If you can't read please download the document
Upload
trandieu
View
226
Download
2
Embed Size (px)
Citation preview
UNIVERSITATEA DE TIINE AGRICOLE I MEDICIN VETERINAR
CLUJ-NAPOCA
FACULTATEA DE ZOOTEHNIE I BIOTEHNOLOGII
COALA DOCTORAL
Ing. LAVINIA IOANA BRNUIU (cs. TOMO)
EVALUAREA PROPRIETILOR BIOLOGICE ALE
MARKERILOR DE CALITATE DIN
LPTIORUL DE MATC I APILARNIL(REZUMAT AL TEZEI DE DOCTORAT)
CONDUCTOR TIINIFIC
Prof. Univ. Dr. Ing. Liviu Alexandru MRGHITA
CLUJ-NAPOCA
2013
2
CUPRINS
INTRODUCERE............................................................................................................. 3
OBIECTIVE.................................................................................................................... 5
CAPITOLUL I. LPTIORUL DE MATC I APILARNILUL GENERALITI... 6
1.1. IMPORTANA LPTIORULUI DE MATC I A APILARNILULUI ......... 6
1.1. COMPOZIIA FIZICO-CHIMIC A LPTIORULUI DE MATC I A
APILARNILULUI ....................................................................................................... 6
CAPITOLUL II. MARKERI DE CALITATE DIN LPTIORUL DE MATC I
APILARNIL.................................................................................................................... 6
CAPITOLUL III. EFECTELE TERAPEUTICE ALE LPTIORULUI DE MATC I
APILARNILULUI .......................................................................................................... 7
CAPITOLUL IV. METODE DE DETERMINARE ALE CAPACITILOR
ANTIOXIDANTE I ANTIMICROBIENE ALE LPTIORULUI DE MATC I
APILARNILULUI .......................................................................................................... 7
CAPITOLUL V. MATERIAL I METOD.................................................................. 8
5.1. MATERIALUL BIOLOGIC ................................................................................. 8
5.2. ANALIZE EFECTUATE ...................................................................................... 8
CAPITOLUL VI. REZULTATE I DISCUII PRIVIND ANALIZELE ....................... 8
FIZICO-CHIMICE.......................................................................................................... 8
CAPITOLUL VII. REZULTATE I DISCUII PRIVIND ANALIZELE
SPECTROFOTOMETRICE UV-VIS............................................................................ 11
CAPITOLUL VIII. REZULTATE I DISCUII PRIVIND ANALIZA HPLC............. 14
CAPITOLUL IX. REZULTATE I DISCUII PRIVIND CAPACITATEA
ANTIMICROBIAN A LPTIORULUI DE MATC I A APILARNILULUI ....... 19
CAPITOLUL X. CONCLUZII GENERALE................................................................. 24
ELEMENTE DE ORIGINALITATE............................................................................. 26
RECOMANDRI I PERSPECTIVE........................................................................... 26
BIBLIOGRAFIE ........................................................................................................... 27
REZUMAT
3
INTRODUCERE
Lptiorul de matc i apilarnilul sunt produse apicole biologic active cu
proprieti biotrofice, energizante, vitalizante, tonifiante i psihotonice care ajut la
refacerea sistemului imunitar. Dei nu este un produs tradiional al stupului, ca i mierea,
polenul, propolisul i ceara, apilarnilul se distinge prin proprietile lui organoleptice
specifice, prin proprietile lui fizico-chimice i microbiologice care l recomand ca un
produs veritabil, de valoare al stupului.
Lptiorul de matc a fost acceptat i adesea folosit ca o substan care sprijin
sntatea. Cercetrile arat c proteinele din lptiorul de matc ar putea avea funcii
fiziologice immunostimulative, supresive de reacii alergice, dar i antihipertensive,
precum i de stimulare a proliferrii celulelor. Toate aceste constatri au deschis o nou
er n ceea ce privete utilizrile lptiorului de matc.
innd seama de caracteristicile organoleptice, fizico-chimice, precum i de
anumite condiii de recoltare, apilarnilul se deosebete esenial de lptiorul de matc.
Este bine ca apicultorii s in seama de aceste deosebiri n procesul i tehnologia de
recoltare ale acestor produse, respectnd ntotdeauna principiul rspunderii, corectitudinii
profesionale i al onestitii n activitatea lor de productori.
Lptiorul de matc prezint caliti biologice i fiziologice de excepie, motiv
pentru care este comercializat pe scar larg, fiind utilizat n diferite industrii, precum cea
farmaceutic, alimentar (suplimente nutritive), cosmetic. Datorit diversitii i
multitudinii de utilizri pe care le are, n rile unde producia este insuficient n raport
cu cererea, lptiorul de matc este importat n cantiti mari. De aceea, cercetarea n
acest domeniu trebuie extins i dezvoltat pentru a permite o evaluare calitativ i
cantitativ, corect, a diferitelor componente. Pe de alt parte, cercetarea permite
implementarea unor teste de evaluare a calitii produselor disponibile pe pia care
includ lptiorul de matc fie ca atare, fie ca aditiv. Cercetarea acestui domeniu are un
rol important i n optimizarea procesului de identificare a lptiorul de matc
contrafcut.
Cunoscnd faptul c n ara noastr, precum i n majoritatea rilor (exceptnd
Brazilia), nu exist un standard al calitii lptiorului de matc, realizarea unui astfel de
REZUMAT
4
standard sau cel puin implementarea unor metode sigure pentru stabilirea funcionalitii
i a calitii acestui produs, prezint interes pentru cercetare. Cercetrile vor contribui la
elaborarea tehnologiei de determinare a acidului 10-hidroxi-2-decanoic n scopul
determinrii autenticitii lptiorului de matc, precum i stabilirea unor markeri de
calitate pentru lptiorul de matc i apilarnil.
Prezenta tez de doctorat dorete s aduc o contribuie important n ceea ce
privete studiul lptiorului de matc i a apilarnilului prin analize chimice de actualitate
cu scopul de a se investiga calitatea acestora. Calitatea acestor produse este data de
componentele cu valori nutriionale (glucide, lipide si proteine), de coninutul n compui
biologic activi (10-HDA, compui polifenolici i peptide), precum i de capacitatea
antioxidant i antimicrobian a acestora.
Lucrarea de fa Evaluarea proprietilor biologice ale markerilor de calitate
din lptiorul de matc i apilarnil este structurat n doua pri. n prima parte,
intitulat Studiu de literatur (Capitolele I -IV) este prezentat stadiul actual al
cunoaterii privind obiectivele propuse, i aspecte legate de compoziia chimic,
capacitile antioxidant i antimicrobian, metodele de analiz utilizate.
n cea de a doua parte Cercetri proprii (Capitolele V - X ) sunt prezentate
materialul biologic (14 probe de lptior de matc i 14 probe de apilarnil), metodele
experimentale aplicate (fizico-chimice, spectrofotometrice, cromatografice i
microbiologice), rezultatele obinute i concluziile studiului efectuat.
REZUMAT
5
OBIECTIVE
Obiectivele urmrite n teza de doctorat sunt urmtoarele:
Cercetri privind compoziia fizico-chimic a lptiorului de matc i a
apilarnilului, prin determinarea umidittii, a cenuii, a aciditii i a lipidelor.
Cercetri privind optimizarea unei metode de determinare a proteinelor totale din
lptiorul de matc i apilarnil metoda Lowry.
Cercetri privind identificarea i cuantificarea glucidelor din lptiorul de matc i
din apilarnil prin tehnica de Cromatografie Lichid de nalt Performan cu
detecie n Indice de Refracie (HPLC-IR).
Cercetri privind identificarea i cuantificarea a acidului 10-hidroxi-2-decenoic
din lptiorul de matc prin tehnica de Cromatografie Lichid de nalt
Performan cu detecie cu ir de Fotodiode (HPLC-PDA).
Cercetri privind identificarea polifenolilor din lptiorul de matc prin tehnica de
Cromatografie Lichid de nalt Performan cu detecie cu ir de Fotodiode
(HPLC-PDA).
Cercetri privind capacitatea antioxidant a lptiorului de matc i a apilarnilului
(metoda DPPH i metoda FRAP) evaluat in vitro prin metode spectrofotometrice
clasice.
Cercetri privind capacitatea antimicrobian a lptiorului de matc i a
apilarnilului prin testarea acestora pe tulpini bacteriene de referin internaional.
REZUMAT
6
CAPITOLUL I. LPTIORUL DE MATC I APILARNILUL
GENERALITI
1.1. IMPORTANA LPTIORULUI DE MATC I A APILARNILULUI
Cunoaterea markerilor biologici ai lptiorului de matc proaspt i ai
apilarnilului responsabili de proprietile lor, este esenial pentru a putea caracteriza
compoziia i calitatea produselor care se obin ca urmare a nglobrii n structura lor a
acestor produse valoroase ale stupului.
1.1. COMPOZIIA FIZICO-CHIMIC A LPTIORULUI DE MATC I A
APILARNILULUI
Lptiorul de matc este singura surs cunoscut de acid 10-hidroxi-2-decenoic
(10-HDA), un compus cu potenial anticancerigen i antibacterien. n componena
lptiorului intr un numr nsemnat de vitamine i aminoacizi precum i compui nc
neidentificai (n proporie de 2,8%) (Boselli i colab., 2003). n literatura de specialitate
se amintete despre importantele componente ale lptiorului de matc precum sunt:
proteinele, glucidele, lipidele (Takenaka, 1984; Portallier i colab., 1990, Lerker i
colab., 2003).
La examenul microscopic al produsului triturat i centifugat s-au observant detritusuri
celulare i celule de polen. Pentru obinerea substanei active standardizate, apilarnilul
triturat i filtrat se liofilizeaz, utilizndu-se apoi ca pulbere (Ilieiu, 1991). O prim
descriere a compoziiei chimice a apilarnilului a fos