PROTOCOLO DE ANLISIS

C5 Universidad Nacional Mayor de San Marcos

Facultad de Farmacia y Bioqumica

ATROPINA SULFATO

Agente antimuscarnico del grupo de las aminas terciarias.

I. PROTOCOLO DE ANLISIS

Fecha de anlisis: 04 de abril de 2011

Lugar de anlisis: Laboratorio de Qumica Medicinal

Sustancia analizada: Atropina sulfato

Forma farmacutica: Ampolla

Concentracin: 0.5 mg/mL

Lote: N 00071433

Fecha de vencimiento: 09 2003 (septiembre de 2003)

Aspecto del producto: Buen estado

Aspecto de la forma farmacutica: Buen estado

Color: incoloro

Olor: inodoro

Solubilidad: ligeramente soluble en alcohol y ms soluble en alcohol caliente. Ligeramente soluble en glicerina. Muy soluble en agua.

Cristales: aciculares y entrecruzados. La cristalizacin formada por agujas muy aproximadas, incoloras. En el fondo los cristales son ms gruesos, y forman grupos reunidos de figura estrellada (lo que a poco aumento da la impresin de ser amorfo).

Cromatografa en capa fina (CCF):

Sistema de solventes: cloroformo acetona dietilamina (5:4:1)

[Se utiliz cloroformo acetona (5:4)]

Soporte: Silicagel G

Revelador: Vapores de Iodo

Corrida del solvente: 6.1 cm

Corrida de la muestra problema 1: 5.9 cm

Corrida de la muestra problema 2: 5.9 cm

Rf = corrida de la Mp = 5.9 = 0.9672

Corrida del solvente 6.1

Anlisis qumico funcional:

Las reacciones de alcaloides, con reactivos generales (Mayer, dragendorff), se encuentran dentro del grupo de las reacciones de precipitacin; stas se basan en un intercambio del anin voluminoso del reactivo en accin, que reemplaza a los aniones pequeos de las sales de los alcaloides. Estos principios activos, poseen un grupo amino que les confiere propiedades alcalinas y, al ser llevados a un medio cido, se protonan e interaccionan electrostticamente con los aniones voluminosos mencionados.

Reaccin de Mayer: positivo (++)

Reactivo de Mayer (tetrayoduro mercurato de potasio): Se prepara disolviendo 1.3g de bicloruro de mercurio en 60 mL de agua y 5g de yoduro de potasio y se afora a 100 mL. Los alcaloides se detectan como un precipitado blanco o de color crema [I4Hg]K2.

La reaccin de Mayer presenta como metal de coordinacin al mercurio (Hg2+), el cual forma una coordinacin tetradrica con una carga formal en su esfera de -2.

Reactivo de Dragendorff: positivo (+++)

Reactivo de Dragendorff (tetrayodo bismutato de potasio): Se prepara mezclando 8g de nitrato de bismuto pentahidratado en 20 mL de cido ntrico al 30% con una solucin de 27.2g de yoduro de potasio en 50 mL de agua. Se deja en reposo por 24 horas, se decanta y se afora a 100 mL. La presencia de alcaloides se detecta por la formacin de un precipitado naranja rojizo cuando se le adiciona este reactivo a una solucin cida de alcaloides.

La reaccin de Dragendorff produce sales de los alcaloides precipitados coloreados; el bismuto presenta una geometra octadrica y una carga formal de -2 en su esfera de coordinacin (anin voluminoso) para interactuar electrostticamente con dos molculas de alcaloides protonadas.

Cloruro de Bario: Negativo (-)

Esta reaccin sirve para reconocer el ion sulfato, debido a que este grupo presenta como particularidad que el sulfato de bario es insoluble en medio acuoso por lo que se formar un precipitado blanco.

CLORHIDRATO DE EFEDRINA

Espectrofotometra UV

Es una espectroscopia de fotones y una espectrofotometra. Utiliza radiacin electromagntica (luz) de las regiones visible, ultravioleta cercana (UV) e infrarroja cercana (NIR) del espectro electromagntico. La radiacin absorbida por las molculas desde esta regin del espectro provoca transiciones electrnicas que pueden ser cuantificadas

El espectrofotmetro es un instrumento que permite comparar la radiacin absorbida o transmitida por una solucin que contiene una cantidad desconocida de soluto, y una que contiene una cantidad conocida de la misma sustancia

Caractersticas del sistema

Las muestras en solucin se ponen en una pequea celda de Si.

Se utilizan dos lmparas: una de H o deuterio para la regin UV, y una de W / halgeno para la regin visible

Se utiliza tambin una celda de referencia que contiene slo solvente.

La luz pasa simultneamente por la celda de muestra y la celda de referencia.

El espectrmetro compara la luz que pasa por la muestra con la que pasa por la celda de referencia.

La radiacin transmitida es detectada y el espectrmetro obtiene el espectro de absorcin al barrer la longitud de onda de la luz que pasa por las celdas.

Se observa que presenta una banda aguda con un pico de absorcin mximo en 25nm, y otras dos bandas tambin agudas con picos de absorcin en 250nm y 260 nm respectivamente.

Espectrofotometra infrarroja

Cromatografa liquida de alta resolucin (HPLC)

La cromatografa es un mtodo fsico de separacin basado en la distribucin de los componentes de una mezcla entre dos fases inmiscibles, una fija o estacionaria y otra mvil. En cromatografa lquida, la fase mvil es un lquido que fluye a travs de una columna que contiene a la fase fija.

La cromatografa lquida clsica se lleva a cabo en una columna generalmente de vidrio, la cual est rellena con la fase fija. Luego de sembrar la muestra en la parte superior, se hace fluir la fase mvil a travs de la columna por efecto de la gravedad. Con el objeto de aumentar la eficiencia en las separaciones, el tamao de las partculas de fase fija se fue disminuyendo hasta el tamao de los micrones, lo cual gener la necesidad de utilizar altas presiones para lograr que fluya la fase mvil.

De esta manera, naci la tcnica de cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC), que requiere de instrumental especial que permita trabajar con las altas presiones requeridas.

PARAMETROS:

a. Retencin: capacidad real de la fase estacionaria para retardar la salida de un componente.

Tiempo muerto (tM): es el tiempo requerido para eluir la muestra no retenida en la columna y se determina midiendo el tiempo de retencin de la fase mvil misma, o bien de una muestra similar.

Tiempo de retencin (tR): es el tiempo que la muestra permanece dentro de la columna y se mide desde el momento en que la muestra se introduce en el sistema hasta el momento en que se obtiene el punto mximo de la seal o pico. Es caracterstico de la muestra, la columna, la fase mvil y la temperatura.

Tiempo de retencin ajustado: (tR = tR tM) es la diferencia entre el Tiempo muerto y Tiempo de retencin.

b. Relacin de capacidad: retencin de un compuesto con independencia del caudal.

c. Eficiencia:

Numero de platos tericos (N): un plato terico es el equilibrio de distribucin de la muestra entre la fase mvil y la fase estacionaria.

Altura equivalente a un plato terico (AEPT): longitud de la columna requerida para obtener un equilibrio de la muestra entre la fase mvil y la fase estacionaria.

Coeficiente de distribucin o de reparto (k): es una propiedad fsica fundamental de cada sustancia. Caracterstico de cada muestra y del sistema de fase mvil y de fase estacionaria en consideracin y tambin en funcin de la temperatura.

Resolucin (R): es una medida cuantitativa del grado de separacin obtenido entre dos compuestos.

Selectividad (): valores elevados significan mejores separaciones.

CONDICIONES PARA EL ENSAYO (BPCR):

Columna: columna de acero inoxidable (20 mm x 4.6 mm) rellena con una capa final de octadesil silica gel para cromatografa

Fase mvil: 0.005 M dioctil sulfosuccinato de sodio en una mezcla de 65 volmenes de metanol, 35 volmenes de agua y 1 volumen de acido actico glacial.

Flujo: 2 ml por minuto

Detector: ultravioleta, longitud de onda (263 nm)

Tiempo: medido en minutos

ESPECIFICACIONES DE LA SUSTANCIA DE REFERENCIA:

Solucin de prueba: Disolver 75 mg de la sustancia a examinar en la fase mvil y diluir a 10 ml con la fase mvil.

Solucin de referencia (a): diluir 2,0 ml de la solucin de ensayo a 100,0 ml con la fase mvil. Diluir 1,0 ml de esta solucin a 10,0 ml con la fase mvil.

Solucin de referencia (b): disolver 5 mg de la sustancia a examinar y 5 mg de pseudoefedrina clorhidrato de CRS en la fase mvil y diluir a 50 ml con el mvil fase.

Columna:

Tamao: l = 0,15 m, = 4,6 mm,

Fase estacionaria: gel de slice esfrica fenilsilil para cromatografa R (3 micras).

Fase mvil: mezcla de seis volmenes de metanol R y 94 volmenes de un 11,6 g / l de acetato de amonio R ajustado a pH 4.0 con cido actico glacial R.

Flujo: 1.0 ml / min.

Deteccin espectrofotomtrica: a 257 nm.

Inyeccin: 20 microlitros.

Ejecutar time 2.5 del tiempo de retencin de la efedrina.

Retencin con referencia relativa a la efedrina (tiempo de retencin = aproximadamente 8 min): B = impureza alrededor de 1,1; impureza A = 1,4.

Sistema de solucin de sustancia de referencia (b):

Resolucin: mnimo de 2.0 entre los picos debido a la efedrina y la impureza B.

Lmites:

Factor de correccin: para el clculo del contenido, multiplicar la superficie del pico de la impureza A por 0.4,

Impureza: no ms que el rea del pico principal en el cromatograma obtenido con la solucin de referencia (a) (0,2 por ciento),

Impurezas sin especificar: para cada impureza, no ms de 0,5 veces la superficie de los principales pico en el cromatograma obtenido con la solucin de referencia (a) (0,1 por ciento),

Suma de otras impurezas que A: no ms de 2.5 veces el rea del pico principal en el cromatograma obtenido con la solucin de referencia (a) (0,5 por ciento),

Desprecio lmite: 0,25 veces el rea del pico principal en el cromatograma obtenido con la solucin de referencia (a) (0,05 por ciento).

BIBLIOGRAFA

Estudio farmacognstico y fotoqumico del rizoma de Zingiber officinale Roscoe Jengibre de la ciudad de Chanchamayo- Regin Junn, Per. URL disponible en:

http://docs.google.com/viewer?a=v&q=cache:2bNAAts_hcoJ:revistas.concytec.gob.pe/pdf/rmv/v5n1/a07v5n1.pdf+reaccin+de+dragendorff&hl=es&gl=pe&pid=bl&srcid=ADGEESjmiiD_3Y29TEcwEITIhotWL56Rn8GNkUYyzhYhN3dS1-t-avHixLs9sZANmzt2GLYBYbgUHRs7NFWKwwxM3Tg6zm-dyGViPbOfhVXzJomjKj5CCOTEpTqhIGT0_znECCAfXA0l&sig=AHIEtbS6WkKXpowi5JKTyXGDt9YaLQPCQA

Alcaloides y compuestos nitrogenados. Universidad de Antioquia. Medelln, junio de 2008. URL disponible en:

http://docs.google.com/viewer?a=v&q=cache:VwHzQksHt5oJ:farmacia.udea.edu.co/~ff/alcaloides.pdf+reaccion+de+mayer+para+la+atropina+sulfato&hl=es&gl=pe&pid=bl&srcid=ADGEESjrFi1DWg3raUQTyVV-UtK4nlGFmBL3JwasWa-VdIn8uIKBYM_YJ4BddEl1USjWkyqA5hi3ZVdokyn6WNqJxxEc4AszuMeNe7nOMG3F8PgBzuVskp23ySkrIl8vFBMsPcGUyrlb&sig=AHIEtbQAr2tZTlnkY6nuGknqDazd3_H1JQ

ESPECTRO INFRARROJO DEL CLORHIDRATO DE EFEDRINA