Upload
santos-flores
View
418
Download
0
Embed Size (px)
Citation preview
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 1/33
MICROBIOLOGÍA GENERAL IILABORATORIO
VIROLOGÍA
PRÁCTICA 2“Estructuras del embrión de pollo y sus vías de inoculación”
EQUIPO: 10Pérez Peña García Mariem
Pérez Velázquez EliaReyes Nava Ana Margarita
GRUPO 2752SEMESTRE 2013-2
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 2/33
Adquirir el conocimiento para el correcto
manejo de la técnica de inoculación deembrión de pollo por las vías másutilizadas.
El alumno conocerá las diversas partes delembrión de pollo de 9 días de incubación.
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 3/33
INOCULACIÓN EN ANIMALES DEEXPERIMENTACIÓN
Monos, conejos, ratas, cobayos y ratones.
INOCULACIÓN EN EMBRIÓN DE POLLO O DERATÓN
INOCULACIÓN EN CULTIVOS CELULARES
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 4/33
Es el conjunto de técnicas que permiten elmantenimiento de las células in vitro,manteniendo al máximo sus propiedadesfisiológicas, bioquímicas y genéticas.
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 5/33
Cul t ivo pr imar io células, tejidos u órganos tomadosdirectamente de un animal.
Cult ivo de órganos mantenimiento de órganos o partede órganos in vitro.
Cult ivo de tej idos mantenimiento de tejidos in vitro.Cu lt iv o de célu las mantenimiento de células
dispersas.
Líneas celu lares células mantenidas por subcultivossucesivos comenzando por uncultivo primario.
Cul t ivos cont inuo s células que han logrado sobrevivir a muchos subcultivos.
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 6/33
Inoculación de virus en animales
Aislamiento e identificación de los virus
Comprobación de la inocuidad
Poder protector de vacunas (poliomielitis)
Elaboración de vacunas
Efecto neutralizante de sueros inmunes
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 7/33
Vía deinoculación
Imagen Vía deinoculación
Imagen
Víaintravenosa
VíaIntratraqueal
Víaintracerebral
Vía Intranasal
Víaintraperitoneal
VíaIntradérmica
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 8/33
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 9/33
Embrión de 7días
Embrión de 12-13 díasEmbrión de 16 días
Embrión de 8 días
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 10/33
Embrión de 18 días Embrión de 19 días
Embrión de 20 días
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 11/33
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 12/33
CONSIDERACIONES:
• Reconocer la viabilidad del embrión.
• Conocer la edad aproximada para determinar lavía de inoculación.
• Reconocer los tejidos sanos que permitiránapreciar cambios macroscópicos que ocurrancomo consecuencia de la infección viral.
•
Humedad:57-60%
• Temperatura: 36-38 °C
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 13/33
UTILIDAD: Es unafuente de tejidovivo convenientey fácil de
manipular que seutiliza en lapropagación,titulación eidentificación devirus, así como enla preparación dealgunas vacunasvirales.
MEMBRANA VIRUS
Saco vitelino Herpes simple
Coriolantoídes Herpes simplePoxvirusSarcoma de Rous
VaricelaVirus de Laringotraqueitis aviar
Enfermedad de Beyer
Alantoides InfluenzaNew Castle
Virus de la bronquitis infecciosa
Amniótica ParotiditisVirus de la Gripe
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 14/33
El efecto citopático, es un deterioro de las células delcultivo de tejidos causado por el virus. Cambiosbioquímicos y moleculares, morfológicos y de viabilidadcelular, causados durante el ciclo de replicación viral.
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 15/33
EFECTO CITOPÁTICO DESCRIPCIÓN
Lítico El virus rompe la célula por lagran masa de virus que se
produce.Hiperplasia La célula se transforma y
multiplica aceleradamente.
Mixto (lítico e hiperplasia) Induce una transformación yluego se rompe.
Formación de sincitios Células multinucleadas porquelas membranas celulares sefunden.
Oncogénicos Transformación en célulasmalignas.
Cuerpos de inclusión Estructuras membranosas enforma de vacuolas.
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 16/33
L is is de una célu la
Hiperplasia
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 17/33
Cuerpos de inclusión
Corpúsculo s de
Negri
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 18/33
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 19/33
Virus Respuesta en célula animal
VIHHerpes simple
Paramixovirus
Células gigantes y multinucleadas,inclusiones intracitoplasmáticas.
Poliovirus
Togavirus
Lisis celular
Varicela
Rabia
Reovirus
Inclusiones o masas en citoplasma
Adenovirus Inclusiones nucleares
Morbillivirus Sincitios
Viruela Lítico e hiperplasia
PoliomavirusVirus del sarcoma de Rous Transformación
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 20/33
Evaluación del poder neutralizante desueros antivirales.
Atenuación y producción de vacunas , por lo general de aplicación veterinaria.(parotiditis, influenza, encefalitis equina,
rabiaFlury).
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 21/33
Aislamiento y mantenimiento de cepas
Clasificación de un virus
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 22/33
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 23/33
2. Corte el cascarón a la altura de lacámara de aire, procurando que noqueden bordes filosos.
1. Ilumine con el ovoscopio el embriónde pollo, identificando y marcando lacámara de aire y la mancha ocular.
3. Deposite el contenido del embrión
en una caja de Petri.
4. Proceda a identificar las estructurasdel embrión de pollo de 9 días.
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 24/33
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 25/33
1
Transiluminar al embrióne identificar la cámara de
aire
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 26/33
2
4
Perforar sobre lacámara de aire y
punto de inoculación
Succionar con unaboquilla por elorificio de la cámarade aire para formar una segundacámaraCon una aguja corta del 27
depositar 0.1mL del colorante.
3
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 27/33
1
Transiluminar
al embrión eidentificar lacámara de
aire
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 28/33
2
En posición horizontal,identificar el sacovitelino (mancha
obscura y densa).
3Introducir una aguja larga del 22,
verticalmente, a través de lacámara de aire y depositar 0.1mL
de colorante.
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 29/33
1
Transiluminar al embrión,
identificar la cámara deaire y marcar un punto enla cima
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 30/33
2
Perforar los puntosmarcados einocular 0.1mL del
colorante conaguja corta del 27.
Aproximadamente 5 mm por abajo de lacámara de aire localizar una zona libre de
vasos y del lado opuesto al embriónmarcar el punto de inoculación.
3
3
La inoculación se puede realizar también através de la cámara de aire con una aguja
del 22 larga.
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 31/33
1
Transiluminar alembrión, marcar la
cámara de aire y elpunto de inoculación
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 32/33
2
3
Marcar el punto de inoculación exactamentedonde se ve el embrión (localice las manchas
oculares).
Iluminar el embrión e inocular con la aguja larga del 22, 0.1mL
del colorante.
7/27/2019 Expo Embrion de Pollo 2-2
http://slidepdf.com/reader/full/expo-embrion-de-pollo-2-2 33/33
Brooks G. Microbiología médica de Jawetz, Melnick y Adelberg. 17ª edición. El manual moderno. México,2002.
Kenneth, L. Microbiología. 9ª edición. PublicacionesCulturales. México, 1986.
Herrero, L [et al]. Procedimientos en virología médica.San José, C.R. : Editorial de la Universidad de CostaRica, 2004.