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Universidad Agraria del EcuadorFacultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia

Trabajo de Bioquímica

Temas:

Identificación de presencia de Carbohidratos en muestras por medio de Reacciones Químicas.

Reacción de Lugol Reacción de Benedict Reacción de Molish Reacción de Selivanoff Reacción de Fehilng Reacción de Barfoed

Autora: María Fernanda Mora Navarrete

Curso: 2do Semestre “B”

Profesor: Dr. Alfredo Bruno

Guayaquil – Ecuador

2014- 2015


Nombre: María Fernanda Mora Navarrete Curso: 2do SemestreFecha: 30/10/2014 Paralelo: “B”

Índice1

.Identificacion de carbohidratos por reacciones fisicas y quimicas..............................................2

2. Tipos de reacciones para identificar carbohidratos más usadas..............................................3

2.1 Reacción de Lugol...........................................................................................................3

2.2 Reacción de Benedict.....................................................................................................3

2.3 Reacción de Molish.........................................................................................................3

2.4 Reacción de Selivanoff....................................................................................................3

2.5 Reacción de Fehilng........................................................................................................3

2.6 Reacción de Barfoed.......................................................................................................3

2.7 Procedimientos y Fundamentos.....................................................................................3

3. Notas........................................................................................................................................6

4. Bibliografía...............................................................................................................................7

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Informe 1

Identificación de carbohidratos por reacciones físicas y químicas.

Objetivos• Diferenciar mediante reacciones cualitativas los monosacáridos, disacáridos y

polisacáridos.• Reconocer y analizar las reacciones que se llevan en cada una de las pruebas de

Molish, Fehling, Lugol, Benedict, Barfoed, Seliwanoff e hidrólisis de sacarosa en los carbohidratos.

• Reconocer la capacidad oxido-reductora de los monosacáridos. Identificar los carbohidratos en una muestra problema.

Planteamiento del problema ¿Qué diferencia existe entre azúcares reductores y no reductores? ¿Cómo se diferencian en su composición los monosacáridos, disacáridos y

polisacáridos? ¿Cómo se puede justificar el hecho de que la glucosa, al igual que la fructosa, sean

azúcares reductores? ¿Podemos realizar este experimento en casa?

Materiales

Reactivos Reactivo de Lugol Reactivo de Benedict Reactivo de Molish Reactivo de Selivanoff Reactivo de Fehilng Reactivo de Barfoed Muestras de 5ml de Fructosa, Glucosa, Maltosa, Lactosa, Sacarosa y Almidón.

Insumos Tubos de Ensayo. Gradilla. Guantes. Cronómetro o reloj. Baño maría o recipientes para Baño María. Mechero.

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Procedimiento

Reacción de Molish.Colocar 2 ml. de muestra problema. Luego adicionar II gotas de reactivo de Molish, mezclar. Lentamente deslizar por las paredes del tubo, 1 ml. de ácido sulfúrico concentrado, (reacción exotérmica). La formación de un anillo de color violeta o púrpura indica presencia de glúcidos.

Fundamento de la prueba de Molish.

Es una reacción general para carbohidratos que contienen más de 5 átomos de carbono.La aparición de un anillo violeta-rojizo en el sitio de contacto de los dos líquidos, indica que la muestra contiene carbohidratos.

Reacción de Benedict.

Depositar 2.5 ml de Reactivo de Benedict, calentar hasta ebullición por 2 minutos. Si no hay cambio de color se adicionan 5 gotas de muestra problema, luego se coloca en baño maría hirviendo durante 3 minutos, luego se deja enfriar.La aparición de una coloración o, precipitado amarillo anaranjado o rojo indica presencia de glúcidos reductores

Fundamento de la prueba de Benedict

Es una prueba específica para las sustancias reductoras con grupos carboxilos libres.La aparición de un precipitado verde, amarillo o rojo indica la presencia de un azúcar reductor. La reacción o prueba de Benedict identifica azúcares reductores (aquellos que tienen su OH anumérico libre), como la lactosa, la glucosa, la maltosa, y celobiosa. En soluciones alcalinas, pueden reducir el Cu2+ que tiene color azul a Cu+, que precipita de la solución alcalina como Cu2O de color rojo-naranja.El reactivo de Benedict consta de:* Sulfato cúprico;* Citrato de sodio;* Carbonato anhidro de sodio.* Además se emplea NaOH para alcalinizar el medio.

El fundamento de esta reacción radica en que en un medio alcalino, el ion cúprico (otorgado por el sulfato cúprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehído del

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azúcar (CHO) a su forma de Cu+. Este nuevo ion se observa como un precipitado rojo ladrillo correspondiente al óxido cuproso (Cu2O).El medio alcalino facilita que el azúcar esté de forma lineal, puesto que el azúcar en solución forma un anillo de piranósico o furanósico. Una vez que el azúcar está lineal, su grupo aldehído puede reaccionar con el ion cúprico en solución.En resumen, se habla de azúcares reductores cuando tienen su OH anumérico libre, y éstos son los que dan positivo en la prueba de Benedict

Reacción de Selivanoff.

En un tubo de prueba se coloca 3 ml de solución clorhídrica de resorcinol y 6 ml de Muestra problema. Luego se coloca en Baño de María hirviente por unos minutos. El desarrollo inmediato de una coloración anaranjado rojizo indica presencia de pentosas.

Fundamento de la prueba de Selivanoff.

Es específica para cetosas que contengan 5 o más átomos de carbono, pero se usa casi exclusivamente para identificar fructosa.

Reacción de LugolDepositar 5ml de la muestra problema.Adicionar III gotas de lugol.

Fundamento de la prueba de Lugol

Es una prueba que se usa para identificar almidón. El color azul, se debe, posiblemente a la formación de un complejo: Ioduro de almidón.

Reacción de Fehling. El reactivo de Fehling, es una solución descubierta por el químico alemán Hermann von Fehling y que se utiliza como reactivo para la determinación de azúcares reductores.El licor de Fehling consiste en dos soluciones acuosas:

Sulfato cúprico cristalizado, 35 g; agua destilada, hasta 1.000 ml.

Sal de Seignette (tartrato mixto de potasio y sodio), 173 g; solución de hidróxido de

sodio al 40%, 3 g; agua, hasta 500 ml.

Ambas se guardan separadas hasta el momento de su uso para evitar la precipitación del hidróxido de cobre (II).

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Fundamento de la prueba de Fehling.

El ensayo con el licor de Fehling se fundamenta en el poder reductor del grupo carbonilo de un aldehído. Éste se oxida a un ácido carboxílico y reduce la sal de cobre (II) en medio alcalino a óxido de cobre (I), que forma un precipitado de color rojo. Un aspecto importante de esta reacción es que la forma aldehído puede detectarse fácilmente aunque exista en muy pequeña cantidad. Si un azúcar reduce el licor de Fehling a óxido de cobre (I) rojo, se dice que es un azúcar reductor.Esta reacción se produce en medio alcalino fuerte, por lo que algunos compuestos no reductores como la fructosa (que contiene un grupo cetona) puede enolizarse a la forma aldehído dando lugar a un falso positivo.

Reacción de Barfoed.

Es un ensayo químico utilizado para detectar monosacáridos. Esta prueba fue descrita por primera vez por el químico danés Christen Thomsen Barfoed1 y se utiliza principalmente en botánica.4 La prueba es similar a la prueba de Fehling. El reactivo de Barfoed se compone de una solución de 0.33 molar de acetato de cobre neutro en una solución de 1% de ácido acético. No es recomendable guardar el reactivo, sino prepararlo previamente a su uso.

Fundamentos Reacción Barfoed.

Se basa en la reducción de cobre (II) (En forma de acetato) a cobre (I) (En forma de óxido), el cual forma un precipitado color rojo ladrillo.1 2RCOH + 2Cu+2 + 2H2O → RCOOH + Cu2O↓ + 4H+Los disacáridos también pueden reaccionar, pero en forma más lenta. El grupo aldehído del monosacárido que se encuentra en forma de hemiacetal se oxida a su ácido carboxílico correspondiente. Muchas sustancias, entre ellas el cloruro de sodio,3 pueden interferir en la prueba.

Gráficos

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Reacción de Molish

Reacción de Fehling

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Reacción de Lugol

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Reacción de Benedict

Reacción de Barfoed

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Reacción de Seliwanoff

Observaciones

Al realizar la prueba con el reactivo de Molish, todas las muestras de carbohidratos reaccionan. Por lo tanto, podemos concluir que el reactivo de Molish sirve para identificar cualquier carbohidrato.

Al mezclar el reactivo de Seliwanoff con la fructosa, observamos que reacciona, cambiando el color a uno rojo. Mientras que con otros carbohidratos no ocurre nada mientras éstos no sean cetosas.

Cuando mezclamos cualquier carbohidrato con el reactivo de Lugol, éste no reaccionará mientras el reactivo no sea un polisacárido complejo, como lo es el almidón.

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Comparación con información previa (Explicación científica)

Los carbohidratos son biomoléculas que presenta grupo funcional carbonilo (aldehído y cetona) y varios grupos hidroxilos en cada carbono. Los carbohidratos también llamados azúcares, osas o sacáridos, son polihidróxialdehidos o polihidroxicetonas o compuestos poliméricos que por hidrólisis producen polihidróxialdehidos y polihidroxicetonas.

Según el número de unidades de azúcares sencillos que posean se clasifican en:MONOSACÁRIDOS o azúcares sencillos, que a su vez pueden ser ALDOSAS cuando contienen el grupo aldehído o CETOSAS cuando contienen el grupo cetona. Los monosacáridos naturales pertenecen a la serie D de los azúcares y pueden tener entre tres y hasta siete átomos de carbono.DISACÁRIDOS que están formados por dos monosacáridos unidos entre sí por enlacesglucosídicos.OLIGOSACÁRIDOS que tienen entre tres y diez monosacáridos unidos también por enlaces glucosídicos.POLISACÁRIDOS que son polímeros naturales con varios miles de unidades de azúcar sencillo ligadas entre sí.

De acuerdo con lo anterior, además de reconocer si un compuesto pertenece a la familia de los carbohidratos, diferenciaríamos si se trata de un monosacárido tipo aldosa o cetosa, si es fácilmente oxidable o no, es decir si es un AZÚCAR REDUCTOR o no lo es, si es de cinco átomos de carbono (pentosa) o de seis átomos de carbono (hexosa), si es disacárido o polisacárido.

Conclusiones (Explicación Lógica)En este experimento pudimos observar diferentes formas para identificar la presencia de carbohidratos en una muestra mediante reacciones químicas con diferentes reactivos, y evaluando los resultados positivos o negativos identificamos los diferentes tipos de sacáridos de acuerdo a la reacción a la que se refería, y diferenciamos las distintas reacciones en base al fundamento en que se basan las mismas.

Publicación

Este trabajo será entregado el sábado 25 de octubre del 2014 al Dr. Alfredo Bruno para su respectiva revisión y comprobación y fue realizado por mi persona, Srta. María Fernanda Mora Navarrete.

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Bibliografía

1) Lozano - Galindo. Bioquímica para Ciencias de la Salud. España. Edit. Mc Graw- Hill- Interamericana de. 2001.

2) Luque L y Hermoza A. Biología Molecular e Ingeniería Genética. Barcelona. Edit. Hartcourt. 2001.

3) Matheus Van Holde. Bioquímica. México. Edit. Mc Graw Hill.2000.

4) Martin, D.W. Bioquímica de Harper. México. Edit. Manual Moderno. 2000.

5) Lehninger, A. Bioquímica. Barcelona .Edit. Omega. 2001.

6) Claros MG, Ávila C. Gallardo F. Bioquímica de los carbohidratos. Madrid .Edit. ISBN. 2001

7) http://es.scribd.com/doc/7244232/CARBOHIDRATOS.

8) http://es.scribd.com/doc/52454046/Identificacion-para-carbohidratos.

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