UNIVERSIDAD CESAR VALLEJO ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANALABORATORIO CLINICOCICLO 2013 - IIIBlgo. CASIANO MACO EDGAR.

DETERMINACIN DE HEMOGLOBINA Y HEMATOCRITOSEMANA 01(01/04/13 05/04/13

Es el pigmento rojo de los hemates . Constituye aprox. el 33% de la masa total del eritrocito.Existen aprox. 300 millones de molculas de Hb por hemate.El contenido de Hb por hemate oscila ente 27 32 picogramos.Es el principal componente del citoplasma del GR y constituye aprox. El 90% del peso seco de las clulas maduras.Es la protena transportadora de oxigeno e intercambio de CO2HEMOGLOBINA

HEMOGLOBINAComponente funcional mas importante del hemate.

Mediante la Hb el eritrocito realiza su funcin transportadora de oxigeno ( O 2 ) desde los pulmones hacia los tejidosTransporta el CO2 en sentido inverso

En los pulmones, el O2 se fija a la Hb y da lugar a la formacin de oxihemoglobina ( HbO2 )Funciones :De esta forma es transportada a los tejidos donde el O2 es liberadoLa Hb se reduce a desoxihemoglobina El catabolismo de la Hb es un proceso inherente a la destruccin natural de los hemates envejecidos por los macrfagos .

Estructura :Es una protena conjugada con un peso molecular cercano a los 64,500. la molcula es casi esfrica con un dimetro mximo de 6.4 nm.

Es un tetrmero que consta de dos pares de cadenas polipeptdicas ( 2 cadenas A y 2 cadenas b ) Cada una de estas tiene adosado un grupo prosttico muy coloreado, el hem, un complejo de hierro y protoporfirina. La porcin proteca se denomina Globina.

Tipo de Hb cadenas etapa del desarrollo

Hb A a2b2 adulta normal (97%)

Hb A2 a2d2 adulta normal ( 3 - 3.5%)

HB F a2g2 adulta normal ( 5% ) Fetal ( 98% )

Gower I z2e2 embrionaria

Gower II a2e2 embrionaria

Portland z2g2 embrionariaHEMOGLOBINAS NORMALES

VALORES DE REFERENCIA:

Nios al nacer 13,6 - 19,6 g/dL

Nios de 1 ao 11,3 - 13,0 g/dL

Nios de 10 -12 aos 11,5 - 14,8 g/dL

Mujeres 11,5 - 16,5 g/dL

Hombres 14,0 - 18,0 g/dLHEMOGLOBINA

DETERMINACIN DE LA HEMOGLOBINAMTODO DE LA CIANMETOHEMOGLOBINA ( ICSH OMS ) La sangre es diluida en una solucin de ferrocianuro de potasio y cianuro de potasio.

El ferrocianuro de potasio oxida a la Hb a hemiglobina ( Hi; metahemoglobina ), y el cianuro de potasio provee iones cianuro ( CN- ) para formar hemiglobinocianuro ( HiCN ), que tiene un mximo espectro de absorcin de 540 nm.

La absorbancia es medida de la solucin es medida en un fotmetro o espectrofotmetro a 540 nm y es comparado contra una solucin standard de HiCN.

1.Hemoglobina + ferricianuro potsico = metahemoglobina ( Hi )2.Hi + cianuro potsico = cianmetahemoglobina ( HiCN )

Mtodo :

Colocar en tubo 5.0 ml del reactivoAadir 20 microlitros de sangre total anticoagulada con EDTA k3Homogenizar Reposar por 10 minutos y leer a 540 nm contra blanco de reactivoRealizar clculos de conversin ( D.O. X Factor ) Hemoglobina G/L

ERRORES EN HEMOGLOBINOMETRAPueden ser de la muestra, el mtodo, el equipo, o el operador.

Equipo : a. la exactitud de los equipos no es uniformeb. precisin en el pipeteo es indispensablec. pipeta debe estar correctamente calibrada d. las cuvetas de lectura deben ser originales y estar limpiase. el fotmetro debe estar calibrado y en la longitud de onda apropiada, o con el filtro apropiadoMuestra : a. una venipuntura inapropiada con hemoconcentracinb. una tcnica inapropiada en sangre capilarMtodo : a. reactivos correctamente almacenados ( frasco oscuro )b. es imprescindible un standard de calidad, que sea reproducible.c. soluciones turbias de HiCN Humanos : a. se requiere personal bien entrenado en la tcnicab. debe estar familiarizado con el equipoc. debe ser capaz de reconocer a que nivel del proceso se produjo un probable error.

Disminuido en :

Anemias primarias Cncer Embarazo Enfermedades renales Enfermedades autoinmunes Hemorragias Linfomas Problemas de alimentacin

Aumentado en :

Cardiopatas

Deshidratacin

Enfermedades pulmonares crnicas

Estancias en lugares de mucha altitud

HEMATOCRITOEs el nombre que se da a la fraccin de volumen eritrocitario

Es el volumen ocupado por los eritrocitos en relacin con el volumen total de sangre

Esta directamente relacionado con la concentracin de hemoglobina

El valor diagnstico del Hto depende de que el volumen plasmtico sea normal

El hematocrito obtenido en sangre venosa es siempre inferior al obtenido en sangre capilarPor tanto, las punciones digitales suministrarn valores ligeramente ms elevados que la puncin venosa

El Hto, la Hb y el recuento eritrocitario se relacionan entre si mediante los ndices eritrocitarios

VCM, HCM y CHCM

Estos ndices son indispensables para el estudio de la anemia

MTODO DE MICROHEMATOCRITOMateriales requeridos:- Capilares rojos y azules (75 mm x 1,5 mm).- Plastilina.Procedimiento:

Tomar la muestra en capilares rojos heparinizados directamente del pulpejo del dedo, o utilizar capilares azules sin heparina para sangre venosa con anticoagulante de Wintrobe o EDTA. Debe llenarse aproximadamente 70% - 80% del capilar.

Ocluir (tapar) un extremo del capilar con plastilina.

Colocar el capilar sobre la plataforma del cabezal de una centrfuga demicrohematocrito, con el extremo ocluido adherido al reborde externo de la plataforma.

Centrifugar por 5 minutos entre 10 000 15 000 rpm.

CENTRIFUGAS PARA MICROHEMATOCRITO

10000 15000 rpm x 5 minutos

Uso de la escala: Sostenga el tubo frente a la escala de manera que el fondo de la columna de eritrocitos (no el extremo inferior del tubo) quede exactamente al mismo nivel de la lnea horizontal correspondiente al cero.

Desplace el tubo a travs de la escala hasta que la lnea marcada con el nmero 1,0 quede al nivel del tope de la columna de plasma. Vigile que el fondo de la columna de eritrocitos contine sobre la lnea cero. El tubodebe encontrarse completamente en posicin vertical.

La lnea que pase al nivel del tope de la columna de eritrocitos indicar la fraccin de volumen de stos.

CAUSAS DE ERROR EN LA DETERMINACIN DEL HEMATOCRITO POR CENTRIFUGACINEmpleo de una relacin sangre:anticoagulante incorrecta ( retraccin del hemate ) del Hto.

Poca cantidad de anticoagulante Extraccin defectuosa de la sangre (hemoconcentracin )

Retraso mayor a 6 horas despus de la extraccin ( falso aumento del Hto )

Cuando la sangre se obtiene directamente de un catter ( dilucin )

Temperatura elevado y se utiliza heparina

Empleo de una fuerza centrifuga insuficiente

Tiempo inadecuado

Recalentamiento de la centrifuga a > 40C ( hemlisis )

Error en la identificacin del tuboCapilar inadecuado

Homogenizacin defectuosa de la muestra antes de llenar el capilar

VALORES DE REFERENCIA:

Hombres 40% - 50%

Mujeres 38% - 44%

Nios (5 aos) 38% - 44%

Lactantes (3 meses) 37% - 42%

Recin nacidos 50% - 58%HEMATOCRITO

ndice Bajo

Anemia Fallos en la mdula sea (Radiaciones, toxinas, fibrosis, tumores, etc...) Embarazo Hemorragias Hipertiroidismo Hemolisis (destruccin de glbulos rojos), por una transfusin Leucemia Problemas de alimentacin Artritis reumatoide ndice Alto

Cardiopatas Deshidratacin Eclampsia (en el embarazo) Enfermedades pulmonares crnicas Exceso de formacin de hemates (Eritrocitosis) Policitemia vera Choque (shock)

ANEMIASLa Anemia como la fiebre es un sntoma de una enfermedad que requiere investigacin para determinar la causa.

En forma prctica la anemia es evaluada por la Hemoglobina y el Hematocrito : que sern influenciados por el volmen plasmtico.

En la deshidratacin habr concentracin de solutos > HB ,y en la gestacin habr incremento del volmen plasmtico ,entonces < Hb sin que est afectada la masa eritrocitaria .

ANEMIAS DEFINICIN :

Descenso de la masa eritrocitaria glbulos rojos de una persona y/o Hemoglobina, siendo insuficiente para aportar el oxgeno necesario a las clulas .

HEMOGLOBINOGNESISPROCESOS:

Sntesis de las globinas + Sntesis del Grupo Hemo

Requerimientos:

Hierro, Vit.B12, Ac. Flico

TEST BSICOS DE LABORATORIORepetir HemogramaG. Blancos, G. rojos, Hematocrito, Hb, Plaquetas

Indices eritrocitarios: Constantes CorpuscularesVolumen corpuscular medio VCMHemoglobin a corpuscular media HCMConcentracin de Hb corpuscular media CHCM

Recuento de Reticulocitos

Lmina Perifrica

INDICES ERITROCITARIOS: CONSTANTES CORPUSCULARESVCM (80-100)Mayor valor clnicoTamao hemates

HCM (25-35)- Representa el peso de la Hb en el GR

CCMH (35-31)Concentracin corpuscular media de la Hb

Hematocrito (L/L)/Eritrocitos

Hemoglobina/Eritrocitos

Hemoglobina/Hematocrito

MANIFESTACIONES CLNICASPalidezSntomas generalesAsteniaDisnea Fatiga muscularHiporexia

Manifestaciones cardiorespiratoriasSntomas de ICSoplo sist. funcionalManifestaciones neurolgicasCefalea, vrtigoParestesiasAlteracin sensibilidad

Manifestaciones gastrointestinalesConstipacin o diarrea

Alteraciones ritmo menstrualDisminucin ritmo menstrual hasta amenorrea

ANEMIAS . CLASIFICACION :

1.- Segn el origen las anemias pueden ser : -De origen Central o Arregenerativas(Medular).

-De origen Perifrico o Regenerativas (Sangre perifrica ).

2.-Segn el Volmen Corpuscular Medio : -Microcticas . -Normocticas . -Macrocticas .

ANEMIAS . ANEMIAS REGENERATIVAS :

1.-Anemias por prdidas sanguneas : anemias post-hemorragias .2.-Anemias Hemolticas Corpusculares : -Problemas de Membrana del GR. -Deficiencias enzimticas . -Alteraciones de la Hemoglobina .3.-Anemias Hemolticas Extracorpusculares : por Agentes txicos, Infecciosos, causas mecnicas, Inmunolgicas, Hiperesplenismo ,etc .

ANEMIAS . ANEMIAS ARREGENERATIVAS :

1.-Insuficiencias Medulares : -Cuantitativas : Selectivas: Aplasia Pura de Serie Roja. Globales : Aplasia Medular .

-Cualitativas: Congnitas: Diseritropoyesis. Adquiridas :S. Mielodisplsico

ANEMIAS . CLASIFICACIN DE LAS ANEMIAS SEGN EL VOLMEN CORPUSCULAR MEDIO :

1.-Microcticas ( VCM < 80)

2.-Macrocticas .( VCM > 100)

3.-Normocticas .( VCM 80 100)

ANEMIAS . ANEMIAS MICROCITICAS :

-Anemia Ferropenicas (panel de hierro)-Talasemias ( electroforesis de Hb)-Algunas anemias Sideroblstica .-Intoxicacin por Plomo.

ANEMIA FERROPNICA

TALASEMIA

ANEMIAS MACROCITICAS : VCM > 100

-Anemias Megaloblstica .-Alcoholismo.-Insuficiencia Heptica .-Sndromes Mielodisplsicos .-Hipotiroidismo.-Casos de Anemia Aplsica . ANEMIAS .

Anemia Megaloblstica

ANEMIA MEGALOBLSTICADEFICIT DE VIT.B12.

DEFICIT DE FOLATO.

ANEMIAS . ANEMIAS NORMOCTICAS :

Enfermedades crnicas.

-Anemia Aplsica (la mayora).

-Prdidas Agudas (Salvo reticulocitocis).

-Invasin Medular ( Mieloptisis).

ANEMIA DE ENFERMEDAD CRNICAInfecciones: TBC, LES, Pielonefritis o ITU crnica.

Malignidad: leucemia, linfoma, mieloma.Desordenes inflamatorios crnicos:

AR, LES, Sarcoidosis, enfermed colageno vascular, polimialgia reumtica, hepatitis cronica.

LMINA PERIFRICAMorfologa GR, leucocitos, plaquetas.

Morfologa GR7-9 m con 1/3 central plido.T V1/2 110-120 dasAprx. del tamao del ncleo del linfocito.

Poiquilocitosis : diferentes formasAnisocitosis : diferentes tamaos

Punteado BasfiloPrecipitado RNA

Intoxicacin plomo Anemia Hemolitica

Celulas crenadas o burrs cellAlteracin membranaUremiaFalla renalSangre tranfundida.

Eliptiocitosis/ovalocitosProteinas anormales del citoesqueleto.

Eliptiocitosis hereditaria.

Cuerpos Howell JollyRemanente nuclear DNA

Anemia hemolitica

Esplenectomizados.

Esquistocitos/helmet cellsGR fragmentados (mecanica o fagocitosis)

Anemia hemoltica microangioptica:

Purpura trombocitopnica trombtica TTP

Sindrome urmico hemoltico CID

Vasculitis

EsferocitosAusencia palidez central

PequeosEsferocitosis hereditaria

Anemia hemolitica inmune.

Target cellsHemoglobinopatias

Talasemia

Enfermedad heptica.

GRACIAS