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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS ESCUELA PARA GRADUADOS INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN ANIMAL CÓRDOBA (IRAC) EVALUACION DE DIFERENTES DOSIS DE CIPIONATO DE ESTRADIOL EN UN PROTOCOLO DE IATF SOBRE EL PORCENTAJE DE PREÑEZ EN VACAS CON CRIA EN EL SEMIARIDO DE SAN LUIS Miranda Salvagno Franco Manuel Trabajo Final Para optar al Título de Especialista en Reproducción Bovina Córdoba- Año 2016

EVALUACION DE DIFERENTES DOSIS DE …...literatura en cuanto al momento que se recomienda realizar la IATF, que varía entre las 48 hs de la remoción del dispositivo hasta las 60

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UNIVERSIDAD NACIONAL DE CÓRDOBA

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

ESCUELA PARA GRADUADOS

INSTITUTO DE REPRODUCCIÓN ANIMAL CÓRDOBA (IRAC)

EVALUACION DE DIFERENTES DOSIS DE

CIPIONATO DE ESTRADIOL EN UN PROTOCOLO

DE IATF SOBRE EL PORCENTAJE DE PREÑEZ EN

VACAS CON CRIA EN EL SEMIARIDO DE SAN

LUIS

Miranda Salvagno Franco Manuel

Trabajo Final

Para optar al Título de Especialista en Reproducción Bovina

Córdoba- Año 2016

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INDICE

1. RESUMEN........................................................................................................ 3

2. INTRODUCCIÓN ............................................................................................ 4

HIPÓTESIS ........................................................................................................... 6

OBJETIVO GENERAL ........................................................................................ 6

3. MATERIALES Y METODO ........................................................................... 6

4. RESULTADOS ............................................................................................... 10

5. DISCUSIÓN ................................................................................................... 11

6. CONCLUSIÓN ............................................................................................... 13

7. AGRADECIMIENTOS .................................................................................. 13

8. BIBLIOGRAFÍA ............................................................................................ 14

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1. RESUMEN

Este trabajo se realizó para evaluar el efecto de la dosis de cipionato de estradiol

aplicada al finalizar un tratamiento con un dispositivo intravaginal liberador de

progesterona y dos intervalos para realizar la inseminación, sobre el porcentaje de preñez a

la inseminación artificial a tiempo fijo (IATF). Se utilizaron 124 vacas Polled Hereford con

cría, con una condición corporal de 3,5±0,5 (escala 1-5), a las que se les colocó un

dispositivo intravaginal liberador de progesterona (DIB 0,5G Syntex) y se les aplicó 2mg

de benzoato de estradiol (Benzoato de Estradiol Syntex). Se retiraron los DIB a los 8 días y

a la mitad de los animales se le aplicó 0,5mg de cipionato de estradiol (Cipiocyn Syntex) y

a la otra mitad 1mg. Simultáneamente se inyectó 523 ug de cloprostenol sódico (Ciclase

DL Syntex) y 400 UI de eCG (novormon Syntex) a todos los animales. El día siguiente al

retiro de los DIB se hizo detección de celos. La IATF se realizó a las 48 hs de extraídos los

dispositivos en aquellos animales que habían presentado celo y a las 56 hs al resto. Se

utilizó semen proveniente de 4 reproductores que fueron asignados a cada hembra según

criterio del productor. El diagnóstico de gestación fue realizado por medio de

ultrasonografía a los 30 días posteriores a la IATF. Los porcentajes de preñez fueron

72,58% y 67,74 % para 0,5 y 1 mg respectivamente.

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2. INTRODUCCIÓN

La Inseminación Artificial a tiempo fijo (IATF) es la biotecnología reproductiva que en

los últimos años ha mostrado mayor incremento en la tasa de adopción por el sector

productivo en los países de la región. En general la tasa de preñez en programas de IATF

es cercana al 50% en promedio, resultado por demás aceptable considerando que esto se

logra en un día de inseminación, sin detectar el estro y en vacas en anestro. (Menchaca et

al., 2013).La detección de estros es relevante cuando se utiliza la IA, ya que la

identificación de las hembras que inician el estro mejora substancialmente el porcentaje de

gestación (Romero et al., 2009).

Su desarrollo en el ganado de carne ha sido lento debido a problemas de detección del

estro y de manejo de grandes rodeos. Para evitar los problemas de la detección de celos en

rodeos de cría se han desarrollado protocolos de sincronización de la ovulación que

permiten además inseminar un gran número de animales en un período de tiempo

establecido.

El control farmacológico del ciclo estral permite sincronizar el celo y la ovulación en

animales cíclicos e inducir la actividad sexual en animales en anestro de manera que el

servicio se realice en un período corto. De esta forma, se facilita la implementación y

realización de la inseminación artificial (IA) con la mejora en el potencial productivo que

esto significa. Además, algunos métodos permiten controlar eficientemente el momento en

que se produce la ovulación de manera que posibilitan la implementación de la IATF

(Callejas, 2005).

Existen actualmente en el mercado dispositivos eficientes que liberan P4 y que son

mantenidos en la vagina por un período de 7 u 8 días (Bó et al., 2001). El tratamiento más

utilizado consiste en administrar 2 mg de benzoato de estradiol (EB) por vía intramuscular

(im) al colocar el dispositivo, momento definido como el Día 0; en el Día 7 u 8, se retira el

dispositivo y se aplica PGF im y 24 h después se administra 1 mg de EB im. Se realiza

IATF entre las 52 y 56 h de la remoción del dispositivo (Cutaia et al., 2003).

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La función fundamental de la aplicación de estrógenos en el inicio del tratamiento es

provocar la atresia del folículo dominante y el recambio folicular (Bó et al., 1995a). Este

tratamiento induce la emergencia de un nuevo folículo 4 días más tarde (Bó et al., 1995b) y

entonces al momento de la remoción del dispositivo al día 7 u 8, estará presente un folículo

relativamente nuevo y un ovocito fértil, lo que ocurre de manera sicrónica en prácticamente

todas las vacas. Esta sincronía permite que las vacas alcancen el desarrollo folicular

ovulatorio en un período muy similar en todo el rodeo, y el hecho de administrar una dosis

de BE 24hs luego del retiro del dispositivo permite inducir y sincronizar aún más el pico de

LH y la ovulación. De esta manera es posible realizar la inseminación sin necesidad de

detectar estro. La segunda aplicación de EB es fundamental, induce una retroalimentación

positiva sobre el hipotálamo produciendo a su vez la liberación de GnRH, la cual es capaz

de aumentar los pulsos y la frecuencia de la hormona Luteinizante (LH), logrando con ello

que se unifique y se reduzca el tiempo en que se presenta la ovulación. Como alternativa

para evitar el encierre adicional para inyectar el BE y simplificar los tratamientos, es

posible utilizar ECP como inductor de la ovulación (Menchaca et al., 2013). El ECP es una

sal de estradiol con mayor vida media (7 días en circulación) que el EB, por lo que la

duración de la acción depende de la absorción y no del metabolismo. El ECP podría ser una

alternativa interesante en programas de IATF en vacas y vaquillonas tratadas con

dispositivos con P4.

Trabajos publicados indican que el uso de ECP al retirar el dispositivo intravaginal

con progesterona, produce una mayor dispersión de las ovulaciones respecto de la

aplicación de BE 24hs posteriores (Uslenghi et al., 2013).

Se ha demostrado que con la aplicación de 0,5 mg de ECP al momento de retirar

la fuente de progesterona, se logran porcentajes de preñez similares a los obtenidos con BE.

Posteriormente, se realizaron trabajos con el objetivo de evaluar si aumentando la dosis de

ECP a 1,0 ó 1,5 mg se podía mejorar la fertilidad, los resultados obtenidos no mostraron

diferencias según dosis utilizadas (Butler, 2011). Además la implementación de estos

protocolos requiere un gran número de encierres, que en algunos casos es causa de estrés

severo si no se toman ciertos recaudos, con la consecuente disminución de la fertilidad y

fracaso de la técnica (Uslenghi, 2010). Desde hace varios años se trabaja para reducir el

número de encierres y facilitar el manejo de los animales; en este sentido el cipionato de

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estradiol aplicado al retirar los dispositivos es el tratamiento más utilizado, ya que

sincroniza las ovulaciones de manera similar a la aplicación de BE (Medero et al., 2012).

Teniendo en cuenta que los espermatozoides tardan entre 8 a 12 h en llegar al sitio de

fertilización se aconseja IATF entre las 52 y 56 hs. Sin embargo, hay divergencias en la

literatura en cuanto al momento que se recomienda realizar la IATF, que varía entre las 48

hs de la remoción del dispositivo hasta las 60 hs.

HIPÓTESIS

La utilización de una dosis de 0,5mg y 1mg de Cipionato de Estradiol el día 8, en un

protocolo convencional no modifica el % de preñez.

OBJETIVO GENERAL

Evaluar el porcentaje de preñez en vacas con cría utilizando 0,5mg o 1mg de CE al

momento de retiro de un dispositivo con p4 en un protocolo de IATF.

3. MATERIALES Y METODO

El trabajo se realizó en un establecimiento ganadero ubicado en la provincia de San Luis

(Argentina) en el departamento Chacabuco. Se trabajó sobre vacas Polled Hereford con cría

(Imagen 1), del cual se extrajeron 124 animales que formaban parte de la cabeza (grupo 1),

cuerpo (grupo 2) y cola (grupo 3) de parición, a medida que la totalidad de los vientres en

cada grupo superaba 45 días de posparto eran sincronizados. A su vez cada uno fue

dividido en dos subgrupos (a y b).

Debido a que los grupos fueron dispuestos por separado en tres lotes diferentes, la

alimentación también lo fue. El grupo 1 en un lote con pasto llorón, el grupo 2 en un

diferido de maíz y el grupo 3 en una pastura de pasto llorón y agropiro. Todos estuvieron

con la misma dieta hasta el momento del diagnóstico de gestación, excepto el grupo 2 que

se lo cambió a una pastura de llorón.

Previo tratamiento de cada rodeo se aplicaron dos dosis de vacunas para prevenir

enfermedades reproductivas, con 15 días de diferencia entre ambas aplicaciones y la

segunda 15 días antes del inicio del protocolo de IATF.

En la figura 1 se esquematiza el tratamiento que fue aplicado. Todas las hembras recibieron

un tratamiento para IATF utilizando un dispositivo intravaginal con 0,5g de progesterona

(DIB 0,5g Syntex) durante 8 días asociado a una dosis de 2mg de benzoato de estradiol

(Benzoato de Estradiol, Syntex) al momento de colocar el dispositivo intravaginal. Al

retirar el dispositivo se administró una dosis de 523 ug de cloprostenol (Ciclase DL

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Syntex), 400 UI de eCG (Novormon, Syntex) y a la mitad de los vientres (subgrupo a) se le

administró 0,5mg de Cipionato de Estradiol (Cipiocyn, Syntex) y a la otra mitad 1 mg

(subgrupo b). Los fármacos inyectables fueron aplicados por vía intramuscular. El día

previo a la IA se detectó celo., aquellas que presentaron celo fueron inseminadas a las 48hs

de retiro del dispositivo y el resto a las 56 hs.

48hs 56hs

0 8 9 10

48hs 56hs

0 8 9 10

Los celos fueron observados visualmente durante la tarde del día 9 (Imagen 3).

Se utilizó semen de 4 toros Polled Hereford adquiridos de dos importantes centros de

extracción y venta. La asignación del servicio a cada hembra fue según el criterio del

productor.

Pasado 15 días de la IA se hizo el repaso por servicio natural con toros propios del

establecimiento.

A los 30 días de la IA se hizo el diagnóstico de gestación por ultrasonografía.

DC

DIB 0,5g +

BE2mg

Retiro DIB +

PG523ug + CE

0,5mg

+eCG400UI IATF

DC

DIB 0,5g +

BE2mg

Retiro DIB +

PG523ug + CE

1mg + eCG 400UI IATF

Figura 1: Tratamiento aplicado, subgrupo a y subgrupo b.

Subgrupo a

Subgrupo b

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Imagen 1: Vaca Polled Hereford con cría al pie en “Establecimiento San

Jorge”.

Imagen 2: Trabajo en la manga.

9

Imagen 3: Detección de celos.

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4. RESULTADOS

Los resultados obtenidos se pueden ver en la Tabla N° 1, demostrando que no se

encontraron diferencias significativas entre los porcentajes de preñez en ambos tratamientos

(P=0,7).

Tabla 1: Porcentaje de preñez según dosis de Cipionato de Estradiol utilizada al retiro

del dispositivo con p4 intravaginal.

Tratamiento Preñadas Porcentaje de preñez

Subgrupo a ECP 0,5 mg

(n62) 45 72,58

Subgrupo b ECP 1 mg

(n62) 42 67,74

Gráfico 1: Preñeces obtenidas con diferentes dosis de ECP

Como modo de entender un poco más en lo que consistió el trabajo a campo, la Tabla y

Gráfico 2 muestran los resultados de los diferentes tratamientos.

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

100

ECP 0,5 mg ECP 1 mg

72,58 67,74

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Tabla 2: Porcentajes de preñez según tratamiento.

Tratamiento %de preñez

ECP 0,5mg - IATF 48hs 78,57%

ECP 0,5mg - IATF 56hs 71,42%

ECP 1mg - IATF 48hs 60%

ECP 1mg - IATF 56hs 71,87%

Gráfico 2: Porcentajes de preñez con diferentes dosis de ECP y momentos de

inseminación.

5. DISCUSIÓN

A pesar que el ECP (sal de estradiol con mayor vida media que el BE) no es

efectivo para sincronizar la emergencia de una nueva onda folicular puede ser utilizado

para reducir el número de veces que los animales pasan por la manga, siendo una

alternativa posible como inductor de la ovulación. A pesar de que el tratamiento con ECP

resulta en muy bajos niveles de estradiol circulante comparado con otros estradioles,

78,57

60

71,428 71,875

0

10

20

30

40

50

60

70

80

90

ECP 0,5mg ECP 1mg

48hs

56hs

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incrementaría la concentración de estradiol por adición a aquella producida por el folículo

preovulatorio en forma suficiente como para estimular la liberación de LH.

En este experimental no se comparan las diferentes sales, si no, diferentes dosis de

cipionato de estradiol. Se sometieron al tratamiento vacas Polled Hereford con cría al pié,

el porcentaje de preñez a la IATF no fue afectado significativamente por la utilización de

dos dosis de ECP (0,5mg o 1mg) al momento del retiro del dispositivo con progesterona,

obteniendo porcentajes de preñez adecuados. Si bien los ensayos realizados por otros

autores están hechos sobre vaquillonas, los resultados son coincidentes, como Butler et

al.,(2011), donde utilizaron 100 vaquillonas Angus de 24 meses de edad, con una condición

corporal de 3,5 (escala 1-5), a las que se les colocó un dispositivo intravaginal liberador de

progesterona (DIB 0,5 g Syntex) y se les aplicó 2 mg de benzoato de estradiol (Benzoato de

Estradiol Syntex). A los 8 días se retiraron los DIB y se asignaron al azar a dos grupos de

50 vaquillonas, a los que se aplicó respectivamente 0,5 ó 1,0 mg de cipionato de estradiol

(Cipiosyn Syntex). Simultáneamente se inyectó 500 µg de cloprostenol sódico (Ciclase

DL® Syntex) en ambos grupos. La IATF se realizó entre las 52-53 hs después de retirados

los DIB. La tasa de preñez fue de 54 y 56 % para 0,5 y 1,0 mg respectivamente (P > 0,05).

Concluyeron que no es necesario un enrrasado perfecto de la dosis a administrar, existiendo

una flexibilidad de la misma en la que no se verá afectado el resultado de la fertilidad.

Por otro lado, Uslenghi et al., (2010) evaluaron el efecto del uso de 0,5mg de ECP, 1

mg de ECP en el momento de retiro de dispositivos o BE a las 24 hs, en el porcentaje de

preñez en 79 vaquillonas de 15 meses de edad y concluyeron que las dosis de ECP son

igualmente efectivas que la de BE. Chesta et al. (2009a) trabajando con vaquillonas cruza

índicas obtuvieron un 55,5% y 57,4% de preñez cuando utilizaron 0,5 mg y 1 mg de CPE

respectivamente. En vaquillonas Holando Argentino de 19 meses de edad, Chesta et al.

(2009b) obtuvieron 54,4%, 58,8% y 66,3 % de preñez utilizando BE 24 h, 0,5 mg de CPE y

1 mg de CPE al retiro del dispositivo, respectivamente, sin diferencias significativas entre

tratamiento.

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6. CONCLUSIÓN

Se concluye que la administración de 0,5 mg o 1 mg de cipionato de

estradiol en el momento de retiro del dispositivo intravaginal con P4 no

modifica el porcentaje de preñez en vacas Polled Hereford con cría al

pie.

7. AGRADECIMIENTOS

A Jorge Sanmartino, propietario del establecimiento ¨San Jorge¨ y a

su esposa Lidia Kaufman, por la colaboración con el trabajo a

campo.

A Etchevers Emiliano, Médico Veterinario, por su ayuda en este

trabajo.

A mis compañeros de la especialidad.

A mi familia y a mi novia por estar siempre presentes.

A todos aquellos que de alguna u otra manera colaboraron en este

trabajo.

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8. BIBLIOGRAFÍA

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el VIII Simposio Internacional de Reproducción Animal, Córdoba

(Argentina).

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Uslenghi G.; González Chaves S.; Cabodevila J,; y Callejas S, .

Efecto del CE y de la cantidad de P4 en dispositivo sobre la

respuesta ovárica en vacas secas. 10° Simposio Internacional de

Reproducción Animal 2013. Pág 327.