E.S.E HOSPITAL LA VEGAeselavega-cundinamarca.gov.co/wp-content/uploads/2020/05/... · 2020. 5. 13. · INMUNOLOGIA Vigencia:2019 Cód.:GMLCMA - 120.11 Versión: 1 EMPRESA SOCIAL DEL

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS EN INMUNOLOGIA

Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1

EMPRESA SOCIAL DEL ESTADO HOSPITAL DE

LA VEGA – PUESTO DE SALUD DE NOCAIMA Página 2 de 33

Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran

Cargo: Lider laboratorio clinico

Cargo:

Gestora de planeación y calidad

Cargo: Gerente

Fecha: Enero 24 de 2019 Fecha: Enero 26 de 2019 Fecha: Enero 26 de 2019

E.S.E HOSPITAL LA VEGA

MANUAL DE INMUNOLOGIA


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


LABORATORIO CLINICO

1. INTRODUCCION

Durante los últimos años el advance tecnológico ha permitido desarrollar técnicas que ayudan al diagnóstico de múltiples enfermedades. En el caso de las enfermedades autoinmunes, las técnicas inmunológicas son de gran ayuda ya que permiten la detección de varios auto - anticuerpos simultáneamente a partir de volúmenes de muestra pequeños. Con el desarrollo de las nuevas técnicas, la sensibilidad y especificidad en la detección de las especificidades de los anticuerpos también han ido en aumento, de tal manera que el clínico puede contar con pruebas que le permiten hacer los diagnósticos tempranos con mayor certeza y hacer también el seguimiento del curso de la enfermedad en función de la variación de los anticuerpos presentes en las muestras de los pacientes. Cabe destacar que las nuevas técnicas de laboratorio que se utilizan para el apoyo en el diagnóstico de las enfermedades autoinmunes ya no son exclusivas de laboratorios de investigación, sino que por su control de calidad, facilidad de estandarización y reproducibilidad pueden usarse en laboratorios clínicos medianos y pequeños. En el presente manual se describen las técnicas de mayor aplicación en el laboratorio clínico.

2. OBJETIVO


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


� Dar a conocer las diferentes pruebas inmunológicas realizadas en el Laboratorio clínico del Hospital de la Vega

� Definir el procedimiento de cada una de las pruebas inmunológicas. 3. ALCANCE

Este documento seta dirigido a las bacteriólogas del laboratorio clínico del Hospital de la Vega quienes se encargan de la realización de estas pruebas

4. RESPONSABLES

Bacteriólogas del laboratorio clínico del Hospital de la Vega

5. PRUEBAS INMUNOLOGICAS RAPIDAS

5.1 . VDRL TEST

FUNDAMENTO

Las reaginas plasmáticas presentes en individuos infectados por T. pallidum se


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


detectan en suero por la reacción con un antígeno cardiolipinico purificado y estabilizado. Si la muestra contiene reagina, esta se unirá al antígeno produciendo una floculación visible en microscopio.

CONSERVACION DE REACTIVOS

Conservar a 2-8 C.

PROCEDIMIENTO

Ver inserto según casa comercial.

� Dejar atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. � Depositar 50 ul de la muestra a ensayar y una gota de cada control en círculos

separados en la lámina de vidrio para VDRL. � Homogenizar el reactivo (A) con suavidad antes del ensayo. Adaptar la aguja al

extremo del vial dispensador de plástico. Invertir el conjunto y presionar ligeramente para eliminar el aire retenido en la aguja.

� Situar la aguja en posición vertical a la tarjeta y añadir a cada círculo una gota de reactivo próxima a la muestra a analizar.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


� Mezclar con ayuda de un palillo desechable, procurando extender la mezcla por toda la superficie interior del círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.

� Agitar la lámina a 180 r.p.m. durante 4 minutos.

LECTURA

Examinar microscópicamente la presencia o ausencia de floculación. Los resultados se evalúan de acuerdo con el siguiente criterio:

TIPO DE AGLUTINACION LECTURA RESULTADO

Floculos grandes, medianos o pequeños

Ningún floculo

R (Reactivo)

N (No reactivo)

Positivo

Negativo

5.2. ASO ANTIESTREPTOLOSINAS LATEX


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


El anticuerpo antiestreptolisina O se encuentra presente en casi todas las personas en títulos bajos, debido a que las infecciones estreptocócicas son comunes. Sin embargo un título alto o creciente de antiestreptolisina O, indica una infección reciente producida por un estreptococo beta hemolítico de grupo A, como amigdalitis, escarlatina, sepsis puerperal, erisipela.

FUNDAMENTO

Los anticuerpos antiestreptolisina O se detectan en suero por su reacción con la estreptolisina O adsorbida sobre soporte inerte de látex. Los anticuerpos antiestreptolisina reaccionan con la estreptolisina produciendo una aglutinación visible macroscópicamente.

REACTIVO Y CONTROLES

Reactivo de Látex: suspensión de partículas de látex poliestireno recubiertas con estreptolisina O. Control Negativo: suero no reactivo con el Reactivo de Látex. ControlPositivo: suero humano conteniendo antiestreptolisina O, en concentración superior a 250 UI/ml.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


PRECAUCIONES

Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro". Los Controles Positivo y Negativo han sido examinados para antígeno de superficie del virus de hepatitis B y anticuerpos contra HIV 1/2, encontrándose no reactivos.

CONSERVACION

Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.

MATERIAL

• Placa de vidrio

• pipetas para dispensar los volúmenes indicados.

• Palillos mezcladores descartables

• Cronómetro

RECOLECCION DE LA MUESTRA

Suero

• Recolección: obtener suero de la manera usual.

• Aditivos: no se requieren.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


• Sustancias interferentes conocidas: los sueros marcadamente lipídicos o contaminados pueden dar resultados falsamente positivos.

• Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la antiestreptolisina en suero es estable 24 horas refrigerada (2- 10oC) o congelada por períodos prolongados.

PROCEDIMIENTO


Llevar los reactivos y la muestra a temperatura ambiente. Agitar el Reactivo de Látex antes de usar.

Técnica cualitativa En uno de los sectores delimitados de la placa de vidrio colocar:

• Reactivo de Látex 1 gota (50 ul)

• Muestra 1 gota (50 ul)

• Mezclar con palillo descartable (uno para cada muestra) hasta obtener una suspensión uniforme en la superficie delimitada de la placa. Inmediatamente disparar un cronómetro.

• Balancear suavemente la placa y observar macroscópicamente el resultado dentro de los 2 minutos.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS

La presencia de aglutinación indica un contenido de antiestreptolisina-0 en el suero igual o superior a 200 Ul/ml. La ausencia de aglutinación indica un contenido de antiestreptolisina-0 en el suero inferior a 200 Ul/ml.

Técnica semicuantitativa

(Titulación) Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas en tubos de Kahn.

• Colocar 0,5 ml de solución fisiológica en cada uno de los tubos.

• Agregar 0,5 ml de suero al tubo No 1 y mezclar. Transferir 0,5 ml de esta dilución al tubo No 2 y mezclar, continuando así las diluciones hasta el último tubo.

• Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, etc.

• Ensayar cada dilución según técnica I.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

• Tiempos de reacción mayores de 2 minutos pueden producir reacciones falsamente positivas por efecto del secado de los reactivos.

• Se pueden producir falsos negativos en niños mayores de 6 meses y menores de 6 años o en infección reciente.

• Debe tenerse en cuenta que en este tipo de infecciones, un resultado aislado sólo constituye un dato auxiliar, por lo que se recomienda efectuar determinaciones seriadas cada 15- 20 días durante 4 ó 6 semanas.

5.2. FACTOR REUMATOIDEO RA test

La artritis reumatoidea es un síndrome crónico de etiología desconocida, caracterizado por una inflamación inespecífica y generalmente simétrica de las


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


articulaciones, que a veces evoluciona hacia la destrucción de las estructuras articulares y periarticulares. En la articulación enferma se observa un engrosamiento de la membrana sinovial con formación de pliegues y proliferación de linfocitos. Estas células, que forman folículos linfoides, son las responsables de la síntesis de factores reumatoideos (FR) y otras inmunoglobulinas.

Los FR son generalmente de tipo IgM anti-IgG, es decir que reaccionan con las fracciones Fc de las IgG. También se han encontrado FR de tipo IgG, aunque en mucho menor proporción de casos. Los FR de tipo IgM están presentes en el 85-90% de los adultos con artritis reumatoidea aunque no es específico de la enfermedad puesto que también se han encontrado en individuos sanos (en un 3 a 5% de los casos).

Por tal motivo, cuando se sospecha la existencia de una enfermedad distinta de la artritis reumatoidea, frente a una reacción de aglutinación positiva es aconsejable realizar la precipitación de las globulinas con sulfato de amonio. De

tal forma, se asegura la precipitación completa de los FR y se mantiene en solución cualquier aglutinina responsable de una falsa reacción positiva, como así también algún posible inhibidor.

FUNDAMENTO

El factor reumatoideo de tipo IgM se detecta en presencia de gamma-inmunoglobulina o fracción II de Cohn (que en este caso es el antígeno) adsorbida sobre un soporte inerte de látex-poliestireno. Este antígeno se une a los FR (anti-IgG) produciendo una aglutinación de las partículas de látex-poliestireno, visible


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


macroscópicamente.

REACTIVOS Y CONTROLES

• Reactivo A: suspensión de partículas de látex poliestireno de 0,20 micrones de diámetro, que tienen adsorbidas moléculas termoagregadas de gamma-inmunoglobulina o fracción II de Cohn.

• Control Positivo: dilución de suero humano positivo. Equivale a 2 (+).

• Control Negativo: dilución de suero humano negativo.

PRECAUCIONES

• Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".

• Los controles han sido ensayados para HIV, HCV y HBV encontrándose inactivos. No obstante, deben ser empleados como si se tratara de material infectivo.

• Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


• Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente

CONSERVACIÓN

• Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar

MATERIAL

• placas de plástico o vidrio fondo negro.

• Palillo o varilla de vidrio.

• Cronómetro.

RECOLECCIÓN

• Recolección: obtener suero de la manera usual. No deben usarse muestras inactivadas por calor.


• Sustancias interferentes conocidas: hemólisis y ciertas proteínas (distintas del factor reumatoideo) pueden ser causa de resultados erróneos.

PROCEDIMIENTO


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente



• Llevar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente antes de usar.

Técnica cualitativa

• En uno de los sectores delimitados de la placa adjunta al equipo, colocar: Muestra 1 gota (50 ul) Reactivo A 1 gota (50 ul)

• Mezclar con palillo o varilla de vidrio hasta obtener una suspensión uniforme en toda la superficie delimitada de la placa.

• Inmediatamente, disparar un cronómetro, balancear suavemente la placa y observar macroscópicamente el resultado dentro de los dos minutos bajo un haz luminoso.

Técnica semicuantitativa

• Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas, en 6 tubos de Kahn.

• Colocar 0,4 ml de solución fisiológica al primer tubo y 0,2 ml de solución fisiológica a los 5 restantes.

• Agregar 0,1 ml (100 ul) de suero al tubo No 1 y mezclar. Transferir 0,2 ml de esta dilución al tubo No 2 y mezclar, continuando de esta forma las diluciones hasta el último tubo.

• Las diluciones así obtenidas equivalen a 1:5; 1:10; 1:20; 1:40; 1:80; 1:160.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


INTERPRETACION DE RESULTADOS

Técnica cualitativa

• Negativo: suspensión homogénea.

• Positivo: aglutinación que aparece dentro de los dos minutos. Se califica de 1 a 4 (+), siendo: 4+: aglutinación franca 3+: moderada aglutinación 2+: ligera aglutinación 1+: aglutinación débil

Técnica semicuantitativa (titulación) Título: inversa de la máxima dilución a la que se produce aglutinación visible macroscópicamente. La concentración aproximada de factor reumatoideo en la muestra puede ser calculada por la fórmula siguiente: FR (UI/ml) = Título x Sensibilidad de la reacción (1 UI/ml) Ejemplo: la muestra presenta un título de 1:40. Su concentración en FR es de 40 x 1 = 40 UI/ml.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente



Sensibilidad analítica: calibrado frente al Standard del CDC, se encuentra una sensibilidad de 1 UI/ml. En un estudio realizado sobre 176 muestras provenientes de una población hospitalaria se compararon los resultados con un método turbidimétrico cuantitativo, obteniéndose una sensibilidad del 100%. En otro estudio realizado sobre una población de 33 muestras de pacientes con historia clínica de artritis reumatoidea, se obtuvieron 29 muestras reactivas. Se concluye que el 88% de los pacientes con artritis reumatoidea son FR positivos. b) Especificidad: en un estudio realizado sobre 75 muestras provenientes de 50 hombres y 26 mujeres con edades entre 18 y 47 años, sin síntomas aparentes de enfermedad reumática, se encontraron 72 muestras no reactivas. Por lo tanto, se concluye que el 4% de esta población sana es FR positiva, siendo la especificidad


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


del 96%.

5.3 TOXOPLASMA IgG/IgM TEST La toxoplasmosis es una enfermedad infecciosa del hombre y de los animales, de distribución universal, cuyo agente etiológico es un parásito intracelular obligado, el Toxoplasma gondii.

Es una enfermedad generalmente benigna y asintomática en individuos inmunocompetentes, convirtiéndose en una seria complicación en pacientes inmunocomprometidos como los que tienen el síndrome de inmunodeficiencia adquirido o los que se hallan bajo terapia inmunosupresora.

Cuando la infección se adquiere durante la gestación, existe un alto riesgo de infección del feto, pudiendo provocar abortos o lesiones graves en el mismo como coriorretinitis, hidrocefalia, microcefalia, calcificaciones cerebrales y retardos psicomotrices. Las lesiones provocadas en el feto son más severas cuanto más temprana en el embarazo sea la contaminación materna. Si la infección es previa al embarazo, la madre se considera inmunizada y el embrión protegido.

Las determinaciones serológicas son las más convenientes y certeras para el diagnóstico de la toxoplasmosis ya que la detección del parásito no siempre es confiable y es inadecuada para el diagnóstico masivo. FUNDAMENTO


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


La muestra se pone en contacto con un reactivo de látex sensibilizado con antígenos purificados de Toxoplasma gondii. Si la muestra contiene anticuerpos anti-T. gondii, éstos reaccionarán en forma sensible y específica produciéndose tres líneas tanto en el control como las de las pruebas. REACTIVOS

• Diluyente : suspensión al 1% de partículas de látex sensibilizadas con antígenos de T. gondii.

PRECAUCIONES • Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".

• Todas las muestras de pacientes deben manipularse como si fueran capaces de transmitir infección.

• Los sueros controles han sido examinados para antígeno de superficie de hepatitis B (HBsAg) y virus de inmunodeficiencia humana (HIV), encontrándose no reactivos. Sin embargo deben ser empleados como si se tratara de material infectivo ya que ningún método puede ofrecer la total seguridad de la ausencia de éstos u otros agentes infecciosos.

• Si bien tanto el reactivo como los controles poseen conservantes, son susceptibles a la contaminación, por lo que deben manipularse con cuidado.

• Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de química clínica.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


• Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.

CONSERVACION

Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente, hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar.

No utilizar los reactivos una vez superada la fecha de vencimiento.

MATERIALES

• Bolsas selladas individualmente que contiene un casete

• Tubo capilar (10ul) o pipeta

• Diluyente

• cronometro

RECOLECCION MUESTRA

Suero


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


• Recolección: obtener suero de la manera usual. El paciente debe estar preferentemente en ayunas. No es necesario inactivar. No usar plasma. Descartar los sueros contaminados o hemolizados.


• Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis o hiperlipemia son causa de resultados erróneos.

• Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el suero debe ser límpido, libre de partículas y preferentemente fresco. En caso de no procesarse en el momento, puede conservarse en refrigerador (2-10oC) durante no más de 48- 72 horas a partir del momento de la extracción. Si se debe conservar por períodos más prolongados, congelar a -20oC. Evitar los congelamientos y descongelamientos sucesivos.

PROCEDIMIENTO


• Llevar a temperatura ambiente (18-25oC) los reactivos y las muestras antes de usar.

• Abrir la bolsa y colocar el dispositivo en una superficie plana y limpia, debidamente marcada con identificación del paciente

• Llenar el tubo capilar sin exceder la línea de muestra como indica el mismo.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


• Dispensar la muestra en posición vertical en el pozo de muestra e inmediatamente agregar dos gotas de diluyente en dicho pozo en posición vertical.

• Poner en marcha cronometro de 10-15 minutos

• Leer y reportar.

INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS Técnica cualitativa No Reactivo: cuando no se detectan anticuerpos anti T. gondii .. En caso de obtener un resultado no reactivo en una muestra de embarazada, se recomienda repetir la determinación periódicamente para detectar una posible seroconversión

Reactivo: cuando se detectan anticuerpos anti T. gondii ya sea IgM o IgG dependiendo de la línea que aparezca.


1.Se debe llevar las instrucciones especificas en el momento del procedimiento e interpretación de los resultados .

2. La prueba rápida Toxo IgG/IgM esta limitada a la detección cualititativa de anticuerpos T. gondii en suero, plasma, sangre total ya que la intensidad del color


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


obtenido en las líneas de ensayo no tienen correlación lineal con la concentración de anticuerpos en la muestra.

3. un resultado no reactivo indica ausencia de niveles detectables anticuerpos T. gondii sin embargo no excluye la posibilidad de exposición o infección de t. gondii.

4. Algunas muestras que contenga cantidades inusualmente altas de anticuerpos heterofilos o factor reumatoideo puede afectar los resultados.

5.4 PRUEBA DE EMBARAZO

La concentración de la gonadotropina corionica humana (hCG) se incrementa dramáticamente en la sangre y orina durante un embarazo normal. HCG es secretada por el recubrimiento de la placenta, comenzando con la trofoblasto primitiva, casi desde el tiempo de la implantación, y sirve para soportar el corpus luteum durante las primeras semanas de embarazo. HCG o glicoproteínas similares hCG pueden también ser producidas por una amplia variedad de tumores trophoblastico y no trophoblastico. La medición de hCG, por los sistemas de análisis con adecuada sensibilidad y especificidad han proveído de un gran valor en la detección de embarazo y el diagnóstico temprano de desórdenes en el embarazo.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


De acuerdo a la literatura, hCG es detectable en un tiempo de tan solo 10 días después de la ovulación, alcanzando los 100mIU/ml en el primer periodo perdido. Por el tiempo de la siguiente ovulación, los niveles de hCG son 200 mi/ml (aproximadamente 28 días después de la concepción). Un pico de 50,000 o hasta 100,000 mi/ml es obtenido en el tercer mes, entonces después un declive gradual se observa. PRINCIPIO Es un inmunoensayo por cromatografía de flujo lateral. El método emplea una combinación única de conjugado anticuerpo monoclonal-colorante y anticuerpos policlonales en fase sólida para identificar selectivamente hCG presente en las muestras, con un elevado grado de sensibilidad. En menos de 5 minutos, pueden detectarse niveles de hCG tan bajos como 10 mIU/ml. Cuando se aplica una cantidad suficiente de muestra en la porción absorbente, ésta migra por capilaridad a través de la tira. El conjugado anticuerpo-colorante se une a la hCG formando un complejo anticuerpo-antígeno. Este complejo se une al anticuerpo anti-hCG de la zona de reacción positiva produciendo una banda coloreada rosa cuando la concentración de hCG es mayor de 10 mIU/ml. En ausencia de hCG, no se observa banda alguna en la zona de reacción positiva. La mezcla de reacción continua la migración a través de la tira hasta la zona control. El conjugado libre aún, se une a los reactivos de la zona control formando una banda coloreada rosa, demostrando el correcto funcionamiento del test. REACTIVOS Y MATERIAL PROPORCIONADOS


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


• 50 casetes

• gotero MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO

• Contenedores para la toma de muestra

• Cronómetro

CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD Si se conserva entre 4 y 30ºC el test será estable hasta la fecha de caducidad que viene indicada en el envase. No congelar. TOMA DE MUESTRA a) Suero LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO 1 El test es sólo para diagnóstico in vitro profesional.

2. Los resultados obtenidos con este test proporcionan un resultado preliminar cualitativo, no pueden considerarse concluyentes. Un resultado positivo debe confirmarse con técnicas alternativas más específicas.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


3. Este producto está diseñado sólo para el análisis de orina / suero humanos.

4. También se ha detectado presencia de hCG en pacientes con enfermedad trofoblástica gestacional y no-gestacional. Como la hCG de neoplasmas trofoblásticos es similar a la encontrada durante el embarazo, estas condiciones, que incluyen coriocarcinoma y mola hidatidiforme deben de excluirse antes de realizar un diagnóstico de embarazo.

5. Un embarazo normal no puede distinguirse de un embarazo ectópico

basándose únicamente en los niveles de hCG. También, los abortos espontáneos pueden crear confusión durante la interpretación de los resultados.

6. Embarazos muy tempranos, conteniendo concentraciones extremadamente bajas de hCG pueden dar resultados negativos. En tal caso, deberá obtenerse otra muestra por lo menos 48 horas más tarde y testarla.

7. Los niveles de hCG pueden permanecer detectables varias semanas en

secreciones normales, secreción por cesárea, abortos espontáneos o terapéuticos.

8. Algunas muestras de suero humano con elevadas concentraciones de Factor Reumatoide (RF), heterofilias o anticuerpos Forssman pueden dar resultados positivos no específicos. Tales casos deben discriminarse antes de realizar el ensayo.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


9. Los resultados del test deben usarse en conjunto con informaciones

disponibles de la evaluación clínica del paciente y otros procedimientos de diagnóstico.

10. La presencia de hidroxietil-celulosa en la composición de lubricante de catéteres puede dar lugar a falsos resultados positivos.

INTERPRETACIÓN DE RESULTADOS

• Ver inserto según casa comercial.

Negativo: Si sólo aparece una banda coloreada transversal en la zona blanca superior (banda control). Positivo: Además de la banda transversal roja (control) aparece una segunda banda transversal roja (test) en la zona blanca central de la tira. Cualquier resultado positivo debe ser confirmado con un método más específico antes de dar una determinación positiva. No válido: Si no aparece ninguna banda coloreada visible se recomienda repetir el test con una nueva placa o obtener una muestra fresca y testarla 48 horas después.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


5.5 HIV 1 Y 2 El Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH o HIV, por su siglas en inglés) es un virus que afecta al sistema de defensas del organismo, llamado sistema inmunológico. Una vez debilitado por el VIH, el sistema de defensas permite la aparición de enfermedades. Esta etapa avanzada de la infección por VIH es la que se denomina Síndrome de Inmuno Deficiencia Adquirida (sida). Esto quiere decir que el sida es un conjunto de síntomas (síndrome) que aparece por una insuficiencia del sistema inmune (inmunodeficiencia) causada por un virus que se transmite de persona a persona (adquirida).

Por eso, no toda persona con VIH tiene sida, pero sí toda persona que presenta un cuadro de sida, tiene VIH. Una persona con VIH no necesariamente desarrolla síntomas o enfermedades. Sin embargo, puede transmitirlo.

Llamamos enfermedades oportunistas a las infecciones o tumores que se desarrollan en el contexto de un sistema inmunológico deteriorado y son las que marcan un cuadro de sida. Las personas que llegan a la etapa de sida, pueden acceder a tratamientos que permitan revertir ese estado, superando la enfermedad que haya aparecido y recuperando un nivel adecuado de defensas.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


PRINCIPIO 1.Consiste en un ensayo inmucromatografico de flujo lateral este contiene un conjugado de antígeno VIH 1recombinate conjugado con coloide de oro (VIH-1conjugado), antígeno VIH2 1recombinate conjugado con coloide de oro (VIH-2conjugado) y control de anticuerpo conjugado con oro coloidal; 2. Una línea membrana de nitrocelulosa que contiene dos líneas de pruebas (líneas 1 y2) y la línea control© Los anticuerpos de VIH 1 si están presentes migran y se unen a los conjugados de este mismo, formando una línea de color borgoñona y de igual manera si se encuentran anticuerpos VIH 2 este migra y se une al conjugado de el mismo formando una línea borgoñona indicando un resultado reactivo. REACTIVOS Y MATERIAL PROPORCIONADOS

• 30 casetes

• 30 tubos capilar(20 UL)

• Diluyente

• inserto MATERIAL NECESARIO NO SUMINISTRADO


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


• Cronómetro

• Control positivo

• Control negativo CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD Si se conserva entre 2 y 30ºC el test será estable hasta la fecha de caducidad que viene indicada en el envase. No congelar. TOMA DE MUESTRA Suero RECOLECCION MUESTRA

Suero

• Recolección: obtener suero de la manera usual o plasma.. Descartar los sueros contaminados o hemolizados.


• Sustancias interferentes conocidas: la hemólisis o hiperlipemia son causa de resultados erróneos.

• Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el suero debe ser límpido, libre de partículas y preferentemente fresco. En caso de no procesarse en


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


el momento, puede conservarse en refrigerador (2-8oC) durante no más de 48- 72 horas a partir del momento de la extracción. Si se debe conservar por períodos más prolongados, congelar a -20oC. Evitar los congelamientos y descongelamientos sucesivos.

PROCEDIMIENTO


• Llevar a temperatura ambiente (18-25oC) los reactivos y las muestras antes de usar.

• Abrir la bolsa y colocar el dispositivo en una superficie plana y limpia, debidamente marcada con identificación del paciente

• Llenar el tubo capilar sin exceder la línea de muestra como indica el mismo.

• Dispensar la muestra en posición vertical en el pozo de muestra e inmediatamente agregar dos gotas de diluyente en dicho pozo en posición vertical.

• Poner en marcha cronometro de 10-15 minutos

• Leer y reportar.

INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


• Técnica cualitativa

• No Reactivo: cuando no se detectan anticuerpos anti VIH ausencia de color en las líneas 1 y 2.

• Reactivo: cuando se detectan anticuerpos anti VIH ya sea 1 o 2 dependiendo de la línea que aparezca.


• 1. Se debe llevar las instrucciones especificas en el momento del procedimiento e interpretación de los resultados.

• 2. La prueba rápida de VIH 1 Y2 está limitada a la detección cualititativa de anticuerpos de VIH1 y VIH 2 en suero, plasma, sangre total ya que la intensidad del color obtenido en las líneas de ensayo no indica la concentración de anticuerpos en la muestra.

• 3. un resultado no reactivo indica ausencia de niveles detectables anticuerpos de VIH 1 y 2,sin embargo no excluye la posibilidad de exposición o infección de de VIH 1y2..

• 4. Algunas muestras que contenga cantidades inusualmente altas de anticuerpos heterofilos o factor reumatoideo puede afectar los resultados.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


• 5. Los resultados obtenidos en esta prueba debe ser interpretada junto con otros procedimientos diagnósticos y la sintomatología clínica.

CONTROL DE CALIDAD INTERNO Los datos obtenidos de los controles de calidad interno en cada una de las técnicas serán registrados en la bitácora destinada para tal fin.


Vigencia:2019

Cód.:GMLCMA-

120.11

Versión: 1



Elaborado Por:

Francia L.

Contreras

Revisado Por:

Molchizu Arango

Aprobado Por:

Hernando Duran


Cargo:


Cargo: Gerente


BIBLIOGRAFIA

1. INSERTO SEGÚN CASA COMERCIAL. 2. Ministerio de salud y protección social.

https://www.minsalud.gov.co/Documentos%20y%20Publicaciones/GUIA%20PARA%20EL%20MANEJO%20DE%20VIH%20SIDA.pdf

Documents

E.S.E HOSPITAL LA VEGAeselavega-cundinamarca.gov.co/wp-content/uploads/2020/05/... · 2020. 5. 13. · INMUNOLOGIA Vigencia:2019 Cód.:GMLCMA - 120.11 Versión: 1 EMPRESA SOCIAL DEL