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FLS. 1 LAUDO 427.210-2 SECRETARIA DE ESTADO DA SEGURANÇA PUBLIC Í/DO DE INVESTIGAÇÃO DE VÍNCULO GENÉTICO G-890 Aos treze dias do mês de outubro do ano de dois mil e dez, nesta cidade de Curitiba e no INSTITUTO DE CRIMINALÍSTICA do Estado, foram designados os Peritos Criminais Hemerson Bertassoni Alves e Marcelo Malaghini, para procederem a exame de vínculo genético de Maternidade, a fim de ser atendida solicitação do Instituto Médico Legal de Campo Mourão, através do ofício n°'086/10, datado de 10 de setembro de 2010, visando instruir autos de IP n° 431/10. Em consequência, os Peritos procederam ao exame solicitado, relatando-o com verdade e com todas as circunstâncias, da forma como segue: MATERIAL Foram encaminhados ao Laboratório de Genética Molecular Forense deste Instituto, através do ofício retromencionado, amostra hematoló Padrão de MARISTELA PACHECO (Suposta Mãe) e fragmentos os supostamente identificados como "Ossada 1", do Instituto Médico Leg Campo Mourão. (Evidência). MOTIVO DO EXAME Determinar os padrões de perfis genéticos das amostras coletadas, através de suas comparações, investigar a existência de vínculo gene maternidade entre a Suposta Mãe e a Evidência. EXAME a) EXTRACÃO DQ D NA: Método de extração orgânica com' Clorofórmio e Inorgânica com resina chelex®, segundo procedimentos de em literatura científica da área1. b) AMPLIFICAÇÃO DO DNA: Amplificação por PCR2, com o emprego do sistema comercial Power Plex 16HSTJ^,(Promega Corporation), em termociclador GeneAmp ® PCR System 9700, programado de acordo com protocolos fornecidos pelo fabricante dos sistemas utilizados. C) DETECÇÃO DQS PRODUTOS AMPLIFICADOS: Corrida eletroforética capilar seguida de detecção da fluorescência laser-induzida no analisador i esc PCR-Based Typing Protocols FBI Laboratory- Editado em 12/12/1994. 2 "Polymerase Chain Reaction", de Reação em Cadeia da Polimerase. Saiki, R. K. Gelfand, D. H. Stoffel, S., Scharf, S. J., Higuchi. R., Horn, G. T., Mullis, K. B., and Erlich, H. A., 1988. Primer- directed enzimatic amplification of DNA with a termostable DNA polymerase. Science 239:543-491. 3 Sistema para amplificação e genotipificação simultânea das regiões D3S1358, vWa, FGA, Amelogenina, D8S1179, D21S11, D18S51, D5S818, D13S317, D7S820, CSF1PO, TPOX, TH01, PENTA D, PENTA E e D16S539 - Power Plex 16HS, PCR Amplification Kit, Users Manual, 2005, Promega Corporation.,

Í/DO DE INVESTIGAÇÃO DE VÍNCULO GENÉTICO · Aos treze dias do mês de outubro do ano de dois mil e dez, nesta cidade ... PENTA E e D16S539 - Power Plex 16HS, PCR Amplification

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FLS. 1

LAUDO N° 427.210-2SECRETARIA DE ESTADO DA SEGURANÇA PUBLIC

Í/DO DE INVESTIGAÇÃO DE VÍNCULO GENÉTICOG-890

Aos treze dias do mês de outubro do ano de dois mil e dez, nesta cidadede Curitiba e no INSTITUTO DE CRIMINALÍSTICA do Estado, foramdesignados os Peritos Criminais Hemerson Bertassoni Alves e MarceloMalaghini, para procederem a exame de vínculo genético de Maternidade, afim de ser atendida solicitação do Instituto Médico Legal de Campo Mourão,através do ofício n°'086/10, datado de 10 de setembro de 2010, visando instruirautos de IP n° 431/10. Em consequência, os Peritos procederam ao examesolicitado, relatando-o com verdade e com todas as circunstâncias, da formacomo segue:

MATERIALForam encaminhados ao Laboratório de Genética Molecular Forense

deste Instituto, através do ofício retromencionado, amostra hematolóPadrão de MARISTELA PACHECO (Suposta Mãe) e fragmentos ossupostamente identificados como "Ossada 1", do Instituto Médico LegCampo Mourão. (Evidência).

MOTIVO DO EXAMEDeterminar os padrões de perfis genéticos das amostras coletadas,

através de suas comparações, investigar a existência de vínculo genematernidade entre a Suposta Mãe e a Evidência.

EXAMEa) EXTRACÃO DQ D N A: Método de extração orgânica com'Clorofórmio e Inorgânica com resina chelex®, segundo procedimentos deem literatura científica da área1.b) AMPLIFICAÇÃO DO DNA: Amplificação por PCR2, com o emprego dosistema comercial Power Plex 16HSTJ^,(Promega Corporation), emtermociclador GeneAmp ® PCR System 9700, programado de acordo comprotocolos fornecidos pelo fabricante dos sistemas utilizados.C) DETECÇÃO DQS PRODUTOS AMPLIFICADOS: Corrida eletroforéticacapilar seguida de detecção da fluorescência laser-induzida no analisador

i esc

PCR-Based Typing Protocols FBI Laboratory- Editado em 12/12/1994.2 "Polymerase Chain Reaction", de Reação em Cadeia da Polimerase. Saiki, R. K. Gelfand,

D. H. Stoffel, S., Scharf, S. J., Higuchi. R., Horn, G. T., Mullis, K. B., and Erlich, H. A., 1988. Primer-directed enzimatic amplification of DNA with a termostable DNA polymerase. Science 239:543-491.

3 Sistema para amplificação e genotipificação simultânea das regiões D3S1358, vWa, FGA,Amelogenina, D8S1179, D21S11, D18S51, D5S818, D13S317, D7S820, CSF1PO, TPOX, TH01, PENTAD, PENTA E e D16S539 - Power Plex 16HS, PCR Amplification Kit, Users Manual, 2005, PromegaCorporation.,

LAUDO N°SECRETARIA DE ESTADO DA SEGURANÇA PUBLICA

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automático de DNA ABI PRISM 310, (Applied Biosystems). Foram encontradascorrespondências alélicas entre a Suposta Mãe e a Evidência, em treze dasquinze regiões analisadas. A relação das regiões pesquisadas, assim comosuas respectivas localizações cromossômicas e genótipos obtidos podem serobservados nos quadros de resultados em anexo.D) DA ANÁLISE ESTATÍSTICA: Dados os achados obtidos, partiu-se para a

análise estatística que visa a mensurar a hipótese dos achados obtidos serem

consequência da existência de vínculo biológico de maternidade entre Suposta

Mãe e a Evidência. Para tal, calculou-se o índice de Maternidade Combinado4

e a Probabilidade de Maternidade5, utilizando-se frequências alélicas da

população brasileira, conforme demonstrado no Quadro de Resultados em

anexo.CONCLUSÃODevido às correspondências alélicas observadas entre a Suposta Mãe e

a Evidência em todas as regiões analisadas e ao índice de MaternidadeCombinado alcançado, conclui-se pela condição de INCLUSÃO DEMATERNIDADE entre MARISTELA PACHECO, em relação aos fragmentosósseos encaminhados via ofício retromencionado, supostamenteidentificados como ossada 01, do Instituto Médico Legal de CampoMourão com uma PROBABILIDADE DE MATERNIDAOE^e 99,999854%.

Este laudo foi redigido pelos Peritos signatários a irfíRresso em duasfolhas de papel timbrado do Instituto mais um "puadro dal Resultados" anexo.E são essas as declarações que em suas consciências têm os PeYitos a fazer.E ptor ,nada mais haver, deu-se\por findo o ef(ame solicitado quel de tudo selavre u b presente lauâo que vai/devidamente assinado pel

íersoireerrassonPERITO CRIMINAL

4 O índice de Maternidade é uma razão entre duas suposições mutuamente exclusivas eexaustivas, cujo resultado indica quantas vezes mais provável é a hipótese dos achados laboratoriaisserem consequência de existência de vínculo biológico de maternidade entre suposto pai e requerente doque ao acaso. O índice de Maternidade Combinado é obtido pelo produto dos índices de Maternidadeindividuais de cada região analisada. Para cálculo do índice de Maternidade da região onde foramconstatadas as ausências de correspondências alélilcas descritas, foi utilizada a razão entre a taxa demutação e a probabilidade média de exclusão da região em questão, conforme Annual Report Summaryfor Testing in 2001 - American Association ofBlood Banks.

5 A Probabilidade de Maternidade é calculada segundo o Teorema de Bayes, a partir doÍndice de Maternidade Combinado. Seu valor expressa a probabilidade da hipótese de existência devínculo biológico de maternidade entre suposto pai e requerente, dados os resultados laboratoriaisobtidos e considerando-se uma probabilidade a príorí de 0,50.

SECRETARIA DE ESTADO DA SEGURANÇA PÚBLICA/

^r^

QUADRO DE RESULTADOS

Base de dados de frequência alélica:Grattapaglia et.al. FSI 118 (2001) 91-94Figueiredo et.al. 2004. JFS 49(1)2004Whittle et.al. 2004. FSI 139(2004) 207-210

Frequência alélica mínima:5/2N

t

Correção para subdivisão populacional:Balding DJ, Nichols RA. FSI 64 (1994) 125-140Theta: 0,01

Análise estatística: , *Riancho JÁ, Zarrabeitia MT. A Windows-based software for common paternity and sibling analysesFSI 135 (2003) 232-234

Laudo:

DQA1

TH01TPOX

CSF1POVWAFÉS

F13A01F13BLPL

D3S1358FGA

D5S818D13S317D7S820D8S1179D16S539D18S51D21S11D1S80LDLRGYPAHBGG

GCPentaDPentaE

D2S1338D19S433OtherS

ALELOS

Suposta Mãe

1,1235961,6286641,358696

1,71232935,714286

1,4792901,6778520,9652512,066116

21,739130

0,988142

2,56410316,556291

0,5291010,6195790,576037

0,6313130,9727630,5966590,6265660,4911590,6738540,956023

0,497018

0,7194240,943040

1,123595511,829960112,48635884

4,25746377152,052277224,929405377,39833

364,284102752,653103

16362,024

16168,0079

41456,4305686364,743

0,5291005290,6466381280,713167793

0,8097942190,9934662850,9955738390,9973572820,997262405

0,998673130,999938887

0,999938153

0,9999758790,999998543

8 / 911 M214/18

15/ 1618/1911 /138/118 /1012/148/12

29/30

10/1117/19

Evidência

8 / 811/11

18/ 19

15/ 1518/2310/1311/1110/ 1112>-Í5

/B IS

30/36

11/1114/19

índice de Maternidade Combinado: | 686364,74*

Probabilidade de Maternidade:

0,9999985

(99,999854%;