Fluorometri Dan Fosforimetri

Embed Size (px)

Citation preview

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    1/30

    FLUOROMETRI DAN

    FOSFORIMETRIOLEH:

    KELOMPOK 4

    FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PEN JURUSAN KIMIA

    UNIVERSITAS HALU OKENDARI

    2015

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    2/30

    Pendahuluan 

    Instrumen

    spektroskopi

    suatu ds!"# "$u %a$'(u!a)a# *a&a# !'#t#

    "$u )$a a#a"t)+ s',s-at#%a sa"#& *'()ata#

    satu d'#&a# %a#& "a

    a"at.a"at #st(u$'# %a#& d&u#a)a# u#tu)$'#&a#a"ss suatu+ u#su(+ $/"')u"+ s'#%aa

    %a#& t'(da!at da"a$ suatu $at'(

    s!')t(/-/t/$'t'( UV.Vs+ S!')t(/-/t/$'t'( IRda# "a# s'*a&a#%a

    s!')t(/u/(/$'t( spektrofosforim

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    3/30

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    4/30

    Luminensi = Penyerapan energi oleh memungkinkan terjadinya : ( Eksitasi

    Fluoresensi, dan Fosforesensi)

    anyak senya!a kimia memiliki sifatfotoluminensi (dapat dieksitasikan ol"ahaya dan meman"arkan kembali sindengan panjang gelombang sama ata

    berbeda dengan semula)#

    $da dua peristi!a fotoluminensi :(Fluorosensi dan Fosforesensi)

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    5/30

    Fluorosensi

    Emisi "ahaya oleh suatu %atyang telah menyerap "ahayaatau radiasi elektromagnetik

    lain dari panjang gelombangyang berbeda#

    Perpindahan tingkat energiyang terjadi pada &uorosensiadalah perpindahan energydari keadaan atom terkesitasi(' atau ') menuju kekeadaan stabil (groundstates)

    Peman"aran kembali sinaroleh molekul yang telahmenyerap energi sinardalam !aktu yang relatiflebih lama (*+ detik)#

    Fosforesensi

    -ambar Da&(a$ t(a#s

    ')stas+ u/('s'#s da# -/s

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    6/30

     'pektro&uorometri('pektrofotometri

    &uoresensi)

    suatu !(/s'du( atau "a#&)a,."a#&)a, %a#& $'#&&u#a)a#

    !'#&u)u(a# #t'#stas a,a%a u/('s'#s %a#& d!a#a()a# /at u3 d*a#d#&)a# d'#&a# %a#& d!a#a()a# /"', suatu *a)t'(t'#tu

    "a(uta# *'(u/('s'#s

    $'$!u#%a #t'#stas$a)s$u$ !ada!a#3a#& &'"/$*a#&%a#& *asa#%a *'()sa(20 #$ ,#&&a 60 #$

    !a#3a#& &'"/$*a#(adas ')stas7&'"/$*a#& !ta!'#%'(a!a# s#a( %$'$*a#&)t)a##%

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    7/30

    7-ambar # P(/s's A*s/(*s da# E$s F"u/('s'#s !ada E#'(&

     Ja*"/#s)8

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    8/30

    .iagram /ablonski

    Fas' !adata# 7/#d'#s'd.!,as'8 $/"')u" %a#& t'(')stas d'#&a$'"'!as)a# )'"'*,a# '#'(& 9*(as#%a *'(u!a !a#as

     J)a $/"')u" $'#%'(a! '#'(& &'"/$*a#& '"')t(/$a't) da"a$u"t(a9/"'t atau 9s*"' $a)a $/"')u" t'(s'*ut a)a# t'(')stas )

    '"')t(/#) %a#& "'*, t#&&

    K'$uda# a)a# t'(3ad !(/s's )/#9'(s #t'(#a" 7#t'(#a" /#9'(t%atu !'(!#da,a# $/"')u" da( t#&)at ')stas S2 dasa( $'#u3u')stas S1 %a#& s'ta(at'(3ad a)*at tu$*u)a# a#ta(a $/"')u" /(&a# d'#&a# $/"')u"

    da"a$ !(/s's ('"a)sas 9*(as/#a" 79*(at/#a" ('"a

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    9/30

    .eakti4asimolekul

    tereksitasi

    P'#&'#d/(a# 9*(as 7Vibrational velaxation = VR8. P'(!#da,a# '#'(& 9*(as da( $/"')u" %a#& t'(')stas

    . M/"')u" %a#& t'(')stas )',"a#&a# '#'(& ')stas9*(as/#a"#%a.T'(3ad sa#&at '!at 710.68 d't)

    . Da!at t'(3ad !ada t#&)at '#'(& '"')t(/#) t'(')stas

    K/#9'(s dda"a$ 7Internal Conversion = IC8. P'(!#da,a# '#'(& da"a$ 1 $/"')u"

    . 7S2   S1 atau T2   T18

    . t'(3ad 3)a )'dua t#&)at '#'(& '"')t(/#) t'(s'*ut*'(d')ata#

    P(ads/sas

    . P'(!#da,a# '"')t(/# )' t#&)at '#'(& 9*(as %a#&

    "'*, t#&& da( t#&)at '#'(& %a#& "'*, ('#da,

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    10/30

    La#3uta#

    Ds/sas

    t'(3ad )a('#a Putus#%a suatu )ata# da"a$ $/"')u" )a('#a

    '#'(& s#a( ta#!a dda,u"u !'(sta )/#9'(s )'da"a$ d$a)ata# t'("'!as

    K/#9'(s )'"ua(

    . t'(3ad )a('#a P'(!#da,a# '#'(& '"')t(/#)a)*at a#ta(a)s $/"')u" %a#& t'(')stasd'#&a# $/"')u" "a#. tda) ada !'$a#a(a# s#a( da# '#'(& %a#&

    d!#da,)a# ada"a, '#'(& '"')t(/#)

    L#tasa# a#ta( s%st'$ 7Inter system Crossing = IX 8. P'$*a")a# a(a, s!# '"')t(/# %a#& t'(')stasda( t'(')stas s#&"'t 7S8 $'#3ad t(!"'t 7T8

    . t'(3ad 3)a t#&)at '#'(& 9*(as da( S/9'("a!!#& d'#&a# t#&)at '#'(& 9*(as da( T

    da# t'(3ad !ada $/"')u" d'#&a# *'(at $/"')u"t#&&

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    11/30

    P'$ada$a# s'#d( 7selfquenching = SQ8

    !(/s's d$a#a #t'#stas u/('s'#s *'()u(a#&d$a#a t'(3ad a)*at ta*(a)a#.ta*(a)a# a#ta(

    $/"')u" s'#d(

    F"u/('s'#s 7F8. P'$a#a(a# s#a( da( S1    S0. =a)tu#%a a$at s#&)at 710.>8 d't). J)a ')stas d,'#t)a#+u/('s'#s t'(,'#t. E$s -/t/# sa$a #"a#%a d'#&a# '#'(& a#&

    ds'(a! /"',suatu $/"')u"

    F/s-/(s'#s 7P8. t'(3ad a)*at P'(/s's sutu $/"')u"$'"a#&su#&)a# suatu t(a#ss 7'$s8 da( t#&)att(!"'t )' t#&)at dasa(

    . P'$a#a(a# s#a( da( T1    S0

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    12/30

    KOMPONEN PEN?USUN FLUOROMETER

    Su$*'( '#

     T'$!

    S'!asa#& $7s'!asa#& @a F"t'( !($* F"t'( s')

    D'

    K/$!ut'(

    Fluorometer adalah alat yang digunakan pada &uorome

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    13/30

    Su$*'( ;a,a%a

    2 La$!u M'()u(t')a#a# t#&&7I#t'#stas t#&& ta!t'()/#s'#t(as !ada&a(s s!'s@)8

    #Lampu 5enon (Panjang gelomdengan range ybesar 8

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    14/30

     T'$!at sa$!'"

     T'$!at sa$!'" *'(-u#&s u#tu)$'#'$!at)a# /#t/,sta#da( *'(u!a u)s

    u#tu) dt'#tu)a# #t'#stas u/('s'#s#%a

     T'$!at /#t/, *'(*'#tu) s"#d'( "#&)a(a#*'(u!a !#&&a# !"at#a a&a( d!'(/"', ,as"%a#& a)u(at

    S'!asa#& $/#/)(/$at/( 7 s'!asa#& @"t'(8

    t'$!at /#t/, ,a(us s'"a"u *'(s, da"a$!'#%$!a#a##%a

    F"t'( !($'( *'(-u#&s u#tu) $'$", s!')t(u$ d'#&a#!a#3a#& &'"/$*a#& t'(t'#tu

    F"t'( s')u#d'( *'(-u#&s u#tu) $'$", s!')t(u$d'#&a# !a#a(a# u/('s'#s $a)s$u$

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    15/30

    .etektor

    u$u$#%a u/(/$'t'($'#&&u#a)a#ta*u#&.ta*u#&-/t/$u"t!"'( s'*a&ad't')t/(

    A(us -/t/ d!'(*'sa(da# d*aa !ada

    s'*ua, $'t'( atau!'(')a$

    d't')t/( %a#& *asad&u#a)a# ada"a,B-/t/$u"t!"'( tu*'Catau Bt,'($//u!"'C

    d't')t/( dt'$!at)a#d atas s'*ua, !/(/s%a#& $'$*uat sudut

    00 d'#&a# *'()as

    ')stas

    U#tu) $'#&,#da(,a$*u(a# # $a)ad&u#a)a# #st(u$'#t%a#& *'(#a$a @"t'(

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    16/30

    'pektrum Eksitasi (Peresapan) dan Fluoresensi (Emisi

    Ma)s$u$ da( s!')t(u$ u/('s'#s s't'"a,!ada !a#3a#& &'"/$*a#& %a#& "'*, !a#3a#& 3)a

    d*a#d#&)a# d'#&a# $a)s$u$ da( s!')t(u$')stas

    Fluoresensi dan 'truktur 6olekul

    S'#%aa d'#&a# t(a#ss '"')t(/#) .. +$'$!u#%a )'$u#&)#a# %a#& "'*, *'sa(u#tu) *'(-"u/('s'#s da(!ada t(a#ss # ..

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    17/30

     'enya!a

     p8

    Panjang gelombang,

    nm

    9onsentasi

    minimum

    (ppm)E)stas F"u/(/s'#s

    $sam p+amino+

    salisilat

    11 600 405 0+004

    sianokobalamin 25 605 0+0069inina 1 250650 450 0+002

    2eserpina 1 600 65 0+00>

    9loroproma%ina 11 650 4>0 0+1

    '*'(a!a s'#%aa %a#& *'(u/(/s'#sada"a, :

    S'#%aa %a#& tda) *'(u/('s'#s d'#&a# suatu!'('a)s t'(t'#tu da!at du*a, $'#3ad s'#%aa%a#& *'(u/('s'#s

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    18/30

    "a#&a# %a#& $'#%ata)a# !'(*a#d#&a# $/" %a#&

    *'(u/('s'#s da# 3u$"a, t/ta" $/" %a#& t'(')stasda# $a< 18

    Esiensi Fluorosensi

    ;atata# I#d')s K T'ta!aF F"u/('

    I; K/#9'E; K/#9'(I L#tas

    s%st'$PD P(ads/D Dss/s

     D PD IX  EC  IC  F 

     F 

     K  K  K  K  K  K 

     K  EF 

    +++++

    =

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    19/30

    Faktor+faktor yang berpengaruh yang pediperhatikan pada analisis &uoresensi

    Pelarut

    ;emperatu

    r p8dan6et

    odailuminas

    i

    Fotode

    komposisi

    9ekak uan

    'truktur

    1ksigen

    terlarut

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    20/30

    EF berkurang pada suhu yang dinaikkan  Kenaikan suhu menyebabkan tabrakan antar mol atau

    dengan mol pelarut Energi akan dipancarkan sebagai sinar fluoresensi diubah

    menjadi bentuk lain misal : EC

    Dalam pelarut polar intensitas fluoresensi bertambah, Jika pelarut yang digunakan mengandung atom-atom

    yang berat C!r ", C#$%&' maka intensitas fluoresensi

     berkurang, sebab ada interaksi gerakan spin dengan

      gerakan orbital elektron ikatan   mempercepat ()*

      maka intensitas menjadi berkurang

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    21/30

    p8

     !H $'$!'#&a(u, )'s'$*a#&a# *'#tu) $/#)

    P'(u*a,a# !H $'$!u#%a '-') %a#& #%atat'(,ada! u/('s'#s

    1ksigen;erlarut

     +ksigen terlarut oleh pengaruh cahaya dapat mengokyang diperiksa

    Fotodekomp

    osisi

    D!'("u)a# su$*'( a,a%a d'#&a# #t'#stas

    t#&& s',#&&a !'#&u(aa# at %a#&d!'()sa "'*, *'sa(

    6etodeiluminasi

    $'#&u)u( u/('s'#s %a#& t'&a) "u(us (adas ')s

    $'#&u)u( u/('s'#s !ada sudut *'*'(a!ad'(a3at da( a(a, (adas ')stas

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    22/30

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    23/30

    9onsentrasi

    P'("u "a(uta# %a#& 10.100 )a" "'*, '#'(da(!ada a#a"sa s!')t(/-/t/$'t(

    2e

    M'$'("u)a# a,a%a $/#/)(/$at) U

    ')stas a,a%a $/#/)(/$at) sa#&a's'#sa"+ )a('#a #t'#stas *'(u*a,.us'sua d'#&a# !a#3a#& &'"/$*a#&

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    24/30

    A!")as S!')t(/u/(/$'t(

    S'!'(t s'#%aa (,/da$# G %a#& da!at

    d",at s!')t(u$#%a )'t)a $'#&a"a$ !(/s'su/(/s'#s

    7-ambar S!')t(u$ u/(/s'#

    S#%a" u/('s'#s da( sa$!'" sta#da(d %atuR,/da$#' G d!'(/"', s!')t(u$u/('s'#s %atu )u(9a a#ta(a #t'#stast'(,ada! !a#3a#& &'"/$*a#& + da# !u#a)

    7!'a) 8 #t'#stas !ada !a#3a#& &'"/$*a#& 00 #$

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    25/30

    -'#/$'#a -/s-/('s'#s d&u#a)a# "a$!u !'#da( La$!u !'#da( ada"a,satu 3'#s "a$!u "uuta# &as $'#&&u#a)a# da%a "st() $'#&')stas ua! (a)sa Ua! (a)sat'(')stas tu $'#&,as")a# &'"/$a,a%a u"t(au#&u %a#& !ada &"($'#%'*a*)a# "a!sa# -/s-/( *'(!da# $'#&,as")a# a,a%a )asat

    La$!u !'#da( $a$!u $'#&,a

    ;/#t/, !'(sta -/s-/('s'#s

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    26/30

    9elebihan &uorometer dan fosforimeteranalisis kuantitatif:

    • M't/d' # s'"')t- da# tda) t'(3ad #t'(-'('#s s!')t(a" I#*"a t$*u" da!at datas d'#&a# !'$",a# !a#3a#& &'"/$*a#*a) !ada ')stas $au!u# !'$'#da(a##%a

    •   M't/d' # s'#st- Pada -/s-/(/$'t'(+ ('s/"us a)tu#%a )a('#a !a#3a#%a a)tu ,du! Ha" # 3u&a $'#&'"$#as !'sa$!'" Tda) s'!'(t u/(/$'t'(+ -/s-/(/$'t'( 3a(a#& d&ua#a"ss )$a )a('#a (u$t#%a !'(a"ata# U#tu) $'$!('!(/dus*'" !ada a#a"ss -/s-/($'t'(+ d!'("u)a# !'#d#&d'#&a# suatu a$!u(a# 5:2:2 d't"'t'(+ s/!'#ta#a da# 'ta#/

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    27/30

    - E@s'#s )ua#tu$ !(/s's !'#da(.a,a%a ,a(us sa$a d'#&a# ('!

    . At/$.at/$ *'(at da# 3'#s.3'#s !a(a$a't) *'(!'#&a(u, t'(,

    - P'#%"a#&a# a#ta(sst'$ da# '@s'#s )ua#tu$ t'(uta$a !adas'!'(t s-at !a(a$a't) O2 da!at $'#%'*a*)a# quenching

    - Suatu !'(&'s'(a# atau !'(u*a,a# #t'#stas su$*'( a,a%a dda!at $'#%'*a*)a# )'sa"a,a# !'#&u)u(a#+

    - d'$)a# 3u&a '-') %a#& d)'#a" d'#&a# inner lter %a#& ds!'(*'daa# #t'#stas !'#da(.u/( !ada ss )a#a# da# ss )($'#&a)*at)a# )'sa"a,a# !'#&u)u(a#

    eberapa kesalahan sering terjad&uorometer dan fosforimeter

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    28/30

    a F"u/(/s'#s ada"a, !'$a#a(a# (adas a,a%a suatu $at'( s't'"a, t'(')stas /"', *'()as a,*'('#'(& t#&& F/s-/('s'#s ada"a, !'$a#a(a# )'$s#a( /"', $/"')u" %a#& t'"a, $'#%a(a! '#'(& s#a( daa)tu %a#& ('"at- "'*, "a$a* S!')t(/-/t/$'t( u/('s'#s da!at da(t)a# s'*a

    !(/s'du( %a#& $'#&&u#a)a# !'#&u)u(a# #t'#a,a%a u/('s'#s %a#& d!a#a()a# /"', at u3 K'"'*,a# da( u/(/$'t( ada"a, *'(s-at "'*, !')as'"')t-dA!")as da( u/(/$'t( ada"a, da!at d&u#a)a# u$'#&d'#t@)asa s'#%aa 9ta$#+ /*at da# ,/($

    $sa"#%a da"a$ $'#&d'#t@)as s'#%aa /(&R,/da$# G

    9esimpulan

    K's$!u"a# %a#& d!'(/"', da( $a)a"a, #da#ta(a#%a s'*a&a *'()ut :

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    29/30

    AMINA SARI MUIS

    ISMARNURSAN

    FATHMASARI FITRIANINGSIH TRISNA=ATI SUDIN

    =A ODE IRMA KEMALASARIMUHAMMAD S?AHRIL

    SARJUNA

    ? :

  • 8/20/2019 Fluorometri Dan Fosforimetri

    30/30

    u/(/$'t( "a(uta# at ds#a( d'#&a# s#a( %a#& !a#3a#&&'"/$*a#%a d s')ta( !a#3a#& &'"/$*a#& !'#%'(a!a#$a)s$u$ %a#& *'(asa" da( "a$!u (a)sa atau "a$!u !3a( %a#t'"a, ds')at d'#&a# @"t'( I#t'#stas u/('s'#s du)u( ataud*a#d#&)a# d'#&a# #t'#stas "a(uta# *a)u S#a( u/('s'#sd*'*as)a# da( s#a( ,a$*u(a# d'#&a# $'"'at)a# s#a( $'"@"t'( atau $/#/)(/$at/( ;a(a !'#&u)u(a# !ada da(a#%a sa$a

    d'#&a# a(a s!')t(/-/t/$'t(