CURSO DE BIOQUMICAI UNIDADSemestre 2015 1

Blgo. Marco Antonio Nuez FonsecaProfesor Responsable del curso.

PROFESORA DE MESA: Lucy Callo Balcazar.

ALUMNA: Katia Galindo Torres.

GRUPO N: 7P LIMA -PERU2015PRCTICA DE LABORATORIO N19REPARACIN SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCIN DE DNA EN TEJIDO HEPATICO

DE LABORATORIO

FUNDAMENTO.-

ADN: Es uncido nucleicoque contiene instruccionesgenticas usadas en eldesarrolloy funcionamiento de todos los organismosvivos conocidos y algunosvirus, y es responsable de su transmisinhereditaria.La funcin principal de la molcula de ADN es el almacenamiento a largo plazo deinformacin.

Es una macromolcula helicoidal formada por dos cadenas de desoxiriboncleotidos, las cuales est formado por una base nitrogenada, azcar y un grupo fosfato.

BASES NITROGENADAS (Purinas- Pirimidinas).- Portadora de la informacin gentica.

GRUPO FOSFATOTiene un papel estructural.

LOSNUCLETIDOSSonmolculas orgnicasformadas por la unin covalentede unmonosacridode cincocarbonos (pentosa), una base nitrogenaday ungrupo fosfato.

HISTONASSon protenas bsicas, de baja masa molecular, muy conservadas evolutivamente entre loseucariotasy en algunosprocariotas.Forman lacromatinajunto con elADN,sobre la base de unas unidades conocidas comonucleosomas. La cromatina resuelveel problema de restriccin de crecimiento de ADN y ncleo, la cromatina est formada porADN y protenas, la principal protena son las histonas.

II. RESULTADOS.-LOS PASOS REALIZADOS PARA LA SEPARACIN SUBCELULAR DE NCLEOS1.-

+ SUCROSA 0.25M (10 MILIMETROS ) ROMPE LA MEMBRANA CELULAR

2.-

CENTRIFUGAR POR 10 MIN. SOBRENADANTE BOTAR ESTO + SUCROSA 0.34M (10 MILIMETROS)

SUSPENSIN AYUDA A LIBERAR EL NUCLEO NO BOTAR

3.- NaCl brinda mdio hipertnico Solubiliza. SDS 25% (ROMPE LA MEMBRANA MUCLEAR) Mezclar alcohol isoamnico (ROMPE PROTEINAS CONTAMINADAS) + Cloroformo (SOLUBILIZA LOS LIPIDOS) 4.-

Verter en el 2 tubo centrifuga. FASE ACUOSA (CONTIENE EL DNA)Centrifugar por 10 min. FASE PROTEICA (CONTIEN PROTEINAS) FASE CLOROMOFORFICA (CONTIENE LOS LIPIDOS)

III. CALCULOS.-DETERMINACIN DE BILIRRUBINA TOTAL

Bilirrubina total mg/L= (Abs MP Abs BM Abs BR) x (Standard) (Abs St Abs BR)

Bilirrubina total mg/L = (0.043 0.023 0.007) x (100) (0.400 - 0.007)

Bilirrubina total mg/L = 0.013 x 100 0.393

Bilirrubina total mg/L = 0.13 0.393

Bilirrubina total mg/L = 3.31 mg/L

IV. INTERPRETACIN DE LOS RESULTADOS.-

Al realizar los clculos comprobamos cuatro principales cifras que son descritas en el cuadro de clculos.

El estndar de la bilirrubina es 100 mg/L

La Absorbancia Blanco Reactivo se resta a la operacin por que el reactivo tambin tiene absorbancia y ayuda a regular la operacin o para que los resultados sean ms especficos. Debemos tener en cuenta que las lecturas deben ser hechas en lectura a cero, para que la operacin sea ms exacta.

V. CONCLUSIONES.-

Nuestro diagnstico nos dio de 3.31 mg/L y en un adulto se encuentra dentro del rango dado que es hasta o menor de 10 mg/Dl; con lo cual no tiene ninguna patologa con respecto a la bilirrubina. Si el paciente hubiese estado en el rango mayor al de 10 mg/Dl estaramos hablando de un caso de hiperbilirrubinemias; habra un problema a nivel del tejido heptico, puede haber una obstruccin masiva o problema hemoltico. Es normal que los nios nacen teniendo nivel de bilirrubina muy elevado pero se normalizan en el transcurso de la semana. En este caso se hara un tratamiento de fotolisis, sera ponerlos en luz pues la bilirrubina disminuye. Hidratacin, sobrealimentacin: se aumenta la ingesta de la leche para evacuar ms seguido y as se produce la eliminacin de bilirrubina atravez de las heces.

Enfermedades Asociadas

Hiperbilirrubinemia no conjugada o indirecta: Anemia hemoltica Sndrome de Gilbert Sndrome de Crigler-Najjar

Hiperbilirrubinemia conjugada o directa:Habitualmente la hiperbilirrubinemia de predominio directo es causada por enfermedades hepticas en las que hay insuficiente capacidad de excretar la bilirrubina. Esta dificultad puede localizarse en el hgado o en la va biliar (ictericia obstructiva).

REPARACION SUBCELULAR DE NUCLEOS Y EXTRACCION DE DNA EN TEJIDO HEPATICO Katia Galindo Torres. USMP.Pgina 5