, en Shiracmaca, según INEI – CPV 2007, existen

un total de 1,325 habitantes, de los cuales el 50.49% son hombres y el 49.51%

restante son mujeres.

2.1.2. UNIVERSO, POBLACIÓN Y MUESTRA.

Universo: Todos los habitantes del Caserío de Shiracmaca

Población: Todas las personas que se encuentran afectadas por la

contaminación minera directa e indirectamente. 1000 Personas

Muestra: Según la siguiente fórmula

N = tamaño Poblacional = 1325

no = Tamaño de muestra = 60 personas.

t = valor tabular (tabla estadística, t – student = 0,78

S = desviación estándar = 0,5

d = nivel de significancia ( P.E. = 0,05)

Page 20: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

19

2.1.3. TOMA DE MUESTRA DE AGUA Y SUELOS 1,3,15

Las muestras se recolectaron siguiendo un plan de muestreo que incluya

puntos críticos, notables, sospechosos y genéricos, en cada zona de

abastecimiento. Las muestras para el control de la calidad química del agua se

recolectaron en zonas estratégicas según control ambiental de la

Municipalidad Provincial de Sánchez Carrión en cantidad mínima de 1 litro en

frasco esterilizado para agua y de 1 kilo para muestras de suelos. Los frascos

botellas se enjuagaron dos veces con el agua que se recolectó.

Las muestras de agua y tierra fueron estabilizadas y almacenadas de acuerdo

a normas establecidas, para su posterior tratamiento y medición. Las muestras

de agua y suelos fueron recolectados siguiendo los procedimientos de

recolección y preservación descrita en las normas técnicas peruanas, a falta

de éstos se empleará preferentemente los procedimientos estándar de la

APHA–AWWA–WEF (American Public Health Association; American Water

Works Association; Water Environment Federation) en cualquiera de sus tres

últimas ediciones.

2.1.2. TOMA DE MUESTRAS DE SANGRE15,16

1. Antes de comenzar el procedimiento de toma de muestras el investigador o

coordinó con un representante de la comunidad de Shiracmaca para

informar y con un Personal profesional para hacer conocer el documento de

consentimiento informado firmado en todas sus partes.

2. La venopunción se hizo solamente en las venas peri ferales de las

extremidades superiores.

3. El Personal pudo hacer sólo un máximo de tres intentos para obtener las

muestras de sangre.

4. No se permitió tomar muestras adicionales a las mencionadas en el

protocolo y/o en el documento de consentimiento informado.

Page 21: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

20

5. A los participantes de estudio no se le pudo sacar más de 3ml/kg en un

período de 24 horas con el único propósito de investigación clínica (no hay

beneficio para el participante).

6. A los participantes de estudio no se les pudo sacar más de 5ml/ kg en un

período de 60 días con el único propósito de la investigación clínica

2.2. MÉTODOS Y TÉCNICAS

2.2.1. ABSORCIÓN ATÓMICA2,4,17

A. Absorción atómica con vapor frío: especialmente para la determinación

de mercurio, en el agua, suelo18,19.

Se pesó 15 g de muestra de tierra.

Se agregó 40mL de agua regia, con la ayuda de una luna de reloj se

tapó, agitó y se dejó reposar por dos horas.

Se calentó moderadamente hasta sequedad (polvo blanquecino).

Se adicionó 10 mL de HClcc y se pondrá a reflujo por 15 minutos.

Nuevamente se calentaró el contenido hasta sequedad.

Se adicionó 10 mL de Hclcc y se puso a reflujo por 15 minutos más.

Se calentó el contenido hasta sequedad.

Se adicionó 1mL de Hclcc y se calentó en plancha brevemente.

Finalmente se adicionó 15 mL de agua destilada, se calentó por 5

minutos, se dejó enfriar y se filtró a una fiola de 50 mL con agua

destilada.

Para la preparación de muestras se empleó 10 mL de cada muestra

obtenida en el proceso de digestión que fueron puestos en tubos de

ensayo debidamente rotulados, a cada tubo se le adicionó IV gotas de

HCl al 1.5% y además I gota de KMnO4; mezclando por inversión. Y se

llevó a leer en espectroscopía

(a) La curva de calibración externa: de acuerdo al rango lineal de trabajo

analítico según EPA 7471 (Agencia para la Protección Ambiental de los

Page 22: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

21

EE.UU.) se preparó la curva de calibración para mercurio a partir de la

solución estándar.

(b) Medición de las muestras de agua: filtradas las muestras de agua se

determinó la concentración de mercurio, de una manera similar a la

solución estándar.

B- Absorción atómica con generación de hidruros: especialmente para la

determinación de arsénico16,18

(a) La curva de calibración externa: de acuerdo al rango lineal de trabajo

analítico según EPA 7061 se prepó la curva de calibración para arsénico a

partir de la solución estándar.

(b) Medición de las muestras de agua: filtradas las muestras de agua se

determinó la concentración de arsénico, de una manera similar a la

solución estándar.

(c) Fase de determinación cuantitativa de arsénico:

Se determinó la concentración de arsénico por el método de

Espectrometría de Absorción Atómica por generación de Hidruros.

Fundamento:

Este método consiste en la transformación de Arsénico (As) en Hidruro de

arsénico con el reactivo de Borohidruro sódico y aspiración de un

atomizador de absorción atómico 18.

La determinación del arsénico total requiere que todos los compuestos de

arsénico inorgánico estén en el estado de As (III) como Arsina (AsH3),

pero para ello; todas las formas orgánicas e inorgánicas de Arsénico

deben oxidarse primero a As (V) por digestión con ácidos.

Debemos tener en cuenta que a temperatura ambiente y a valores del pH

de una solución de 1 o menores, el Ácido Arsénico [estado de oxidación

del As (V)] se reduce con relativa lentitud por el borohidruro sódico para

Page 23: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

22

transformarse en Arsina (AsH3) con estado de oxidación (III), por lo cual es

necesario, previamente, reducir cuantitativamente el Ácido Arsénico

[estado de oxidación del As (V)], a Acido Arsenioso [estado de oxidación

del As (III)] con yoduro de sodio o potasio antes de la reacción con

borohidruro de sodio 18.

El Ácido arsenioso [estado de oxidación del As (III)] se convierte

instantáneamente en sus hidruros volátiles con el reactivo de borohidruro

de sodio en solución acida. Los hidruros se purgan continuamente con

argón o nitrógeno en un atomizador apropiado de un espectrómetro de

absorción atómica y se convierte en los átomos de la fase gaseosa. El

reductor Borohidruro de sodio, por una rápida generación de hidruros de

los elementos en una célula de reacción apropiada, hace que sea mínima

la dilución de los hidruros por el gas portador y proporciona una

determinación rápida y sensible de arsénico. Se debe tener en

consideración que los picos de absorción atómica de As (V) son

normalmente un cuarto o un tercio más bajos que los picos de absorción

atómica de As (III) 19, 20.

C- Espectrofotometría de absorción molecular: especialmente para la

determinación de cianuro21

(a) Destilación simple:

- En lo que respecta a las muestras de agua, se tomó un determinado

volumen y se preparó para la destilación de acuerdo a EPA 9010

- Para las muestras de tierra, una cantidad fue extraída con hidróxido de

sodio 2,5 M en agitación por 20 minutos y luego el contenido se filtró

para seguir el proceso de determinación

(b) La curva de calibración externa: de acuerdo al rango lineal de

trabajo analítico según EPA 9010 se preparó la curva de calibración

para cianuro a partir de la solución estándar.

Page 24: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

23

(c) Medición de las muestras: las soluciones de agua y de tierra fueron

medidas espectrofotométricamente para cianuro, de una manera similar

a la solución estándar.

(d) Fase de determinación cuantitativa de cianuro: 21,22

DESTILACIÓN ÁCIDA A REFLUJO

El cianuro insoluble de un residuo sólido se puede determinar por el

método de cianuro total, poniendo una muestra de 500 mg con 500 mg

de agua destilada en un matraz de destilación y siguiendo el

procedimiento general de destilación. Al hacer los cálculos

multiplíquese por mil para obtener el contenido de cianuro de la

muestra sólida, en miligramos por kilogramo. Los cianuros de hierro

insoluble del sólido se pueden lixiviar antes, agitando una cantidad

pesada de muestra en una solución de NAOH al 10 por 100, durante

12 a 16 horas. El lixiviado y aguas de lavado del residuo sólido darán

el contenido en cianuro de hierro por el procedimiento de destilación.

La cloración previa habrá eliminado todo el cianuro susceptible de

cloración. No exponer las muestras a la luz solar.

CIANURO TOTAL DESPUÉS DE LA DESTILACIÓN: Tras eliminar las

sustancias interferentes, el cianuro metálico se convierte en HCN gas,

que se destila y absorbe en hidróxido sódico (NAOH). Debido a la

descomposición catalítica del cianuro en presencia de cobalto a

temperatura elevada en una solución ácida fuerte, el cobaltocianuro no

se recupera totalmente. Existen indicaciones de los complejos de

cianuro con los metales nobles, como el oro, platino y paladio,

tampoco se recuperan totalmente con este procedimiento. La

destilación separa también cianuros procedentes de otros

contaminantes orgánicos o inorgánicos productores de color y que

posiblemente interfieren. Posteriormente, se analiza la sal simple

cianuro sódico (NACN).

DETERMINACIÓN ESPECTROFOTOMÉTRICA UTILIZANDO ÁCIDO

BARBITÚRICO Y PIRIDINA: Los iones de cianuro reaccionan con el

Page 25: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

24

cloro activo en la cloramina T, formando cianuro de cloro. Cuando se

añada una solución acuosa de piridina y ácido barbitúrico, el cianuro

de cloro se acumula en el anillo de la piridina, separándolo. El

producto resultante es un glutacondialdehido intermedio, el cual al

combinarse con 2 moléculas de ácido barbitúrico (C4H4O3N2) se

condensa para producir un tinte de color violeta rojizo, susceptible a la

fotometría a 573 nm.

D. Absorción atómica a la llama: especialmente para la determinación de

plomo, cobre y cromo en el agua, suelo, se sigue así,

(a) La curva de calibración externa: de acuerdo al rango lineal de trabajo

analítico según EPA 7429(Pb), 7410(Cu) y 7190(Cr) se preparó la curva

de calibración para cada elemento a partir de soluciones estándar.

(b) Medición de las muestras de agua: luego de filtradas las muestras de

agua se determinó la concentración de cada analito, de una manera

similar a las soluciones estándares.

2.2.2. ANÁLISIS DE GENOTOXICIDAD DE MUESTRAS DE SANGRE EN

NIÑOS IMPACTADOS POR LA MINERÍA ARTESANAL DEL CERRO EL

TORO10,12,13

2.2.2.1. SELECCIÓN DE DONANTES:

Se aplicaron encuestas para obtener información personal y familiar del

estado de salud, hábitos de consumo y ocupación previa, actual y alterna

de los posibles donantes. Se seleccionaron las personas según criterios de

inclusión y exclusión de los cuales 10 serán controles y 50 son

sospechosos de contaminación, las edades a incluir serán entre 12 a 50

años

Page 26: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

25

Criterio de inclusión: se consideraron a las personas que participaron en

la campaña de salud como estrategia de inclusión de las personas que

trabajan en la minería artesanal

Criterio de exclusión: no se consideraron como parte del estudio a las

personas que no viven o trabajan en la comunidad de Shiracmaca.

2.2.2.2. OBTENCIÓN DE LAS MUESTRAS

Se tomaran con punción venosa del antebrazo 5 mL de sangre periférica

con jeringa heparinizada este procedimiento lo realizó un personal

especializado y con técnicas de asepsia.

2.2.2.3. PRUEBA DE GENOTOXICIDAD

EXTRACCIÓN DE ADN 23,24

1. Se Agregó 400 µL de sangre en un tubo de centrífuga, luego se

añadió 600 µL de Buffer de extracción.

2. Luego se Agregó un volumen de 400 µL de solución de

cloroformo/alcohol isoamílico. Mezclar por inversión durante 10 a

15 min.

3. Se Centrifugó por 10 min. a 10 000 rev/min. a una temperatura de

4ºC.

4. Se Transfirió la fase acuosa a otro tubo de centrífuga (anotar la

cantidad extraída) teniendo especial cuidado en no tocar ni el

precipitado ni el sedimento.

5. Luego se agregó 1 o 2 volúmenes de isopropanol (el cual esta

previamente en hielo), según la cantidad tomada de la fase

acuosa, en seguida se mezcló por inversión.

6. Se dejó en reposo por 10 min. a una temperatura 4 ºC.

7. Se Centrifugó por 5 min. a 10 000 rev/min.

Page 27: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

26

8. Se Eliminó el sobrenadante y se realizó 2 lavados con etanol 70%

de 700 µL cada lavado, y con un tiempo de duración de 10 – 15

min. por cada lavado.

9. Se Secó por inversión.

10. Se resuspendió en 600 µL de T.E. pH 8.

D. ELECTROFORESIS EN GEL DE AGAROSA NEUTRAL23,24

1. Se Agregó agarosa a la cantidad apropiada de solución

amortiguadora para gel TAE 1X.

2. Se Derritió la agarosa en estufa, mezclando varias veces durante

el calentamiento. Se enfrió a 55 °C manteniéndola cubierta para

evitar la evaporación.

3. Se envolvió con cinta adhesiva los extremos de la lámina

portaobjeto y se vertió la agarosa en una probeta pre-calentada

para medir el volumen y luego añadir en la lámina portaobjetos. Se

dejó solidificar (20 – 30 min).

4. Se retiró la cinta y se cargó las placas gel con muestras de ADN,

así como el control, enseguida se colocó en la cámara de

electroforesis y se vertió el buffer de corrido hasta cubrir las

mismas.

5. Se corrió las muestras en el gel a 20 V, corriente constante, hasta

que el colorante azul de bromofenol haya emigrado.

6. Se retiró las placas gel del dispositivo y se tiñó en solución de

bromuro de etidio (1 µg/mL) durante 20 minutos agitando con

suavidad.

7. Se enjuagó el gel en H2O destilada durante 20 min, se secó a

temperatura ambiente hasta observar la coloración adecuada.

8. Se observó mediante microscopia óptica las placas gel.

Page 28: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

27

2.2.4. ANÁLISIS ESTADÍSTICO25

Los datos del estudio se introdujeron y procesaron en el programa

Microsoft Office Excel 2010.

Teniendo los resultados de la determinación cuantitativa de mercurio

en los suelos, se realizará la prueba T para comparar la presencia de

metales. El nivel de significancia a utilizar para valorar la existencia

de diferencias entre los valores de las muestras será de p < 0,05.

Page 29: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

28

3. RESULTADOS

Tabla Nº 1: Concentración en ppm de metales presentes en el Cerro el Toro según muestras de Fierro, Cobre y Plomo en Suelos.

N° LUGAR Metales pesados (ppm)

Fe Cu Pb

1 TIERRA DE CANAL DE RIEGO 169.70 3.10 13.46

2 TIERRA DE PUENTE SHIRACMACA 97.78 1.51 2.41

3 TIERRA HUMEDA DE ZONA CHAMIZ 232.30 2.11 2.59

4 TIERRA SECA DE ZONA CHAMIZ 116.30 1.23 1.24

5 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 1 55.32 7.40 21.10

6 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 2 82.36 41.22 22.35

7 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 3 591.70 33.91 218.20

8 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 4 65.59 3.95 9.32

9 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 5 38.55 2.07 28.50

Tabla Nº 2: Concentración en ppm de metales presentes en el Cerro el Toro según muestras de Mercurio en Tierra y Agua

ANALISIS DE Hg en TIERRA Y AGUA

ANALISIS EN AGUA ANALISIS EN TIERRA

N° LUGAR RESULTADOS

(µg/L) LUGAR

RESULTADOS (µg/L)

1 PUENTE SHIRACMACA

0.455 TIERRA DE CANAL DE RIEGO

1.770 µg/L

2 RIO CHAMIZ BAJO 0.489

TIERRA DE PUENTE SHIRACMACA

1.147 µg/L

3 AGUA DE BEBEDEROS

0.391 TIERRA HUMEDA DE ZONA CHAMIZ

1.097 µg/L

4 AGUA DE RIEGO 0.382

TIERRA SECA DE ZONA CHAMIZ

1.150 µg/L

5 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 1

1.710 µg/L

6 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 2

1.542 µg/L

7 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 3

1.197 µg/L

Page 30: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

29

Tabla Nº 3: Concentración en ppm de metales presentes en el Cerro el Toro según muestras de Arsénico en Tierra y Agua

ANALISIS DE As en TIERRA Y AGUA

ANALISIS EN AGUA ANALISIS EN TIERRA

N° LUGAR RESULTADOS (µg/L)

LUGAR RESULTADOS (µg/L)

1 PUENTE SHIRACMACA

17.65 µg/L TIERRA DE CANAL DE RIEGO

70.23 µg/L

2 RIO CHAMIZ BAJO 36.94 µg/L TIERRA DE PUENTE SHIRACMACA

58.72 µg/L

3 AGUA DE BEBEDEROS

25.72 µg/L TIERRA HUMEDA DE ZONA CHAMIZ

70.36 µg/L

4 AGUA DE RIEGO 21.56 µg/L TIERRA SECA DE ZONA CHAMIZ

50.67 µg/L

5 TIERRA SOCAVON DE

CERRO DEL TORO 1 55.63 µg/L

6 TIERRA SOCAVON DE

CERRO DEL TORO 2 68.50 µg/L

7 TIERRA SOCAVON DE

CERRO DEL TORO 3 59.31 µg/L

Tabla Nº 4: Concentración en ppm de metales presentes en el Cerro el Toro según muestras de Cianuro en Agua

LUGAR

CIANURO EN AGUA µg/L

1 QUEBRADA CHAMIZ BAJO 34,35 µg/L

2 QUEBRADA CHAMIZ ALTO 0,5461 µg/L

3 AGUA DE RIO CERCA AL BEBEDERO 23,27 µg/L

4 SHIRACMACA 0,5577 µg/L

Page 31: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

30

TABLA N° 05: Resultados del daño genotóxico en Personas Impactadas por La Minería Artesanal en el Cerro el Toro.

PACIENTE EDAD (años)

SEXO TIPO

CONTACTO TIEMPO

CONTACTO ALIMENTACIÓN RESULTADO

1 18 M Directo 8 años Regular Positivo

2 19 M Indirecto 4 años Regular Negativo

3 20 M Directo 1 año Regular Negativo

4 22 M Directo 4 años Mala Positivo

5 24 M Directo 5 años Regular Positivo

6 24 M Directo 6 meses Regular Negativo

7 26 M Directo 6 años Mala Positivo

8 26 F Indirecto 5 años Regular Negativo

9 28 M Directo 2 años Regular Negativo

10 28 M Indirecto 7 años Mala Negativo

11 29 M Directo 2 meses Regular Negativo

12 30 M Indirecto 6 años Regular Negativo

13 31 M Directo 4 años Regular Positivo

14 31 F Indirecto 7 años Regular Negativo

15 33 F Indirecto 10 años Regular Negativo

16 35 M Directo 2 años Mala Negativo

17 36 F Indirecto 8 años Regular Negativo

18 37 M Indirecto 7 años Regular Negativo

19 41 M Directo 4 años Regular Positivo

20 41 M Directo 1 año Mala Negativo

21 44 M Indirecto 6 años Regular Negativo

22 45 M Indirecto 7 años Regular Negativo

23 48 M Indirecto 8 años Regular Negativo

24 52 M Indirecto 9 años Regular Negativo

25 53 M Indirecto 8 años Mala Negativo

26 56 M Directo 3 años Regular Positivo

27 57 M Indirecto 9 años Regular Negativo

28 59 M Indirecto 9 años Regular Negativo

29 60 M Indirecto 8 años Mala Negativo

30 64 M Indirecto 9 años Regular Negativo

31 66 M Indirecto 8 años Regular Negativo

32 69 M Directo 5 años Mala Positivo

33 78 M Indirecto 9 años Regular Negativo

34 79 F Indirecto 8 años Mala Negativo

35 80 M Indirecto 10 años Regular Negativo

36 81 M Directo 1 año Mala Negativo

Page 32: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

31

TABLA N° 06: Resultados del daño genotóxico en Personas Control no Impactadas por La Minería Artesanal en el Cerro el Toro.

PACIENTE EDAD (años)

SEXO TIPO

CONTACTO TIEMPO

CONTACTO ALIMENTACIÓN RESULTADO

1 22 M SC 0 años Regular Negativo

2 21 M SC 0 años Regular Negativo

3 28 M SC 0 año Regular Negativo

4 27 M SC 0 años Regular Negativo

5 31 M SC 0 años Regular Negativo

6 25 M SC 0 meses Regular Negativo

7 30 M SC 0 años Regular Negativo

8 29 M SC 0 años Regular Negativo

9 32 M SC 0 años Regular Negativo

10 24 M SC 0 años Regular Negativo

Page 33: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

32

Observación al Microscopio: NO HAY

DAÑO GENOTÓXICO

Observación al Microscopio:

DAÑO GENOTÓXICO

Page 34: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

33

Figura No 1. Porcentaje de Genotoxicidad en Personas Impactadas por la

Minería artesanal del Cerro el Toro - Shiracmaca – Huamachuco – La Libertad

Figura No 2. Comparación de Genotoxicidad en Personas Impactadas por la Minería Artesanal según Tipo de Contacto en el Cerro el Toro - Shiracmaca –

Huamachuco – La Libertad

Page 35: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

34

Figura No 3. Comparación de Genotoxicidad en Personas Impactadas por la Minería artesanal según el tiempo de Exposición en el Cerro el Toro - Shiracmaca

– Huamachuco – La Libertad

Page 36: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

35

4. DISCUSIÓN

La Minería Artesanal es una actividad que involucra a familias, que han

encontrado una gran oportunidad para salir de la pobreza y combatir el

desempleo, forjando un futuro mejor con sus propias manos. Con poca inversión,

tecnología sencilla y trabajo intensivo aprovechan aquellos yacimientos que para

la minería convencional han dejado de ser atractivos hace décadas. A pesar de su

enorme potencial, la minería artesanal enfrenta cotidianamente múltiples

problemas. Lo que al inicio fueron campamentos espontáneos, hoy son centros

poblados desordenados y sin servicios básicos, donde la cercanía de socavones y

viviendas atenta contra la salud de sus pobladores. Al peligro del trabajo en la

mina se suman los riesgos de la contaminación ambiental, sobre todo por

cianuro26.

En la actualidad el impacto de la minería es uno de los problemas que afecta al

medio ambiente mundial; el Perú no se encuentra exento de dicho problema, ya

que es un país con grandes yacimientos mineros. Una de las actividades es la

minería artesanal que se viene desarrollando en el poblado de Shiracmaca en

Huamachuco – La Libertad donde gran parte de la población se dedica a la

extracción de oro, ocasionando en ellos un grave problema de salud. Este impacto

origina daños a nivel de vías urinarias, afecciones a las vías respiratorias,

problemas estomacales, generando enfermedades cancerígenas originadas por

un efecto genotóxico a nivel de ADN. Motivo por el cual se desarrolló un estudio

basado en determinar el daño del ADN de las personas impactadas por la minería

artesanal del Cerro El Toro. Este estudio se realizó mediante el Ensayo Cometa.

Se ha constatado trabajos de minería artesanal en el cerro el Toro, distrito de

Huamachuco. Estos están impactando negativamente a la comunidad, y al medio

ambiente habiéndose encontrado que el 70% del cerro el Toro viene siendo

explotado de manera artesanal y sin ningún criterio técnico; utilizando como

Page 37: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

36

insumo el cianuro. Existen un promedio de 700 mineros artesanales, localizados

en un área aproximada de 100 hectáreas. El relave o desmonte, producto de la

cianuración y metales acumulados al costado de estas pozas constituyendo

pasivos ambientales y dada la acusada pendiente y constantes lluvias, estos

relaves son deslizados a las partes bajas del cerro que van hacia las viviendas

aledañas de los poblados de Shiracmaca teniendo como efectos la perdida de

suelos aptos para la agricultura, perdida de la flora y fauna. Así como poner en

evidente riesgo la salud humana y el medio ambiente27

Los valores encontrados en las muestras analizadas en el Tabla Nº1, son a partir

de 97.78 a 232.30 ppm de hierro (Fe) en suelo agrícola; mientras que el suelo de

socavón está entre 38.55 a 591.70 ppm, teniendo en consideración que el valor de

Fe es de 32 ppm, determinamos que existe un aumento de este metal en estos

suelos

En referencia al cobre los valores mayores a 100 mg/kg son superiores al rango

considerado como normal por McLean y Bledsoe (1992), y son considerados como

fitotóxicos en diversos países, sin embargo, el rango de concentración de los

suelos agrícola del caserío de Shiracmaca indican que no hay problemas por

exceso de este mineral debido a que los valores están comprendidos entre 1.51 y

3.1 ppm, esta situación es similar en la tierra de socavones que están

comprendidos entre 2.07 y 41.22 ppm, lo que no representa un problema de salud

en la actualidad para la población de dicho caserío, pero no debemos olvidar que

la actividad minera en la zona pueden incrementar la presencia de este metal,

representando entonces un peligro potencial.

En referencia al plomo (Pb), el rango para suelos no contaminados está entre 20 y

50 mg/kg. Este rango fue establecido por Nriagu (1978), referenciado en

McLaughlin et al. (1999b). luego del análisis de las muestras recolectadas en

Shiracmaca, se estableció que los suelos de cultivo presentan una cantidad de

1.24 a 13.46 ppm encontrándose en valores permisibles, mientras que la tierra de

Page 38: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

37

socavones la presencia de Plomo empieza en 9.32 a 218.2, como podemos

darnos cuenta este último valor en mención se encuentra fuera de los límites

permisibles lo que representa un problema de salud para los pobladores que se

encuentran en contacto debido a que el Plomo es ingerido, inhalado o absorbido

por la piel, resultando ser altamente tóxico para los seres vivos en general y para

los humanos en particular28.

Los valores encontrados en las muestras analizadas en la Tabla Nº2, sobre

mercurio en agua y tierra, fluctúan entre 0.382 µg/L a 0.489 µg/L y 1.097 µg/L a

1.770 µg/L, respectivamente, según los valores dados por la Dirección General de

Salud (DIGESA) donde se indica que el valor de concentración de mercurio no

debe pasar de 1 µg/L; y claramente se puede observar que los valores hallados en

las muestras de tierra sobrepasan este límite.

Los valores encontrados en las muestras analizadas en el Tabla Nº3, sobre

Arsénico en agua y tierra tienen un rango entre 17.95 µg/L a 36.94 µg/L y 50.77

µg/L a 70.36 µg/L, respectivamente, según los valores dados por la Dirección

General de Salud (DIGESA) donde se indica que el valor de concentración de

arsénico no debe exceder de 50 µg/L; y claramente se puede notar que los valores

encontrados en las muestras de tierra sobrepasan este límite.

Se observa un aumento de las concentraciones de arsénico lo cual se debe a que

en esta zona está en contacto continuo con aguas utilizadas en el proceso de

lavado de los metales, los cuales son absorbidos por los suelos pues muchos

compuestos comunes de arsénico pueden disolverse en agua; por tanto, el

arsénico puede pasar a lagos, ríos o al agua subterránea disolviéndose en el agua

de lluvia. Cierta cantidad de arsénico se adherirá a partículas en el agua o a

sedimento del fondo de lagos o ríos, mientras que otra porción será arrastrada por

el agua y al final, la mayor parte del arsénico termina en el suelo o en el

sedimento. El arsénico puede añadirse a los suelos en forma de diferentes

compuestos, tanto de carácter inorgánico: arsenito y arseniato, como orgánico. El

arsenito será oxidado en la mayoría de los suelos agrícolas a arseniato, la

Page 39: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

38

persistencia del arsénico está controlada por la capacidad de adsorción del suelo y

por las pérdidas que se puedan producir tanto por lavado o lixiviación como por

volatilización. La adsorción de arsénico es dependiente del tiempo pues como

observamos en esta zona la concentración de arsénico se ha incrementado al

paso del tiempo. El arsénico está presente en zonas donde hay actividad minera

debido a que esta en continuo cambio al entrar en contacto con el ambiente, pues

puede cambiar de forma al reaccionar con oxígeno o con otras moléculas

presentes en el aire, o por la acción de bacterias que viven en el suelo o el

sedimento. El arsénico puede viajar en el aire adherido a partículas muy pequeñas

en el polvo que levanta el viento pudiendo permanecer en el aire varios días y

movilizarse a largas distancias; finalmente estas partículas se depositan en el

suelo o son removidas del aire por la lluvia 29, 30.

El AsIII interactúa de forma específica con grupos sulfhidrilo de moléculas

celulares, lo que conduce a la inhibición de más de un centenar de enzimas, como

la Glutation reductasa (GR), Tiorredoxina reductasa y Deshidrogenasas, la

succínico deshidrogenasa (SDH) y el complejo enzimático de la piruvato

deshidrogenasa (PDH). Además de la inducción de estrés oxidativo. 31

Los valores encontrados en las muestras analizadas en el Tabla Nº4, podríamos

mencionar que la presencia de cianuro en agua de consumo, proviene

principalmente de la contaminación industrial y de un tratamiento indebido de los

productos de desecho. Las muestras de la Quebrada Chamiz bajo y las del Rio

cerca a un bebedero, presentan valores cercanos al valor permiscible (50 µg/L),

valores que con el tiempo aumentarán, en caso de no tomar medidas preventivas.

La exposición prolongada a bajos niveles de cianuro podría provocar problemas

respiratorios, la irritación de los ojos, dolores de pecho, vómitos, la pérdida de

apetito, dolores de cabeza y el aumento de tamaño del tiroides (bocio).

Cuando el pH es superior a 9.3, hay pocos iones de hidrógeno por lo que casi todo

el cianuro libre está presente como CN-, de ahí que esta es la muestra con más

alta concentración de cianuro debido al pH que presenta. También puede ser que

en disolución acuosa, el cianuro de hidrógeno forma un ácido débil, la relación

Page 40: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

39

entre el cianuro de hidrógeno y el ion cianuro puede expresarse por una reacción

de hidrólisis: esta relación es importante porque en los procesos de extracción de

oro por cianuración, que se conducen a un pH de 10.3, la mayor parte del cianuro

libre que hay en el agua de la pulpa del proceso o como fluido intersticial en

lixiviación en pila está en forma de iones CN. Dado que en los fluidos del proceso

la relación HCN/CN es baja. La capacidad de pérdida de cianuro por volatilización

es limitada.Otra explicación de la presencia de cianuro en tierra de cultivo es

debido a que una pequeña porción del cianuro en el aire está presente como

pequeñas partículas de polvo, este eventualmente se deposita sobre el suelo y el

agua. La lluvia y la nieve ayudan a remover las partículas de cianuro del aire.

32,33,34.

De los resultados obtenidos podemos observar que en la Tabla N° 5, del total de

36 pacientes, 8 presentan daño genotóxico por contacto directo y tiempo de

contacto mayor a 3 años con las sustancias tóxicas. Los 28 restantes no

presentan daño genético; de estos, 7 pacientes están en contacto directo pero con

un tiempo de contacto menor a 3 años y 21 pacientes estuvieron expuestos

indirectamente y con un tiempo de contacto que oscila entre 4 a 10 años. Las

personas impactadas por la minería artesanal guardan como común denominador

una relación entre el tipo de contacto directo y el tiempo de contacto mayor a 3

años.

En la Figura Nº 1. Se puede apreciar el resultado de genotoxicidad en ADN de

las personas impactadas. Observándose así que el 77.78% del total de la muestra

presenta un resultado negativo, es decir, no hay daño a nivel de ADN, debido a

que el tipo de exposición a sustancias tóxicas emanadas en la extracción del oro

es indirecto (no trabajan en la mina) o que el tiempo de exposición a estas

sustancias no es suficiente como para producir un fraccionamiento a nivel de

ADN. Así mismo, el 22.22% presenta un resultado positivo, lo que significa que

existe daño a nivel de ADN, porque el tipo de exposición a sustancias tóxicas es

netamente directo y el tiempo de exposición a estas sustancias es prolongado.

Page 41: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

40

En la Figura N° 2 observamos que del total de personas 15 tienen contacto

directo; esto quiere decir que son personas que trabajan en las minas del Cerro El

Toro. Entre éstas hay 8 personas que presentan un resultado positivo (daño del

ADN) y las 7 restantes muestran un resultado negativo (no daño del ADN). Por lo

que podemos deducir que un factor importante que favorece al daño genético es el

tiempo de contacto. Ahora bien las 21 personas restantes tienen un tipo de

contacto indirecto, es decir que no trabajan en el Cerro El Toro, ni viven cerca a

socavones; lo que se verifica con resultados negativos en todas ellas (no daño del

ADN), pero esto es algo que puede cambiar con el devenir del tiempo.

La Figura N° 3 relaciona los resultados obtenidos con el tiempo de exposición que

tienen los trabajadores mineros, observando que a mayor tiempo de exposición

hay mayor probabilidad de dar resultados positivos, ya que de las 15 personas que

tienen contacto directo, 8 dieron resultados positivos porque tienen de 3 a más

años trabajando en la mina; mientras que las 7 personas que dieron resultados

negativos tienen un tiempo de trabajo menor a tres años.

Los mineros artesanales realizan sus actividades de una forma tradicional y

carente de tecnología, por lo tanto no cuentan con medidas básicas y/o mínimas

de protección a su salud. Es por ello, que las sustancias tóxicas como mercurio,

arsénico, cromo, plomo, cianuro, etc. , ingresan al organismo por las diferentes

vías de absorción como son la vía cutánea, vía respiratoria, etc.; esto gracias al

carácter lipofílico de los tóxicos y a su afinidad química por membranas biológicas

produciendo también acumulación de éstos en tejidos adiposos, como

consecuencia de la disminución en la eficacia de su eliminación por parte del

cuerpo humano, agotando su capacidad de aumentar la polaridad de estas

sustancias, evitando su eliminación y permitiendo su acumulación, originando el

fraccionamiento del ADN. A todo esto se suma la calidad de alimentación de los

pacientes, que en promedio es regular, por la falta de educación e información

nutricional de los alimentos, pues la actividad agrícola en la zona ha disminuido

notablemente como consecuencia de lo rentable que se ha tornado la minería.

El daño genético se traduce en una modificación del ADN por ruptura o

transformación química de alguna de sus bases, que originan fraccionamiento del

Page 42: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

41

material genético. Esto debido a que los compuestos tóxicos que están presentes

en el proceso de síntesis del ADN en el cual ocurre el desenrrollamiento de su

doble cadena y formación de la hélice de replicación, interactúan con el material

genético, para posteriormente provocar cambios a nivel de sus bases

nitrogenadas por mecanismo de oxidación, desaminación e hidrólisis, ocasionando

translocaciones, delecciones y transversiones, que posteriormente se traducen en

mutaciones celulares.

La minería en el Perú es beneficiosa económicamente y por ende se le debe

apoyar, sin embargo no se debe olvidar el gran impacto socioambiental que

también causa esta actividad. Las consecuencias sociales como las condiciones

de trabajo muy precarias, jornada de trabajo prolongadas, las graves deficiencias

de seguridad y las consecuencias extremadamente negativas para la salud de las

personas son causadas directamente por intoxicaciones, accidentes, polvo, etc., lo

que nos obliga a no quedar exentos a toda esta realidad.

Todos los conocimientos adquiridos y los resultados obtenidos en este trabajo nos

permiten tener un panorama claro de la deficiente calidad de vida que presentan

los pobladores expuestos a la contaminación de la minería artesanal de esta

localidad. A pesar de que han existido intentos de mejorar esta situación como

planes de desarrollo ambiental por parte de las autoridades locales y regionales,

así como también la intervención de otras entidades gubernamentales y privadas

no ha sido suficiente para mejorar la calidad de vida de los trabajadores

artesanales.

El presente trabajo de investigación cuenta con la base científica para poder

garantizar cualquier proyecto de desarrollo o política por parte del gobierno local,

regional y central, las cuales nos permitan mitigar y/o solucionar está

problemática, respaldándose en las leyes existentes así como la Ley General del

Ambiente que tiene como prioridad la prevención de riesgos y daños a la salud de

las personas.

Page 43: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

42

5. CONCLUSIONES

1. Se determinó la presencia de sustancias tóxicas como mercurio, arsénico en

tierra y agua, hierro, cobre y plomo en tierra y cianuro en agua.

2. Se determinó el efecto genotóxico en el ADN de personas impactadas por la

minería artesanal del Cerro el Toro encontrándose un 22.22% de personas

que presentan daño del ADN evidenciándose el efecto del daño estructural del

ADN a través de la observación microscópica por el Efecto Cometa

3. Se determinó que el tiempo de exposición y el tipo de contacto son factores

importantes en el daño genético.

Page 44: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

43

6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS:

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Huamachuco. [Fecha de acceso 31 de agosto 2010]. Disponible en:

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l_toro

28. Goyzueta G, Trigos C. Riesgos de Salud Pública en el Centro Poblado

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Disponible en: http://sisbib.unmsm.edu.pe /BVrevistas/Medicina_Expe-

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http://publicaciones.ua.es/filespubli/pdf/LD8479081929819613.pdf

Page 47: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

46

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Arsénico. Departamento de Salud y Servicios Humanos de EE. UU.,

Servicio de Salud Pública. División de Toxicología y Medicina Ambiental

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31. Gisbert J. Medicina Legal y toxicológica. 5ºed. España: Ed. Masson, S.A.

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32. Barclay M., Knowles C., Tett V. Biodegradación de cianuros metálicos.

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http://www.espatentes.com/pdf/2156387_t3.pdf

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Oro Utilizando el Cianuro. [Fecha de acceso 02 de enero 2011].

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34. Morales A., Salvador R. Efecto del pH e Intensidad de Corriente en la

Concentración de NaCN presente en un Efluente Minero Aurífero

Mediante una Celda Electrolítica de Lecho Empacado. Universidad

Nacional de Trujillo. Perú. 2001.

Page 48: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

47

ANEXOS

Page 49: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

48

ANEXO N°1

HOJA DE RESULTADOS Y PARÁMETROS ANALIZADOS EN LA

ENCUESTA

MUESTRA EDAD (años) SEXO

TIPO

CONTACTO

TIEMPO

CONTACTO ALIMENTACIÓN RESULTADO

1.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8.

9.

10.

11.

12.

13.

14.

15.

16.

17.

18.

19.

20.

21.

22.

23.

24.

25.

26.

27.

28.

29.

30.

Page 50: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

49

ANEXO N° 2

BOLETÍN INFORMATIVO

ANEXO N° 04

CONSENTIMIENTO INFORMADO

Yo …………………………………………………………………………………..…….

identificado con DNI N°…………………, domiciliado en

…….…………………………………., que después de haber sido informado ampliamente

sobre la metodología a realizar y beneficios derivados del estudio, acepto y me comprometo

a ser partícipe de las actividades programadas para la realización del proyecto:

“DETERMINACIÓN DEL EFECTO A NIVEL DE ADN DE PERSONAS ADULTAS

IMPACTADAS POR LA MINERÍA ARTESANAL CERRO EL TORO, SHIRACMACA

– HUAMACHUCO 2012”, llevado a cabo por la Facultad de Farmacia y Bioquímica de la

Universidad Nacional de Trujillo.

Trujillo, 6 de octubre del 2010

__________________________

Firma

Page 51: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

50

ANEXO N° 3

ENCUESTA

I.- DATOS GENERALES:

Nombre y Apellidos:………………………………………………….……….………

Edad: ……....... Sexo: M F

Peso:…………. Talla:…….... P.A.: …………….……..

Dirección: …………………………………………………………………………….

II.- ASPECTO NUTRICIONAL:

Tipos de alimentos que consume:

Harinas: Si No

Cuáles y cuantas veces a la semana: ______________________________________

Carnes: Si No

Cuáles y cuantas veces a la semana: _______________________________________

Lácteos: Si No

Cuáles y cuantas veces a la semana: _______________________________________

Legumbres: Si No

Cuáles: _____________________________________________________________

Frutas y Verduras: Si No

Cuáles y cuantas veces a la semana: ______________________________________

Embutido Si No

Cuáles y cuantas veces a la semana: ______________________________________

Café: Si No

Cuántas veces a la semana: ______________________________________

III.- ESTILO DE VIDA:

¿Ud. consume bebidas alcohólicas?

Siempre A veces Nunca

¿Ud. consume gaseosa?

Siempre A veces Nunca

¿Consume Medicamentos?

Siempre A veces Nunca

Cuáles: _________________________________________________________

Condición Física:

Hace ejercicios No hace ejercicios

Tabaquismo:

Fuma No Fuma

IV.- ASPECTO LABORAL

¿En que trabaja actualmente?

__________________________________________________________________

¿Cuánto tiempo viene realizando esa actividad?

__________________________________________________________________

V.- ANTECEDENTES:

¿Tiene familiares con alguna enfermedad? ¿Cuáles?

Page 52: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

51

__________________________________________________________________

VI.- OTROS:

¿Sufre de alguna enfermedad actualmente?

________________________________________________________________

________________________________________________________________

¡ GRACIAS POR SU COLABORACIÓN !

Page 53: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

52

“CUIDANDO EL MEDIO AMBIENTE

PROTEGEMOS LA SALUD DE LA

POBLACIÓN”

“CUIDANDO EL MEDIO AMBIENTE

PROTEGEMOS LA SALUD DE LA

POBLACIÓN”

“CUIDANDO EL MEDIO

AMBIENTE PROTEGEMOS LA

SALUD DE LA POBLACIÓN”

ANEXO N° 4

TRÍPTICO

Los principales problemas de salud que genera

la actividad minera son: Náuseas

Diarreas

Dolor de Cabeza

Fiebre

Dolores Musculares

Problemas respiratorios: Dificultad para

respirar, Bronquitis, Asma, etc.

Anemias

Insuficiencia Renal.

PULMONES

ESTÓMAGO

RIÑONES

HÍGADO

PIEL

Problemas Ambientales

CÁNCER A

DIVERSOS

ÓRGANOS

IMPACTO

AMBIENTAL Y

ADN

Page 54: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

53

¿Causas del Impacto

Ambiental?

RIESGO DE INGESTA ACCIDENTAL EN MENORES DE EDAD

Se produce por los insumos que utiliza la

actividad, por el espacio que ocupa y por los

efluentes que emite. Siempre que hay una

actividad humana se producen impactos,

pero muchos de ellos, son despreciables; para

que un impacto sea digno de atención debe

ser significativo. Algunas actividades son:

ACTIVIDAD INDUSTRIAL.

ACTIVIDADAD MINERA

CONTAMINACIÓN

Reciban el cordial saludo de los

alumnos de la Facultad de Farmacia y

Bioquímica de la Universidad Nacional

de Trujillo, que forman parte de un

equipo de investigación denominado

Impacto Ambiental, el cual esta

avocado en esta ciudad a realizar

estudios sobre los efectos que causa la

minería informal, pero no solo eso si

no también a buscar soluciones de

cómo poder resolver los problemas

que se puedan generar y además de

promover y realizar campañas de salud

para la mejora de la calidad de vida de

toda la comunidad. Esperamos su

apoyo en esta noble labor para que

juntos busquemos una vida mejor para

nosotros y para nuestros hijos.

Perjudiciales

Mejor situación

Económica

Generación de Empleos

Mayor posibilidad de educación

PRESENTACIÓN

El impacto ambiental es sin duda alguna el

efecto que produce una determinada acción

humana sobre el medio ambiente en sus

distintos aspectos el cual nos concierne a

todos los seres humanos, ya que somos

nosotros los causantes de este desgaste.

¿Qué es Impacto

Ambiental?

Beneficiosas

Consecuencias de la

Actividad Minera

Se produce un desequilibrio ecológico

debido a las sustancias tóxicas que se

emana de esta actividad,

contaminando el aire, suelo y gua;

afectando así también a los seres vivos

que viven en ellos.

Algunos metales, como cadmio y

mercurio, y metaloides como

antimonio o arsénico, los cuales son

muy común en pequeñas cantidades

en depósitos metálicos son altamente

tóxicos, aun en pequeñas cantidades,

particularmente en forma soluble, la

cual puede ser absorbida por los

organismos vivos.

Problemas Ambientales

H.E.C.H

.

Page 55: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

54

ANEXO N° 5

CONSENTIMIENTO INFORMADO

Yo …………………………………………………………………………………..…….

identificado con DNI N°…………………, domiciliado en

…….…………………………………., que después de haber sido informado

ampliamente sobre la metodología a realizar y beneficios derivados del estudio,

acepto y me comprometo a ser partícipe de las actividades programadas para la

realización del proyecto: “CALIDAD DE ADN DE PERSONAS IMPACTADAS

POR LA MINERÍA ARTESANAL EN EL CERRO EL TORO, HUAMACHUCO,

LA LIBERTAD 2010” , llevado a cabo por la Facultad de Farmacia y Bioquímica de

la Universidad Nacional de Trujillo.

Trujillo, 8 de octubre del 2010

__________________________

Firma

ANEXO N° 6

RESULTADOS DE LOS ANÁLISIS REALIZADOS

Apellidos y Nombres: …………………………………………………………………….

Dirección: ………………………………………………………………………………..

Talla: ………….…… Peso: ……….……

ANÁLISIS RESULTADO

ADN

Page 56: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

55

ANEXO N° 7

N° LUGAR Metales pesados (ppm)

Fe

1 TIERRA DE CANAL DE RIEGO 169.7

2 TIERRA DE PUENTE SHIRACMACA 97.78

3 TIERRA HUMEDA DE ZONA CHAMIZ 232.3

4 TIERRA SECA DE ZONA CHAMIZ 116.3

5 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 1 55.32

6 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 2 82.36

7 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 3 591.7

8 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 4 65.59

9 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 5 38.55

Prueba T Para comparar Metales Pesados (Fe) en Tierras de Cultivo vs Tierras de Socavon

Variables a Comparar en Fe Promedio Desv. Est. P

Tierras de Cultivo 154.02 60.44 0.92116

Tierra de Socavon 166.704 238.11

N° LUGAR Metales pesados (ppm)

Cu

1 TIERRA DE CANAL DE RIEGO 3.1

2 TIERRA DE PUENTE SHIRACMACA 1.51

3 TIERRA HUMEDA DE ZONA CHAMIZ 2.11

4 TIERRA SECA DE ZONA CHAMIZ 1.23

5 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 1 7.4

6 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 2 41.22

7 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 3 33.91

8 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 4 3.95

9 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 5 2.07

Prueba T Para comparar Metales Pesados (Cu) en Tierras de Cultivo vs Tierras de Socavon

Variables a Comparar en Cu Promedio Desv. Est. P

Tierras de Cultivo 1.9875 0.828 0.1362

Tierra de Socavon 17.71 18.408

W = 12

P = 0.0662

Dado que P es mayor igual que 0.05 entonces la prueba U indica que No existe diferencia significativa

Page 57: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

56

N° LUGAR Metales pesados (ppm)

Pb

1 TIERRA DE CANAL DE RIEGO 13.46

2 TIERRA DE PUENTE SHIRACMACA 2.41

3 TIERRA HUMEDA DE ZONA CHAMIZ 2.59

4 TIERRA SECA DE ZONA CHAMIZ 1.24

5 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 1 21.1

6 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 2 22.35

7 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 3 218.2

8 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 4 9.32

9 TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 5 28.5

Prueba T Para comparar Metales Pesados (Pb) en Tierras de Cultivo vs Tierras de Socavon

Variables a Comparar en Fe Promedio Desv. Est. P

Tierras de Cultivo 4.925 5.721 0.26223

Tierra de Socavon 59.894 88.767

W = 34

P = 0.0373

Dado que P es menor que 0.05 entonces la prueba U indica diferencia significativa

Page 58: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

0

ANALISIS DE Hg en TIERRA Y AGUA µg/L

ANALISIS EN AGUA ANALISIS EN TIERRA

N° LUGAR RESULTADOS

(µg/L) LUGAR RESULTADOS (µg/L)

1 PUENTE SHIRACMACA 0.455 TIERRA DE CANAL DE RIEGO 1.77

2 RIO CHAMIZ BAJO 0.489 TIERRA DE PUENTE SHIRACMACA 1.147

3 AGUA DE BEBEDEROS 0.391 TIERRA HUMEDA DE ZONA CHAMIZ 1.097

4 AGUA DE RIEGO 0.382 TIERRA SECA DE ZONA CHAMIZ 1.15

5

TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 1 1.71

6

TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 2 1.542

7

TIERRA SOCAVON DE CERRO DEL TORO 3 1.197

Prueba T Para comparar_________________________________ en Tierras de Cultivo vs Tierras de Socavon

Variables a Comparar en Fe Promedio Desv. Est. P

Tierras de Cultivo 1.291 0.3203 0.43762

Tierra de Socavon 1.483 0.2615

Page 59: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

1

Lectura de las Absorbancias de los estándares - Arsénico

Curva de Calibración para Arsénico

y = 0.009x - 0.0163

0

0.02

0.04

0.06

0.08

0.1

0.12

0.14

0 5 10 15 20

Ab

sorb

anci

a

Concentracion de Arsenico (ppm)

Concentracion de Arsenico vs Absorbancia

Estándar

ppm Absorbancia

Estándar 1 5 0.028

Estándar 2 10 0.075

Estándar 3 15 0.118

Page 60: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

2

y = 0.0136x + 0.007 R² = 0.9927

0

0.02

0.04

0.06

0.08

0.1

0.12

0.14

0.16

0 2 4 6 8 10 12

AB

SOR

VA

NC

IA

CONCENTRACIÓN ppb

Lectura de las Absorbancias de los estándares - Mercurio

Curva de Calibración para Mercurio

ESTÁNDAR CONCENTRACION (ppb) ABSORVANCIA

ESTÁNDAR 1 1 0.0173

ESTÁNDAR 2 5 0.325

ESTÁNDAR 3 10 0.422

Page 61: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

3

Lectura de las Absorbancias de los estándares - Cianuro

Curva de Calibración para Cianuro

ESTÁNDAR CONCENTRACION (ppm) ABSORVANCIA

ESTÁNDAR 1 0.025 0.028412

ESTÁNDAR 2 0.05 0.060303

ESTÁNDAR 3 0.1 0.11987

ESTÁNDAR 4 0.2 0.13702

Page 62: ESCUELA DE POSTGRADO DOCTORADO EN FARMACIA Y …

4

y = 0.5964x + 0.0305 R² = 0.8271

0

0.02

0.04

0.06

0.08

0.1

0.12

0.14

0.16

0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25

AB

SOR

VA

NC

IA

CONCENTRACION