ADN y RNA

introducción - estructura

Fred Griffith – 1928: Principio transformador

Bacteria Pneumococcus: cápsula externa de polisacáridos esencial para la patogenicidad

S= bacteria normal

R= mutante sin cápsula

Oswald Avery-Colin MacLeod-Maclyn McCarthy – 1944:

fraccionamiento del extracto celular de neumococos S muertos por calor

El componente fundamental del principio transformador es el ADN

Oswald Avery-Colin MacLeod-Maclyn McCarthy – 1944:

fraccionamiento del extracto celular de neumococos S muertos por calor

¿Cómo sabían que se trataba de ADN?

Análisis químico elemental coincidente con el calculado para el ADN

Propiedades ópticas, de ultracentrifugación, difusión y electroforésis similares al ADN

no afecta la extracción de lípidos y proteínas

tripsina y quimotripsina no afectan

ribonucleasa no afecta pero desoxirribonucleasa sí.

Alfred Hershey y Martha Chase - 1952:

Confirmación del papel genético del ADN

Composición del ADN

Qué tipo de enlace

son?

Estructura primaria

Erwin Chargaff -1950: – las proporciones de A/T y G/C ≈ 1

Erwin Chargaff -1950: – que procedimiento siguió??

Utilizó extractos de DNA

Los hidrolizó en medio ácido.

Utilizando cromatografía en papel separó los distintos nucleótidos.

Utilizando espectrofotometría UV cuantificó los porcentajes de las

distintas bases.

Propiedades espectroscópicas

Estructura tridimensional – modelo de Watson y Crick -1953

estabilización por ptes de H y

apilamiento

parámetros estructurales

A-T

(amarillo)

G-C

(azul)

Estructura tridimensional – modelo de Watson y Crick

parámetros estructurales

la secuencia precisa de bases transporta la

información genética

modelo de replicación

Estructura tridimensional – maximización del apilamiento

H2O??

Estructura de ácidos nucléicos

Alto número de conformaciones

torsión del esqueleto

de fosforibosa

torsión del anillo

de azúcar

torsión del anillo

aromático en torno al

azúcar.

syn: más compacto pero impedido estéricamente, principalmente para

pirimidinas

Sugar pucker

Las rotaciones están correlacionadas para mantener la conformación no-planar

144≤ Ψ ≤190 0≤ Ψ ≤36

Estructuras de DNA

B form: forma fisiológica,alta humedad

A form: baja humedad, alcoholes, NaCl por debajo de 10%

DNA, DNA-RNA, RNAs dobles

Z form: alta concentración salina 3-4 M NaCl,

alternancia purina-pirimidina (GC)n, (GT)n

Metilacion C5 cytosina.

Polimorfismo en el DNA

ARN

el ARN no forma doble hélice B pero puede poseer estructura secundaria y terciaria.

Plegamiento del tRNA

• Maximización el número de ptes de H entre bases

• Maximización del apilamiento

• Las pares de bases apareadas adoptan la estructura de A-DNA