INMUNOCROMATOGRAFIA:PRUEBAS RAPIDAS

INTEGRANTES:-OCTAVIO LUCANA

- VERA BECERRA ROSA- MONTOYA MONTANO WILLIAM

CONCEPTO

• La inmunocromatografía es una de las técnicas de inmunodiagnóstico más modernas cuyas principales ventajas son la sencillez y rapidez del test.

• No es necesario reactivos ni instrumentación adicional, como en el campo clínico. El ejemplo más conocido son los test de embarazo de las farmacias.  

• Sobre una membrana de nitrocelulosa o nylon se encuentran absorbidos en la línea de reacción anticuerpos contra el antígeno que buscamos y sobre la línea control anticuerpos anti-conjugado, de forma que cuando la muestra contiene antígeno, este fluye por la membrana quedando retenido en la línea de reacción. El conjugado, que también es un anticuerpo específico frente al antígeno que buscamos, está marcado con una molécula de oro coloidal, que también fluye por la membrana, es retenido por el antígeno en la línea de reacción y por el anticuerpo en la línea control. En el caso de muestras negativas que no contienen antígeno, el conjugado es retenido únicamente en la línea control. Estás técnicas son rápidas, obteniéndose resultados en 15-30 minutos.

                                 

               

TÉCNICA DE INMUNOCROMATOGRAFÍA

CC TT SS

FUNDAMENTO DE INMUNOCROMATOGRAFÍA PARA DETECCIÓN DE ANTÍGENOS

TIRA NITROCELULOSA

Antígeno en muestraAntígeno en muestra

Anticuerpo de Captura Anticuerpo de Captura contra antígenocontra antígeno

específicoespecífico

GG

Anticuerpos de detecciónAnticuerpos de detección marcados con marcados con

Oro ColoidalOro ColoidalGG

Anticuerpo de Captura Anticuerpo de Captura contra anticuerpo contra anticuerpo

de detecciónde detección

PROCEDIMIENTO

RESULTADOS

POSITIVOPOSITIVO

NEGATIVONEGATIVO

• El método basado en el oro coloidal como marcador ha tenido un gran desarrollo en los últimos años y ésto por diversas razones:

• En primer lugar las partículas de oro se pueden fabricar en diferentes tamaños, de entre 2-3 nm a 100-150 nm, con todas las posibles medidas intermedias.

• Estas partículas pueden fabricarse en el laboratorio aunque actualmente existe una amplia disponibilidad comercial.

• Las partículas de oro absorven todo tipo de proteínas formando complejos muy estables. • Muchas de las proteínas acomplejadas con oro mantienen sus propiedades y actividad biológica. • Los tamaños de 2 a 3 nm son los menores disponibles para un marcador y por ello el oro es el

marcador que permite la máxima resolución.• La utilización del oro como marcador unido a proteína A, anticuerpos u otras proteínas, se ha

limitado tradicionalmente a la microscopía electrónica, pero recientemente el desarrollo de métodos de amplificación de la señal mediante precipitación de plata metálica ha permitido su aplicación en microscopía óptica.

• Los métodos de amplificación de señal se basan en la propiedad del oro de catalizar la reducción de iones plata a plata metálica en presencia de un agente reductor. Durante este proceso las partículas de oro son rodeadas por plata metálica haciendose visibles al microscopio óptico con una coloración marrón oscuro.   Se utiliza el lactato de plata como donador de iones y la hidroquinona como reductor a un pH de aproximadamente 3.5.

• Actualmente el oro coloidal unido a anticuerpos o a proteína A es el marcador más empleado en microscopía electrónica.