Esperienze internazionali di supporto per la diagnosi della rabbia in Africa

IZSVe, Centro di referenza nazionale e Centro di referenza FAO per la rabbia

Morgane Gourlaouen, PhD

Ministero della SaluteRoma, il 30 Septembre 2019

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Sommario

• La rabbia e sintomi

• Il ruolo del laboratorio

• RESOLAB

• Trainings in Laboratori Veterinari Centrale in Africa

• Proficiency testing

• Conclusi

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• Almeno 60 000 decessi/anno

• In Africa circa 20 000-25 000 decessi/anno

• Numeri sottovalutati (malattia negletta)

• Malattia prevenibile (PEP)

• Tutti mammiferi sono suscettibili

• Il cane è responsabile del 99% dei casi di trasmissione del virus

La Rabbia

WHO-rabies-bulletin.org

La rabbia e il cane

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• Rabbia furiosa o muta

• Cambio di comportamento

• Agressività

• Convulsioni

• Ipersalivazione

• Paralisi

• Automutilazione

• Diagnosi differenziale (Cimurro, epatite infettiva....)

• Necessità di conferma del laboratorio

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Il ruolo fondamentale del laboratorio nell’ eradicazione della rabbia

LABORATORIO

Endemicità

Epidemiologia

PEP

Stakeholder

Reservoir

Diagnostica

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• Migliorare le capacita dei laboratori

• Consentire accesso alla vaccinazione

• Rinforziare il senso di responsabilità nei proprietari di cani

• Sensibilisare attraverso educazione e la conoscienza della malattia

Il ruolo fondamentale del laboratorio nell’ eradicazione della rabbia

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RESOLAB

• Network di 23 laboratori diagnostici veterinari in Africa occidentale e centrale

• Nel 2007 iniziativa della FAO per AI e malattie diffusive

• Nel 2010 - il « sub-network » rabbia

• Attività di eventi formativi

• Raccolta dei report attivita laboratorio

• Support tecnico

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RESOLAB - Informazioni

https://rabiesalliance.org/networks/paracon/bulletin

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• 3 metodiche di riferimento (Gold standard)

• Manuale dell’OIE

• Immunofluorescenza (DFA)

• Direct immuno-histochemical test (dRIT)

• Metodiche molecolari

La diagnostica - pilastro per l'eliminazione della rabbia

ANTIGENI

VIRALI

ARN VIRALE

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Attività di formazione sulla rabbia

• Biosicurezza

• Necroscopia

• Campionamento

• Analisi di laboratorio

• Analisi dei risultati

• Linee guida internazionali (OIE)

• Tracciabilità

• Epidemiologia

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Congo – Una Storia di Successo

• Formazione a Brazzaville nel 2012

• Epidemia nell’area di Pointe Noire nel 2013

• Conferma da parte del laboratorio

• Pronta risposta delle autorità competenti

• Campagna di vaccinazione

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Liberia – LVC Leon Q. Ledlum (2018)

• Dopo anni di inattività diagnostica

• Ristrutturazione laboratorio

• Assunzione nuovo personale

• Formazione in diagnostica specialistica

• Spedizione campioni a IZSVe per conferma

• Pubblicazione sequenze online (GenBank)

• Partecipazione al Ring test

FAO

IZSVe

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Guinea – LVC Conakry (2018)

• Dopo anni di inattività diagnostica

• Ristrutturazione laboratorio

• Assunzione nuovo personale

• Formazione in diagnostica specialistica

• Spedizione campioni a IZSVe per conferma

• Pubblicazione sequenze online (GenBank)

• Partecipazione al Ring test

FAO

IZSVe

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Attività di formazione del l’IZSVe sulla rabbia in Africa

• Periodo 2009-2018

• 263 partecipanti (89 ospitati nel Centro di Referenza italiano, 174 in altri paesi)

• 215 partecipanti provenienti da paesiafricani

• 46 paesi coinvolti (30 africani, 4 mediorientali, 12 asiatici)

• Più di 20 trainings

Proficiency test – Circuito Inter-laboratorio

Valutazione performance tecnici di laboratorio - Richiesto da ISO 17025

(sistema qualità dei laboratori diagnostici) 15

Valutazione performance diagnosticheDelle metodiche classiche

Campioni incogniti

Organizzazione Generale Laboratory

Name Country

Laboratoire National d’Elevage (LNE) Burkina Faso

Laboratoire National Vétérinaire (LANAVET) Cameroon

Laboratoire National Vétérinaire (LANAVET

Yaoundé)Cameroon

Laboratoire Central Vétérinaire de Bingerville Cote d'Ivoire

National Animal Health Diagnostic and

Investigation Center (NAHDIC)Ethiopia

Laboratoire Vétérinaire de Kinshasa D. R. Congo

Accra Veterinary Laboratory Ghana

Laboratoire Central Vétérinaire de Conakry

Direction nationale de l’ElevageGuinea

Central Veterinary Laboratories

Molecular LaboratoryKenya

Leon Quist Ledlum Central Veterinary diagnostic

Laboratory (CVDL)Liberia

Laboratoire Central Vétérinaire du Mali Mali

Laboratoire National d’Elevage et de Recherches

Vétérinaires (LNERV)Senegal

Central Veterinary Laboratory Teko Sierra Leone

Tanzania Veterinary Laboratories Agency (TVLA) Tanzania

National Animal Disease Diagnostic and

Epidemiology Centre (NADDEC)Uganda

1. Lettera di invito

Documenti correlati (protocolli, Linee guida, Lista dei reagenti)

2. Certificato di Vaccinazione

3. “Proficiency test – Perché? Come? Tutto quello che bisogna sapere per fare un PT di successo”. Un webinar co-organizzato con FAO

Organizzazione Generale

• 10 Campioni + controlli

• Immunofluorescenza (DFA)

• PCR

• Protocollo e reagenti per la PCR rabbia forniti da RC e FAO

(Strumentazione già presente in laboratorio)

Organizzazione Generale

Diagnosi molecolare della rabbia

• Campioni degradati

Tempistiche di trasferimento

Analisi forensi

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• Gold standard OIE 2018

• DNA finale stabile

• Sequencing dei ceppi

• Problema con il DFA

Risultati

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PT AFRICA PT EUROPE

Sensibilità Specificità Concordanza Concordanza

DFA 89.2% 86.2% 87.7% 87.1%

PCR 96.7% 100% 98.2% 90.5%

• Performance dei laboratori Africani di ottimo livello

• Criteri di accettabilità - 79% laboratori

• Efficace applicazione della nuova metodica molecolare (PCR)

Settembre 2017Invito

Dicembre 2017Spedizione

Altri numeri importanti

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Maggio 2017Preparazione campioni

Ottobre 2018Partecipazione Liberia e Guinea

Gennaio 2018Risultati 11/15

Dicembre 2018Risultati 14/15

• 29% senza vaccinazione adeguata

• Protocollo PCR introdotto in 9 laboratori

20 mesi in totale

Conclusioni e nostri progetti futuri

• Proficiency test 2020

• Training locale in Sierra Leone

• Training regionale in Cameroon

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• Risultati ottimali del primo PT

• Attività diagnostica in Liberia and Guinea

• Caratterizzazione dei ceppicirculanti in Liberia and Guinea

Acknowledgments

Tutti nostri collaboratori in Africa

FAO collegui

Angélique Angot

Cristian De Battisti

Béatrice Mouillée

Adama Sow

Lidewij Wiersma

USAID for funding

IZSVePaola De Benedictis

Terregino Calogero

Francesca Ellero

Stefania Leopardi

Marzia Mancin

Barbara Tramontan

Barbara Zecchin

Grazie mille per la vostra attenzione

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