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ESTUDIO Y CLASIFICACIÓN DE MUTACIONES PATOGÉNICAS EN BRCA1 Y BRCA2: SÍNDROME DE CÁNCER DE MAMA Y OVARIO
HEREDITARIO (CMOH)
Marina Fernández Villares(1), David Gómez-Sánchez(2),
Montserrat De Miguel Reyes (2)
(1)Hospital Universitario Puerta del Mar (2)Hospital Universitario 12 de Octubre
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
CÁNCER DE MAMA
Neoplasia más frecuente
Incidencia
Detección precoz
¿QUÉ PROPORCIÓN DE
CÁNCER ES HEREDITARIO?
REDUCCIÓN RIESGO
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
GENES DE SUSCEPTIBILIDAD DESCRITOS
BRCA 1 (17q21)
5592 NT24 exones 1863 aa
BRCA 2 (13q12)
1385 NT 27 exones 3418 aa
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Mutaciones somáticas versus mutaciones en línea germinal
Mutaciones somáticas
En las células
tumorales de un
determinado tejido
(p.ej. mama)
En tejidos no germinales
No heredable
Propio del cáncer esporádico
Presente
en todas
las células
de los
hijos
En todas células del cuerpo
Transmisible a la descendencia
Origina Sdme. Cáncer
Hereditario
Descendiente
En línea germinal
Mutación
en el
gameto
Progenitor
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
MATERIAL Y MÉTODOS
Estudio retrospectivo de
983 pacientes con neoplasia sugestiva
de corresponder a CMOH
IDENTIFICACIÓN DE VARIANTES PATOGÉNICAS
OBJETIVO
Analizar los resultados de 983 estudios completos
de los genes BRCA1 y BRCA2, y detectar las
mutaciones más frecuentemente encontradas.
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
MATERIAL Y MÉTODOS
Extracción DNA
Sangre total Análisis exones y regiones
intrónicas adyacentes
BRCA1 BRCA2
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
MATERIAL Y MÉTODOS
Secuenciación masiva (Ion Torrent, Illumina) MLPA(Multiplex Ligation-dependent Probe
Amplification) HRM (High Resolution Melting)
Secuenciación Sanger
Bases de datos específicas de locus: -BRCA Mutation Database (University of UTAH) -UMD Share -BRCA Exchange (incluye Bic, ClinVar, ESP, ExAC, ENIGMA, LOVD, exLOVD, 1000 Genomes)
Clasificación de las variantes patogénicas en base a los transcritos de referencia: NM_007294 (BRCA1) NM_000059 (BRCA2)
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
RESULTADOS
43 variantes patogénicas diferentes
33 aparecen en 1 solo paciente
10 aparecen en varios pacientes (29)
5 aparecen en varios pacientes
(27)
22 aparecen en 1 solo paciente
27 variantes patogénicas diferentes
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
Gráfico 4. Leyenda de dominios de proteínas BRCA1 y BRCA2 en lollipop plot.
BRCA1 BRCA2
Gráficos 2 y 3. Dominios funcionales de las proteínas BRCA1 y BRCA2,respectivamente, y posición de las diferentes mutaciones.
RESULTADOS Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
RESULTADOS: BRCA1
Gráfico 2. Dominios funcionales de la proteína BRCA1 y posición de las diferentes mutaciones.
Mutaciones en BRCA1 presentes en (n) pacientes
n=2 c.1687C>T p.(Gln563fs) Q563* c.181T>G p.(Cys61Gly) C61G c.211A>G p.(Arg71Gly) R71G c.5153-1G>A IVS18-1G>A c.5095C>T p.(Arg1699Trp) R1699W c.5266dupC p.(Gln1756Profs*74) Q1756Pfs*74 c.3331_3334delCAAG p.(Gln1111Asnfs*5) Q1111Nfs*5
n=3 c.68_69delAG p.(Glu23Valfs*17) E23Vfs*17
n=4 c.302-1G>A
n=8 c.5123C>A p.(Ala1708Glu) A1708E
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
RESULTADOS: BRCA2
Gráfico 3. Dominios funcionales de la proteína BRCA2 y posición de las diferentes mutaciones.
Mutaciones en BRCA2 presentes en (n) pacientes
n=2 c.9382C>T p.(Arg3128*) R3128*
n=5 c.3922G>T p.(Glu1308*) E1308*
c.9026_9030delATCAT p.(Tyr3009Serfs*7) Y3009Sfs*7
n=6 c.6275_6276delTT p.(Leu2092Profs*7) L2092Pfs*7
n=9 c.2808_2811delACAA p.(Ala938Profs*21) A938Pfs*21
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
RESULTADOS
Gráfico 5. Distribución de variantes patogénicas en función del fenotipo expresado
0
5
10
15
20
25
30
Cáncer
Mama (CM)
Cáncer
Ovario (CO)
CM bilateral CO bilateral Cáncer mama
y ovario
(CMO)
CM bilateral
y CO
Otras
neoplasias
CM y
Endometrio
Portadores
sanos
Fenotipo en pacientes con mutaciones en BRCA1 (n=62) y BRCA2 (n=49)
BRCA1
BRCA2
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
CONCLUSIONES 1. El 11,3% de los estudios completos realizados (111 pacientes)
presentaron alguna variante patogénica (clase 5).
2. Se encontró un mayor número de mutaciones en BRCA1
respecto a BRCA2: 62 pacientes (55,85%) con mutaciones en
BRCA1 y 49 pacientes (44,15%) con mutaciones en en BRCA2.
3. Se detectaron 43 variantes patogénicas diferentes en BRCA1,
y 27 en BRCA2; apareciendo la mayoría en un único paciente.
Entre las que se repetían en varios pacientes, las más
frecuentes fueron: c.5123C>A p.(Ala1708Glu) en BRCA1, en 8
pacientes; y c.2808_2811delACAA p.(Ala938Profs*21) en
BRCA2, en 9 pacientes.
4. El fenotipo más expresado fue cáncer de mama unilateral
(47,7% de todos los casos).
Congreso Nacional del Laboratorio Clínico 2017
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